实验七 核算的制备及定量测定（Ⅰ）动物肝脏DNA的提取
1、 DNA在浓NaCl(1-2mol／L)和NaCl(0.14mol／L)溶液中的
溶解度是怎样的？NaCl溶液中加入EDTA-Na有何作用？
2、 本实验中SDS有何作用？氯仿-异戊醇又有何用途？
3、 本实验需多次离心，多次离心的目的的分别是什么？
4、 本实验提取的DNA是否为纯品？
5、 肝脏行鲜或在4℃条件下保存多天还能否用作实验材料？
为什么？
6、 为什么肝脏匀浆要充分（研磨要充分）？
实验八 聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质（核黄素—TEMED聚合系统）（Ⅰ）凝胶制备
1、 胶制备的原理是什么？
2、 化学聚合和光聚合各有何特点？
3、 光聚合加入核黄素、TEMED各有何作用？
4、 氧的存在对凝胶聚合有何影响？如何除去溶解氧？
5、 凝胶浓度和交联度与孔径大小有何关系？柱状胶是指什么
样的胶？
6、 凝胶制备时在制胶架凹槽中滴1—2滴蔗糖液的作用是什
么？
7、 在称量Acr、Bis时应注意哪些问题？在制胶时应注意哪些
问题？
8、 如何判断凝胶（浓缩胶、分离胶）聚合是否完成？
9、 T、C值的含义？如何根据T值计算出C值及Acr、Bis的
用量？
实验九 聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质（核黄素—TEMED聚合系统）（Ⅱ）电泳分离
1、 电泳的原理是什么？
2、 盘状电泳的过程有哪三种物理效应？
3、 电泳基质的四个不连续时指的是什么？
4、 本实验中样品液应如何制备？样品胶通常可用什么代替？
5、 安装凝胶管时应注意哪些问题？
6、 如何确定电泳终点？剥胶时应注意哪些问题？
7、 为什么电极缓冲液的下槽液不能用于上槽？
8、 剥出的凝胶条通常需固定，为什么？固定往往与哪个操作
可同时进行？
实验十 蛋白质分子量测定—凝胶过滤层析法（Ⅱ）分子量测定
1、 凝胶层析法的原理是什么？
2、 加样时应该注意哪些问题？
3、 恒流泵的转速如何矫正？
4、 核酸蛋白检测仪，部分收集器、记录仪应该如何使用？
5、 蛋白质分子量标准曲线如何制作？
6、 试分析：如果只给你层析柱和凝胶，而没有核酸蛋白检测
仪和部分收集器，也没有记录仪，此实验能否完成？如何完成？
实验十一 琼脂糖凝胶电泳法分离LDH同工酶及血清LDH总活力的测定（Ⅰ）LDH同工酶分离
1、 什么是同工酶？LDH催化发生什么样的反应？
2、 琼脂糖凝胶板如何制备？
3、 本实验的滤纸桥与醋酸纤维薄膜电泳的滤纸桥的搭法有何
异同点？
4、 显色是非常关键的操作步骤，显色时应注意哪些问题？
5、 为什么叫酶专一性染色？试分析之。
6、 试分析：LDH同工酶分离可否用薄膜电泳或PAGE电泳？ 实验十二 琼脂糖凝胶电泳法分离LDH同工酶及血清LDH总活力的测定（Ⅱ）LDH总活力的测定
1、 LDH总活力的测定的原理是什么？本实验方法是利用
顺向反应还是逆向反应？
2、 LDH总活力的测定中用哪些注意事项？
3、 本实验中酶活性的定义是什么？你能否重新给一个定
义？
4、 测定LDH活力是要在37℃条件下保温15min,这15min
时间计时是否要准确？为什么？
5、 你是如何理解LDH总活力计算公式的？（与酶的定义
联系起来进行分析）
实验七 核算的制备及定量测定（Ⅰ）动物肝脏DNA的提取
1、 DNA在浓NaCl(1-2mol／L)和NaCl(0.14mol／L)溶液中的
溶解度是怎样的？NaCl溶液中加入EDTA-Na有何作用？
2、 本实验中SDS有何作用？氯仿-异戊醇又有何用途？
3、 本实验需多次离心，多次离心的目的的分别是什么？
4、 本实验提取的DNA是否为纯品？
5、 肝脏行鲜或在4℃条件下保存多天还能否用作实验材料？
为什么？
6、 为什么肝脏匀浆要充分（研磨要充分）？
实验八 聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质（核黄素—TEMED聚合系统）（Ⅰ）凝胶制备
1、 胶制备的原理是什么？
2、 化学聚合和光聚合各有何特点？
3、 光聚合加入核黄素、TEMED各有何作用？
4、 氧的存在对凝胶聚合有何影响？如何除去溶解氧？
5、 凝胶浓度和交联度与孔径大小有何关系？柱状胶是指什么
样的胶？
6、 凝胶制备时在制胶架凹槽中滴1—2滴蔗糖液的作用是什
么？
7、 在称量Acr、Bis时应注意哪些问题？在制胶时应注意哪些
问题？
8、 如何判断凝胶（浓缩胶、分离胶）聚合是否完成？
9、 T、C值的含义？如何根据T值计算出C值及Acr、Bis的
用量？
实验九 聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）分离血清蛋白质（核黄素—TEMED聚合系统）（Ⅱ）电泳分离
1、 电泳的原理是什么？
2、 盘状电泳的过程有哪三种物理效应？
3、 电泳基质的四个不连续时指的是什么？
4、 本实验中样品液应如何制备？样品胶通常可用什么代替？
5、 安装凝胶管时应注意哪些问题？
6、 如何确定电泳终点？剥胶时应注意哪些问题？
7、 为什么电极缓冲液的下槽液不能用于上槽？
8、 剥出的凝胶条通常需固定，为什么？固定往往与哪个操作
可同时进行？
实验十 蛋白质分子量测定—凝胶过滤层析法（Ⅱ）分子量测定
1、 凝胶层析法的原理是什么？
2、 加样时应该注意哪些问题？
3、 恒流泵的转速如何矫正？
4、 核酸蛋白检测仪，部分收集器、记录仪应该如何使用？
5、 蛋白质分子量标准曲线如何制作？
6、 试分析：如果只给你层析柱和凝胶，而没有核酸蛋白检测
仪和部分收集器，也没有记录仪，此实验能否完成？如何完成？
实验十一 琼脂糖凝胶电泳法分离LDH同工酶及血清LDH总活力的测定（Ⅰ）LDH同工酶分离
1、 什么是同工酶？LDH催化发生什么样的反应？
2、 琼脂糖凝胶板如何制备？
3、 本实验的滤纸桥与醋酸纤维薄膜电泳的滤纸桥的搭法有何
异同点？
4、 显色是非常关键的操作步骤，显色时应注意哪些问题？
5、 为什么叫酶专一性染色？试分析之。
6、 试分析：LDH同工酶分离可否用薄膜电泳或PAGE电泳？ 实验十二 琼脂糖凝胶电泳法分离LDH同工酶及血清LDH总活力的测定（Ⅱ）LDH总活力的测定
1、 LDH总活力的测定的原理是什么？本实验方法是利用
顺向反应还是逆向反应？
2、 LDH总活力的测定中用哪些注意事项？
3、 本实验中酶活性的定义是什么？你能否重新给一个定
义？
4、 测定LDH活力是要在37℃条件下保温15min,这15min
时间计时是否要准确？为什么？
5、 你是如何理解LDH总活力计算公式的？（与酶的定义
联系起来进行分析）