实验二 甲醇、异丙醇与正丁醇的气相色谱分析
一、实验目的
1. 了解气相色谱仪的基本结构和工作原理.
2. 学习归一化法定量的基本原理和方法.
3. 掌握气相色谱操作的基本要求.
二、实验原理
1. 纯物质保留时间定性分析
利用同一种物质在相同的色谱条件下应具有相同的保留时间的特点，采用纯物质定性法，对混合物中的甲醇、异丙醇与正丁醇进行定性，以确定混合物样品中甲醇、异丙醇与正丁醇的存在与否，并得出它们相应的出峰顺序。
2. 面积归一化法定量分析
应用归一化法进行色谱定量分析，要求试样中各组分都必须全部流出并得到完全分离，根据色谱图中各色谱峰的数据，可按下式计算各组分的含量：
%ci =fiAi
∑fiAi
i =1n ⨯100
本实验以峰面积A i 为测定参数，假定fi 恒等于1，利用FL9500色谱工作站对进样后所得到的各色谱峰进行直接定量，并打印出样品组分的色谱分析结果报告单。
三、仪器与试剂
1. 福立气相色谱仪
2. 微量注射器 0.5 uL
3. 高纯氮、高纯氢、低噪声空气净化源
4. 甲醇（AR ）；异丙醇（AR ）；正丁醇（AR ）； 甲醇、异丙醇与正丁醇的混合液
四、色谱条件
1. 固定液：聚甲基硅烷（非极性）；色谱柱：毛细管0.32×30 mm/m
2. 柱温：80 ℃； 气化室温度：150 ℃； 检测器温度：150 ℃
3. 载气：氮气； 检测器：氢火焰离子化检测器（FID ）
4. 进样量：0.1 uL
五、实验步骤
1 . 开N 2钢瓶：⑴逆时针转动减压阀手柄至放松位置，此时减压阀处于关闭状态. ⑵逆时针打开钢瓶上的总阀门，并记录瓶中余气压力.
⑶顺时针旋紧减压阀，直至分压值达所需压力0.5 Mpa.
2. 接通电源，开净化器，三个全打开.
3. 开色谱仪上的两电源，并调毛细管柱前压(主机顶上表压力) 0.06 Mpa.
4. 设置参数，选择优化条件：1. 柱温(柱箱键).
2. 汽化室(辅助I).
3. FID(检测器).
4. 其它参数(参数键, 通过上行和下行调出极性，量程等参数).
5. 待所设参数达到设置条件时(显示键查看) ，开H 2钢瓶.
H 2钢瓶的开法：⑴. 逆时针转动减压阀手柄至放松位置.
⑵. 逆时针打开钢瓶上的总阀门.
⑶. 逆时针打开减压阀左边的小通道（使用阀）.
⑷. 顺时针旋紧减压阀直至分压值达所需压力0.2 Mpa.
6. 调色谱仪主板上H 2表Ⅱ的压力为0.1 Mpa.
7. 开低噪声空气净化源， 调色谱仪主板上空气压力为0.03 Mpa.
8. 点火，若点火困难，可先调高氢气至0.15 Mpa，点火后调回至0.1 Mpa.
9. 打开电脑，点桌面上的FL9500色谱工作站图标进入系统，点通道1或2，在菜单样品设置中点新建，输入样品名及各种信息. 点下一步，点下一步选择定量方法等，点下一步，点下一步，点下一步，点完成，填入仪器条件，点确定.
10. 待基线平直后，即可进样，进样后按工作站的通道A 或B 上的按时器或在工作界面上
点击开始按钮即进行进样分析。（注意：进样前一定要将微量注射器用相应试剂清洗干净，清洗干净的微量注射器应该专用，不能与准备进样别的试剂的微量注射器混用）.
11. 采样结束后点停止，若想处理色谱图点进样后处理，点转入再处理，打印结果，待所有
样品采样结束后，关色谱程序窗，关电脑.
12. 关H 2，先关总阀(顺) —减压阀(逆) —使用阀(顺) —稳压阀.
13. 关低噪声空气净化源.
14. 设置气化室，FID ，柱箱温度为50℃，到达后关主机.
15. 关N 2， 先关总阀(顺) —减压阀(逆) —稳压阀，关净化器，随后关掉一切电源.
16. 实验结束后做好仪器使用情况登记，经实验指导老师检查签名后方可离开实验室.
六、思考题
1. 色谱归一化法有何特点？应用该方法进行定量的前提是什么？
2. 色谱归一化的定量结果与进样量有关系吗，为什么？
3、开、关H 2顺序？
4、开、关N 2顺序？
5、本实验的色谱条件是什么？
实验二 甲醇、异丙醇与正丁醇的气相色谱分析
一、实验目的
1. 了解气相色谱仪的基本结构和工作原理.
2. 学习归一化法定量的基本原理和方法.
3. 掌握气相色谱操作的基本要求.
二、实验原理
1. 纯物质保留时间定性分析
利用同一种物质在相同的色谱条件下应具有相同的保留时间的特点，采用纯物质定性法，对混合物中的甲醇、异丙醇与正丁醇进行定性，以确定混合物样品中甲醇、异丙醇与正丁醇的存在与否，并得出它们相应的出峰顺序。
2. 面积归一化法定量分析
应用归一化法进行色谱定量分析，要求试样中各组分都必须全部流出并得到完全分离，根据色谱图中各色谱峰的数据，可按下式计算各组分的含量：
%ci =fiAi
∑fiAi
i =1n ⨯100
本实验以峰面积A i 为测定参数，假定fi 恒等于1，利用FL9500色谱工作站对进样后所得到的各色谱峰进行直接定量，并打印出样品组分的色谱分析结果报告单。
三、仪器与试剂
1. 福立气相色谱仪
2. 微量注射器 0.5 uL
3. 高纯氮、高纯氢、低噪声空气净化源
4. 甲醇（AR ）；异丙醇（AR ）；正丁醇（AR ）； 甲醇、异丙醇与正丁醇的混合液
四、色谱条件
1. 固定液：聚甲基硅烷（非极性）；色谱柱：毛细管0.32×30 mm/m
2. 柱温：80 ℃； 气化室温度：150 ℃； 检测器温度：150 ℃
3. 载气：氮气； 检测器：氢火焰离子化检测器（FID ）
4. 进样量：0.1 uL
五、实验步骤
1 . 开N 2钢瓶：⑴逆时针转动减压阀手柄至放松位置，此时减压阀处于关闭状态. ⑵逆时针打开钢瓶上的总阀门，并记录瓶中余气压力.
⑶顺时针旋紧减压阀，直至分压值达所需压力0.5 Mpa.
2. 接通电源，开净化器，三个全打开.
3. 开色谱仪上的两电源，并调毛细管柱前压(主机顶上表压力) 0.06 Mpa.
4. 设置参数，选择优化条件：1. 柱温(柱箱键).
2. 汽化室(辅助I).
3. FID(检测器).
4. 其它参数(参数键, 通过上行和下行调出极性，量程等参数).
5. 待所设参数达到设置条件时(显示键查看) ，开H 2钢瓶.
H 2钢瓶的开法：⑴. 逆时针转动减压阀手柄至放松位置.
⑵. 逆时针打开钢瓶上的总阀门.
⑶. 逆时针打开减压阀左边的小通道（使用阀）.
⑷. 顺时针旋紧减压阀直至分压值达所需压力0.2 Mpa.
6. 调色谱仪主板上H 2表Ⅱ的压力为0.1 Mpa.
7. 开低噪声空气净化源， 调色谱仪主板上空气压力为0.03 Mpa.
8. 点火，若点火困难，可先调高氢气至0.15 Mpa，点火后调回至0.1 Mpa.
9. 打开电脑，点桌面上的FL9500色谱工作站图标进入系统，点通道1或2，在菜单样品设置中点新建，输入样品名及各种信息. 点下一步，点下一步选择定量方法等，点下一步，点下一步，点下一步，点完成，填入仪器条件，点确定.
10. 待基线平直后，即可进样，进样后按工作站的通道A 或B 上的按时器或在工作界面上
点击开始按钮即进行进样分析。（注意：进样前一定要将微量注射器用相应试剂清洗干净，清洗干净的微量注射器应该专用，不能与准备进样别的试剂的微量注射器混用）.
11. 采样结束后点停止，若想处理色谱图点进样后处理，点转入再处理，打印结果，待所有
样品采样结束后，关色谱程序窗，关电脑.
12. 关H 2，先关总阀(顺) —减压阀(逆) —使用阀(顺) —稳压阀.
13. 关低噪声空气净化源.
14. 设置气化室，FID ，柱箱温度为50℃，到达后关主机.
15. 关N 2， 先关总阀(顺) —减压阀(逆) —稳压阀，关净化器，随后关掉一切电源.
16. 实验结束后做好仪器使用情况登记，经实验指导老师检查签名后方可离开实验室.
六、思考题
1. 色谱归一化法有何特点？应用该方法进行定量的前提是什么？
2. 色谱归一化的定量结果与进样量有关系吗，为什么？
3、开、关H 2顺序？
4、开、关N 2顺序？
5、本实验的色谱条件是什么？