Lowry法蛋白浓度测定试剂盒使用说明

Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒使用说明

货号:PC0030

规格:1000T(微孔)

保存:BSA 蛋白标准品4℃保存有效期至少3个月,-20℃保存有效期至少一年,其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存,Folin 酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。

产品组成:

Folin 酚甲试剂A Folin 酚甲试剂B Folin 酚乙试剂(1N)

PBS 稀释液

BSA 蛋白标准品(5mg/ml)

100ml ×25ml 20ml 30ml 1ml

产品简介:

Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将Folin 试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100µg/ml蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

操作说明:

1.根据需要量,取适量Folin 酚甲试剂A 和B 按50:1混合,混合后有效期为24小时,过期失效。

2.根据需要量,取适量BSA 标准品用PBS 稀释稀释10倍至浓度0.5mg/ml。

若采用酶标仪法(96孔)

3.将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到96孔板中,加PBS 补足到20ul。

4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度),加20ul 到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

5.将配好的Folin 酚甲试剂每孔加入200ul,轻轻震动,混匀,室温放置10分钟。

6.各孔加入20微升Folin 酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650计算蛋白浓度。

若采用分光光度计法(接上述步骤2)

3.取八支(或者更多)5ml离心管,标号,按下表加入试剂。

4.混匀,37℃放置30分钟。分光光度计测定A650计算蛋白浓度。

相关试剂:

PC0001BSA 标准品(5mg/ml)

PC00155×G250(蛋白定量用)

PC0021BCA 试剂

PC0020BCA 法蛋白浓度测定试剂盒

Folin 酚甲试剂A 100ml×2

Folin 酚甲试剂B 5ml

Folin 酚乙试剂(1N)20ml

PBS 稀释液30ml

BSA 蛋白标准品(5mg/ml) 1ml

PC0010Bradford 法蛋白浓度测定试剂盒

R0010高效RIPA 组织/细胞快速裂解液

PR1600预染低分子量蛋白MARKER

R0050核蛋白抽提试剂盒

P10154×蛋白上样缓冲液(含DTT )

P1300SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒

D106010×电泳转移缓冲液

PE0010ECL Plus 荧光检测试剂(ECL超敏发光液)

7(样品管1)200ul 适当稀释的样品1

02ml

8(样品管2)200ul 适当稀释的样品202ml

……9(样品管3)

离心管号123456

标准蛋白BSA

040ul 80ul 120ul 160ul 200ul

PBS Folin 酚甲试剂

200ul 2ml

160ul 2ml

120ul 2ml

80ul 2ml

40ul 2ml

02ml

02ml

混匀,室温放置10分钟

Folin 酚乙试剂

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

Lowry 法蛋白浓度测定试剂盒使用说明

货号:PC0030

规格:1000T(微孔)

保存:BSA 蛋白标准品4℃保存有效期至少3个月,-20℃保存有效期至少一年,其他试剂室温保存有效期至少一年。试剂开封使用后请及时密闭保存,Folin 酚乙试剂颜色变成深绿色即失效。

产品组成:

Folin 酚甲试剂A Folin 酚甲试剂B Folin 酚乙试剂(1N)

PBS 稀释液

BSA 蛋白标准品(5mg/ml)

100ml ×25ml 20ml 30ml 1ml

产品简介:

Folin-酚试剂法包括两步反应:第一步是在碱性条件下,蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物;第二步是此络合物将Folin 试剂还原,产生深蓝色,颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5~100µg/ml蛋白质。Folin 试剂显色反应由酪氨酸、色氨酸和半胱氨酸引起,因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外,不同蛋白质因酪氨酸、色氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。

操作说明:

1.根据需要量,取适量Folin 酚甲试剂A 和B 按50:1混合,混合后有效期为24小时,过期失效。

2.根据需要量,取适量BSA 标准品用PBS 稀释稀释10倍至浓度0.5mg/ml。

若采用酶标仪法(96孔)

3.将标准品按0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到96孔板中,加PBS 补足到20ul。

4.将样品作适当稀释(最好多做几个梯度),加20ul 到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差,标准线前面的点误差比较大,所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。

5.将配好的Folin 酚甲试剂每孔加入200ul,轻轻震动,混匀,室温放置10分钟。

6.各孔加入20微升Folin 酚乙试剂,迅速混匀,37℃放置30分钟。用酶标仪测定A650计算蛋白浓度。

若采用分光光度计法(接上述步骤2)

3.取八支(或者更多)5ml离心管,标号,按下表加入试剂。

4.混匀,37℃放置30分钟。分光光度计测定A650计算蛋白浓度。

相关试剂:

PC0001BSA 标准品(5mg/ml)

PC00155×G250(蛋白定量用)

PC0021BCA 试剂

PC0020BCA 法蛋白浓度测定试剂盒

Folin 酚甲试剂A 100ml×2

Folin 酚甲试剂B 5ml

Folin 酚乙试剂(1N)20ml

PBS 稀释液30ml

BSA 蛋白标准品(5mg/ml) 1ml

PC0010Bradford 法蛋白浓度测定试剂盒

R0010高效RIPA 组织/细胞快速裂解液

PR1600预染低分子量蛋白MARKER

R0050核蛋白抽提试剂盒

P10154×蛋白上样缓冲液(含DTT )

P1300SDS-PAGE 凝胶制备试剂盒

D106010×电泳转移缓冲液

PE0010ECL Plus 荧光检测试剂(ECL超敏发光液)

7(样品管1)200ul 适当稀释的样品1

02ml

8(样品管2)200ul 适当稀释的样品202ml

……9(样品管3)

离心管号123456

标准蛋白BSA

040ul 80ul 120ul 160ul 200ul

PBS Folin 酚甲试剂

200ul 2ml

160ul 2ml

120ul 2ml

80ul 2ml

40ul 2ml

02ml

02ml

混匀,室温放置10分钟

Folin 酚乙试剂

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul

200ul


相关内容

  • 蛋白检测方法
  • 蛋白检测方法 一.微量凯氏(Kjeldahl )定氮法 含氮有机物与浓硫酸共热, 即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸铵.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量.若以甘氨酸为例,其反应式如下: H2NCH2COOH+ 3H2SO4 2CO ...

  • 6种方法测定蛋白质含量
  • 6种方法测定蛋白质含量 2007-10-23 01:06 6种方法测定蛋白质含量 一.微量凯氏(kjeldahl )定氮法 样品与浓硫酸共热.含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨.经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量.若以甘 ...

  • 蛋白质浓度的测定
  • 实验九 蛋白质浓度的测定(四)──考马斯亮蓝染色法 目的要求 学习考马斯亮蓝(Coomassie Brilliant Blue)法测定蛋白质浓度的原理和方法. 实验原理 考马斯亮蓝法测定蛋白质浓度,是利用蛋白质―染料结合的原理,定量的测定微量蛋白浓度的快速.灵敏的方法. 考马斯亮蓝G―250存在着两 ...

  • 检测蛋白质中氨基酸的含量的各种方法及优劣讨论
  • 蛋白质中氨基酸的含量测定 组成蛋白质的基本单位是氨基酸,氨基酸通过脱水缩合形成肽链.蛋白质是由一条或多条多肽链组成的生物大分子,其含量测定是生化药品研究中最常用.最基本的分析方法之一.目前其常用的测定方法有凯氏定氮法.福林酚法.双缩脲法.BcA法.考马斯亮蓝法.紫外分光光度法及荧光法. 1凯氏定氮法 ...

  • 蛋白质含量测定法
  • 蛋白质含量测定 组成蛋白质的基本单位是氨基酸,氨基酸通过脱水缩合形成肽链,蛋白质是一条或多条多肽链组成的生物大分子.不同品种应针对自身蛋白质特性选择适宜的测定方法并做相应方法学验证,同时应尽可能选用与待测品种蛋白质结构相同或相近的蛋白质作对照品. 第一法 凯氏定氮法 本法系依据蛋白质为含氮的有机化合 ...

  • 医学生物化学基本实验
  • 医学生物化学基本实验 第一节 蛋白定量分析实验 蛋白质是一切活细胞和有机体的最重要组成成分,它是构成人体及所有动物机体组织的主要部分.蛋白质是由二十种氨基酸以肽键相互连接而成的复杂的高分子化合物.蛋白质含量可通过它们的物理化学性质,如折射率﹑比重﹑紫外吸收﹑染色等测定而得知,或用化学方法,如微量凯氏 ...

  • 生物化学实验参考资料
  • 1. 测定蛋白质含量的方法有(双缩脲法) ,(紫外吸收法) ,(Folin-酚试剂法(或Lowry 法)) 和(考马斯亮蓝G-250染色法). 2.CAT 即过氧化氢酶能把H2O2分解为H2O 和O2,其活性大小以(以一定时间内分解的H2O2量)来表示,当CAT 与H2O2反应结束,再用(碘量法)测 ...

  • 虾过敏原蛋白纯化中硫酸铵沉淀法的改进
  • 50食品与药品Food and Drug2008年第10卷第11期 虾过敏原蛋白纯化中硫酸铵沉淀法的改进 张轶群1,林 洪*1,李振兴1,吕 朋2 (1. 中国海洋大学食品学院水产品安全性实验室,山东青岛266003:2. 山东出入境检验检疫局, 山东青岛266001) 摘 要:目的 优化虾过敏原蛋 ...

  • 实验二 蛋白质含量的测定
  • 实验二 蛋白质含量的测定(Folin-酚法) 一.研究背景 蛋白质是与生命.与各种形式的生命活动联系在一起的物质.可以说没有蛋白质就没有生命.它是机体的重要物质基础,机体的每一个细胞和所有重要组成部分都有蛋白质参与.蛋白质的结构千差万别,具有多种多样的生物学功能:例如酶的催化作用.激素的生理调节作用 ...