产碱性纤维素酶菌株的筛选及酶学性质研究
摘要：从采集的造纸厂土样中，筛选出ｌ株产碱性纤维素酶酶活力较高的菌株Ｈ－１，经鉴定，该菌株为革兰氏阳性芽孢杆菌属。发酵产酶条件和酶学性质研究表明Ｈ－１菌株的适宜发酵条件为：接种量为６％，ｐＨ ９．０，温度为３７ ℃，此条件下的酶活力可达８．６９ Ｕ／ｍＬ，是初始酶活力（２．９３ Ｕ／ｍＬ）的３倍。该酶最适反应温度为４０ ℃，最适反应ｐＨ ９．０。在２５～５５ ℃，ｐＨ ７．０～１１．０仍能保持６０％以上的酶活力，能较好地满足日常洗涤的环境要求。
关键词：碱性纤维素酶（ＣＭＣ酶）；菌株筛选；发酵条件；酶学性质
Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ Ａｌｋａｌｉｎｅ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ Ｓｔｒａｉｎ ａｎｄ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｉｔｓ Ｅｎｚｙｍａｉｃ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｆｒｏｍ ｓｏｉｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｐａｐｅｒ ｍｉｌｌｓ， ｏｎｅ ｓｔｒａｉｎ ｃａｌｌｅｄ Ｈ－１ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｄｅｇｒａｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ｗａｓ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ Ｇｒａｍ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｂａｃｉｌｌｕｓ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｎｚｙｍｅ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ， ｉｎｏｃｕｌｕｍ ａｍｏｕｎｔ ６％， ｐＨ ９．０ ， ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ３７ ℃． Ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ ８．６９ Ｕ／ｍＬ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ３ ｔｉｍｅｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｉｎｉｔｉａｌ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ（２．９３ Ｕ／ｍＬ）． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ａｂｏｕｔ ４０ ℃ ａｎｄ ｐＨ ９．０． Ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ａｂｏｖｅ ６０％ ａｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ２５～５５℃ ａｎｄ ｐＨ ７．０～１１．０， which ｍｅｅｔ ｔｈｅ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｄａｉｌｙ ｗａｓｈｉｎｇ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： a ｌｋａｌｉｎｅ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ enzyme （ＣＭＣ ｅｎｚｙｍｅ）； strain sｃｒｅｅｎｉｎｇ； ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ； ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ
纤维素酶的研究一般都以有效利用纤维素资源为主，酶作用的ｐＨ多为酸性，当添加到洗涤剂中，由于所处环境为碱性而失去活力，不能发挥作用［１］。近年来碱性纤维素酶的发现使其在洗涤工业中得到成功应用。碱性纤维素酶是纤维素酶系的一个组分，即羧甲基纤维素酶（ＣＭＣ酶），它不含有纤维素酶系的
产碱性纤维素酶菌株的筛选及酶学性质研究
摘要：从采集的造纸厂土样中，筛选出ｌ株产碱性纤维素酶酶活力较高的菌株Ｈ－１，经鉴定，该菌株为革兰氏阳性芽孢杆菌属。发酵产酶条件和酶学性质研究表明Ｈ－１菌株的适宜发酵条件为：接种量为６％，ｐＨ ９．０，温度为３７ ℃，此条件下的酶活力可达８．６９ Ｕ／ｍＬ，是初始酶活力（２．９３ Ｕ／ｍＬ）的３倍。该酶最适反应温度为４０ ℃，最适反应ｐＨ ９．０。在２５～５５ ℃，ｐＨ ７．０～１１．０仍能保持６０％以上的酶活力，能较好地满足日常洗涤的环境要求。
关键词：碱性纤维素酶（ＣＭＣ酶）；菌株筛选；发酵条件；酶学性质
Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｏｆ Ａｌｋａｌｉｎｅ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ Ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ Ｓｔｒａｉｎ ａｎｄ Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｉｔｓ Ｅｎｚｙｍａｉｃ Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ
Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｆｒｏｍ ｓｏｉｌ ｓａｍｐｌｅｓ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ ｆｒｏｍ ｐａｐｅｒ ｍｉｌｌｓ， ｏｎｅ ｓｔｒａｉｎ ｃａｌｌｅｄ Ｈ－１ ｃａｐａｂｌｅ ｏｆ ｄｅｇｒａｄｉｎｇ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ ｗａｓ ｓｃｒｅｅｎｅｄ ａｎｄ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ Ｇｒａｍ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｂａｃｉｌｌｕｓ． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍｕｍ ｅｎｚｙｍｅ－ｐｒｏｄｕｃｉｎｇ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ａｓ ｆｏｌｌｏｗｓ， ｉｎｏｃｕｌｕｍ ａｍｏｕｎｔ ６％， ｐＨ ９．０ ， ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ３７ ℃． Ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｗａｓ ｕｐ ｔｏ ８．６９ Ｕ／ｍＬ， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ３ ｔｉｍｅｓ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｉｎｉｔｉａｌ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ（２．９３ Ｕ／ｍＬ）． Ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ａｂｏｕｔ ４０ ℃ ａｎｄ ｐＨ ９．０． Ｔｈｅ ｅｎｚｙｍｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ａｂｏｖｅ ６０％ ａｔ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ２５～５５℃ ａｎｄ ｐＨ ７．０～１１．０， which ｍｅｅｔ ｔｈｅ ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌ ｒｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｄａｉｌｙ ｗａｓｈｉｎｇ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： a ｌｋａｌｉｎｅ－ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ enzyme （ＣＭＣ ｅｎｚｙｍｅ）； strain sｃｒｅｅｎｉｎｇ； ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ； ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｅｎｚｙｍｅ
纤维素酶的研究一般都以有效利用纤维素资源为主，酶作用的ｐＨ多为酸性，当添加到洗涤剂中，由于所处环境为碱性而失去活力，不能发挥作用［１］。近年来碱性纤维素酶的发现使其在洗涤工业中得到成功应用。碱性纤维素酶是纤维素酶系的一个组分，即羧甲基纤维素酶（ＣＭＣ酶），它不含有纤维素酶系的