临床微生物
1、 最低杀菌浓度（MBC ）:把无菌生长的试管（微孔）吸取0.1ml 加到冷却至50℃M-H 琼脂
混合倾注平板，同时以前述的稀释1：1000（或1：200）的原接种液作倾注平板，培养48~72小时后计数菌落数，即可得到抗菌药物的最小杀菌浓度（定义为接种菌减少99.9%）
2、 最低抑菌浓度：以在试管内或小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度称为之。
3、 耐药（R ）：指分离菌株不被常规剂量的抗菌药物在感染部位可达到的浓度所抑制，和（或）
证明抑菌环直径落在可存在某些特定的微生物耐药机制的范围内，并且治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠。
4、 敏感（S ）：指分离菌株能被使用常规剂量的抗菌药物在感染部位可达到的浓度所抑制。
5、 支原体：一类缺乏细胞壁、形态上呈高度多形性，能通过除菌滤器，在无生命培养基中
能生长繁殖的最小元和细胞型微生物，由于它们能形成有分枝的长丝，故称为之。
6、 厌氧菌：指一大群在有氧条件下不能生长，必须在无氧条件下才能生长的细菌。
7、 衣原体：一类专性细胞内寄生、有独特发育周期、能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。
8、 L 型细菌：细菌在体内外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚
糖直接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌
9、 呼吸道病毒：指能侵犯呼吸道并导致呼吸道病变或以呼吸道途径感染而主要引起呼吸道
以外组织器官病变的病毒
10、 非发酵菌
11、 立克次体：一类微小的杆菌或球杆状、革兰染色阴性，除极少数歪均专性寄生在宿主细胞
内的微生物
12、 卡介苗BCG ：有毒力的牛型结核分枝杆菌在甘油、胆汁和马铃薯的培养基中经13年230
次传代而获得的减毒变异株
13、 选择培养基：在培养基中加入抑制剂，目的是抑制标本中的杂菌生长，有助于对所选择的
细菌种类的生长。
14、 鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及代谢产物的不同，在培养基中加入特定
的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。 15、MRSA ：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌是临床上常见的毒性较强的细菌，自从本世纪40年代青霉素问世后，金黄色葡萄球菌引起的感染性疾病受到较大的控制，但随着青霉素的广泛使用，有些金黄色葡萄球菌产生青霉素酶，能水解β-内酰胺环，表现为对青霉素的耐药。科学家研究出一种新的能耐青霉素酶的半合成青霉素，即甲氧西林(methicillin)。1959年应用于临床后曾有效地控制了金黄色葡萄球菌产酶株的感染，可英国的Jevons 就首次发现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),MRSA从发现至今感染几乎遍及全球，已成为院内感染的重要病原菌之一。
16、ESBL ：超广谱β内酰胺酶，是金黄色葡萄球菌耐药的机制之一，治疗方法可以选用苯唑青霉素(新青Ⅱ号) 、氯唑青霉素， 广谱青霉素：如氨苄青霉素、羟氨苄青霉素等
17、VRE ：万古霉素耐药的肠球菌。又名万古霉素抗药性肠球菌，是肠球菌属下的一种细菌，有着对万古霉素这种抗生素的抗药性。在肠球菌属中，对人类有着病原性的有粪肠球菌（Enterococcus faecalis）及屎肠球菌（Enterococcus faecium）。而所有屎肠球菌更是有着抗药性的，亦即所有屎肠球菌都是VRE 。肠球菌属的细菌主要是在肠内，亦可以在人类的消化道及尿道内发现。VRE 特别对免疫系统受损的人有危险性，但是它令健康的人受感染则较少见。一般
来说可以引起心内膜炎、败血病及尿道感染等病症。
18、O ∕F 试验：氧化-发酵试验。细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型。氧化型细菌在无氧环境中不能分解葡萄糖。细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧讲解的，称为发酵型。发酵型细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖。不分解葡萄糖的细菌称为产碱型。利用此试验可区分细菌的代谢类型。
19、外斐试验：(weil-felix reaction)肠杆菌属中某些特殊菌株如X19、X2、Xk 的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，能出现交叉凝集反应。临床上可用这些变形杆菌替代立克次体与患者血清作凝集反应，可作为立克次体病的辅助诊断试验。
20、乙肝小三阳：HBsAg(+)、HBeAb(+)、抗HBc(+)主要见于乙肝后期或慢性乙肝，复制水平低
21、卫星现象：指流感嗜血杆菌生长在金葡萄周围处的菌落增大现象。
22、肥达现象：用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O 、H 抗原，检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验。
23、迁徙现象：普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株在普通琼脂平板上可蔓延成波纹状薄膜布满整个培养基表面。
24、内源性感染：人体有四大储菌库，即皮肤、鼻咽口腔、泌尿生殖道和肠道，其中以肠道最为重要，当这些微生物在体内异位时即可发生感染。这种从病人自己体内的的感染叫作自身感染，也称内源性感染。
25、医院内感染：又称医院获得性感染（HAI ），指在医院中获得的感染。包括外源性和内源性。外源性来自于另一感染者或环境; 内源性感染来自于患者自身，由于正常菌群迁徙至机体其他部位，或受损组织、抗菌药物的不合理适用导致病原体过度生长。入院时处于潜伏期的感染，不属于医院感染。
26、实验室生物安全保障：指单位和个人为防止病原体和毒素丢失、盗窃、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。
二、问答
1、简述厌氧菌的临床和细菌学指征
答：1．感染局部有气体产生
2．发生在黏膜附近的感染
3．深部外伤
4．有特殊的分泌物
5．某些抗生素治疗无效的感染
细菌形态及培养有特征性变化
6．细菌形态及培养有特征性变化
2、简述萋尼氏染色镜检结果分级报告标准
答：萋尼氏染色=抗酸染色
仔细观察至少300个视野未发现抗酸菌;
+/-:100~300个视野内发现1~2条抗酸菌（全部涂膜镜检三遍）；
+：100个视野内发现3~9条抗酸菌（全部涂膜镜检一遍）;
2+:10个视野内发现1~9条抗酸菌；
3+：每个视野内发现1~9条抗酸菌
4+：每个视野内发现9条以上的抗酸菌
3、ESBL 的检测方法和临床意义是什么
答：方法：纸片法检测和液体稀释法检测
临床意义：
4、简述O/F试验的原理和结果的判读
原理：氧化-发酵试验。细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型。氧化型细菌在无氧环境中不能分解葡萄糖。细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧讲解的，称为发酵型。发酵型细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖。不分解葡萄糖的细菌称为产碱型。利用此试验可区分细菌的代谢类型。
结果判读：培养基变黄表示细菌分解葡萄糖产酸，若两支培养基均为黄色为发酵型，均不变色为产碱型或不分解葡萄糖型，仅不加液体石蜡的培养基变黄为氧化型。铜绿假单胞菌为氧化型，大肠埃希菌为发酵型。
5、什么是浅部真菌？浅部真菌包括哪几类？临床上最常见的浅部真菌是什么？简述D 试验一克林霉素诱导耐药试验的检测方法和结果的判读。
真菌种类繁多，有记载的真菌有10万以上，但对人类致病的有400种左右。按其侵犯人体组织和器官的不同，临床上将真菌分为浅部真菌和深部真菌两大类。①、浅部真菌主要侵犯机体的皮肤、毛发和指甲，寄生和腐生于表皮，毛发和甲板的角质组织中，引起浅部真菌病。浅部感染真菌包括表面感染真菌、皮肤廯真菌和皮下组织感染真菌三类。临床上最多的浅部真菌为皮肤廯真菌，包括毛廯菌属、表皮廯菌属和小孢子菌属
D-TEST
检测方法：按常规方法制备MH 平板或血平板，按纸片扩散法涂抹细菌，采用纸片相邻试验，对于葡萄球菌，距红霉素纸片（15ug ）边缘15~26mm处放置克林霉素纸片（2ug ）来进行检测；对于β-溶血链球菌，将克林霉素纸片（2ug ）和红霉素纸片（15ug ）贴在相邻的位置，纸片边缘相距12mm
结果判读：克林霉素抑菌环不出现“截平”现象，硬报告分离株对克林霉素敏感。邻近红霉素纸片侧克林霉素抑菌环出现“截平”现象（称为“D ”抑菌环），提示存在可诱导的克林霉素耐药，应报告分离株对克林霉素耐药，同时在报告中应注明“通过诱导克林霉素耐药试验，推测此菌株对克林霉素耐药，但对某些病人克林霉素可能仍有效。
6、简述细菌的主要耐药机制有哪几种。
7、简述琼脂稀释法的原理、方法、结果的判读及影响因素
答：原理：接种待测的菌株至含不同浓度抗菌药物的MH 琼脂平板上，经一定时间和温度培养后，无细菌生长的最低药物浓度即为测试菌的MIC
方法：1、制备不同浓度的抗菌药物应用液
2、制备含不同浓度抗菌药物的MH 琼脂平板：将已稀释成不同浓度的定量抗菌药物加入融化并冷至50℃左右的定量MH 琼脂中，倾注至直径为9mm 的平板中，制备成不同递减浓度的抗菌药物平板
3、细菌的接种：适用多点接种器对MH 琼脂平板接种，每次接种量为1~2ul（含菌量为10-7cfu/ml），最终接种菌量约每个接种点含104个细菌
4、细菌的孵育：置平板于35℃孵育16~24h
结果的判读：完全抑制细菌生长的最低药物浓度即为某抗菌药物对该菌的MIC
影响因素：接种细菌的浓度，培养基的PH ，离子浓度，抗菌药物的质量，孵育时间和温度等对结果有影响。临床检验中常用标准菌株来作质量控制，当标准菌株的结果在可接受的范围内，认为试验结果可信。
8、简述支原体和细菌L 型的区别点P306
三、论述
根据临床症状，判断可能感染的细菌，判断的依据，检验程序，与其他易混淆菌的鉴别实验、预期效果。（金黄色葡萄球菌，化脓性链球菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、淋球菌、结核杆菌）
临床微生物
1、 最低杀菌浓度（MBC ）:把无菌生长的试管（微孔）吸取0.1ml 加到冷却至50℃M-H 琼脂
混合倾注平板，同时以前述的稀释1：1000（或1：200）的原接种液作倾注平板，培养48~72小时后计数菌落数，即可得到抗菌药物的最小杀菌浓度（定义为接种菌减少99.9%）
2、 最低抑菌浓度：以在试管内或小孔内完全抑制细菌生长的最低药物浓度称为之。
3、 耐药（R ）：指分离菌株不被常规剂量的抗菌药物在感染部位可达到的浓度所抑制，和（或）
证明抑菌环直径落在可存在某些特定的微生物耐药机制的范围内，并且治疗研究显示药物对分离菌株的临床疗效不可靠。
4、 敏感（S ）：指分离菌株能被使用常规剂量的抗菌药物在感染部位可达到的浓度所抑制。
5、 支原体：一类缺乏细胞壁、形态上呈高度多形性，能通过除菌滤器，在无生命培养基中
能生长繁殖的最小元和细胞型微生物，由于它们能形成有分枝的长丝，故称为之。
6、 厌氧菌：指一大群在有氧条件下不能生长，必须在无氧条件下才能生长的细菌。
7、 衣原体：一类专性细胞内寄生、有独特发育周期、能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。
8、 L 型细菌：细菌在体内外受到各种直接或间接的理化或生物因素影响后导致细胞壁肽聚
糖直接破坏或合成被抑制进而形成一种细胞壁缺失或缺陷的细菌
9、 呼吸道病毒：指能侵犯呼吸道并导致呼吸道病变或以呼吸道途径感染而主要引起呼吸道
以外组织器官病变的病毒
10、 非发酵菌
11、 立克次体：一类微小的杆菌或球杆状、革兰染色阴性，除极少数歪均专性寄生在宿主细胞
内的微生物
12、 卡介苗BCG ：有毒力的牛型结核分枝杆菌在甘油、胆汁和马铃薯的培养基中经13年230
次传代而获得的减毒变异株
13、 选择培养基：在培养基中加入抑制剂，目的是抑制标本中的杂菌生长，有助于对所选择的
细菌种类的生长。
14、 鉴别培养基：利用细菌分解糖类和蛋白质的能力及代谢产物的不同，在培养基中加入特定
的作用底物和指示剂，观察细菌生长过程中分解底物所释放的不同产物，通过指示剂的反应不同来鉴别细菌。 15、MRSA ：耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。金黄色葡萄球菌是临床上常见的毒性较强的细菌，自从本世纪40年代青霉素问世后，金黄色葡萄球菌引起的感染性疾病受到较大的控制，但随着青霉素的广泛使用，有些金黄色葡萄球菌产生青霉素酶，能水解β-内酰胺环，表现为对青霉素的耐药。科学家研究出一种新的能耐青霉素酶的半合成青霉素，即甲氧西林(methicillin)。1959年应用于临床后曾有效地控制了金黄色葡萄球菌产酶株的感染，可英国的Jevons 就首次发现了耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),MRSA从发现至今感染几乎遍及全球，已成为院内感染的重要病原菌之一。
16、ESBL ：超广谱β内酰胺酶，是金黄色葡萄球菌耐药的机制之一，治疗方法可以选用苯唑青霉素(新青Ⅱ号) 、氯唑青霉素， 广谱青霉素：如氨苄青霉素、羟氨苄青霉素等
17、VRE ：万古霉素耐药的肠球菌。又名万古霉素抗药性肠球菌，是肠球菌属下的一种细菌，有着对万古霉素这种抗生素的抗药性。在肠球菌属中，对人类有着病原性的有粪肠球菌（Enterococcus faecalis）及屎肠球菌（Enterococcus faecium）。而所有屎肠球菌更是有着抗药性的，亦即所有屎肠球菌都是VRE 。肠球菌属的细菌主要是在肠内，亦可以在人类的消化道及尿道内发现。VRE 特别对免疫系统受损的人有危险性，但是它令健康的人受感染则较少见。一般
来说可以引起心内膜炎、败血病及尿道感染等病症。
18、O ∕F 试验：氧化-发酵试验。细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型。氧化型细菌在无氧环境中不能分解葡萄糖。细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧讲解的，称为发酵型。发酵型细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖。不分解葡萄糖的细菌称为产碱型。利用此试验可区分细菌的代谢类型。
19、外斐试验：(weil-felix reaction)肠杆菌属中某些特殊菌株如X19、X2、Xk 的菌体抗原与某些立克次体有共同抗原，能出现交叉凝集反应。临床上可用这些变形杆菌替代立克次体与患者血清作凝集反应，可作为立克次体病的辅助诊断试验。
20、乙肝小三阳：HBsAg(+)、HBeAb(+)、抗HBc(+)主要见于乙肝后期或慢性乙肝，复制水平低
21、卫星现象：指流感嗜血杆菌生长在金葡萄周围处的菌落增大现象。
22、肥达现象：用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O 、H 抗原，检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验。
23、迁徙现象：普通变形杆菌和奇异变形杆菌的大多数菌株在普通琼脂平板上可蔓延成波纹状薄膜布满整个培养基表面。
24、内源性感染：人体有四大储菌库，即皮肤、鼻咽口腔、泌尿生殖道和肠道，其中以肠道最为重要，当这些微生物在体内异位时即可发生感染。这种从病人自己体内的的感染叫作自身感染，也称内源性感染。
25、医院内感染：又称医院获得性感染（HAI ），指在医院中获得的感染。包括外源性和内源性。外源性来自于另一感染者或环境; 内源性感染来自于患者自身，由于正常菌群迁徙至机体其他部位，或受损组织、抗菌药物的不合理适用导致病原体过度生长。入院时处于潜伏期的感染，不属于医院感染。
26、实验室生物安全保障：指单位和个人为防止病原体和毒素丢失、盗窃、滥用、转移或有意释放而采取的安全措施。
二、问答
1、简述厌氧菌的临床和细菌学指征
答：1．感染局部有气体产生
2．发生在黏膜附近的感染
3．深部外伤
4．有特殊的分泌物
5．某些抗生素治疗无效的感染
细菌形态及培养有特征性变化
6．细菌形态及培养有特征性变化
2、简述萋尼氏染色镜检结果分级报告标准
答：萋尼氏染色=抗酸染色
仔细观察至少300个视野未发现抗酸菌;
+/-:100~300个视野内发现1~2条抗酸菌（全部涂膜镜检三遍）；
+：100个视野内发现3~9条抗酸菌（全部涂膜镜检一遍）;
2+:10个视野内发现1~9条抗酸菌；
3+：每个视野内发现1~9条抗酸菌
4+：每个视野内发现9条以上的抗酸菌
3、ESBL 的检测方法和临床意义是什么
答：方法：纸片法检测和液体稀释法检测
临床意义：
4、简述O/F试验的原理和结果的判读
原理：氧化-发酵试验。细菌在分解葡萄糖的过程中，必须有分子氧参加的，称为氧化型。氧化型细菌在无氧环境中不能分解葡萄糖。细菌在分解葡萄糖的过程中，可以进行无氧讲解的，称为发酵型。发酵型细菌无论在有氧或无氧的环境中都能分解葡萄糖。不分解葡萄糖的细菌称为产碱型。利用此试验可区分细菌的代谢类型。
结果判读：培养基变黄表示细菌分解葡萄糖产酸，若两支培养基均为黄色为发酵型，均不变色为产碱型或不分解葡萄糖型，仅不加液体石蜡的培养基变黄为氧化型。铜绿假单胞菌为氧化型，大肠埃希菌为发酵型。
5、什么是浅部真菌？浅部真菌包括哪几类？临床上最常见的浅部真菌是什么？简述D 试验一克林霉素诱导耐药试验的检测方法和结果的判读。
真菌种类繁多，有记载的真菌有10万以上，但对人类致病的有400种左右。按其侵犯人体组织和器官的不同，临床上将真菌分为浅部真菌和深部真菌两大类。①、浅部真菌主要侵犯机体的皮肤、毛发和指甲，寄生和腐生于表皮，毛发和甲板的角质组织中，引起浅部真菌病。浅部感染真菌包括表面感染真菌、皮肤廯真菌和皮下组织感染真菌三类。临床上最多的浅部真菌为皮肤廯真菌，包括毛廯菌属、表皮廯菌属和小孢子菌属
D-TEST
检测方法：按常规方法制备MH 平板或血平板，按纸片扩散法涂抹细菌，采用纸片相邻试验，对于葡萄球菌，距红霉素纸片（15ug ）边缘15~26mm处放置克林霉素纸片（2ug ）来进行检测；对于β-溶血链球菌，将克林霉素纸片（2ug ）和红霉素纸片（15ug ）贴在相邻的位置，纸片边缘相距12mm
结果判读：克林霉素抑菌环不出现“截平”现象，硬报告分离株对克林霉素敏感。邻近红霉素纸片侧克林霉素抑菌环出现“截平”现象（称为“D ”抑菌环），提示存在可诱导的克林霉素耐药，应报告分离株对克林霉素耐药，同时在报告中应注明“通过诱导克林霉素耐药试验，推测此菌株对克林霉素耐药，但对某些病人克林霉素可能仍有效。
6、简述细菌的主要耐药机制有哪几种。
7、简述琼脂稀释法的原理、方法、结果的判读及影响因素
答：原理：接种待测的菌株至含不同浓度抗菌药物的MH 琼脂平板上，经一定时间和温度培养后，无细菌生长的最低药物浓度即为测试菌的MIC
方法：1、制备不同浓度的抗菌药物应用液
2、制备含不同浓度抗菌药物的MH 琼脂平板：将已稀释成不同浓度的定量抗菌药物加入融化并冷至50℃左右的定量MH 琼脂中，倾注至直径为9mm 的平板中，制备成不同递减浓度的抗菌药物平板
3、细菌的接种：适用多点接种器对MH 琼脂平板接种，每次接种量为1~2ul（含菌量为10-7cfu/ml），最终接种菌量约每个接种点含104个细菌
4、细菌的孵育：置平板于35℃孵育16~24h
结果的判读：完全抑制细菌生长的最低药物浓度即为某抗菌药物对该菌的MIC
影响因素：接种细菌的浓度，培养基的PH ，离子浓度，抗菌药物的质量，孵育时间和温度等对结果有影响。临床检验中常用标准菌株来作质量控制，当标准菌株的结果在可接受的范围内，认为试验结果可信。
8、简述支原体和细菌L 型的区别点P306
三、论述
根据临床症状，判断可能感染的细菌，判断的依据，检验程序，与其他易混淆菌的鉴别实验、预期效果。（金黄色葡萄球菌，化脓性链球菌、铜绿假单胞菌、伤寒沙门菌、痢疾杆菌、霍乱弧菌、淋球菌、结核杆菌）