·28·
中华检验医学杂志2001年1月第24卷第1期 Chin J Lab Med , January 2001, Vol 24, No . 1
·论著·
嗜血杆菌分离培养基的评价与应用
陈东科 胡云建 张秀珍
【摘要】 目的 选择合适的嗜血杆菌分离培养基提高嗜血杆菌分离率。方法 将嗜血杆菌接种于7种培养基上, 计算和比较7种培养基上嗜血杆菌的平均生长指数(GI ) ; 对325份呼吸道标本进行检测, 比较巧克力琼脂(BRchoc ) 和加万古霉素巧克力琼脂(BRchoc -V ) 的嗜血杆菌分离率。结果 添加2%鲜酵母浸液和50%鲜牛肉浸液的各种培养基, 较未加者的GI 值明显增高; 兔血巧克力琼脂培养基较羊血巧克力琼脂培养基的GI 值为高(P
【关键词】 嗜血杆菌; 培养基; 分离率
Evaluation and applicatipn of media for isolation of haemophilus CHEN Dongke , H U Y u njian , ZH ANG
Xiu zhen . Dep artment of Labor ato ry M edicine , Beijing Ho spital , Beijing 100730, China
【Abstract 】 Objective To select suitable media for increasin g isolation rate of haemophilus . Methods Haemophilus was inoculated on seven types of media . The average growth index (GI ) of Haemophilus was calculated and Haemop hilus was isolated from 325specimens of the respiratory tract and its isolation rate was compared with that media of brchoc and brchoc -V agare . Results The GI of media with 2%fresh yeast in fusion and 50%of meat infus ion was higher than that of those with no yeast and meat infusion . The GI of Haemophilus on BRchoc was higher than that of the BSchoc (P
【Key words 】 Haemophilus ; Medium ; Is olation rate
嗜血杆菌与许多感染性疾病有关
[1]
, 但由该菌
引起的感染发病率一直难以估计, 因为嗜血杆菌是苛养性细菌, 其生长不仅需要X 、V 因子, 而且受革兰阳性细菌生长的干扰, 分离培养极为困难。因此, 配制一种既操作简便又经济实用的嗜血杆菌分离培养基, 用以提高嗜血杆菌分离率, 是临床诊断和治疗嗜血杆菌感染所急需的。为了提高嗜血杆菌分离率, 作者对不同血源及配方的巧克力琼脂培养基进行了嗜血杆菌生长指数(growth index , G I ) 的测定, 同时进行了嗜血杆菌的分离率比较, 报告如下。
材料与方法
一、材料
1. 试剂:脑心浸液(干粉) 、XV 因子(SR 158) 、VITEK -NHI 试卡及X 、V 因子纸片购自生物梅里埃
公司, 鲜酵母粉为市售(东莞产) , 新鲜牛肉浸液、1%
[2]
鲜酵母浸液为本实验室自制, 脱纤维蛋白羊血、兔血为外购。
2. 试验菌株:流感嗜血杆菌ATC C 10211、ATCC 49247、ATCC 49766及金葡菌ATCC 25923为本实验室菌库保存, 4株副流感嗜血杆菌和3株溶血嗜血杆菌为临床分离菌株。
3. 培养基(1) 基础培养基:A :按厂家规定剂量脑心浸液(干粉) , 加2%琼脂粉和水, 调pH7. 6, 置121℃15min 高压灭菌; B :脑心浸液(干粉) , 加2%琼脂粉、50%鲜牛肉浸液、50%水, 调pH 7. 6, 置121℃15min 高压灭菌, 倾碟前无菌操作加入2%的滤菌鲜酵母浸液(补充V 因子) 。(2) 应用培养基:Axv :往A 中加入X 因子(氯化血红素15mg L ) 、V 因子(辅酶Ι15mg L ) ; Bxv :往B 中加入X 、V 因子; A 羊血巧克力琼脂(ASchoc ) :A 中加入5%脱纤维蛋
中华检验医学杂志2001年1月第24卷第1期 Chin J Lab Med , J anuary 2001, Vol 24, No . 1
·29·
脱纤维蛋白羊血; A 兔血巧克力琼脂(ARchoc ) :A 中加入5%脱纤维蛋白兔血; B 兔血巧克力琼脂(BRchoc ) :B 中加入5%脱纤维蛋白兔血; B 兔血巧克力琼脂-V (BRchoc -V ) :BRchoc 中加入万古霉素(50μg ml ) 。上述培养基加血后置85℃水浴10min 后倾制平板。
4. 标本来源:325份标本取自6～8岁健康儿童的咽部分泌物, 男、女比例为162 163, 取材当日无流感流行。
二、方法
1. GI 值测定:取经18h 培养的嗜血杆菌(n =10) 单个菌落于1ml 脑心浸液中, 用脑心浸液进行1∶10连续稀释, 取各稀释度菌液100μl 均匀接种在各种分离培养基上, 于8%CO 2孵箱中35℃孵育24h , 计数少于10个菌落平板上的菌落数, 并用游标卡尺量出菌落直径, 求其均值(mm ) , 再乘以此最高稀释度的对数即得G I 值
[3]
表2 嗜血杆菌在不同血源巧克力培养基的
GI 值比较(n =10)
培养基Bxv BRchoc BSchoc
GI ( x ±s ) 6. 286±1. 5727. 006±1. 5815. 352±1. 538
5. 39(
t (P 值)
本在BRchoc -V 培养基分离251株嗜血杆菌, 分离率为77. 2%;而在BRchoc 培养基上仅分离到嗜血杆菌104株, 分离率为32. 0%,嗜血杆菌在两种培养基上
的分离率差异有显著性(P
表3 325份标本中嗜血杆菌分离率比较
菌种
流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌副溶血嗜血杆菌溶血嗜血杆菌合计
BR choc 3(0. 9) 44(13. 5) 54(16. 6) 3(0. 9) 104(32. 0)
BR choc -V 17(5. 2)
136(51. 5) 95(29. 2) 3(0. 9) 251(77. 2)
分离株数(%) 分离株数(%)
2
χ
P 值
12. 07
—
141. 24
。
2. 嗜血杆菌分离率比较:以兔血巧克力琼脂(BRchoc ) 和加万古霉素(50μg ml ) 的兔血巧克力琼脂(BRchoc -V ) 为分离培养基, 对325份标本进行嗜血杆菌的分离培养, 按规程进行操作
VITEK -NHI 试卡鉴定到种。
2
[4]
讨论
, 分离菌株用
嗜血杆菌是专性寄生的苛养性细菌, 其生长需要X 、V 因子或两者之一, 最适生长温度为35℃～37℃,在pH7. 6条件下生长最好。7种培养基嗜血杆菌的G I 值比较结果显示:嗜血杆菌在兔血巧克力琼脂培养基上生长好于羊血巧克力琼脂培养基(P
嗜血杆菌主要寄生在呼吸道, 是引起下呼吸道感染的主要病原菌
[6]
[5]
3. 统计分析:用t 检验比较流感嗜血杆菌在各种培养基上的GI 差异; 用χ检验比较两种培养基对嗜血杆菌的分离率。
结
果
1. 不同营养的培养基G I 值比较:表1数据显示, 培养基中加与不加鲜酵母浸液和鲜牛肉浸液, 生长指数差异有显著性(P
表1 不同营养培养基上的G I 值比较(n =10)
培养基Axv
Bxv ASchoc BSchoc ARchoc BRchoc
G I (x ±s ) 4. 185±1. 1616. 286±1. 5722. 259±0. 7345. 352±1. 5384. 166±1. 3457. 006±1. 581
t (P 值) 10. 15(
。呼吸道标本中的嗜血杆菌在
初代培养时, 受到革兰阳性细菌的抑制, 菌落细小不
易与其他杂菌相区别, 这是造成嗜血杆菌分离率低的直接原因, 当在培养基中加入万古霉素后, 抑制了革兰阳性细菌的生长, 增加了对嗜血杆菌的选择性, 嗜血杆菌在加万古霉素的培养基上, 菌落生长较大, 极易识别, 从而提高了嗜血杆菌的分离率。325名儿童咽拭子的分离结果表明, 加万古霉素(50μg ml ) 的兔血巧克力琼脂培养基对嗜血杆菌的分离率为77. 2%,而未加万古霉素兔血巧克力琼脂培养基的分离率为32%,两者差异极为显著(P
·30·
中华检验医学杂志2001年1月第24卷第1期 Chin J Lab Med , January 2001, Vol 24, No . 1
2李仲兴, 郑家齐, 李家宏, 主编. 诊断细菌学. 香港:黄河文化出
版社, 1992. 440.
3R ennin R , Gordon T , Yaschuk Y , et al . Laboratory and clinical eveluatioas of media for the pri mary is olation of Haemophilus s pecies . J Clin Microbiol , 1992, 30:1917. 4卫生部医政司. 全国临床检验操作规程. 第2版. 南京:东南大学出版社, 1997. 347. 5吴丽华, 徐培元, 周第. 流感嗜血杆菌培养基及培养条件的研究. 中华医学检验杂志, 1994, 17:187. 6Forgie IM , BSC , O ′neill P , et al . The etiology of acute lower res piratory tract infections in Gambian :Ⅱ. Acute lower respiratory tract infections in infants pres enting at the hospital . Pediatr Infect Dis J , 1991, 10:42-47. 7陈民钧. 为什么有的细菌室分离不出流感嗜血杆菌. 中华医学检验杂志, 1996, 19:85.
(收稿日期:2000-05-30)
总之, 嗜血杆菌分离培养基以5%兔血巧克力琼脂最好(脑心琼脂虽好, 但X 、V 因子需进口, 菌落辨认较难) , 如兔血来源困难也可用羊血代替, 但需
加入一定的营养物质。为提高嗜血杆菌分离率, 应在培养基中加入50μg ml 的万古霉素(或其他革兰阳性细菌抑制剂) 。如X 、V 因子纸片来源困难, 嗜血杆菌X 、V 因子需求试验可用金黄色葡萄球菌斑
[7]
点法(即卫星试验) 代替。
参
考
文
献
1Burman LA , Troll fors B , Anderson B , et al . Diagnos is of pneumonia by
cultures , bacterial and viral anti gen detection s erology with s pecial reference to antibodies agains t pneumonia antigens . J Infect Dis , 1991, 163:1087.
(本文编辑:毛家都)
·实验室管理·
参加澳大利亚梅毒血清学国际室间质评五年回顾
李倩 高学慧 潘蔚如
质量控制是提高临床医学检验水平的重要途径, 为提高梅毒血清学检验水平, 我们从1984年起参加了澳大利亚微生物学会主持的微生物学国际室间质评活动, 该项质评包括细菌学、血清学、病毒学、寄生虫学、真菌学。有300多家医院的实验室参加, 主要是澳大利亚本国, 部分来自东南亚国家。通过参加质评, 我们积累了经验, 对提高梅毒实验室诊断水平很有帮助。现将1994～1998年梅毒血清学部分作一总结。报告如下。
一、材料和方法
1. 质控血清:澳大利亚微生物学会提供。每6周1次, 每次2份样品, 每年8次。每份样品均有简要病历介绍。
2. 试剂:梅毒快速血浆反应素试验(RPR ) 试剂:上海实业科华生物技术有限公司; 梅毒螺旋体血凝试验(TPHA ) 试剂:英国OMEGA 公司。
3. 评价方法:在规定的时间内完成测试, 并将结果寄给澳方, 澳方回报参考实验室结果和群体结果供我方评估。
二、结果
1. 每份样品均做RPR 筛选试验和TPHA 确证试验, 5年内共完成了80份样品的检测, 共计160个测试, 其中158个测试结果与澳方参考实验室回报结果一致, 正确率98. 6%。
2. 错报两次, 1995年第4次, 样品“7A ”, 我室报告TPHA 阳性, 澳方回报为阴性; 1995年第8次样品“7A ”, 我室报告RPR 弱阳性, 澳方回报为阴性。
作者单位:100730中国医学科学院中国协和医科大学北京协3. 从群体结果, 可以了解其他实验室的情况。如:1995年第8次共有145个实验室参加梅毒血清学质控, RPR 试验样品A 与参考实验室回报一致的为63%,样品B 为72%。TPH A 试验样品A 为65%,样品B 为76%。与群体结果比较, 我室成绩优良。
三、讨论
1. 通过5年质控实践, 我们体会到要做好梅毒血清学检验必须选用敏感、特异, 质量稳定的试剂, 严格质量控制, 因不同厂家不同批号的试剂存在差异, 因此每次试验必须做阴、阳性对照, 如对照结果不理想, 须查找原因, 重复试验。
2. 由于RPR 采用肉眼观察结果易产生人为误差, 因此必须严格按标准化操作, 每个环节都不可忽视。我们1995年第8次样品“7A ”RPR 阴性错报为弱阳性, 即与反应时间过长有关。
3. 阳性标本要做适当稀释, 以保证稀释倍数的准确性, 弱阳性标本的判断较为困难, 应十分仔细, 结合病历介绍全面考虑, 必要时重复试验。
4. TPHA 试剂使用前, 应恢复至室温, 充分摇匀。反应孔必须清洁, 如有残留物会严重干扰反应, 我们1995年第4次样品“7A ”TPHA 阴性错报为阳性, 可能与此有关。
通过5年质评回顾, 深感参加室间质评的重要性。通过质控监督, 规范了操作规程, 丰富了工作人员的经验, 保证了结果的准确性, 为临床提供了正确的结果。
(收稿日期:2000-02-11)
(:
·28·
中华检验医学杂志2001年1月第24卷第1期 Chin J Lab Med , January 2001, Vol 24, No . 1
·论著·
嗜血杆菌分离培养基的评价与应用
陈东科 胡云建 张秀珍
【摘要】 目的 选择合适的嗜血杆菌分离培养基提高嗜血杆菌分离率。方法 将嗜血杆菌接种于7种培养基上, 计算和比较7种培养基上嗜血杆菌的平均生长指数(GI ) ; 对325份呼吸道标本进行检测, 比较巧克力琼脂(BRchoc ) 和加万古霉素巧克力琼脂(BRchoc -V ) 的嗜血杆菌分离率。结果 添加2%鲜酵母浸液和50%鲜牛肉浸液的各种培养基, 较未加者的GI 值明显增高; 兔血巧克力琼脂培养基较羊血巧克力琼脂培养基的GI 值为高(P
【关键词】 嗜血杆菌; 培养基; 分离率
Evaluation and applicatipn of media for isolation of haemophilus CHEN Dongke , H U Y u njian , ZH ANG
Xiu zhen . Dep artment of Labor ato ry M edicine , Beijing Ho spital , Beijing 100730, China
【Abstract 】 Objective To select suitable media for increasin g isolation rate of haemophilus . Methods Haemophilus was inoculated on seven types of media . The average growth index (GI ) of Haemophilus was calculated and Haemop hilus was isolated from 325specimens of the respiratory tract and its isolation rate was compared with that media of brchoc and brchoc -V agare . Results The GI of media with 2%fresh yeast in fusion and 50%of meat infus ion was higher than that of those with no yeast and meat infusion . The GI of Haemophilus on BRchoc was higher than that of the BSchoc (P
【Key words 】 Haemophilus ; Medium ; Is olation rate
嗜血杆菌与许多感染性疾病有关
[1]
, 但由该菌
引起的感染发病率一直难以估计, 因为嗜血杆菌是苛养性细菌, 其生长不仅需要X 、V 因子, 而且受革兰阳性细菌生长的干扰, 分离培养极为困难。因此, 配制一种既操作简便又经济实用的嗜血杆菌分离培养基, 用以提高嗜血杆菌分离率, 是临床诊断和治疗嗜血杆菌感染所急需的。为了提高嗜血杆菌分离率, 作者对不同血源及配方的巧克力琼脂培养基进行了嗜血杆菌生长指数(growth index , G I ) 的测定, 同时进行了嗜血杆菌的分离率比较, 报告如下。
材料与方法
一、材料
1. 试剂:脑心浸液(干粉) 、XV 因子(SR 158) 、VITEK -NHI 试卡及X 、V 因子纸片购自生物梅里埃
公司, 鲜酵母粉为市售(东莞产) , 新鲜牛肉浸液、1%
[2]
鲜酵母浸液为本实验室自制, 脱纤维蛋白羊血、兔血为外购。
2. 试验菌株:流感嗜血杆菌ATC C 10211、ATCC 49247、ATCC 49766及金葡菌ATCC 25923为本实验室菌库保存, 4株副流感嗜血杆菌和3株溶血嗜血杆菌为临床分离菌株。
3. 培养基(1) 基础培养基:A :按厂家规定剂量脑心浸液(干粉) , 加2%琼脂粉和水, 调pH7. 6, 置121℃15min 高压灭菌; B :脑心浸液(干粉) , 加2%琼脂粉、50%鲜牛肉浸液、50%水, 调pH 7. 6, 置121℃15min 高压灭菌, 倾碟前无菌操作加入2%的滤菌鲜酵母浸液(补充V 因子) 。(2) 应用培养基:Axv :往A 中加入X 因子(氯化血红素15mg L ) 、V 因子(辅酶Ι15mg L ) ; Bxv :往B 中加入X 、V 因子; A 羊血巧克力琼脂(ASchoc ) :A 中加入5%脱纤维蛋
中华检验医学杂志2001年1月第24卷第1期 Chin J Lab Med , J anuary 2001, Vol 24, No . 1
·29·
脱纤维蛋白羊血; A 兔血巧克力琼脂(ARchoc ) :A 中加入5%脱纤维蛋白兔血; B 兔血巧克力琼脂(BRchoc ) :B 中加入5%脱纤维蛋白兔血; B 兔血巧克力琼脂-V (BRchoc -V ) :BRchoc 中加入万古霉素(50μg ml ) 。上述培养基加血后置85℃水浴10min 后倾制平板。
4. 标本来源:325份标本取自6～8岁健康儿童的咽部分泌物, 男、女比例为162 163, 取材当日无流感流行。
二、方法
1. GI 值测定:取经18h 培养的嗜血杆菌(n =10) 单个菌落于1ml 脑心浸液中, 用脑心浸液进行1∶10连续稀释, 取各稀释度菌液100μl 均匀接种在各种分离培养基上, 于8%CO 2孵箱中35℃孵育24h , 计数少于10个菌落平板上的菌落数, 并用游标卡尺量出菌落直径, 求其均值(mm ) , 再乘以此最高稀释度的对数即得G I 值
[3]
表2 嗜血杆菌在不同血源巧克力培养基的
GI 值比较(n =10)
培养基Bxv BRchoc BSchoc
GI ( x ±s ) 6. 286±1. 5727. 006±1. 5815. 352±1. 538
5. 39(
t (P 值)
本在BRchoc -V 培养基分离251株嗜血杆菌, 分离率为77. 2%;而在BRchoc 培养基上仅分离到嗜血杆菌104株, 分离率为32. 0%,嗜血杆菌在两种培养基上
的分离率差异有显著性(P
表3 325份标本中嗜血杆菌分离率比较
菌种
流感嗜血杆菌副流感嗜血杆菌副溶血嗜血杆菌溶血嗜血杆菌合计
BR choc 3(0. 9) 44(13. 5) 54(16. 6) 3(0. 9) 104(32. 0)
BR choc -V 17(5. 2)
136(51. 5) 95(29. 2) 3(0. 9) 251(77. 2)
分离株数(%) 分离株数(%)
2
χ
P 值
12. 07
—
141. 24
。
2. 嗜血杆菌分离率比较:以兔血巧克力琼脂(BRchoc ) 和加万古霉素(50μg ml ) 的兔血巧克力琼脂(BRchoc -V ) 为分离培养基, 对325份标本进行嗜血杆菌的分离培养, 按规程进行操作
VITEK -NHI 试卡鉴定到种。
2
[4]
讨论
, 分离菌株用
嗜血杆菌是专性寄生的苛养性细菌, 其生长需要X 、V 因子或两者之一, 最适生长温度为35℃～37℃,在pH7. 6条件下生长最好。7种培养基嗜血杆菌的G I 值比较结果显示:嗜血杆菌在兔血巧克力琼脂培养基上生长好于羊血巧克力琼脂培养基(P
嗜血杆菌主要寄生在呼吸道, 是引起下呼吸道感染的主要病原菌
[6]
[5]
3. 统计分析:用t 检验比较流感嗜血杆菌在各种培养基上的GI 差异; 用χ检验比较两种培养基对嗜血杆菌的分离率。
结
果
1. 不同营养的培养基G I 值比较:表1数据显示, 培养基中加与不加鲜酵母浸液和鲜牛肉浸液, 生长指数差异有显著性(P
表1 不同营养培养基上的G I 值比较(n =10)
培养基Axv
Bxv ASchoc BSchoc ARchoc BRchoc
G I (x ±s ) 4. 185±1. 1616. 286±1. 5722. 259±0. 7345. 352±1. 5384. 166±1. 3457. 006±1. 581
t (P 值) 10. 15(
。呼吸道标本中的嗜血杆菌在
初代培养时, 受到革兰阳性细菌的抑制, 菌落细小不
易与其他杂菌相区别, 这是造成嗜血杆菌分离率低的直接原因, 当在培养基中加入万古霉素后, 抑制了革兰阳性细菌的生长, 增加了对嗜血杆菌的选择性, 嗜血杆菌在加万古霉素的培养基上, 菌落生长较大, 极易识别, 从而提高了嗜血杆菌的分离率。325名儿童咽拭子的分离结果表明, 加万古霉素(50μg ml ) 的兔血巧克力琼脂培养基对嗜血杆菌的分离率为77. 2%,而未加万古霉素兔血巧克力琼脂培养基的分离率为32%,两者差异极为显著(P
·30·
中华检验医学杂志2001年1月第24卷第1期 Chin J Lab Med , January 2001, Vol 24, No . 1
2李仲兴, 郑家齐, 李家宏, 主编. 诊断细菌学. 香港:黄河文化出
版社, 1992. 440.
3R ennin R , Gordon T , Yaschuk Y , et al . Laboratory and clinical eveluatioas of media for the pri mary is olation of Haemophilus s pecies . J Clin Microbiol , 1992, 30:1917. 4卫生部医政司. 全国临床检验操作规程. 第2版. 南京:东南大学出版社, 1997. 347. 5吴丽华, 徐培元, 周第. 流感嗜血杆菌培养基及培养条件的研究. 中华医学检验杂志, 1994, 17:187. 6Forgie IM , BSC , O ′neill P , et al . The etiology of acute lower res piratory tract infections in Gambian :Ⅱ. Acute lower respiratory tract infections in infants pres enting at the hospital . Pediatr Infect Dis J , 1991, 10:42-47. 7陈民钧. 为什么有的细菌室分离不出流感嗜血杆菌. 中华医学检验杂志, 1996, 19:85.
(收稿日期:2000-05-30)
总之, 嗜血杆菌分离培养基以5%兔血巧克力琼脂最好(脑心琼脂虽好, 但X 、V 因子需进口, 菌落辨认较难) , 如兔血来源困难也可用羊血代替, 但需
加入一定的营养物质。为提高嗜血杆菌分离率, 应在培养基中加入50μg ml 的万古霉素(或其他革兰阳性细菌抑制剂) 。如X 、V 因子纸片来源困难, 嗜血杆菌X 、V 因子需求试验可用金黄色葡萄球菌斑
[7]
点法(即卫星试验) 代替。
参
考
文
献
1Burman LA , Troll fors B , Anderson B , et al . Diagnos is of pneumonia by
cultures , bacterial and viral anti gen detection s erology with s pecial reference to antibodies agains t pneumonia antigens . J Infect Dis , 1991, 163:1087.
(本文编辑:毛家都)
·实验室管理·
参加澳大利亚梅毒血清学国际室间质评五年回顾
李倩 高学慧 潘蔚如
质量控制是提高临床医学检验水平的重要途径, 为提高梅毒血清学检验水平, 我们从1984年起参加了澳大利亚微生物学会主持的微生物学国际室间质评活动, 该项质评包括细菌学、血清学、病毒学、寄生虫学、真菌学。有300多家医院的实验室参加, 主要是澳大利亚本国, 部分来自东南亚国家。通过参加质评, 我们积累了经验, 对提高梅毒实验室诊断水平很有帮助。现将1994～1998年梅毒血清学部分作一总结。报告如下。
一、材料和方法
1. 质控血清:澳大利亚微生物学会提供。每6周1次, 每次2份样品, 每年8次。每份样品均有简要病历介绍。
2. 试剂:梅毒快速血浆反应素试验(RPR ) 试剂:上海实业科华生物技术有限公司; 梅毒螺旋体血凝试验(TPHA ) 试剂:英国OMEGA 公司。
3. 评价方法:在规定的时间内完成测试, 并将结果寄给澳方, 澳方回报参考实验室结果和群体结果供我方评估。
二、结果
1. 每份样品均做RPR 筛选试验和TPHA 确证试验, 5年内共完成了80份样品的检测, 共计160个测试, 其中158个测试结果与澳方参考实验室回报结果一致, 正确率98. 6%。
2. 错报两次, 1995年第4次, 样品“7A ”, 我室报告TPHA 阳性, 澳方回报为阴性; 1995年第8次样品“7A ”, 我室报告RPR 弱阳性, 澳方回报为阴性。
作者单位:100730中国医学科学院中国协和医科大学北京协3. 从群体结果, 可以了解其他实验室的情况。如:1995年第8次共有145个实验室参加梅毒血清学质控, RPR 试验样品A 与参考实验室回报一致的为63%,样品B 为72%。TPH A 试验样品A 为65%,样品B 为76%。与群体结果比较, 我室成绩优良。
三、讨论
1. 通过5年质控实践, 我们体会到要做好梅毒血清学检验必须选用敏感、特异, 质量稳定的试剂, 严格质量控制, 因不同厂家不同批号的试剂存在差异, 因此每次试验必须做阴、阳性对照, 如对照结果不理想, 须查找原因, 重复试验。
2. 由于RPR 采用肉眼观察结果易产生人为误差, 因此必须严格按标准化操作, 每个环节都不可忽视。我们1995年第8次样品“7A ”RPR 阴性错报为弱阳性, 即与反应时间过长有关。
3. 阳性标本要做适当稀释, 以保证稀释倍数的准确性, 弱阳性标本的判断较为困难, 应十分仔细, 结合病历介绍全面考虑, 必要时重复试验。
4. TPHA 试剂使用前, 应恢复至室温, 充分摇匀。反应孔必须清洁, 如有残留物会严重干扰反应, 我们1995年第4次样品“7A ”TPHA 阴性错报为阳性, 可能与此有关。
通过5年质评回顾, 深感参加室间质评的重要性。通过质控监督, 规范了操作规程, 丰富了工作人员的经验, 保证了结果的准确性, 为临床提供了正确的结果。
(收稿日期:2000-02-11)
(: