普通生物学实验 实验十:血细胞计数及大小测量
实验目的:1、用血球计数板、计数器计数,估算兔血中红细胞浓度。 2、用目镜测微尺、物镜测微尺测量人血涂片中白细胞的大小。
测量是在40X 物镜下进行:通过校尺使两尺平行,找到两刻度完全重合的两个位臵。 目镜测微尺每个长度=(5/20)X10μm=2.5μm 白细胞体积=(4π/3)ab^2=4.0*10^-15m³
思考题1:将原来浓的从活体上直接提取的血细胞溶液稀释,再将稀释液涂在血细胞计数板上,由于计数板每个小格的容积已知,若稀释倍数得当且涂液时血细胞分布均匀,则可以通过镜检的方式对一定体积的稀释液中血细胞计数。然后乘上相应的稀释倍数即可以得血细胞的浓度。
思考题2:影响因素1:稀释倍数不当导致计数板中上血细胞分布过密,无法计数。 解决方案:根据第一次镜检的结果估算一下应稀释多少倍为宜。
影响因素2:涂血细胞溶液时没有涂均匀,导致有些中方格血细胞数差别很大 解决方案:如果两个中方格相差超过20个,则视为没有涂均匀,需重新涂。多次 测量取平均值。
实验十一:血细胞种类的观察及血型鉴定
实验目的:观察人血永久装片,了解血液的基本的有形成分。
学习ABO 血型鉴定的方法,初步了解抗原—抗体反应的原理。
思考题1:人体的血细胞大致分为3类:其中血液中大量无核圆形的细胞为红细胞。少量有
核的细胞为白细胞(白细胞又根据其细胞内有无颗粒分为有粒细胞和无粒细胞,有粒细胞又因颗粒着色不同分为嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞。而无粒细胞分为单核细胞和淋巴细胞两类)。以及呈碎片状,体积很小的巨核细胞细胞质碎片——血小板。
思考题2:我的血型为A 型血。因为我的血液同标准A 血清发生凝集反应,血滴略呈花边状;
与标准B 血清不发生凝集反应,血液呈均匀状态,边缘整齐。
实验十二:红细胞膜通透性观察
实验目的:熟悉并理解细胞膜选择透性这一基本生理活动。 了解各类物质进入细胞的速度。 思考题1:
红细胞通透性观察
并且可以使红细胞溶血的溶液即使浓度相同,是红细胞发生溶血所需时间也有差异。如将红细胞臵于低渗溶液中,由于细胞内溶质高于细胞外,所以液体很快进入细胞,使细胞胀破,血红蛋白逸出,即发生溶血现象。如将红细胞臵于各种等渗溶液中,由于红细胞膜对各种溶质分子的通透性不同,有的分子能通过,有的分子不能通过,溶质分子种类不同,渗入速度也有差异。渗入的溶质提高了红细胞的渗透压,降低了水势,促使水分进入细胞,引起溶血。对上述结果进行分析:0号为低渗溶液,故发生溶血。1至10号为等渗溶液,通过各溶质及其所含的阴阳离子的对比,可知铵根可以进入细胞而钠离子不能进入细胞。而甘油丙酮乙醇均为脂溶性小分子,因此可以进入红细胞。所以2,3,5,8,9,10试管中发生溶血。钠离子,氯离子,硝酸根离子,硫酸根离子为非通透性离子。
思考题2:这主要与溶质分子或离子能否进入红细胞有关,铵根离子,甘油乙醇丙酮可以通
过细胞膜进入细胞,因此使细胞内渗透势降低,从而吸水溶血。而钠离子,氯离 子,硝酸根离子,硫酸根离子不能进入细胞内外渗透势相等,从而细胞不会吸水, 因而不会发生溶血。
普通生物学实验 实验十:血细胞计数及大小测量
实验目的:1、用血球计数板、计数器计数,估算兔血中红细胞浓度。 2、用目镜测微尺、物镜测微尺测量人血涂片中白细胞的大小。
测量是在40X 物镜下进行:通过校尺使两尺平行,找到两刻度完全重合的两个位臵。 目镜测微尺每个长度=(5/20)X10μm=2.5μm 白细胞体积=(4π/3)ab^2=4.0*10^-15m³
思考题1:将原来浓的从活体上直接提取的血细胞溶液稀释,再将稀释液涂在血细胞计数板上,由于计数板每个小格的容积已知,若稀释倍数得当且涂液时血细胞分布均匀,则可以通过镜检的方式对一定体积的稀释液中血细胞计数。然后乘上相应的稀释倍数即可以得血细胞的浓度。
思考题2:影响因素1:稀释倍数不当导致计数板中上血细胞分布过密,无法计数。 解决方案:根据第一次镜检的结果估算一下应稀释多少倍为宜。
影响因素2:涂血细胞溶液时没有涂均匀,导致有些中方格血细胞数差别很大 解决方案:如果两个中方格相差超过20个,则视为没有涂均匀,需重新涂。多次 测量取平均值。
实验十一:血细胞种类的观察及血型鉴定
实验目的:观察人血永久装片,了解血液的基本的有形成分。
学习ABO 血型鉴定的方法,初步了解抗原—抗体反应的原理。
思考题1:人体的血细胞大致分为3类:其中血液中大量无核圆形的细胞为红细胞。少量有
核的细胞为白细胞(白细胞又根据其细胞内有无颗粒分为有粒细胞和无粒细胞,有粒细胞又因颗粒着色不同分为嗜中性粒细胞,嗜酸性粒细胞,嗜碱性粒细胞。而无粒细胞分为单核细胞和淋巴细胞两类)。以及呈碎片状,体积很小的巨核细胞细胞质碎片——血小板。
思考题2:我的血型为A 型血。因为我的血液同标准A 血清发生凝集反应,血滴略呈花边状;
与标准B 血清不发生凝集反应,血液呈均匀状态,边缘整齐。
实验十二:红细胞膜通透性观察
实验目的:熟悉并理解细胞膜选择透性这一基本生理活动。 了解各类物质进入细胞的速度。 思考题1:
红细胞通透性观察
并且可以使红细胞溶血的溶液即使浓度相同,是红细胞发生溶血所需时间也有差异。如将红细胞臵于低渗溶液中,由于细胞内溶质高于细胞外,所以液体很快进入细胞,使细胞胀破,血红蛋白逸出,即发生溶血现象。如将红细胞臵于各种等渗溶液中,由于红细胞膜对各种溶质分子的通透性不同,有的分子能通过,有的分子不能通过,溶质分子种类不同,渗入速度也有差异。渗入的溶质提高了红细胞的渗透压,降低了水势,促使水分进入细胞,引起溶血。对上述结果进行分析:0号为低渗溶液,故发生溶血。1至10号为等渗溶液,通过各溶质及其所含的阴阳离子的对比,可知铵根可以进入细胞而钠离子不能进入细胞。而甘油丙酮乙醇均为脂溶性小分子,因此可以进入红细胞。所以2,3,5,8,9,10试管中发生溶血。钠离子,氯离子,硝酸根离子,硫酸根离子为非通透性离子。
思考题2:这主要与溶质分子或离子能否进入红细胞有关,铵根离子,甘油乙醇丙酮可以通
过细胞膜进入细胞,因此使细胞内渗透势降低,从而吸水溶血。而钠离子,氯离 子,硝酸根离子,硫酸根离子不能进入细胞内外渗透势相等,从而细胞不会吸水, 因而不会发生溶血。