很多朋友肯定现在都做过关于细胞迁移的实验。
其中划痕法以其材料廉价,操作简单而多年来一直深受大家的欢迎。
我这里介绍一下我自己的操作过程和结果图。希望能给新来的朋友们以帮助。
材料:
6 孔板(其他的也可以,但感觉6孔比较好,大小适中)
marker笔
直尺
20微升枪头(灭菌)
无血清培养基
PBS
准备:
所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)
流程:
1。先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2。在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3。第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
4。用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
5。放入37度5%co2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。
很多朋友肯定现在都做过关于细胞迁移的实验。
其中划痕法以其材料廉价,操作简单而多年来一直深受大家的欢迎。
我这里介绍一下我自己的操作过程和结果图。希望能给新来的朋友们以帮助。
材料:
6 孔板(其他的也可以,但感觉6孔比较好,大小适中)
marker笔
直尺
20微升枪头(灭菌)
无血清培养基
PBS
准备:
所有能灭菌的器械都要灭菌,直尺和marker笔在操作前紫外照射30min(超净台内)
流程:
1。先用marker笔在6孔板背后,用直尺比着,均匀得划横线,大约每隔0.5~1cm一道,横穿过孔。每孔至少穿过5条线。
2。在空中加入约5X105个细胞,具体数量因细胞不同而不同,掌握为过夜能铺满。
3。第二天用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
4。用PBS洗细胞3次,去处划下的细胞,加入无血清培养基。
5。放入37度5%co2培养箱,培养。按0,6,12,24小时取样,拍照。