1. 种子检验:按照一定的标袋数设一点。3) 扦取初次样上发芽 准(现行《农作物种子检验规品 ;根据种子的大小、形状,纸间(BP):a.另外用一层纸程》和《农作物种子质量标准》选用不同的袋装种子扦样器。松松地盖在种子上。b.纸卷,为依据),应用科学的方法,对中、小粒种子,用单管扦样器; 把种子均匀置放在湿润的发芽( 禾谷类取试样(4×100)、豆(4)一般鉴定原则:凡是胚
类(4×50),在30℃水中浸种的主要构造及有关活营养组织4小时(玉米浸6h,水稻浸染成有光泽的鲜红色,且组织24h), 播于砂床,禾谷类种胚状态正常的,为有生活力种子。农业生产上使用的种子质量进行检测、鉴定、分析,以判断其使用价值的过程。 2. 种子检验学的内容:品种的真实性和纯度,种子净度、发芽力、生活力、活力、健康状况、水分和千粒重进行分析、检验。 3. 种子检验的作用:① 保证实现种子质量标准化;② 保证种子加工、贮藏和运输的安全;③ 检测经营流通中种子的质量,促进种子质量不断提高;④ 防止、控制种传病虫杂草的传播蔓延,特别是检疫性病虫、杂草。 4. 国际种子检验协会的简写(ISTA),组成由各国官方种子检验室(站)和种子技术专家组成的世界性的政府间协会;目前,已拥有包括来自世界74个国家的210位个人会员和162个实验室成员。 5. 种子检验的特点:(1)具有一定的连贯性和顺序性;(2)必须严格按照技术规程进行,结果才有效;(3)种子检验必须借助大量先进的仪器和设备进行。 6. 种子检验的分类和程序: (1)分类 :从检测对象上分①田间检验:②室内检验:③小区种植鉴定:从职能上分:①内部检验:②监督检验:③仲裁检验: (2)程序:扦(取)样品:检测分析: 结果报告(签证): 7. 扦样的有关概念:(1)扦样:用专用的扦样器具,扦取适量有代表性种子样品的过程。 (2)种子批:《农作物种子检验规程》:同一来源、同一品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、在规定数量之内的种子。《国际种子检验规程》:规定重量的、外观一致的种子。 (3)初次样品:从种子批的一个点,用扦样器或徒手所扦取的一部分种子。 (4)混合样品:从种子批内所扦出的全部初次样品合并混合而成的样品。 (5)试(验)样(品):由送验样品中分出一定量种子,供检验种子某个质量项目用的样品。 (6)半试样:将试验样品分减成一半重量的样品。 (7)送验样品:从混合样品中分取一部分种子送至检验室作检验用的样品,其大小至少符合规定重量。 8. 扦样的目的和原则: (1)目的:从一批大量的种子中扦取适当数量;有代表性的;供分析检验用的样品。 (2)原则:种子批质量要均匀扦样点要均匀分布;各个扦样点扦出种子数量应基本相等; 合格扦样员扦样。 9. 扦样的程序:合格扦样员、扦样前准备、划分种子批、扦取初次样品、分取送验样品、送验样品的包装和发送 、样品的保存 10. 单管扦样器—袋装中小粒;双管扦样器—袋装大粒;长柄短筒圆锥形—散装种子 11. 袋装种子扦样:1)计算扦样袋数:根据种子批袋数确定应扦样袋数 ;2)设置扦样点 A. 贮藏期间,均匀分布在种子堆上、中、下各部位。B. 收购、调运、加工、装卸过程中,根据总袋数和应扦袋数间隔一定大粒种子可拆开袋口,用双管扦样器扦样; 特大粒(棉花、花生)种子,徒手扦样或倒包扦样。 12. 散装种子扦样(>100kg):(1)确定扦样点数:根据种子数量确定扦样点数;(2)设置扦样点:水平、垂直分布均有点①设置水平扦样点:按种子堆水平面积分区设点(每区面积不得超过25㎡)。②设置垂直扦样点:按种子堆高分层种子堆高不足2m时,分上、下2层; 种子堆高2-3m时,分上、中、下3层;种子堆高3m以上再加一层; 上层在距顶部以下10-20cm处,中层在种子堆中心,下层距底部5-10cm处。(3)扦取初次样品:根据扦样点位置,按一定扦样次序扦样,先扦上层,后扦中层,最后扦下层,以免搅乱层次而失去代表性。 13. 种子净度:指供检样品中除去杂质和其他植物种子后留下本作物净种子重量占样品总重量的百分率。 14. 种子净度分析方法: (1)精确法:好种子废种子有生命杂质无生命杂质 (2)快速法:净种子其他植物种子杂质 15. 净种子:送验者所叙述的种(包括种的全部植物学变种和栽培品种),符合净种子定义要求的种子单位或构造。 16. 净种子的一般原则: (1)从种类上看:凡能明确地鉴别出它们是属于所分析的种,即使是未成熟的、瘦小的、皱缩的、带病的或发过芽的都应作为净种子。(2)从构造上看:完整的种子单位或大于原来大小1/2的破损种子单位。 17. 净度分析步骤:(1)重型混杂物检验: (2)试样分取 (3)试验样品的分离(2500粒) (4)结果计算 18. 种子净度测定方法根据送验者的不同要求,其他植物种子数目的测定可采用完全检验、有限检验和简化检验、简化有限检验 。 19. 种子发芽:指在适宜条件下种子萌发和发育到一定程度,其幼苗构造表明在田间适宜条件下能进一步生长成为正常的植株。 20. 发芽力:指种子在适宜条件下发芽并长成正常植株的能力。通常用发芽势和发芽率来表示 21. 发芽势:规定日期内(发芽试验初期)正常发芽种子数占供试种子数的百分率。(表示种子活力强,发芽迅速、整齐) 22. 发芽率:规定日期内(发芽试验终期)全部正常发芽种子数占供试种子数的百分率。 23. 正常幼苗 1)完整正常幼苗2)带有轻微缺陷的正常幼苗3)次生感染的正常幼苗 24. 不正常幼苗 1)受损伤的幼苗2)畸形或不匀称的幼苗3)腐烂幼苗 25. 未发芽种子 1)硬实2)新鲜不发芽种子3)死种子4)其它类型(无胚、虫蛀) 26. 纸床:多用于中、小粒种子的发芽 要求: ①吸水良好 、②无毒质 、③无病菌 、④纸质韧性好 使用方法:纸上(TP):种子放在一层或多层纸纸上,再用另一张同样大小的发芽纸覆盖在种子上,然后卷成纸卷,两端用皮筋扣住,竖放。利于幼苗的分离和鉴定。 27. 砂床:无污染的细砂或清水砂,使用前洗涤 、消毒、过筛 (0.05~0.8mm )。使用时,先将砂调到适宜水分,以攥砂成团,松手散开的程度为宜。(100g沙加18~26ml水) (1)使用方法:砂上(TS) :将种子压入砂的表面,湿砂厚度2~3cm,适用于小粒种子的发芽试验。砂中(S):将种子播放在平整的湿砂上,湿砂厚度2~4cm,然后根据种子的大小加盖1~2cm厚度的湿砂。适用于大、中粒种子 28. 种子置床、发芽期间管理 (1)种子置床的要求与方法 1)置床的要求: 种子试样均匀分布在发芽床上;每粒种子之间应留有足够的空间;一般保持其1-5倍的间距,以防止种子携带的病菌或污染菌的相互感染并保持足够的生长空间。每粒种子均应良好接触水分;使发芽趋于一致。。 2) 置床的方法:采用合适的数种设备(大粒用数种板,中小粒用真空数种器),手工数种置床; 3)粘放标签:置床后,容器底盘的侧面贴上标签,注明置床日期、样品编号、品种名称及重复次数等,然后盖好容器盖子或套一薄膜塑料袋。 (2)发芽期间管理 1)水分和通气:发芽床应始终保持湿润,以保持适宜的发芽水分。根据发芽床和种子特性决定发芽床的加水量。 发芽应使种子周围有足够的空气,注意通气。纸卷须相当疏松; 用砂床时,覆盖种子的砂不要紧压。 2) 温度:按附表2规定的温度进行。温度应保持在所需温度的±1℃范围内,用变温时,通常应保持先高温8h后低温16h。 对非休眠的种子,变温应在3h内完成。 如是休眠种子,应在1h或更短时间内完成。 3)霉菌管理:如发现霉菌滋生,应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5%时,应调换发芽床,如发现腐烂死亡种子,则应将其除去并记载。 4)光照:一般采用光照,可抑制霉菌生长,利于幼苗鉴定。如在变温条件下发芽,光照应在8h高温时进行。 29. 快速发芽试验方法 (1) 应用:时间紧迫,急需了解种子发芽力时 (2) 原理:利用适当的高温、高湿,加速种子吸胀,促进种子内部的生理生化代谢,或除去阻碍种子发芽的因素,从而加速种子发芽。 (3) 方法:物理方法(去壳法、高温盖砂法、剥胚法)及化学方法(赤霉酸) 玉米切果柄并撕去胚部种皮法( 数取种子(4×50),在30~35℃温水中浸种3~4h; 种子胚朝下用锋利刀片切下胚根尖端果柄,但不能切断下面种皮,用手指捏住果柄撕下胚部外边果种皮,置于砂床中,35℃下培养2天,计算发芽率。) 禾谷类、豆类高温盖砂法朝上,轻压种子使之与砂面平齐,其上盖一层湿纱布,再盖上0.5-2cm湿砂,放在高温条件下发芽(粳稻32℃,籼稻、玉米35~37℃,花生30℃,麦类、豆类25~28℃),经2天,揭去纱布和砂,计算发芽率。) 棉花硫酸脱绒切割法(用浓硫酸脱绒,清水冲洗干净; 在胚根相对一端切去1/4或一小口,切口向下直接播于砂床,其上盖一层湿纱布,再盖上0.5-2cm湿砂;放在35℃高温条件下发芽培养2d,揭去纱布和砂,计算种子发芽率。 水稻去颖法(水稻种子脱去谷壳,取完整米粒(4×100),放在水中浸泡3h;然后置于纸床,30℃下培养。籼稻培养2d,粳稻培养3d,计算发芽率。因米粒失去谷壳保护,易发霉,须每天检查,如有发霉及时洗涤,并做好记载。 30. 种子生活力:指种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力。(通常用一批种子中具有生命力的种子占种子总数的百分率来表示。) 31. 种子生活力测定的原理及方法:根据测定原理可分为4类:(1)生物化学法:四唑测定法、溴麝香草酚蓝法、甲烯蓝法、中性红法和二硝基苯法等。(2)组织化学法:如靛蓝染色法、红墨水染色法和软x射线造影法等。(3)离体胚测定法:(4)荧光分析法: 32. 四唑染色 (1)测定原理:有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都会发生氧化还原反应。四唑溶液(无色)被种子活组织吸收后,参与活细胞的还原反应,从脱氢酶接受氢离子,被还原成红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲臜; DPNH2 + TTC → DPN + TTCH + HCl (辅酶IH2) (四唑) (辅酶I) (甲臜) (氯化氢) (2)测定方法 试验样品 从净度分析后并经充分混合的净种子中,随机数取100粒种子,4次重复。如果是测定发芽试验末期休眠种子的生活力,则单用发芽试验末期所发现的休眠种子。 染色前的种子准备(预湿、预措):1)种子预湿(方法:①快速水浸预湿:适用于直接浸入水中不会造成组织破裂损伤,不会影响鉴定正确性的种子;②缓慢纸床预湿:适用于直接浸在水中容易破裂和损伤的种子,以及衰弱的种子或过分干燥的种子;③H2O2溶液浸种:为加快种子吸胀、促进酶的活化,缩短预湿时间。 ) 2)染色前的种子处理(预措):(方法:①刺穿:对经过预湿的种子或硬实种子,可利用解剖针或解剖刀,刺穿种子的非主要部位,适用于小粒牧草等种子。②纵切:通过胚中轴和胚乳,纵向切开,使胚的主要构造暴露出来,适用于具有直立胚的大粒禾本科等种子。③横切:用解剖刀、刀片、弯曲剪子或其他适当的方法,沿种子非主要组织横向切断。) (3)染色程序:将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或烧杯中。加入适宜浓度的四唑溶液,以淹没种子为度,移置到一定温度的(黑暗或弱光)恒温箱内进行染色反应。 凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色和光泽,并且活营养组织不染色部分已超过1/2,或超过允许范围以及组织软化的,为不正常种子。 凡是完全不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色,且组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。 33. 离体胚测定的原理:将离体胚在规定的条件下培养5~10d有生活力的胚仍然保持坚硬新鲜的状态,或者吸水膨胀、子叶展开转绿,或者胚根和侧根伸长、长出上胚轴和第1叶;无生活力的胚,则呈现腐烂的症状 34. 染料染色法测定原理:活细胞原生质膜具有选择透性,染料大分子不能进入活细胞内,胚部等活组织不能被染料染色;死的种胚细胞因原生质膜丧失选择吸收能力,故可被染料染色 35. 种子活力:决定种子或种子批在发芽和出苗期间的活性水平和行为的那些种子特性的综合表现。 36. 种子活力、种子生活力、种子发芽力三者之间的关系:(1)高活力的种子一定具有高的发芽力和生活力(2)具有高发芽力的种子也必定具有高的生活力(3)具有生活力的种子不一定都具发芽力,能发芽的种子活力也不一定高。 37. 发芽测定法(3类):(1)标准发芽试验(发芽速率测定)法(最古老和最为简单的方法,适用于各种作物。)(2)幼苗生长量测定法:适用于具有直立胚芽或胚根的禾谷类和蔬菜种子,采用纸卷直立发芽法。(3)幼苗评定试验:对大粒豆类种子,细弱苗也可达到相当的长度,不能用幼苗长度表示活力,采用标准发芽试验方法,幼苗评定时分成不同等级。 38. 电导率测定:(1)测定原理:种子吸胀初期,细胞膜重建和修复能力影响电解质(如氨基酸、有机酸、糖及其他离子)渗出程度,膜完整性修复速度越快,渗出物越少。高活力种子能够更加快速地重建膜,且最大限度修复任何损伤; 高活力种子浸泡液的电导率低于低活力种子。(2)测定方法:取50粒种子称重(精确至2位小数)2个重复。 取烧杯3个,用热水和去离子水洗净。将种子放入烧杯中,加入250ml去离子水,另一烧杯内加去离子水作对照。所有烧杯于20℃条件下放置24h,用电导仪测定浸泡液和对照的电导率。 39. 种子真实性:指一批种子所属品种、种或属与文件描述(品种证书、标签等)是否相同。即种子样品的真假。 40. 品种纯度:品种个体之间在特征、特性方面典型一致的程度,用本品种的种子数占供检样品种子数的百分率表示。即品种一致性程度的高低。 41. 品种真实性和纯度鉴定的方法分类 (1)根据其所依据的原理不同主要可分为:1)形态鉴定:籽粒、种苗、植株形态测定;2)物理化学法鉴定:荧光鉴定法、煮沸法;苯酚染色法、碘化钾染色法;3)生理生化法鉴定:愈创木酚染色法、电泳法、色谱法、免疫技术;4)分子生物学方法鉴定:分子标记技术;5)
细胞学鉴定:染色体数目 (2)依据检验的对象分:1)种子纯度测定2)幼苗纯度测定3)植株纯度测定
(3)根据检验的场所分:1)田间纯度检验2)室内纯度检验3)田间小区种植检验
42. 苯酚(石炭酸)染色法 (1)染色原理:由于每个品种皮壳内酚酶活性不同,将苯酚氧化呈现深浅不同的褐色。 (2)适用范围:小麦、水稻和燕麦、大麦、黑麦草、早熟禾等牧草种子。
43. 愈创木酚法原理:大豆种皮内具有过氧化物酶,能使过氧化氢分解而放出氧,使愈创木酚氧化而产生红棕色的4-邻甲氧基醌。
44. 应用电泳鉴定品种的理论基础:电泳基础带电颗粒在电场作用下向与其电性相反方向的电极移动的现象称电泳。蛋白质带有电荷,因此在电场中能泳动。品种鉴定中,个体或群体间酶及蛋白质成分的差异,反映基因表达的差异。电泳技术可非常准确地分析种子蛋白质或同工酶的差异,进而区分不同品种
45. 种子纯度电泳检测的一般程序:(1)样品的提取;(2)凝胶的制备(3)加样电泳(4)染色(5)谱带分析 46. 田间检验:在种子生产过程 中,在田间对品种真实性进行验证,对品种纯度进行鉴定,对作物生长状况、病虫危害、异作物和杂草等情况进行调查,并确定其与特定要求符合程度的活动(种子能否作为种用)。一般由地方种子检验部门负责。
47. 田间检验时期:种子田在生长季节可以检查多次,通常为苗期、花期、成熟期,至少应在品种特征、特性表现最充分、最明显的时期检查一次。常规作物通常在成熟期;杂交作物在花期或花药开裂前;蔬菜作物则在食用器官成熟期 48. 田间检验方法(程序): (1)取样1)了解情况: 了解种子田基本情况检查隔离情况检查种子田总体状况;2)划分检验区 ;3)设点 (2)检验:边设点边检验,(根据品种特征特性)逐株观察 (3)结果与报告 49. 种子水分(种子含水量):指种子中所有自由水与束缚水的总量占种子总重量的百分率。
50. 种子水分测定的意义: (1)保证种子安全贮藏(2)种子水分是种子分级的主要(四大)指标之一(3)节约贮运费用(体积、重量)
51. 种子水分测定的方法: (1) 标准测定方法:烘干减
重法:样品烘干后失去水分的重量计算种子水分百分率。
(2) 其他方法:1)(卡尔-
费休)滴定法:适用于微量水份的测定。2)(甲苯)蒸馏法:适用于含挥发性物质的样品。3)快速法(电容式、电阻式和红外线水分测定仪)。
52. 标准测定法:
(1)低恒温烘干法(标准:103℃、8h,一次烘干):适用种类--所有农业、园艺和牧草种子。特别是油料作物种子(油分易于氧化而挥发而降低样品重量)必须采用此法。葱属、花生、芸苔属、辣椒、大豆、棉属、向日葵、萝卜、蓖麻、芝麻、茄子、所有林木种类等。
(2)高恒温烘干法(标准:130℃、1h):适用种类:除油料作物以外的种子。禾谷类、豆类、禾本科牧草、豆科牧草、芹菜、胡萝卜、茼蓠、石刁梢、甜菜、西瓜、黄瓜、莴苣、番茄、菠菜、大麻、烟草等。 (3)(高水分种子)预先(二次)烘干法: 适用种类--需要磨碎的高水分种子。禾谷类种子水分超过18%,豆类和油料作物水分超过16%时,必须采用预先烘干法。
53. 电阻式水分速测仪测定原理:在一闭合电路中,当电压一定时,电流强度与电阻成反比(欧姆定律I=U/R)。把种子作为电阻接入电路中,电流随种子自由水含量的高低而变化。把电表的刻度转换成相应水分的刻度。电容式水分速测仪测定原理。电容是表示导体容纳电量的物理量。电容量的大小与物质的介电常数(ξ )和两极板对应面积(s)成正比,与两极间的距离( d)成反比。当两极板的距离一定,测试的样品量一定(即两极的对应面积一定)时,电容量的变化只与介电常数变化有关。空气的介电常数为1,种子干物质为10,水为81,因此种子内水分变化,就会引起介电常数的变化,从而引起电容的变化。 若将种子放在电路中,作为电容的一个组成部分,测得电容的大小就可间接测得水分含量。 54. 甲苯蒸馏法测定原理:甲苯为有机溶剂,不溶于水,沸点为110.5℃, 相对密度为0.867,当其与样品共沸时,水分首先蒸发,同时也伴有甲苯蒸发,经冷凝滴入测量管中。由于甲苯不溶于水,且相对密度较水小,二者共存时有明显的界面,蒸馏完毕,可测出水的体积。根据水分体积和样品重量,计算样品的含水量。 55. 种子健康检验:对种子所携带病(真菌、细菌及病毒)虫(线虫及害虫)害种类及数量进行检验。(表示方法 :种子带病率 ;种子虫害率。) 56. 种子病原物的检验方法:(1)肉眼检验(2)过筛检验(3)洗涤检验(4)漏斗分离检验(5)萌芽检验(6)分离培养检验(7)噬菌体检验(8)接种指示植物法(9)血清学检验(10)隔离种植检验
57. 种子害虫的检验方法:(1)肉眼检验(2)过筛检验(3)剖粒检验(4)染色检验(5)相对密度检验 58. 种子质量评定:对种子的品种品质和播种品质检验得到的结果与现行有效规定的最低标准或与标签(发票、合同、协议、检验报告单、广告目录等)标注进行比较,并给出相应结论的过程。
59. 种子质量评定的依据和原则
(1)种子质量评定的依据:1)国家标准:2)行业标准:3)地方标准: 4)企业标准: (2)种子质量评定的原则:1)品种品质评定的一般原则 品种品质的优劣取决于品种的真实性和一致性。同一批种子当田间和室内纯度检验结果不一致时,应以纯度低的为准。若田间品种纯度过低,达不到国家分级标准的最低指标时,应严格去杂,经检验合格后作为种用,否则不能作为种用。若室内纯度低于国家分级标准最低指标时,绝不能作种用。
2)杂交种品种品质的评定:察看亲本纯度、制种田的隔离条件是否符合制种要求。田间杂株(穗)率(父本杂株散粉率、母本杂株率及母本散粉率)在分级指标内 60. 国外种子质量分级标准的特点:(1)品种纯度的大多数指标侧重于过程控制的指标,很少规定最终产品的指标(因为最终产品指标在短期内无法鉴定),标准容易实施。(2)品种纯度指标与室内检测指标(净度、发芽率)分开(因为像预基础种子、基础种子没有发芽率规定的约束,可以较低)切合种子繁殖的实际情况。(3)国际规定的品种纯度的指标都比较高,且与前作、隔离条件、亲本种子质量等结合起来使用。(4)种子的物理质量(如净度、发芽率等)(OECD)没有规定具体的标准,只规定必须满足进口国的最低标准
61. 国际种子检验证书包括种子批证书①橙色国际种子批证书②绿色国际种子批证书、种子样品证书③蓝色国际种子样品证书、检验报告 62. 种子标签:固定在种子包装物表面及内外的特定文字说明及图案。是种子生产者、销售者向种子使用者传递该种子质量状况及其它有关信息的方式,种子标签属种子质量证书的范畴。(外标签、标牌、内标签)
1. 种子检验:按照一定的标袋数设一点。3) 扦取初次样上发芽 准(现行《农作物种子检验规品 ;根据种子的大小、形状,纸间(BP):a.另外用一层纸程》和《农作物种子质量标准》选用不同的袋装种子扦样器。松松地盖在种子上。b.纸卷,为依据),应用科学的方法,对中、小粒种子,用单管扦样器; 把种子均匀置放在湿润的发芽( 禾谷类取试样(4×100)、豆(4)一般鉴定原则:凡是胚
类(4×50),在30℃水中浸种的主要构造及有关活营养组织4小时(玉米浸6h,水稻浸染成有光泽的鲜红色,且组织24h), 播于砂床,禾谷类种胚状态正常的,为有生活力种子。农业生产上使用的种子质量进行检测、鉴定、分析,以判断其使用价值的过程。 2. 种子检验学的内容:品种的真实性和纯度,种子净度、发芽力、生活力、活力、健康状况、水分和千粒重进行分析、检验。 3. 种子检验的作用:① 保证实现种子质量标准化;② 保证种子加工、贮藏和运输的安全;③ 检测经营流通中种子的质量,促进种子质量不断提高;④ 防止、控制种传病虫杂草的传播蔓延,特别是检疫性病虫、杂草。 4. 国际种子检验协会的简写(ISTA),组成由各国官方种子检验室(站)和种子技术专家组成的世界性的政府间协会;目前,已拥有包括来自世界74个国家的210位个人会员和162个实验室成员。 5. 种子检验的特点:(1)具有一定的连贯性和顺序性;(2)必须严格按照技术规程进行,结果才有效;(3)种子检验必须借助大量先进的仪器和设备进行。 6. 种子检验的分类和程序: (1)分类 :从检测对象上分①田间检验:②室内检验:③小区种植鉴定:从职能上分:①内部检验:②监督检验:③仲裁检验: (2)程序:扦(取)样品:检测分析: 结果报告(签证): 7. 扦样的有关概念:(1)扦样:用专用的扦样器具,扦取适量有代表性种子样品的过程。 (2)种子批:《农作物种子检验规程》:同一来源、同一品种、同一年度、同一时期收获和质量基本一致、在规定数量之内的种子。《国际种子检验规程》:规定重量的、外观一致的种子。 (3)初次样品:从种子批的一个点,用扦样器或徒手所扦取的一部分种子。 (4)混合样品:从种子批内所扦出的全部初次样品合并混合而成的样品。 (5)试(验)样(品):由送验样品中分出一定量种子,供检验种子某个质量项目用的样品。 (6)半试样:将试验样品分减成一半重量的样品。 (7)送验样品:从混合样品中分取一部分种子送至检验室作检验用的样品,其大小至少符合规定重量。 8. 扦样的目的和原则: (1)目的:从一批大量的种子中扦取适当数量;有代表性的;供分析检验用的样品。 (2)原则:种子批质量要均匀扦样点要均匀分布;各个扦样点扦出种子数量应基本相等; 合格扦样员扦样。 9. 扦样的程序:合格扦样员、扦样前准备、划分种子批、扦取初次样品、分取送验样品、送验样品的包装和发送 、样品的保存 10. 单管扦样器—袋装中小粒;双管扦样器—袋装大粒;长柄短筒圆锥形—散装种子 11. 袋装种子扦样:1)计算扦样袋数:根据种子批袋数确定应扦样袋数 ;2)设置扦样点 A. 贮藏期间,均匀分布在种子堆上、中、下各部位。B. 收购、调运、加工、装卸过程中,根据总袋数和应扦袋数间隔一定大粒种子可拆开袋口,用双管扦样器扦样; 特大粒(棉花、花生)种子,徒手扦样或倒包扦样。 12. 散装种子扦样(>100kg):(1)确定扦样点数:根据种子数量确定扦样点数;(2)设置扦样点:水平、垂直分布均有点①设置水平扦样点:按种子堆水平面积分区设点(每区面积不得超过25㎡)。②设置垂直扦样点:按种子堆高分层种子堆高不足2m时,分上、下2层; 种子堆高2-3m时,分上、中、下3层;种子堆高3m以上再加一层; 上层在距顶部以下10-20cm处,中层在种子堆中心,下层距底部5-10cm处。(3)扦取初次样品:根据扦样点位置,按一定扦样次序扦样,先扦上层,后扦中层,最后扦下层,以免搅乱层次而失去代表性。 13. 种子净度:指供检样品中除去杂质和其他植物种子后留下本作物净种子重量占样品总重量的百分率。 14. 种子净度分析方法: (1)精确法:好种子废种子有生命杂质无生命杂质 (2)快速法:净种子其他植物种子杂质 15. 净种子:送验者所叙述的种(包括种的全部植物学变种和栽培品种),符合净种子定义要求的种子单位或构造。 16. 净种子的一般原则: (1)从种类上看:凡能明确地鉴别出它们是属于所分析的种,即使是未成熟的、瘦小的、皱缩的、带病的或发过芽的都应作为净种子。(2)从构造上看:完整的种子单位或大于原来大小1/2的破损种子单位。 17. 净度分析步骤:(1)重型混杂物检验: (2)试样分取 (3)试验样品的分离(2500粒) (4)结果计算 18. 种子净度测定方法根据送验者的不同要求,其他植物种子数目的测定可采用完全检验、有限检验和简化检验、简化有限检验 。 19. 种子发芽:指在适宜条件下种子萌发和发育到一定程度,其幼苗构造表明在田间适宜条件下能进一步生长成为正常的植株。 20. 发芽力:指种子在适宜条件下发芽并长成正常植株的能力。通常用发芽势和发芽率来表示 21. 发芽势:规定日期内(发芽试验初期)正常发芽种子数占供试种子数的百分率。(表示种子活力强,发芽迅速、整齐) 22. 发芽率:规定日期内(发芽试验终期)全部正常发芽种子数占供试种子数的百分率。 23. 正常幼苗 1)完整正常幼苗2)带有轻微缺陷的正常幼苗3)次生感染的正常幼苗 24. 不正常幼苗 1)受损伤的幼苗2)畸形或不匀称的幼苗3)腐烂幼苗 25. 未发芽种子 1)硬实2)新鲜不发芽种子3)死种子4)其它类型(无胚、虫蛀) 26. 纸床:多用于中、小粒种子的发芽 要求: ①吸水良好 、②无毒质 、③无病菌 、④纸质韧性好 使用方法:纸上(TP):种子放在一层或多层纸纸上,再用另一张同样大小的发芽纸覆盖在种子上,然后卷成纸卷,两端用皮筋扣住,竖放。利于幼苗的分离和鉴定。 27. 砂床:无污染的细砂或清水砂,使用前洗涤 、消毒、过筛 (0.05~0.8mm )。使用时,先将砂调到适宜水分,以攥砂成团,松手散开的程度为宜。(100g沙加18~26ml水) (1)使用方法:砂上(TS) :将种子压入砂的表面,湿砂厚度2~3cm,适用于小粒种子的发芽试验。砂中(S):将种子播放在平整的湿砂上,湿砂厚度2~4cm,然后根据种子的大小加盖1~2cm厚度的湿砂。适用于大、中粒种子 28. 种子置床、发芽期间管理 (1)种子置床的要求与方法 1)置床的要求: 种子试样均匀分布在发芽床上;每粒种子之间应留有足够的空间;一般保持其1-5倍的间距,以防止种子携带的病菌或污染菌的相互感染并保持足够的生长空间。每粒种子均应良好接触水分;使发芽趋于一致。。 2) 置床的方法:采用合适的数种设备(大粒用数种板,中小粒用真空数种器),手工数种置床; 3)粘放标签:置床后,容器底盘的侧面贴上标签,注明置床日期、样品编号、品种名称及重复次数等,然后盖好容器盖子或套一薄膜塑料袋。 (2)发芽期间管理 1)水分和通气:发芽床应始终保持湿润,以保持适宜的发芽水分。根据发芽床和种子特性决定发芽床的加水量。 发芽应使种子周围有足够的空气,注意通气。纸卷须相当疏松; 用砂床时,覆盖种子的砂不要紧压。 2) 温度:按附表2规定的温度进行。温度应保持在所需温度的±1℃范围内,用变温时,通常应保持先高温8h后低温16h。 对非休眠的种子,变温应在3h内完成。 如是休眠种子,应在1h或更短时间内完成。 3)霉菌管理:如发现霉菌滋生,应及时取出洗涤去霉。当发霉种子超过5%时,应调换发芽床,如发现腐烂死亡种子,则应将其除去并记载。 4)光照:一般采用光照,可抑制霉菌生长,利于幼苗鉴定。如在变温条件下发芽,光照应在8h高温时进行。 29. 快速发芽试验方法 (1) 应用:时间紧迫,急需了解种子发芽力时 (2) 原理:利用适当的高温、高湿,加速种子吸胀,促进种子内部的生理生化代谢,或除去阻碍种子发芽的因素,从而加速种子发芽。 (3) 方法:物理方法(去壳法、高温盖砂法、剥胚法)及化学方法(赤霉酸) 玉米切果柄并撕去胚部种皮法( 数取种子(4×50),在30~35℃温水中浸种3~4h; 种子胚朝下用锋利刀片切下胚根尖端果柄,但不能切断下面种皮,用手指捏住果柄撕下胚部外边果种皮,置于砂床中,35℃下培养2天,计算发芽率。) 禾谷类、豆类高温盖砂法朝上,轻压种子使之与砂面平齐,其上盖一层湿纱布,再盖上0.5-2cm湿砂,放在高温条件下发芽(粳稻32℃,籼稻、玉米35~37℃,花生30℃,麦类、豆类25~28℃),经2天,揭去纱布和砂,计算发芽率。) 棉花硫酸脱绒切割法(用浓硫酸脱绒,清水冲洗干净; 在胚根相对一端切去1/4或一小口,切口向下直接播于砂床,其上盖一层湿纱布,再盖上0.5-2cm湿砂;放在35℃高温条件下发芽培养2d,揭去纱布和砂,计算种子发芽率。 水稻去颖法(水稻种子脱去谷壳,取完整米粒(4×100),放在水中浸泡3h;然后置于纸床,30℃下培养。籼稻培养2d,粳稻培养3d,计算发芽率。因米粒失去谷壳保护,易发霉,须每天检查,如有发霉及时洗涤,并做好记载。 30. 种子生活力:指种子发芽的潜在能力或种胚所具有的生命力。(通常用一批种子中具有生命力的种子占种子总数的百分率来表示。) 31. 种子生活力测定的原理及方法:根据测定原理可分为4类:(1)生物化学法:四唑测定法、溴麝香草酚蓝法、甲烯蓝法、中性红法和二硝基苯法等。(2)组织化学法:如靛蓝染色法、红墨水染色法和软x射线造影法等。(3)离体胚测定法:(4)荧光分析法: 32. 四唑染色 (1)测定原理:有生活力的种子活细胞在呼吸过程中都会发生氧化还原反应。四唑溶液(无色)被种子活组织吸收后,参与活细胞的还原反应,从脱氢酶接受氢离子,被还原成红色、稳定、不扩散、不溶于水的三苯基甲臜; DPNH2 + TTC → DPN + TTCH + HCl (辅酶IH2) (四唑) (辅酶I) (甲臜) (氯化氢) (2)测定方法 试验样品 从净度分析后并经充分混合的净种子中,随机数取100粒种子,4次重复。如果是测定发芽试验末期休眠种子的生活力,则单用发芽试验末期所发现的休眠种子。 染色前的种子准备(预湿、预措):1)种子预湿(方法:①快速水浸预湿:适用于直接浸入水中不会造成组织破裂损伤,不会影响鉴定正确性的种子;②缓慢纸床预湿:适用于直接浸在水中容易破裂和损伤的种子,以及衰弱的种子或过分干燥的种子;③H2O2溶液浸种:为加快种子吸胀、促进酶的活化,缩短预湿时间。 ) 2)染色前的种子处理(预措):(方法:①刺穿:对经过预湿的种子或硬实种子,可利用解剖针或解剖刀,刺穿种子的非主要部位,适用于小粒牧草等种子。②纵切:通过胚中轴和胚乳,纵向切开,使胚的主要构造暴露出来,适用于具有直立胚的大粒禾本科等种子。③横切:用解剖刀、刀片、弯曲剪子或其他适当的方法,沿种子非主要组织横向切断。) (3)染色程序:将准备好的100×4种子放入适宜大小的培养皿或烧杯中。加入适宜浓度的四唑溶液,以淹没种子为度,移置到一定温度的(黑暗或弱光)恒温箱内进行染色反应。 凡是胚的主要构造局部不染色或染成异常的颜色和光泽,并且活营养组织不染色部分已超过1/2,或超过允许范围以及组织软化的,为不正常种子。 凡是完全不染色或染成无光泽的淡红色或灰白色,且组织已软腐或异常、虫蛀、损伤、腐烂的为死种子。 33. 离体胚测定的原理:将离体胚在规定的条件下培养5~10d有生活力的胚仍然保持坚硬新鲜的状态,或者吸水膨胀、子叶展开转绿,或者胚根和侧根伸长、长出上胚轴和第1叶;无生活力的胚,则呈现腐烂的症状 34. 染料染色法测定原理:活细胞原生质膜具有选择透性,染料大分子不能进入活细胞内,胚部等活组织不能被染料染色;死的种胚细胞因原生质膜丧失选择吸收能力,故可被染料染色 35. 种子活力:决定种子或种子批在发芽和出苗期间的活性水平和行为的那些种子特性的综合表现。 36. 种子活力、种子生活力、种子发芽力三者之间的关系:(1)高活力的种子一定具有高的发芽力和生活力(2)具有高发芽力的种子也必定具有高的生活力(3)具有生活力的种子不一定都具发芽力,能发芽的种子活力也不一定高。 37. 发芽测定法(3类):(1)标准发芽试验(发芽速率测定)法(最古老和最为简单的方法,适用于各种作物。)(2)幼苗生长量测定法:适用于具有直立胚芽或胚根的禾谷类和蔬菜种子,采用纸卷直立发芽法。(3)幼苗评定试验:对大粒豆类种子,细弱苗也可达到相当的长度,不能用幼苗长度表示活力,采用标准发芽试验方法,幼苗评定时分成不同等级。 38. 电导率测定:(1)测定原理:种子吸胀初期,细胞膜重建和修复能力影响电解质(如氨基酸、有机酸、糖及其他离子)渗出程度,膜完整性修复速度越快,渗出物越少。高活力种子能够更加快速地重建膜,且最大限度修复任何损伤; 高活力种子浸泡液的电导率低于低活力种子。(2)测定方法:取50粒种子称重(精确至2位小数)2个重复。 取烧杯3个,用热水和去离子水洗净。将种子放入烧杯中,加入250ml去离子水,另一烧杯内加去离子水作对照。所有烧杯于20℃条件下放置24h,用电导仪测定浸泡液和对照的电导率。 39. 种子真实性:指一批种子所属品种、种或属与文件描述(品种证书、标签等)是否相同。即种子样品的真假。 40. 品种纯度:品种个体之间在特征、特性方面典型一致的程度,用本品种的种子数占供检样品种子数的百分率表示。即品种一致性程度的高低。 41. 品种真实性和纯度鉴定的方法分类 (1)根据其所依据的原理不同主要可分为:1)形态鉴定:籽粒、种苗、植株形态测定;2)物理化学法鉴定:荧光鉴定法、煮沸法;苯酚染色法、碘化钾染色法;3)生理生化法鉴定:愈创木酚染色法、电泳法、色谱法、免疫技术;4)分子生物学方法鉴定:分子标记技术;5)
细胞学鉴定:染色体数目 (2)依据检验的对象分:1)种子纯度测定2)幼苗纯度测定3)植株纯度测定
(3)根据检验的场所分:1)田间纯度检验2)室内纯度检验3)田间小区种植检验
42. 苯酚(石炭酸)染色法 (1)染色原理:由于每个品种皮壳内酚酶活性不同,将苯酚氧化呈现深浅不同的褐色。 (2)适用范围:小麦、水稻和燕麦、大麦、黑麦草、早熟禾等牧草种子。
43. 愈创木酚法原理:大豆种皮内具有过氧化物酶,能使过氧化氢分解而放出氧,使愈创木酚氧化而产生红棕色的4-邻甲氧基醌。
44. 应用电泳鉴定品种的理论基础:电泳基础带电颗粒在电场作用下向与其电性相反方向的电极移动的现象称电泳。蛋白质带有电荷,因此在电场中能泳动。品种鉴定中,个体或群体间酶及蛋白质成分的差异,反映基因表达的差异。电泳技术可非常准确地分析种子蛋白质或同工酶的差异,进而区分不同品种
45. 种子纯度电泳检测的一般程序:(1)样品的提取;(2)凝胶的制备(3)加样电泳(4)染色(5)谱带分析 46. 田间检验:在种子生产过程 中,在田间对品种真实性进行验证,对品种纯度进行鉴定,对作物生长状况、病虫危害、异作物和杂草等情况进行调查,并确定其与特定要求符合程度的活动(种子能否作为种用)。一般由地方种子检验部门负责。
47. 田间检验时期:种子田在生长季节可以检查多次,通常为苗期、花期、成熟期,至少应在品种特征、特性表现最充分、最明显的时期检查一次。常规作物通常在成熟期;杂交作物在花期或花药开裂前;蔬菜作物则在食用器官成熟期 48. 田间检验方法(程序): (1)取样1)了解情况: 了解种子田基本情况检查隔离情况检查种子田总体状况;2)划分检验区 ;3)设点 (2)检验:边设点边检验,(根据品种特征特性)逐株观察 (3)结果与报告 49. 种子水分(种子含水量):指种子中所有自由水与束缚水的总量占种子总重量的百分率。
50. 种子水分测定的意义: (1)保证种子安全贮藏(2)种子水分是种子分级的主要(四大)指标之一(3)节约贮运费用(体积、重量)
51. 种子水分测定的方法: (1) 标准测定方法:烘干减
重法:样品烘干后失去水分的重量计算种子水分百分率。
(2) 其他方法:1)(卡尔-
费休)滴定法:适用于微量水份的测定。2)(甲苯)蒸馏法:适用于含挥发性物质的样品。3)快速法(电容式、电阻式和红外线水分测定仪)。
52. 标准测定法:
(1)低恒温烘干法(标准:103℃、8h,一次烘干):适用种类--所有农业、园艺和牧草种子。特别是油料作物种子(油分易于氧化而挥发而降低样品重量)必须采用此法。葱属、花生、芸苔属、辣椒、大豆、棉属、向日葵、萝卜、蓖麻、芝麻、茄子、所有林木种类等。
(2)高恒温烘干法(标准:130℃、1h):适用种类:除油料作物以外的种子。禾谷类、豆类、禾本科牧草、豆科牧草、芹菜、胡萝卜、茼蓠、石刁梢、甜菜、西瓜、黄瓜、莴苣、番茄、菠菜、大麻、烟草等。 (3)(高水分种子)预先(二次)烘干法: 适用种类--需要磨碎的高水分种子。禾谷类种子水分超过18%,豆类和油料作物水分超过16%时,必须采用预先烘干法。
53. 电阻式水分速测仪测定原理:在一闭合电路中,当电压一定时,电流强度与电阻成反比(欧姆定律I=U/R)。把种子作为电阻接入电路中,电流随种子自由水含量的高低而变化。把电表的刻度转换成相应水分的刻度。电容式水分速测仪测定原理。电容是表示导体容纳电量的物理量。电容量的大小与物质的介电常数(ξ )和两极板对应面积(s)成正比,与两极间的距离( d)成反比。当两极板的距离一定,测试的样品量一定(即两极的对应面积一定)时,电容量的变化只与介电常数变化有关。空气的介电常数为1,种子干物质为10,水为81,因此种子内水分变化,就会引起介电常数的变化,从而引起电容的变化。 若将种子放在电路中,作为电容的一个组成部分,测得电容的大小就可间接测得水分含量。 54. 甲苯蒸馏法测定原理:甲苯为有机溶剂,不溶于水,沸点为110.5℃, 相对密度为0.867,当其与样品共沸时,水分首先蒸发,同时也伴有甲苯蒸发,经冷凝滴入测量管中。由于甲苯不溶于水,且相对密度较水小,二者共存时有明显的界面,蒸馏完毕,可测出水的体积。根据水分体积和样品重量,计算样品的含水量。 55. 种子健康检验:对种子所携带病(真菌、细菌及病毒)虫(线虫及害虫)害种类及数量进行检验。(表示方法 :种子带病率 ;种子虫害率。) 56. 种子病原物的检验方法:(1)肉眼检验(2)过筛检验(3)洗涤检验(4)漏斗分离检验(5)萌芽检验(6)分离培养检验(7)噬菌体检验(8)接种指示植物法(9)血清学检验(10)隔离种植检验
57. 种子害虫的检验方法:(1)肉眼检验(2)过筛检验(3)剖粒检验(4)染色检验(5)相对密度检验 58. 种子质量评定:对种子的品种品质和播种品质检验得到的结果与现行有效规定的最低标准或与标签(发票、合同、协议、检验报告单、广告目录等)标注进行比较,并给出相应结论的过程。
59. 种子质量评定的依据和原则
(1)种子质量评定的依据:1)国家标准:2)行业标准:3)地方标准: 4)企业标准: (2)种子质量评定的原则:1)品种品质评定的一般原则 品种品质的优劣取决于品种的真实性和一致性。同一批种子当田间和室内纯度检验结果不一致时,应以纯度低的为准。若田间品种纯度过低,达不到国家分级标准的最低指标时,应严格去杂,经检验合格后作为种用,否则不能作为种用。若室内纯度低于国家分级标准最低指标时,绝不能作种用。
2)杂交种品种品质的评定:察看亲本纯度、制种田的隔离条件是否符合制种要求。田间杂株(穗)率(父本杂株散粉率、母本杂株率及母本散粉率)在分级指标内 60. 国外种子质量分级标准的特点:(1)品种纯度的大多数指标侧重于过程控制的指标,很少规定最终产品的指标(因为最终产品指标在短期内无法鉴定),标准容易实施。(2)品种纯度指标与室内检测指标(净度、发芽率)分开(因为像预基础种子、基础种子没有发芽率规定的约束,可以较低)切合种子繁殖的实际情况。(3)国际规定的品种纯度的指标都比较高,且与前作、隔离条件、亲本种子质量等结合起来使用。(4)种子的物理质量(如净度、发芽率等)(OECD)没有规定具体的标准,只规定必须满足进口国的最低标准
61. 国际种子检验证书包括种子批证书①橙色国际种子批证书②绿色国际种子批证书、种子样品证书③蓝色国际种子样品证书、检验报告 62. 种子标签:固定在种子包装物表面及内外的特定文字说明及图案。是种子生产者、销售者向种子使用者传递该种子质量状况及其它有关信息的方式,种子标签属种子质量证书的范畴。(外标签、标牌、内标签)