・188・医学综述2009年1月第15卷第2期 MedicalRecapitulate,Jan2009,Vol.15,No.2
pumpMRP4inpatientswithprimarybiliarycirrhosis[J].Liver
Int,2007,27(7):9202929.
[21] KrumbholzM,SpecksU,WickM,etal.BAFFiselevatedinserum
ofpatientswithWegener′sgranulomatosis[J].JAutoimmun,2005,25(4):2982302.
[22] IsseK,HaradaK,SatoY,etal.Characterizationofbiliaryintra2
epitheliallymphocytesatdifferentanatomicallevelsofintrahepat2icbileductsundernormalandpathologicalconditions:numbersof
+-CD4CD28intra2epitheliallymphocytesareincreasedinprimarybiliarycirrhosis[J].PatholInt,2006,56(1):17224.
收稿日期:2008207208 修回日期:2008209213
[16] 仲人前,梁艳.原发性胆汁性肝硬化患者外周血APRIL基因表
达水平初探[J].临床检验杂志,2007,25(1):51253.
[17] 仲人前,梁艳.原发性胆汁性肝硬化患者血浆可溶型肿瘤坏死
因子相关凋亡诱导配体的表达及临床意义[J].第二军医大学学报,2007,28(2):1512153.
[18] 周琳,范列英,王皓,等.人B细胞激活因子基因表达水平的荧
光测定[J].中华检验医学杂志,2004,27(5):2992302.
[19] 仲人前,梁艳.原发性胆汁性肝硬化患者B淋巴细胞刺激因子
基因表达的测定及临床意义[J].检验医学,2007,22(1):38240.
[20] ZollnerG,WagnerM,FickertP.Expressionofbileacidsynthesis
anddetoxificationenzymesandthealternativebileacidefflux
(),王秦秦(审校)
(,昆明650032)
3 文献标识码:A 文章编号:100622084(2009)0220188203
该染色体的结构发生了改
变。一般染色体显带技术有G显带(最常用),Q显带和R显带等。G带技术是其中最常用的技术,由
[1]
DevelopmentofChromosomeKaryotypeAnalysisTechnology XULi2xia,WANGQin2qin.(CenterofMed2Pardue等建立。方法是icalResearch,theFirstAffiliatedHospitalofKunmingMedicalCollege,Kunming650032,China)先用加热或蛋白水解酶处Abstract:Theform,textureandamountofchromosomekeepconstantamongvariouskindsoforganisms.Thechromosomeconstitutionforeachorganismiscalledforkaryotype.Idiogramanalysis,i.e.karyotypeanaly2理未染色的中期染色体sis,makeforprobechromosomeevolutionandkinshipamongbiologicalspecies.Furthermore,itisveryimportant
片,然后用吉姆萨(Giemsa)
forresearchofgeneticsandclinicaldiagnosisofmankindchromosomaldisease.Chromosomebandingtechnology
ishelpfulinidentificationof24humanchromosomes(1～22,X,Y),andthekaryotypehasbeenanalyzedauto2染料染色,结果染色体呈maticallybycomputersoftwareinrecentyears.
特异的G带。G带Keywords:Karyotypeanalysis;Spectralkaryotyping;Fluorescenceinsituhybridization;GRQtechnology现清晰、
反映了染色体DNA上A2T
从染色体玻片标本和染色体照片的对比分析,的丰富区,在人类中约有2000条G带可被鉴别。G进行染色体分组,并对组内各染色体的长度、着丝点带不仅稳定且用扫描电镜可在带区见到收缩的痕位置、臂比和随体有无等形态特征进行观测和描述,迹。现在已制成人类的G带标准图谱,可用于鉴定从而阐明生物的染色体组成,确定其染色体组型,这染色体号数以及基因定位。在植物中G分带技术尚种过程称为染色体组型分析。因其实用性,已成为不成熟,不少植物中难以显示G带或者结果很不稳
[2]
染色体异常的常规筛选技术。定。Q带是在1968年由Caspersson等建立的。这1 传统技术———GRQ带技术种方法是将中期染色体用芥子奎吖因染色,在染色
人类染色体用Giemsa染料染色呈均质状,但是体的G带相同区域产生另外荧光带,在荧光显微镜如果染色体经过变性和(或)酶消化等不同处理后,下可以清晰地看到。虽然可以用于诊断,但受到荧再染色可呈现一系列深浅交替的带纹,这些带纹图光染色所限,不能长期保留。R带是和G带相反的形称为染色体带型。显带技术就是通过特殊的染色带,即G带的深染区正是R带的浅染区,G带的浅染方法使染色体的不同区域着色,使染色体在光镜下区又正是R带的深染区。R带也就是反带的意思。
[3]
呈现出明暗相间的带纹。每个染色体都有特定的带这种方法是由Dutrillaux等建立的。方法是将中纹,甚至每个染色体的长臂和短臂都有特异性。根期未染色的片子放在pH4～4.5、温度为88℃的据染色体的不同带型,可以更细致而可靠地识别染1mmol/L的NaH2PO4溶液中温育,然后再染色,即可色体的个性。染色体特定的带型发生变化,则表示染成R带。R带的DNA在细胞周期S期早复制,富
摘要:各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。每一生物细胞内特定的染色体组成叫染色体组型,染色体组型分析也称核型分析。染色体组型分析有助于探明染色体组的演化和生物种属间的亲缘关系,对于遗传研究与人类染色体疾病的临床诊断也非常重要。染色体显带技术的产生使人们能对人类24条染色体(1～22,X,Y)进行识别和鉴定,而且近年来已经可以通过计算机软件进行自动核型分析。
关键词:核型分析;光谱核型分析;荧光原位杂交;GRQ带技术
医学综述2009年1月第15卷第2期 MedicalRecapitulate,Jan2009,Vol.15,No.2・189・
含GC和短分散核元件序列,而G带的DNA在S期晚复制,富含AT和长分散核元件序列。可以认为染色体的条带为染色体结构单位,相当于复制子族。此外,根据基因的复制时间与显带特点可以推断,管家基因一般是早复制,多位于R带中,而组织特异性基因晚复制,多位于G带中。2 主流技术———荧光原位杂交技术
荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子结合,杂FISH的基本原理是将或DNA,来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析。FISH具有安全、快速、敏感度高、探针能长期保存、能同时显示多种颜色等优点,不但能显示中期分裂相,还能显示于间期核。同时,在荧光原位杂交基础上又发展了多彩色荧光原位杂交技术和染色质纤维荧光原位杂交技术。
最早应用荧光原位杂交是在1980年,当时直接用荧光在RNA3′端标记,作为探针来检测特定DNA
[4]
序列。联合氨基基质,能够耦联任何半抗原或者荧光团。用简单的化学分析就可以检测低信号探针,这对原位技术的发展很重要。探针的特异性,影响了FISH中低拷贝数量核酸的检测。间接标记杂交探针,可以使非直接检测的信号放大。在20世纪80年代初期,用生物素标记探针,然后用链球菌抗生
[5]
物素蛋白荧光素级联放大检测DNA。大约10年之后,含有大量荧光分子的杂交探针经化学处理后,
[6]
可以进行直接检测。20世纪90年代,为同时检测更多的种类,科研工作者开辟了新的研究方向。起
[7]
初,运用的是成像显著的光谱荧光团。后来,人们开始用两种编码方法来改进它。①特定核酸可以用二元颜色化合物来鉴定。这样,每个染色体、基因或者转录过程就被截然不同的荧光信号所表示。②使用比率相同的编码,用同一种颜色的混合物,依据对全部信号每一种颜色的相对变化,来描绘多种靶目标。采用一种方法和同时用两种一样,已经提高了许多核酸同时检测的数量。
FISH用不能嵌入体内的荧光团或者仅在杂交时
[8,9]
显荧光的探针,来检测活细胞中的RNAs。多元光子方法同样扩大了荧光图像的使用。多光子显微
镜,使用近红外线的激发光源能更深的穿透生物样品,并且产生的毒害远小于可见光对活样本的损伤。这种方法可应用到许多方面,包括全部动物。在生物体中使用合成探针的能力有限,所以当前大多数体内荧光图像是自然产生的荧光分子或者生物性发[10]
光。在组织中存在的自然荧光信号,是一种生理学或者病理生理学现象,能够编码重要的临床信息。如果能制作与生物最佳结合的探针,那么就可以识别许多特殊的核酸,。
FISH,在过,。由于涉及很多领域,操作容易,所以FISH的使用非常广泛。虽然基本操作没有改变,但是高敏感检测、多种类检测、自动化数据收集分析技术的提高,很大程度地促进了该技术的发展。它已经成为一项先进的生物学技术。当前,科研人员掌握了低噪声杂交探针的制备,能在更广阔的研究领域中运用它。3 趋势———光谱核型分析技术
SKY(spectralkaryotying)光谱染色体自动核型分析是一项显微图像处理技术,SKY通过光谱干涉仪,由高品质CCD获取每一个像素的干涉图像,形成一个三维的数据库并得到每个像素的光程差与强度间的对应曲线,该曲线经傅立叶变换之后得到该像素的光谱,再经由软件分析之后用分类色来显示图像或将光谱数据转换成相应的红绿蓝信号后以常规方
[11]
式显示。24种全染色体涂染探针先用5种不同的荧光素组合进行不同的标记,然后将探针混合物与中期染色体进行原位杂交,通过荧光显微镜获得荧光图像进行光谱成像。其结果分为显色成像和分色成像两部分。前者可于图像获取后即刻评估所有探针的杂交质量,后者用特定的SKY软件参照每一条染色体特有的光谱信息特征进行分析。在染色体核型排序chromosomekaryotyping的应用上,SKY可同时分辨人类的22对染色体及X、Y性染色体或老鼠的21种不同染色体,并以各种颜色呈现出来。
SKY技术不同于M2FISH染色体核型技术,后者需由6个或更多的荧光滤镜组来分别取各个颜色的
[12]
荧光的图像,然后再将所有图像层层堆叠,手续相当繁琐,况且信号之间会互相干扰。只有SKY才能真正做到只用一组荧光滤镜,只做一次杂交反应,便可得到全部染色体的自动核型定序。传统的利用GRQ或DAPIbanding常常无法就染色体结构上的细微变异,特别是发生在染色体末端的变化做出准确
[13]
的判断,尤其是当基因体变异发生在G带极为相
・190・医学综述2009年1月第15卷第2期 MedicalRecapitulate,Jan2009,Vol.15,No.2
似的染色体片段时,只有靠频谱分析才能做出快速
而准确的诊断。频谱分析的另一个优点是仍然支持传统的G带或DAPI带为基础的染色体核型定序。SKY具有高光透过量和高精确度。由于SKY使用光谱干涉仪来测量光谱而不是使用滤镜,所以CCD相机所探测到的光信号就要强得多,信噪比也因而大
[14]
大增强,检测的精确度也大大提高。而M2FISH利用多滤镜成像,仅通过有限频率范围的光,其光强不可避免地被削弱许多,从而造成信噪比的减小。SKY测量的是全光谱,而M2FISH仅测量5个强度。因此,许多由传统荧光显微镜无法分辨的细胞差异
[15]
都可以由SKY系统来精确测出。
SKYFI色体重排,G,其适用于鉴别与特殊表型相关的新型多发性染色体异常,也可用于评价治疗疗效和疾病的愈后。4 讨 论
作为细胞遗传学检查方法之一的染色体核型分析,因其实用性和一定程度的准确性,已经成为染色体异常的常规筛选技术。但是,利用传统的GRQ带通常无法检测到染色体结构上的细微变异,特别在许多实体瘤组织的复杂核型分析方面,更难以获得
[16]
精确的结果。FISH虽具有高度的敏感性和特异性,但需要已知的特异性探针用于检测相关的染色
[17]
体,所以检测的结果受到探针来源的限制。SKY技术是在FISH基础上发展起来的,它运用了光谱干涉仪和傅立叶变换将图像中每一像素做光谱分析后
[18]
再重新显示,结合干涉成像。它可以使用多个荧光染料的频谱重叠的探针,因而一次SKY实验就可以检测全部的46条染色体,并且都能显示相当多的
[19]
数目和复杂结构的改变。尤其是当基因变异发生在与G带极为相似的染色体片段时,应用SKY技术就能作出快速而准确的诊断,更可以揭示常规分析方法难以识别的染色体易位、重排和一些未知来源的标记染色体。因此,现在SKY已经成为公认的准
[20]
确、高效的研究方法,但同时看到SKY也有其自身的局限性,如不能检测同一条染色体中的易位或
[21]
倒位,以及不能精确地显示染色体断裂的区带等。因此,SKY技术在临床应用中一方面与相应的技术
[22]
结合应用,另一方面正通过提高分辨率与完善软件自动化分类运算方法来发展特定的多色探针,聚焦于疾病个体中经常发生结构和数目异常染色体亚带,以开拓临床应用领域。
参考文献
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terizationofamegakaryoblastcelllinewithamplificationofMLL[J].Leukemia,1998,12(7):111921127.
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收稿日期:2008209216 修回日期:2008211211
・188・医学综述2009年1月第15卷第2期 MedicalRecapitulate,Jan2009,Vol.15,No.2
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[21] KrumbholzM,SpecksU,WickM,etal.BAFFiselevatedinserum
ofpatientswithWegener′sgranulomatosis[J].JAutoimmun,2005,25(4):2982302.
[22] IsseK,HaradaK,SatoY,etal.Characterizationofbiliaryintra2
epitheliallymphocytesatdifferentanatomicallevelsofintrahepat2icbileductsundernormalandpathologicalconditions:numbersof
+-CD4CD28intra2epitheliallymphocytesareincreasedinprimarybiliarycirrhosis[J].PatholInt,2006,56(1):17224.
收稿日期:2008207208 修回日期:2008209213
[16] 仲人前,梁艳.原发性胆汁性肝硬化患者外周血APRIL基因表
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[18] 周琳,范列英,王皓,等.人B细胞激活因子基因表达水平的荧
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[19] 仲人前,梁艳.原发性胆汁性肝硬化患者B淋巴细胞刺激因子
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[20] ZollnerG,WagnerM,FickertP.Expressionofbileacidsynthesis
anddetoxificationenzymesandthealternativebileacidefflux
(),王秦秦(审校)
(,昆明650032)
3 文献标识码:A 文章编号:100622084(2009)0220188203
该染色体的结构发生了改
变。一般染色体显带技术有G显带(最常用),Q显带和R显带等。G带技术是其中最常用的技术,由
[1]
DevelopmentofChromosomeKaryotypeAnalysisTechnology XULi2xia,WANGQin2qin.(CenterofMed2Pardue等建立。方法是icalResearch,theFirstAffiliatedHospitalofKunmingMedicalCollege,Kunming650032,China)先用加热或蛋白水解酶处Abstract:Theform,textureandamountofchromosomekeepconstantamongvariouskindsoforganisms.Thechromosomeconstitutionforeachorganismiscalledforkaryotype.Idiogramanalysis,i.e.karyotypeanaly2理未染色的中期染色体sis,makeforprobechromosomeevolutionandkinshipamongbiologicalspecies.Furthermore,itisveryimportant
片,然后用吉姆萨(Giemsa)
forresearchofgeneticsandclinicaldiagnosisofmankindchromosomaldisease.Chromosomebandingtechnology
ishelpfulinidentificationof24humanchromosomes(1～22,X,Y),andthekaryotypehasbeenanalyzedauto2染料染色,结果染色体呈maticallybycomputersoftwareinrecentyears.
特异的G带。G带Keywords:Karyotypeanalysis;Spectralkaryotyping;Fluorescenceinsituhybridization;GRQtechnology现清晰、
反映了染色体DNA上A2T
从染色体玻片标本和染色体照片的对比分析,的丰富区,在人类中约有2000条G带可被鉴别。G进行染色体分组,并对组内各染色体的长度、着丝点带不仅稳定且用扫描电镜可在带区见到收缩的痕位置、臂比和随体有无等形态特征进行观测和描述,迹。现在已制成人类的G带标准图谱,可用于鉴定从而阐明生物的染色体组成,确定其染色体组型,这染色体号数以及基因定位。在植物中G分带技术尚种过程称为染色体组型分析。因其实用性,已成为不成熟,不少植物中难以显示G带或者结果很不稳
[2]
染色体异常的常规筛选技术。定。Q带是在1968年由Caspersson等建立的。这1 传统技术———GRQ带技术种方法是将中期染色体用芥子奎吖因染色,在染色
人类染色体用Giemsa染料染色呈均质状,但是体的G带相同区域产生另外荧光带,在荧光显微镜如果染色体经过变性和(或)酶消化等不同处理后,下可以清晰地看到。虽然可以用于诊断,但受到荧再染色可呈现一系列深浅交替的带纹,这些带纹图光染色所限,不能长期保留。R带是和G带相反的形称为染色体带型。显带技术就是通过特殊的染色带,即G带的深染区正是R带的浅染区,G带的浅染方法使染色体的不同区域着色,使染色体在光镜下区又正是R带的深染区。R带也就是反带的意思。
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呈现出明暗相间的带纹。每个染色体都有特定的带这种方法是由Dutrillaux等建立的。方法是将中纹,甚至每个染色体的长臂和短臂都有特异性。根期未染色的片子放在pH4～4.5、温度为88℃的据染色体的不同带型,可以更细致而可靠地识别染1mmol/L的NaH2PO4溶液中温育,然后再染色,即可色体的个性。染色体特定的带型发生变化,则表示染成R带。R带的DNA在细胞周期S期早复制,富
摘要:各种生物染色体的形态、结构和数目都是相对稳定的。每一生物细胞内特定的染色体组成叫染色体组型,染色体组型分析也称核型分析。染色体组型分析有助于探明染色体组的演化和生物种属间的亲缘关系,对于遗传研究与人类染色体疾病的临床诊断也非常重要。染色体显带技术的产生使人们能对人类24条染色体(1～22,X,Y)进行识别和鉴定,而且近年来已经可以通过计算机软件进行自动核型分析。
关键词:核型分析;光谱核型分析;荧光原位杂交;GRQ带技术
医学综述2009年1月第15卷第2期 MedicalRecapitulate,Jan2009,Vol.15,No.2・189・
含GC和短分散核元件序列,而G带的DNA在S期晚复制,富含AT和长分散核元件序列。可以认为染色体的条带为染色体结构单位,相当于复制子族。此外,根据基因的复制时间与显带特点可以推断,管家基因一般是早复制,多位于R带中,而组织特异性基因晚复制,多位于G带中。2 主流技术———荧光原位杂交技术
荧光原位杂交(fluorescenceinsituhybridization,FISH)是在20世纪80年代末在放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性分子细胞遗传技术,以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法,探针首先与某种介导分子结合,杂FISH的基本原理是将或DNA,来检测DNA序列在染色体或DNA纤维切片上的定性、定位、相对定量分析。FISH具有安全、快速、敏感度高、探针能长期保存、能同时显示多种颜色等优点,不但能显示中期分裂相,还能显示于间期核。同时,在荧光原位杂交基础上又发展了多彩色荧光原位杂交技术和染色质纤维荧光原位杂交技术。
最早应用荧光原位杂交是在1980年,当时直接用荧光在RNA3′端标记,作为探针来检测特定DNA
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序列。联合氨基基质,能够耦联任何半抗原或者荧光团。用简单的化学分析就可以检测低信号探针,这对原位技术的发展很重要。探针的特异性,影响了FISH中低拷贝数量核酸的检测。间接标记杂交探针,可以使非直接检测的信号放大。在20世纪80年代初期,用生物素标记探针,然后用链球菌抗生
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物素蛋白荧光素级联放大检测DNA。大约10年之后,含有大量荧光分子的杂交探针经化学处理后,
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可以进行直接检测。20世纪90年代,为同时检测更多的种类,科研工作者开辟了新的研究方向。起
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初,运用的是成像显著的光谱荧光团。后来,人们开始用两种编码方法来改进它。①特定核酸可以用二元颜色化合物来鉴定。这样,每个染色体、基因或者转录过程就被截然不同的荧光信号所表示。②使用比率相同的编码,用同一种颜色的混合物,依据对全部信号每一种颜色的相对变化,来描绘多种靶目标。采用一种方法和同时用两种一样,已经提高了许多核酸同时检测的数量。
FISH用不能嵌入体内的荧光团或者仅在杂交时
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显荧光的探针,来检测活细胞中的RNAs。多元光子方法同样扩大了荧光图像的使用。多光子显微
镜,使用近红外线的激发光源能更深的穿透生物样品,并且产生的毒害远小于可见光对活样本的损伤。这种方法可应用到许多方面,包括全部动物。在生物体中使用合成探针的能力有限,所以当前大多数体内荧光图像是自然产生的荧光分子或者生物性发[10]
光。在组织中存在的自然荧光信号,是一种生理学或者病理生理学现象,能够编码重要的临床信息。如果能制作与生物最佳结合的探针,那么就可以识别许多特殊的核酸,。
FISH,在过,。由于涉及很多领域,操作容易,所以FISH的使用非常广泛。虽然基本操作没有改变,但是高敏感检测、多种类检测、自动化数据收集分析技术的提高,很大程度地促进了该技术的发展。它已经成为一项先进的生物学技术。当前,科研人员掌握了低噪声杂交探针的制备,能在更广阔的研究领域中运用它。3 趋势———光谱核型分析技术
SKY(spectralkaryotying)光谱染色体自动核型分析是一项显微图像处理技术,SKY通过光谱干涉仪,由高品质CCD获取每一个像素的干涉图像,形成一个三维的数据库并得到每个像素的光程差与强度间的对应曲线,该曲线经傅立叶变换之后得到该像素的光谱,再经由软件分析之后用分类色来显示图像或将光谱数据转换成相应的红绿蓝信号后以常规方
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式显示。24种全染色体涂染探针先用5种不同的荧光素组合进行不同的标记,然后将探针混合物与中期染色体进行原位杂交,通过荧光显微镜获得荧光图像进行光谱成像。其结果分为显色成像和分色成像两部分。前者可于图像获取后即刻评估所有探针的杂交质量,后者用特定的SKY软件参照每一条染色体特有的光谱信息特征进行分析。在染色体核型排序chromosomekaryotyping的应用上,SKY可同时分辨人类的22对染色体及X、Y性染色体或老鼠的21种不同染色体,并以各种颜色呈现出来。
SKY技术不同于M2FISH染色体核型技术,后者需由6个或更多的荧光滤镜组来分别取各个颜色的
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荧光的图像,然后再将所有图像层层堆叠,手续相当繁琐,况且信号之间会互相干扰。只有SKY才能真正做到只用一组荧光滤镜,只做一次杂交反应,便可得到全部染色体的自动核型定序。传统的利用GRQ或DAPIbanding常常无法就染色体结构上的细微变异,特别是发生在染色体末端的变化做出准确
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的判断,尤其是当基因体变异发生在G带极为相
・190・医学综述2009年1月第15卷第2期 MedicalRecapitulate,Jan2009,Vol.15,No.2
似的染色体片段时,只有靠频谱分析才能做出快速
而准确的诊断。频谱分析的另一个优点是仍然支持传统的G带或DAPI带为基础的染色体核型定序。SKY具有高光透过量和高精确度。由于SKY使用光谱干涉仪来测量光谱而不是使用滤镜,所以CCD相机所探测到的光信号就要强得多,信噪比也因而大
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大增强,检测的精确度也大大提高。而M2FISH利用多滤镜成像,仅通过有限频率范围的光,其光强不可避免地被削弱许多,从而造成信噪比的减小。SKY测量的是全光谱,而M2FISH仅测量5个强度。因此,许多由传统荧光显微镜无法分辨的细胞差异
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都可以由SKY系统来精确测出。
SKYFI色体重排,G,其适用于鉴别与特殊表型相关的新型多发性染色体异常,也可用于评价治疗疗效和疾病的愈后。4 讨 论
作为细胞遗传学检查方法之一的染色体核型分析,因其实用性和一定程度的准确性,已经成为染色体异常的常规筛选技术。但是,利用传统的GRQ带通常无法检测到染色体结构上的细微变异,特别在许多实体瘤组织的复杂核型分析方面,更难以获得
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精确的结果。FISH虽具有高度的敏感性和特异性,但需要已知的特异性探针用于检测相关的染色
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体,所以检测的结果受到探针来源的限制。SKY技术是在FISH基础上发展起来的,它运用了光谱干涉仪和傅立叶变换将图像中每一像素做光谱分析后
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再重新显示,结合干涉成像。它可以使用多个荧光染料的频谱重叠的探针,因而一次SKY实验就可以检测全部的46条染色体,并且都能显示相当多的
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数目和复杂结构的改变。尤其是当基因变异发生在与G带极为相似的染色体片段时,应用SKY技术就能作出快速而准确的诊断,更可以揭示常规分析方法难以识别的染色体易位、重排和一些未知来源的标记染色体。因此,现在SKY已经成为公认的准
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确、高效的研究方法,但同时看到SKY也有其自身的局限性,如不能检测同一条染色体中的易位或
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倒位,以及不能精确地显示染色体断裂的区带等。因此,SKY技术在临床应用中一方面与相应的技术
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结合应用,另一方面正通过提高分辨率与完善软件自动化分类运算方法来发展特定的多色探针,聚焦于疾病个体中经常发生结构和数目异常染色体亚带,以开拓临床应用领域。
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收稿日期:2008209216 修回日期:2008211211