DOI:10.16003/j.cnki.issn1672-5190.2011.01.063
畜牧与饲料科学Animal Husbandry and Feed Science 2011，32（1）:77-78
油乳剂灭活疫苗不同接种途径的效力比较试验
张建伟，李
林，章振华，景小冬，黄凤军，王惠云，姜北宇
100097）
（北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京
摘要：采用北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫预防研究室制备的鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联灭活疫苗，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个部位免疫SPF 鸡，免疫后采血，测定ND 、IB 、EDS HI 抗体，并用AEV VR 株强毒攻击，攻毒后观察疫苗保护效果，比较不同接种部位对油乳剂灭活疫苗效力的影响。结果证明，经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉3个部位免疫均可产生同样好的免疫效力。
关键词：灭活疫苗；免疫途径；免疫效力中图分类号：S852.4
文献标识码：A
文章顺序编号：1672-5190（2011）01-0077-02
Comparison on Efficiency of Inactivated Emulsion Vaccine Inoculated via Different Immunization Routes
ZHANG Jian-wei, LI Lin, ZHANG Zhen-hua, JING Xiao-dong, HUANG Feng-jun, WANG Hui-yun, JIANG Bei-yu
（Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China ）
Abstract ：Emulsion vaccine against Newcastle disease (ND),infectious bronchitis (IB),egg -drop syndrome (EDS)and avian
encephalomyelitis (AE)was prepared in laboratory in Institute of Animal Husbandry and veterinary Medicine of Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences. SPF chickens were immunized through injection in chest muscle or leg muscle or through subcutaneous injection in neck back. Blood samples were collected, and the HI titers of ND, IB and EDS were determined. The chickens were challenged with AEV VR strain, and protective efficiency against AE was detected. The results showed that good immune efficiency was achieved whatever immunization rout was used.
Key words ：inactivated vaccine; immunization route; immune efficiency 在对动物进行免疫接种时，不同的接种方法会对疫苗的免疫效果产生影响
［1-5］
②IBH120活疫苗，由北京市农林科学院畜牧兽医研究
所免疫预防研究室用H120活疫苗毒种，接种SPF 鸡胚自制，批号20070415。
，这在实际应用中具有重要的意
义，因此，寻找适合的免疫接种部位和方法，减少对接种动物的应激是生产的重要需求［6-8］。在实际应用中，采用腿部肌肉接种途径会造成动物的短期运动困难和障碍，为此，笔者进行了不同部位的免疫接种试验，以确定何种途径接种对动物的影响最小。现将试验结果总结如下，以期对生产实际有借鉴和指导意义。
1.1.21.1.3
入。
抗原：ND HI 抗原、IB （M41）HI 抗原及EDS HI 抗原，均试验鸡：32日龄SPF 公雏鸡，由北京实验动物中心购攻击用强毒、攻毒方法及剂量：AEV Van Roekel 株
由北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫预防研究室自制。
1.1.4
11.1
材料与方法材料疫苗
其毒价为105.5EID 50/0.2mL 。攻毒采用脑内注射途径，攻击
50倍稀释毒0.05mL/只。1.21.2.1
方法
不同部位接种四联苗的ND 、EDS 及AE 部分效力比
1.1.1
①由北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫预防研究
室制备的鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联灭活疫苗，其批号为：20070720。
收稿日期：2011－01－12
作者简介：张建伟（1964—），男，副研究员，硕士，主要研究方向
为兽用生物制品。
通讯作者：姜北宇（1956—），男，研究员，主要研究方向为兽用
生物制品。
较试验：将35只32日龄SPF 鸡分成4个组，第1～3组为免疫组，每组10只鸡，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个部位用四联苗免疫，每只0.5mL ；第4组5只鸡，不进行免疫为对照组。采血后用AEV VR 株强毒脑内注射，每只0.05mL ，攻毒后观察21d 。
1.2.2不同部位接种四联苗的IB 部分效力比较试验：先将
40只32日龄SPF 鸡分成A 、B 两组，A 组35只鸡，B 组5只
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
器官的出血新鲜、明显，多为机械性损伤和电麻所引起，反之为致病因素所引起的出血。
综上所述，淋巴结检查是屠宰检疫过程中不可缺少的一部分，但不是全部。因此，对所出现的各种病理变化一定要结合各种因素做出全面的分析和判断，从而作出正确的检疫结论。
参考文献：
［1］徐定人，徐百万. 动物检疫800题［M ］. 北京：时事出版社，
［4］［2］［3］
1998.
卢旺. 动物检疫员手册［M ］. 北京：中国农业出版社，2007. 李放之. 动物检疫讲义之淋巴结检验［EB/OL］. （2008-10-
22）.http://221.202.129.162:8080/jzah/E_ReadNews.asp?NewsID=1051.
蒋炳轩. 健康猪扁桃体及淋巴结的细菌检查结果［J ］. 甘肃畜牧兽医，1980（4）：13.
（责任编辑：赵景娣）
78
表1
试验分组
接种途径颈背侧皮下胸部肌肉腿部肌肉对照
畜牧与饲料科学
四联苗不同接种途径接种ND 、EDS 及AE 部分效力比较试验结果
免疫后（周）HI 效价（log2GMT ）
免疫剂量（mL ）
免疫鸡数
第32卷
8.68.78.81.6
0000
1.81.81.81.8
9.49.310.10
AE 攻毒保护率（正常鸡数/攻毒鸡数）
100%（10/10）100%（10/10）100%（10/10）20%（1/5）
1234
0.50.50.5
—
表2
1010105
四联苗不同部位接种IB 部分效力比较试验结果
首免抗体滴度
二免抗体滴度
二免抗体是首免抗体倍数
试验分组试验鸡数接种途径颈背侧皮下胸部肌肉腿部肌肉对照
—
A1A2A3A4B
10101055
1∶23.9（14.93）1∶23.9（14.93）1∶23.9（14.93）1∶23.9（14.93）1∶21.4（2.64）
1∶26.5（90.51）1∶26.8（111.43）1∶26.6（97.01）1∶23.8（13.93）1∶21.6（3.03）
6.067.466.50
——
鸡。A 组35只试验鸡先用IBH120活疫苗滴鼻免疫，1羽份/只，B 组5只鸡不免疫作为对照鸡。两组试验鸡分别隔离饲养。IBH120活疫苗免疫后3周，A 组试验鸡随机取10只鸡连同B 组5只鸡，采血分离血清、冻存，然后将A 组试验鸡分成A1、A2、A3及A4共4组，A1、A2及A3组每组10只，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个部位用四联苗加强免疫，每只0.5mL ，A4组5只鸡，不免疫灭活疫苗，作为仅用H120活疫苗免疫组；加强免疫后3周对所有试验鸡采血、分离血清，连同四联苗免疫前（H120活苗免后
对照组4/5发病。
②四联苗不同接种部位IB 部分效力比较试验结果显
示，SPF 鸡接种鸡传染性支气管炎H120活疫苗21d 后，再经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个不同部位用四联苗加强免疫，加强免疫后21d IB HI 抗体水平几何平均值分别是首免的6.06，7.46及6.50倍，3种不同部位接种鸡只所产生的四联苗IB 部分效力，以胸部肌肉途径最好，但不同部位接种鸡IB HI 抗体差异不大。
③采用四联灭活疫苗，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及
腿部肌肉共3个不同部位免疫SPF 鸡，比较了不同部位免疫对四联苗效力的影响。试验结果证明，经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉3个部位免疫四联苗后，诱导鸡只所产生的ND 、EDS 及IB HI 抗体滴度以及抗AEV 强毒攻击的保护力基本相同，均产生了同样好的免疫效力。因此，在进行油乳剂灭活疫苗免疫接种时，这3个部位均可选用。
3周）血样，测定IB HI 抗体，计算试验鸡经3个不同部位加
强免疫四联灭活疫苗后的IB HI 抗体增加倍数。
22.1
结果
不同部位接种四联苗的ND 、EDS 及AE 部分效力比
结果见表1。四联苗经颈背侧皮下、胸部肌肉
较试验结果
及腿部肌肉途径免疫后4周，ND HI 抗体几何平均滴度分别为8.6，8.7及8.8log2，EDS HI 抗体几何平均滴度分别为
④不同部位接种后免疫效果产生时间的差异有待进行
进一步的研究。
参考文献：
［1］张英楠，栾维民，杨树宝. 免疫途径对鸡全身性免疫应答水
平的影响［J ］. 畜牧兽医杂志，2009，28（3）：1-2，4. ［2］兰信海. 禽流感—新城疫重组二联活疫苗免疫途径的试验
［J ］. 山东畜牧兽医，2009，30（7）：11-12.
［3］陈文宏. 疫苗接种不良反应及预防措施［J ］. 现代农业科技，
9.4，9.3及10.1log2，对照组鸡为阴性。AEV 强毒攻击后，3
个不同部位免疫组鸡均10/10保护，而对照组4/5发病。
2.2不同部位接种四联苗的IB 部分效力比较试验结果
由表2可见，SPF 鸡接种鸡传染性支气管炎H120活疫苗
21d 后，再经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个不同
部位用四联苗加强免疫，加强免疫后21d IB HI 抗体水平几何平均值分别是首免的6.06，7.46及6.50倍。
3小结与讨论
2009（12）：237，239.
［4］王泉，叶红美. 对动物免疫接种过程中所出现问题的思考
［J ］. 现代农业科技，2008（14）：236-237.
［5］耿树林，吴锦宏，李志章. 家禽免疫途径的选择及注意事项
［J ］. 中国畜禽种业，2010（8）：32.
［6］王红琳，杨峻，邵华斌，等. 禽霍乱·新城疫二联油乳剂灭活
—疫苗对鸭和鹅的安全性及免疫效力疫苗研究（Ⅲ报）——
试验［J ］. 安徽农业科学，2008，36（36）：15902-15903. ［7］杨光钰. 动物免疫接种注意事项［J ］. 现代农业科技，2009
（23）：339.
［8］孙永久. 规模养鸡场疫病防治与免疫接种［J ］. 现代农业科
技，2009（14）：316.
①采用北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫预防研
究室制备的鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联灭活疫苗，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个不同部位免疫SPF 鸡，进行疫苗不同接种部位效力比较试验。结果显示，四联苗免疫后4周，经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉途径接种的鸡只ND HI 抗体几何平均滴度分别为8.6，8.7及8.8log2，EDS HI 抗体几何平均滴度分别为9.4，9.3及10.1log2，腿部肌肉注射所产生的ND 及EDS HI 抗体几何平均滴度最高，但3个部位接种所产生的ND 及EDS HI 抗体几何平均滴度差异不显著；
AEV 强毒攻击后，3个不同部位免疫组鸡均10/10保护，而
（责任编辑：栗林）
DOI:10.16003/j.cnki.issn1672-5190.2011.01.063
畜牧与饲料科学Animal Husbandry and Feed Science 2011，32（1）:77-78
油乳剂灭活疫苗不同接种途径的效力比较试验
张建伟，李
林，章振华，景小冬，黄凤军，王惠云，姜北宇
100097）
（北京市农林科学院畜牧兽医研究所，北京
摘要：采用北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫预防研究室制备的鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联灭活疫苗，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个部位免疫SPF 鸡，免疫后采血，测定ND 、IB 、EDS HI 抗体，并用AEV VR 株强毒攻击，攻毒后观察疫苗保护效果，比较不同接种部位对油乳剂灭活疫苗效力的影响。结果证明，经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉3个部位免疫均可产生同样好的免疫效力。
关键词：灭活疫苗；免疫途径；免疫效力中图分类号：S852.4
文献标识码：A
文章顺序编号：1672-5190（2011）01-0077-02
Comparison on Efficiency of Inactivated Emulsion Vaccine Inoculated via Different Immunization Routes
ZHANG Jian-wei, LI Lin, ZHANG Zhen-hua, JING Xiao-dong, HUANG Feng-jun, WANG Hui-yun, JIANG Bei-yu
（Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine, Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences, Beijing 100097, China ）
Abstract ：Emulsion vaccine against Newcastle disease (ND),infectious bronchitis (IB),egg -drop syndrome (EDS)and avian
encephalomyelitis (AE)was prepared in laboratory in Institute of Animal Husbandry and veterinary Medicine of Beijing Academy of Agriculture and Forestry Sciences. SPF chickens were immunized through injection in chest muscle or leg muscle or through subcutaneous injection in neck back. Blood samples were collected, and the HI titers of ND, IB and EDS were determined. The chickens were challenged with AEV VR strain, and protective efficiency against AE was detected. The results showed that good immune efficiency was achieved whatever immunization rout was used.
Key words ：inactivated vaccine; immunization route; immune efficiency 在对动物进行免疫接种时，不同的接种方法会对疫苗的免疫效果产生影响
［1-5］
②IBH120活疫苗，由北京市农林科学院畜牧兽医研究
所免疫预防研究室用H120活疫苗毒种，接种SPF 鸡胚自制，批号20070415。
，这在实际应用中具有重要的意
义，因此，寻找适合的免疫接种部位和方法，减少对接种动物的应激是生产的重要需求［6-8］。在实际应用中，采用腿部肌肉接种途径会造成动物的短期运动困难和障碍，为此，笔者进行了不同部位的免疫接种试验，以确定何种途径接种对动物的影响最小。现将试验结果总结如下，以期对生产实际有借鉴和指导意义。
1.1.21.1.3
入。
抗原：ND HI 抗原、IB （M41）HI 抗原及EDS HI 抗原，均试验鸡：32日龄SPF 公雏鸡，由北京实验动物中心购攻击用强毒、攻毒方法及剂量：AEV Van Roekel 株
由北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫预防研究室自制。
1.1.4
11.1
材料与方法材料疫苗
其毒价为105.5EID 50/0.2mL 。攻毒采用脑内注射途径，攻击
50倍稀释毒0.05mL/只。1.21.2.1
方法
不同部位接种四联苗的ND 、EDS 及AE 部分效力比
1.1.1
①由北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫预防研究
室制备的鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联灭活疫苗，其批号为：20070720。
收稿日期：2011－01－12
作者简介：张建伟（1964—），男，副研究员，硕士，主要研究方向
为兽用生物制品。
通讯作者：姜北宇（1956—），男，研究员，主要研究方向为兽用
生物制品。
较试验：将35只32日龄SPF 鸡分成4个组，第1～3组为免疫组，每组10只鸡，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个部位用四联苗免疫，每只0.5mL ；第4组5只鸡，不进行免疫为对照组。采血后用AEV VR 株强毒脑内注射，每只0.05mL ，攻毒后观察21d 。
1.2.2不同部位接种四联苗的IB 部分效力比较试验：先将
40只32日龄SPF 鸡分成A 、B 两组，A 组35只鸡，B 组5只
!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!
器官的出血新鲜、明显，多为机械性损伤和电麻所引起，反之为致病因素所引起的出血。
综上所述，淋巴结检查是屠宰检疫过程中不可缺少的一部分，但不是全部。因此，对所出现的各种病理变化一定要结合各种因素做出全面的分析和判断，从而作出正确的检疫结论。
参考文献：
［1］徐定人，徐百万. 动物检疫800题［M ］. 北京：时事出版社，
［4］［2］［3］
1998.
卢旺. 动物检疫员手册［M ］. 北京：中国农业出版社，2007. 李放之. 动物检疫讲义之淋巴结检验［EB/OL］. （2008-10-
22）.http://221.202.129.162:8080/jzah/E_ReadNews.asp?NewsID=1051.
蒋炳轩. 健康猪扁桃体及淋巴结的细菌检查结果［J ］. 甘肃畜牧兽医，1980（4）：13.
（责任编辑：赵景娣）
78
表1
试验分组
接种途径颈背侧皮下胸部肌肉腿部肌肉对照
畜牧与饲料科学
四联苗不同接种途径接种ND 、EDS 及AE 部分效力比较试验结果
免疫后（周）HI 效价（log2GMT ）
免疫剂量（mL ）
免疫鸡数
第32卷
8.68.78.81.6
0000
1.81.81.81.8
9.49.310.10
AE 攻毒保护率（正常鸡数/攻毒鸡数）
100%（10/10）100%（10/10）100%（10/10）20%（1/5）
1234
0.50.50.5
—
表2
1010105
四联苗不同部位接种IB 部分效力比较试验结果
首免抗体滴度
二免抗体滴度
二免抗体是首免抗体倍数
试验分组试验鸡数接种途径颈背侧皮下胸部肌肉腿部肌肉对照
—
A1A2A3A4B
10101055
1∶23.9（14.93）1∶23.9（14.93）1∶23.9（14.93）1∶23.9（14.93）1∶21.4（2.64）
1∶26.5（90.51）1∶26.8（111.43）1∶26.6（97.01）1∶23.8（13.93）1∶21.6（3.03）
6.067.466.50
——
鸡。A 组35只试验鸡先用IBH120活疫苗滴鼻免疫，1羽份/只，B 组5只鸡不免疫作为对照鸡。两组试验鸡分别隔离饲养。IBH120活疫苗免疫后3周，A 组试验鸡随机取10只鸡连同B 组5只鸡，采血分离血清、冻存，然后将A 组试验鸡分成A1、A2、A3及A4共4组，A1、A2及A3组每组10只，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个部位用四联苗加强免疫，每只0.5mL ，A4组5只鸡，不免疫灭活疫苗，作为仅用H120活疫苗免疫组；加强免疫后3周对所有试验鸡采血、分离血清，连同四联苗免疫前（H120活苗免后
对照组4/5发病。
②四联苗不同接种部位IB 部分效力比较试验结果显
示，SPF 鸡接种鸡传染性支气管炎H120活疫苗21d 后，再经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个不同部位用四联苗加强免疫，加强免疫后21d IB HI 抗体水平几何平均值分别是首免的6.06，7.46及6.50倍，3种不同部位接种鸡只所产生的四联苗IB 部分效力，以胸部肌肉途径最好，但不同部位接种鸡IB HI 抗体差异不大。
③采用四联灭活疫苗，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及
腿部肌肉共3个不同部位免疫SPF 鸡，比较了不同部位免疫对四联苗效力的影响。试验结果证明，经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉3个部位免疫四联苗后，诱导鸡只所产生的ND 、EDS 及IB HI 抗体滴度以及抗AEV 强毒攻击的保护力基本相同，均产生了同样好的免疫效力。因此，在进行油乳剂灭活疫苗免疫接种时，这3个部位均可选用。
3周）血样，测定IB HI 抗体，计算试验鸡经3个不同部位加
强免疫四联灭活疫苗后的IB HI 抗体增加倍数。
22.1
结果
不同部位接种四联苗的ND 、EDS 及AE 部分效力比
结果见表1。四联苗经颈背侧皮下、胸部肌肉
较试验结果
及腿部肌肉途径免疫后4周，ND HI 抗体几何平均滴度分别为8.6，8.7及8.8log2，EDS HI 抗体几何平均滴度分别为
④不同部位接种后免疫效果产生时间的差异有待进行
进一步的研究。
参考文献：
［1］张英楠，栾维民，杨树宝. 免疫途径对鸡全身性免疫应答水
平的影响［J ］. 畜牧兽医杂志，2009，28（3）：1-2，4. ［2］兰信海. 禽流感—新城疫重组二联活疫苗免疫途径的试验
［J ］. 山东畜牧兽医，2009，30（7）：11-12.
［3］陈文宏. 疫苗接种不良反应及预防措施［J ］. 现代农业科技，
9.4，9.3及10.1log2，对照组鸡为阴性。AEV 强毒攻击后，3
个不同部位免疫组鸡均10/10保护，而对照组4/5发病。
2.2不同部位接种四联苗的IB 部分效力比较试验结果
由表2可见，SPF 鸡接种鸡传染性支气管炎H120活疫苗
21d 后，再经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个不同
部位用四联苗加强免疫，加强免疫后21d IB HI 抗体水平几何平均值分别是首免的6.06，7.46及6.50倍。
3小结与讨论
2009（12）：237，239.
［4］王泉，叶红美. 对动物免疫接种过程中所出现问题的思考
［J ］. 现代农业科技，2008（14）：236-237.
［5］耿树林，吴锦宏，李志章. 家禽免疫途径的选择及注意事项
［J ］. 中国畜禽种业，2010（8）：32.
［6］王红琳，杨峻，邵华斌，等. 禽霍乱·新城疫二联油乳剂灭活
—疫苗对鸭和鹅的安全性及免疫效力疫苗研究（Ⅲ报）——
试验［J ］. 安徽农业科学，2008，36（36）：15902-15903. ［7］杨光钰. 动物免疫接种注意事项［J ］. 现代农业科技，2009
（23）：339.
［8］孙永久. 规模养鸡场疫病防治与免疫接种［J ］. 现代农业科
技，2009（14）：316.
①采用北京市农林科学院畜牧兽医研究所免疫预防研
究室制备的鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联灭活疫苗，分别经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉共3个不同部位免疫SPF 鸡，进行疫苗不同接种部位效力比较试验。结果显示，四联苗免疫后4周，经颈背侧皮下、胸部肌肉及腿部肌肉途径接种的鸡只ND HI 抗体几何平均滴度分别为8.6，8.7及8.8log2，EDS HI 抗体几何平均滴度分别为9.4，9.3及10.1log2，腿部肌肉注射所产生的ND 及EDS HI 抗体几何平均滴度最高，但3个部位接种所产生的ND 及EDS HI 抗体几何平均滴度差异不显著；
AEV 强毒攻击后，3个不同部位免疫组鸡均10/10保护，而
（责任编辑：栗林）