糖含量方法
1.2.1 材料预处理。将新鲜市售的蓝莓用粉碎机打成浆状,待测。
1.2.2 试剂配制。(1)1 mg/ml葡萄糖标准液。取适量葡萄糖于80℃烘干至恒重后,准确称0.100 00 g置于烧杯中,加少量蒸馏水溶解后定量转移至100 ml容量瓶中,以蒸馏水定容。
(2)DNS显色液。¹将104 gNaOH溶于1 300 ml蒸馏水中,加入30 g3,5-二硝基水杨酸;º分别将910 g酒石酸、25g重蒸粉和25 g无水亚硫酸钠溶于2 500 ml蒸馏水中;待溶解完全后,将¹和º两种溶液混合,补蒸馏水1 200 ml,使总体积为5 000 ml,静置1周后待用。
1.2.3 DNS试剂法葡萄糖标准曲线[4]。精密吸取0 ml,0.1ml,0.2 ml,0.3 ml,0.4 ml,0.5 ml,0.6 ml,0.7 ml 1 mg/ml的葡萄糖标准液,分别置于15 mm × 150 mm的洁净干燥试管中,补蒸馏水至3.0 ml,加入0.5 ml DNS显色液,沸水浴12 min后,立即用流动冷水冷却,补蒸馏水2.5 ml,使总体积为6ml。采用721型分光光度计,在510 nm处测定吸光值,同时得葡萄糖标准曲线。
1.2.4 DNS法测定含糖量。准确称取蓝莓样品1.000 00g,分别置于15 mm×150 mm的洁净干燥试管中,补蒸馏水至3.0 ml,加入0.5 ml DNS显色液,沸水浴12 min后,立即用流动冷水冷却,补蒸馏水2.5 ml,使总体积为6 ml,同时进行3次平行。及时于510 nm下测定吸光值,结合葡萄糖标准曲线计算含糖量[5]。
1.2.5 2种水解处理方法
(1)酸水解。取淀粉0.500 0 g,蓝莓渣2.000 0 g,分别置于250 ml锥形瓶中,分别加入6mol/LHCl溶液10 ml和蒸馏水14 ml,沸水浴回流30 min(回
流过程中用I2-KI溶液检验水解情况)。水解完全后取出,分别加入1 mol/LNaOH溶液60 ml中和样液至微碱性,冷却后定容至100 ml,过滤,滤液以DNS法测定含糖量,同时进行3 次平行。
(2)酶水解。取淀粉10.000 0 g,以少量蒸馏水浸湿,再以沸水糊化,待温度下降至60~65℃时,加入A-淀粉酶约0.2 g[5],60℃水浴2 h后,调pH值至4.2~4.5,再加入0.2 g糖化酶[6],60℃水浴2 h。蒸馏水定容至1 000 ml,准确吸取10 ml,再定容至200 ml,同时进行3次平行。以DNS法测定含糖量。
1.2.6 酶解法残留低聚糖的测定 从1.2.5(2)酶解法最终稀释定溶液中取32.0ml于50ml容量瓶中,加入1mol/LHCl溶液2.0ml,80e水浴30min后,加入1mol/LNaOH溶液2.0ml,冷却后定容。以DNS法测定糖含量。该处得到的值减去酶解法测定的值为低聚糖含量值[7]。
1.2.7 含糖量测定途径 测定蓝莓含糖量的3种不同途径为:
糖含量方法
1.2.1 材料预处理。将新鲜市售的蓝莓用粉碎机打成浆状,待测。
1.2.2 试剂配制。(1)1 mg/ml葡萄糖标准液。取适量葡萄糖于80℃烘干至恒重后,准确称0.100 00 g置于烧杯中,加少量蒸馏水溶解后定量转移至100 ml容量瓶中,以蒸馏水定容。
(2)DNS显色液。¹将104 gNaOH溶于1 300 ml蒸馏水中,加入30 g3,5-二硝基水杨酸;º分别将910 g酒石酸、25g重蒸粉和25 g无水亚硫酸钠溶于2 500 ml蒸馏水中;待溶解完全后,将¹和º两种溶液混合,补蒸馏水1 200 ml,使总体积为5 000 ml,静置1周后待用。
1.2.3 DNS试剂法葡萄糖标准曲线[4]。精密吸取0 ml,0.1ml,0.2 ml,0.3 ml,0.4 ml,0.5 ml,0.6 ml,0.7 ml 1 mg/ml的葡萄糖标准液,分别置于15 mm × 150 mm的洁净干燥试管中,补蒸馏水至3.0 ml,加入0.5 ml DNS显色液,沸水浴12 min后,立即用流动冷水冷却,补蒸馏水2.5 ml,使总体积为6ml。采用721型分光光度计,在510 nm处测定吸光值,同时得葡萄糖标准曲线。
1.2.4 DNS法测定含糖量。准确称取蓝莓样品1.000 00g,分别置于15 mm×150 mm的洁净干燥试管中,补蒸馏水至3.0 ml,加入0.5 ml DNS显色液,沸水浴12 min后,立即用流动冷水冷却,补蒸馏水2.5 ml,使总体积为6 ml,同时进行3次平行。及时于510 nm下测定吸光值,结合葡萄糖标准曲线计算含糖量[5]。
1.2.5 2种水解处理方法
(1)酸水解。取淀粉0.500 0 g,蓝莓渣2.000 0 g,分别置于250 ml锥形瓶中,分别加入6mol/LHCl溶液10 ml和蒸馏水14 ml,沸水浴回流30 min(回
流过程中用I2-KI溶液检验水解情况)。水解完全后取出,分别加入1 mol/LNaOH溶液60 ml中和样液至微碱性,冷却后定容至100 ml,过滤,滤液以DNS法测定含糖量,同时进行3 次平行。
(2)酶水解。取淀粉10.000 0 g,以少量蒸馏水浸湿,再以沸水糊化,待温度下降至60~65℃时,加入A-淀粉酶约0.2 g[5],60℃水浴2 h后,调pH值至4.2~4.5,再加入0.2 g糖化酶[6],60℃水浴2 h。蒸馏水定容至1 000 ml,准确吸取10 ml,再定容至200 ml,同时进行3次平行。以DNS法测定含糖量。
1.2.6 酶解法残留低聚糖的测定 从1.2.5(2)酶解法最终稀释定溶液中取32.0ml于50ml容量瓶中,加入1mol/LHCl溶液2.0ml,80e水浴30min后,加入1mol/LNaOH溶液2.0ml,冷却后定容。以DNS法测定糖含量。该处得到的值减去酶解法测定的值为低聚糖含量值[7]。
1.2.7 含糖量测定途径 测定蓝莓含糖量的3种不同途径为: