Tris缓冲液（TBS和THB）的配制
（一）TBS的配制
0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制：
Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1g NaCl 17.5g 加蒸馏水 1500ml
磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4，再加蒸馏水至2000ml，即可。 如需含1% Triton X-100，则在滴加HCl前先加入20ml Triton X-100。
（二）THB的配制
A液 ( 0.2 M Tris )：( MW 121.14 ) 称取2.428克 Tris，溶于100毫升蒸馏水中。
B液 ( 0.1 N HCl)： 取37% HCl ( 比重1:19 ) 0.84毫升，加入蒸馏水中，使成100毫升。
不同pH ( 7.19 ~ 9.10 ) 的0.05 M THB配制：按下表，取A液25ml加B液Xml，补加蒸馏水至100ml。 B=X 45.0 42.5 41.4 40.0 38.4 37.5
pH 7.19 7.36 7.40 7.54 7.60 7.66
B=X 25.0 22.5 20.0 17.5 15.0 12.5
pH 8.14 8.23 8.32 8.41 8.51 8.62
32.5 30.0 27.5
7.87 7.96 8.05
7.5 5.0
8.92 9.10
免疫组织化学中，常用pH7.6的THB。
磷酸盐缓冲液（PB）的配制
（1）A液（0.2M磷酸二氢钠水溶液）：
NaH2PO4·H2O 27.6g，溶于蒸馏水中，稀释至1000ml。 （2）B液（0.2M磷酸氢二钠水溶液）：
Na2HPO4·7H2O 53.6g (或Na2HPO4·12 H2O 71.6g或Na2HPO4·2 H2O 35.6g ) 加蒸馏水溶解，加水至1000ml。
（3）不同pH值磷酸盐缓冲液（PB）缓冲液的配制
A液X ml (参照下表) 中，加入B液Y ml，为0.2M PB。若再加蒸馏水至200ml则成0.1M PB。 PH 5.7 5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3
X ml Y ml pH 93.5 92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5
6.5 8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5
6.9 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5
X ml Y ml 45.0 39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0
55.0 61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0
6.5 6.6 6.7 6.8
68.5 62.5 56.5 51.0
31.5 37.5 43.5 49.0
7.7 7.8 7.9 8.0
10.0 8.5 7.0 5.3
90.0 91.5 93.0 94.7
若先分别配成0.1M，1/15M 和1/200 M的A液和B液，可按下表配成相应浓度所需pH值的PB
KH2PO4或NaH2 PO4H2O (ml )
46 45 44 43 42 41 40 39 38 37 36 35
Na2HPO4 (ml ) 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
pH ( M/10 ) 5.67 5.78 5.86 5.94 6.02 6.08 6.12 6.17 6.23 6.28 6.33 6.39
5.74 5.83 5.91 5.99 6.07 6.14 6.19 6.24 6.28 6.32 6.37 6.41
5.94 6.06 6.14 6.22 6.30 6.36 6.42 6.47 6.57 6.61 6.65 6.68
pH( M/15 ) pH( M/200 )
33 32 31 30 29 28 27 26 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 15 14 13 12
17 6.45 18 6.49 19 6.53 20 6.55 21 6.58 22 6.61 23 6.65 24 6.70 25 6.76 26 6.81 27 6.84 28 6.89 29 6.89 30 6.91 31 6.94 32 6.97 33 7.00 34 7.02 35 7.06 36 7.10 37 7.14 38
7.17
6.49 6.75 6.53 6.79 6.56 6.82 6.59 6.88 6.63 6.91 6.68 6.95 6.72 7.00 6.76 7.05 6.81 7.09 6.86 7.13 6.91 7.16 6.94 7.18 6.96 7.20 6.98 7.22 7.01 7.25 7.03 7.26 7.05 7.31 7.07 7.34 7.11 7.38 7.15 7.41 7.20 7.45 7.24
7.45
10 9 8 7 6 5 3 2
40 41 42 43 44 45 47 48
7.30 7.36 7.42 7.49 7.57 7.65 7.81 7.92
7.33 7.40 7.49 7.54 7.61 7.69 7.85 7.97
7.59 7.65 7.70 7.75 7.80 7.87 8.05 8.15
常用储存液的配制
Tris缓冲液（TBS和THB）的配制
（一）TBS的配制
0.05 M TBS ( pH7.4 ) 的配制：
Tris ( 三羟甲基胺基甲烷 ) 12.1g NaCl 17.5g 加蒸馏水 1500ml
磁性搅拌下滴加浓HCl至pH为7.4，再加蒸馏水至2000ml，即可。 如需含1% Triton X-100，则在滴加HCl前先加入20ml Triton X-100。
（二）THB的配制
A液 ( 0.2 M Tris )：( MW 121.14 ) 称取2.428克 Tris，溶于100毫升蒸馏水中。
B液 ( 0.1 N HCl)： 取37% HCl ( 比重1:19 ) 0.84毫升，加入蒸馏水中，使成100毫升。
不同pH ( 7.19 ~ 9.10 ) 的0.05 M THB配制：按下表，取A液25ml加B液Xml，补加蒸馏水至100ml。 B=X 45.0 42.5 41.4 40.0 38.4 37.5
pH 7.19 7.36 7.40 7.54 7.60 7.66
B=X 25.0 22.5 20.0 17.5 15.0 12.5
pH 8.14 8.23 8.32 8.41 8.51 8.62
32.5 30.0 27.5
7.87 7.96 8.05
7.5 5.0
8.92 9.10
免疫组织化学中，常用pH7.6的THB。
磷酸盐缓冲液（PB）的配制
（1）A液（0.2M磷酸二氢钠水溶液）：
NaH2PO4·H2O 27.6g，溶于蒸馏水中，稀释至1000ml。 （2）B液（0.2M磷酸氢二钠水溶液）：
Na2HPO4·7H2O 53.6g (或Na2HPO4·12 H2O 71.6g或Na2HPO4·2 H2O 35.6g ) 加蒸馏水溶解，加水至1000ml。
（3）不同pH值磷酸盐缓冲液（PB）缓冲液的配制
A液X ml (参照下表) 中，加入B液Y ml，为0.2M PB。若再加蒸馏水至200ml则成0.1M PB。 PH 5.7 5.8 5.9 6.0 6.1 6.2 6.3
X ml Y ml pH 93.5 92.0 90.0 87.7 85.0 81.5 77.5
6.5 8.0 10.0 12.3 15.0 18.5 22.5
6.9 7.0 7.1 7.2 7.3 7.4 7.5
X ml Y ml 45.0 39.0 33.0 28.0 23.0 19.0 16.0
55.0 61.0 67.0 72.0 77.0 81.0 84.0
6.5 6.6 6.7 6.8
68.5 62.5 56.5 51.0
31.5 37.5 43.5 49.0
7.7 7.8 7.9 8.0
10.0 8.5 7.0 5.3
90.0 91.5 93.0 94.7
若先分别配成0.1M，1/15M 和1/200 M的A液和B液，可按下表配成相应浓度所需pH值的PB
KH2PO4或NaH2 PO4H2O (ml )
46 45 44 43 42 41 40 39 38 37 36 35
Na2HPO4 (ml ) 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15
pH ( M/10 ) 5.67 5.78 5.86 5.94 6.02 6.08 6.12 6.17 6.23 6.28 6.33 6.39
5.74 5.83 5.91 5.99 6.07 6.14 6.19 6.24 6.28 6.32 6.37 6.41
5.94 6.06 6.14 6.22 6.30 6.36 6.42 6.47 6.57 6.61 6.65 6.68
pH( M/15 ) pH( M/200 )
33 32 31 30 29 28 27 26 25 24 23 22 21 20 19 18 17 16 15 14 13 12
17 6.45 18 6.49 19 6.53 20 6.55 21 6.58 22 6.61 23 6.65 24 6.70 25 6.76 26 6.81 27 6.84 28 6.89 29 6.89 30 6.91 31 6.94 32 6.97 33 7.00 34 7.02 35 7.06 36 7.10 37 7.14 38
7.17
6.49 6.75 6.53 6.79 6.56 6.82 6.59 6.88 6.63 6.91 6.68 6.95 6.72 7.00 6.76 7.05 6.81 7.09 6.86 7.13 6.91 7.16 6.94 7.18 6.96 7.20 6.98 7.22 7.01 7.25 7.03 7.26 7.05 7.31 7.07 7.34 7.11 7.38 7.15 7.41 7.20 7.45 7.24
7.45
10 9 8 7 6 5 3 2
40 41 42 43 44 45 47 48
7.30 7.36 7.42 7.49 7.57 7.65 7.81 7.92
7.33 7.40 7.49 7.54 7.61 7.69 7.85 7.97
7.59 7.65 7.70 7.75 7.80 7.87 8.05 8.15
常用储存液的配制