中南药学 2015年6月 第13卷 第6期 Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6
GC-MS 法对市售广藿香油的成分分析及质量评价
杨银慧1，2 ，豆小文 2，孔维军 2，肖强1*，杨美华2*（1. 江西科技师范大学 江西省有机功能分子重点实验室，南
昌 330013；2. 中国医学科学院 中国协和医科大学药用植物研究所，北京 100193）
摘要：目的 对市售广藿香油进行成分分析及质量评价。方法 采用气相色谱串联质谱（GC-MS ）法对10批市售广藿香油进行化学成分分析，并建立化学指纹图谱。 结果 不同市售广藿香油成分有一定的差异，且部分样品与广藿香油对照品相比较差别较大，可以确定为伪品。结论 GC-MS 建立的指纹图谱简单准确，可用于市售广藿香油的成分分析、质量评价及真伪鉴别，为广藿香油的质量控制提供依据。关键词：广藿香油；GC-MS ；指纹图谱；质量控制
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2015)06-0631-04doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2015.06.019
Composition analysis and quality evaluation of commercial
Pogostemon cablin oil by GC-MS
YANG Yin-hui1, 2 , DOU Xiao-wen2, KONG Wei-jun2, XIAO Qiang1*, YANG Mei-hua2* (1. Jiangxi Key Laboratory
of Organic Chemistry, Jiangxi Normal University of Science & Technology, Nanchang 330013; 2. Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100193)
Abstract: Objective To study the quality and composition of commercial Pogostemon cablin oil. Methods Gas chromatography tandem mass spectrometry (GC-MS) was used to analyze the compositions and to establish the chemical fingerprint of commercial Pogostemon cablin oil samples. Results There were a few differences in different oil samples. Compared with Pogostemon cablin oil reference, one sample had big difference which could be considered a fake. Conclusion The study presented a simple and accurate method for the co m ponents analysis and quality control of commercial Pogostemon cablin oil. Key words: Pogostemon cablin oil; GC-MS; fi ngerprint; quality control
广藿香油为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin（Blarico ）Benth. 的干燥地上部分经水蒸气蒸馏提取的挥发油 [1]。广藿香油的主要化学成分有广藿香醇、广藿香酮、广藿香烯、愈创木烯等[2] 。现代药理研究表明，广藿香油是广藿香药材的主要活性成分，具有止吐、 抗
[3-4] [5-6]
氧化、杀虫抑菌等作用，其在香水和食品行业也
[7-9]
有十分广泛的应用。查阅相关文献，近年来对广藿香药材的研究较多[10-11]，而关于市售广藿香油质量的研究尚未见报道。广藿 香油化学成分复杂，仅凭外观、颜色、气味及若干指标性成分分析很难判断其真伪优劣或评价其质量。中药指纹图谱能较全面地反映中药及其相关产品的内在质量和化学成分，是实现鉴别中药及其相关产品真实性、评价质量一致性和产品稳定性的可行模式 [12]，已被广泛用于中药和相关产品的质量评价[13-15] 。因此，本文对市售10批广藿香油进行了GC-MS 分析，以期对市售广藿香油的质量进行评价。
基金项目：海南省重大科技项目（No. ZDZX2013008）。
1 仪器与试药
Thermo ISQ GC-MS气相色谱-质谱联用仪（美国赛默飞世尔公司）；广藿香油对 照品（供鉴别用，批号：110832-200604，中国食品药品检定研究院）；色谱纯乙酸乙酯（美国Honeywell 公司）。
10批市售广藿香油样品购自商场和网店，依次标记为S1～S10，广藿香油对照品标记为S0。2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密吸取5 μL 广藿香油的对照品置于1 mL棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。2.2 供试品溶液的制备
精密吸取5 μL 市售广藿香油，置于1 mL棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。2.3 GC-MS 分析条件
载气：氦气（纯度：99.99%），流速：1.5 mL・min －1；
作者简介：杨银慧，女，硕士研究生，主要从事中药质量分析与安全性研究，Tel ：（010）57833265，E-mail ：[email protected] *通讯作者：肖强，男，教授，主要从事天然产物全合成研究，Tel ：（0791）86422903，E-mail ：[email protected]；杨美华，女，研究员，主要从事中药质量控制与安全性研究，Tel ：（010）57833277，E-mail ：[email protected]
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Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6 中南药学 2015年6月 第13卷 第6期
色谱柱：Rtx-5ms 石英毛细管柱（30.0 m×250 μm ×0.25 μm ）；进样口温度：250 ℃，进样量：1 μL ，分流进样，分流比：20 ：1。程序升温，初始温度50 ℃，保持3 min ，以15 ℃・min －1升温至134 ℃，再以1 ℃・min －1
升温至143℃，保持5 min，再以5 ℃・min －1升温至230 ℃，保持1 min，再以15 ℃・min －1升温至250℃，保持5 min。电离方式EI ，离子源温度250 ℃，传输带温度250 ℃，离子扫描范围：40.0～500.0 amu，采集方式：SCAN 扫描。
1009080
×107
12.17
2.4 样品检测
分别取对照品和供试品溶液各1 μL ，按照“2.3”项下方法进样分析，广藿香油对照品和样品的总离子流图见图1。
2.4.1 参照峰的选择 通过对对照品以及10批样品的GC-MS 测定样品，比较保留时间和总离子流色谱图，确定对照品和供试品总离子流图中12号峰为百秋李醇（见图1）。因12号峰强度适中且峰形较好，因此选择其作为参照物峰。
1009080
×107
20.73
S0
12号
S8
R e l a t i v e A b u n d a n c e
[**************]
10.54
11.24
70
12.71
13.89
605040
12号
20.71
12.17
13.89
3020
11.24
12.71
23.49
16.44
14.77
19.86
16.76
18.37
22.33
23.49
19.86
16.44
16.20
16.65
18.39
22.33
100
10.27
24.32
10 12 14 16 18 20 22 24t /min10 12 14 16 18 20 22 24t /min
图 1 对照品（S0）和样品（S8）的总离子流色谱图
Fig 1 Total ionic current chromatogram of reference solution（S0）and sample solution（S8）
2.4.2 精密度试验 取“2.1”项下广藿香油对照品溶液，在“2.3”项条件下连续进样6次，记录总离子流色谱图。以百秋李醇色谱峰（指纹图谱中12号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有色谱峰的相对保留时间及相对峰面积比值进行统计。结果各主要共有峰相对峰面积RSD ＜1.8%，相对保留时间RSD ＜0.12%，表明该仪器的精密度良好，符合指纹图谱检测要求。
2.4.3 稳定性试验 取“2.1”项下广藿香油对照品溶液，在“2.3”项条件下分别在0、2、4、6、12、24 h依次进样，记录总离子流色谱图。以百秋李醇色谱峰（指纹图谱中12号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有色谱峰的相对保留时间及相对峰面积比值进行统计。结果各主要共有峰相对峰面积RSD ＜2.6%，相对保留时间RSD ＜0.16%，表明该对照品溶液在24 h内稳定，符合指纹图谱检测要求。
2.4.4 重复性试验 取广藿香油供试品平行制备6份，在“2.3”项条件下分别进样，记录总离子流色谱图。以百秋李醇色谱峰（指纹图谱中12号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有色谱峰的相对保留时间及相对峰面积比值进行统计。结果各主要共有峰相对峰面积RSD ＜2.3%，相对保留时间RSD ＜0.22%，表明该方法重复性较好，符合指纹图谱检测要求。2.5 指纹图谱的建立与评价
2.5.1 指纹图谱的建立 按“2.1”、“2.2”项下方法，制备对照品溶液和供试品溶液。按照“2.3”项下的方法分别吸取S0～S10广藿香油样品各1 μL 进样，得到对照品以及10批广藿香油GC-MS 指纹图谱（见图2）。根据相对保留时间，确定共有峰。将同时存在于对照品和样品中的具有良好分离度的13个稳定的峰作为特征指纹峰。从对照品和广藿香油的总离子流图中可以看出，
S4的化学成分和S0的化学成分截然不同，大多数存在于S0中的成分在S4中不含有，这可以判断出S4是伪品。其他样品的化学成分和S0相比较差异较小，仅相对含量不同，说明除S4外，其他样品的质量比较稳定。
图2 11批广藿香油的GC-MS 总离子流图
Fig 2 Total ion chromatography of 11 batches of Pogostemon cablin oil samples
2.5.2 共有指纹峰的确认 采用GC-MS ，结合NIST 数据库及文献检索确认了10批样品中12个共有峰，结果见表1。根据初步研究，共有峰面积占总色谱峰面积的90%以上，非共有峰面积占总色谱峰面积不到10%，该结果符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》标准。
2.5.3 相似度分析 采用国家药典委员会编写的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A 版”软件，将图谱数据导入指纹图谱相似性评价软件分析，以对照品S0图谱为参照图谱，进行色谱 峰匹配。S1～S10广藿香油样品与对照品S0之间的相似度分别为0.996、0.998、0.999、
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中南药学 2015年6月 第13卷 第6期 Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6
表1 广藿香油化学成分的共有峰
Tab 1 Common components of Pogostemon cablin oil
序号（No. ）
[**************]13
保留时 间（retention time）/min
11.2411.9212.1712.7112.9713.0413.1813.8916.4416.6519.8620.7323.49
化合物名称（compound name）β-广藿香烯（β-patchoulene ）反式-石竹烯（caryoph y llene ）α-愈创木烯（α-guaiene ）刺蕊草烯（sey c hellene ）α-广藿香烯（α-patchoulene ）广藿香烯（patchoulene ）γ-广藿香烯（γ-caryophyllene ）δ-愈创木烯（δ-guaiene ）异石竹烯（isocaryophyllene ）石竹烯氧化物（caryophyllene oxide）（－）-蓝桉醇[（－）-globulol]广藿香醇（patchouli alcohol）广藿香酮（pogostone ）
分子式（formula ）
C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24O C 15H 26O C 15H 26O C 12H 16O 4
CAS 号（CAS No.）
514-51-287-44-53691-12-120085-93-2560-32-71405-16-9508-55-43691-11-03724-42-31139-30-6489-41-85986-55-023800-56-8
0.576、0.999、0.998、0.996、0.998、0.999和0.998。10
批市售广藿香油样品与广藿香油对照品相比较，9批样品的相似度均＞0.99，表明其质量和标准品广藿香油质量基本一致，差异较小。S4样品与广藿香油对照品的相似度很低，初步判断该批样品为伪品。
2.5.4 系统聚类分析 采用 SPSS 19.0软件对10批广藿香油的气相色谱峰面积进行聚类分组，采用组间均联法（Ward method），以Squared Euclidean距离作为样品相似度的测度。聚类分析将10批市售广藿香油样品分为2类，结果见图3。10批市售广藿香油样品中，S4单独分为一类，说 明S4的内在质量和标准品油相差较大，是伪品。其余样品和S0聚为一类，说明除S4样品其他样品的内在质量和对照品质量相近。
结果显示：① 共有峰的分析：通过共有峰的相对保留时间和相对峰面积可知，10批样品中虽然9批样品均有12个共有峰，但不同样品中的各个峰的相对含量不同，这可能是由于广藿香油样品其化学成分的含量受产地、应用部位、提取方式等因素的影响；② 相似度分析：10批市售广藿香油除S4外，其余样品与广藿香油对照品之间的相似度均＞0.99，质量较稳定，相似度分析表明S4是伪品；③ 聚类分析：基于SPSS 19.0软件的聚类分析可知，除S4外的10批样品分布较集中，最终被聚为一类，说明除S4外的其余样品质量与标准的广藿香油相近，S4被单独聚为一类并且离散分布，与标准的广藿香油之间具有一定的差异性，此结果和相似度分析的结果相一致。10批市售广藿香油中部分样品的质量不稳定，这种质量不稳定的现象值得引起相关部门和消费者的注意，应对全国范围内市场上流通的广藿香油质量进行考察和评价，还应收集市场上更多更具有代表性的样本。本研究提示，其他市售药材的精油是否也存在类似的质量问题，值得有关单位及医药工作者高度关注。[1] 中国药典 2010 年版. 一部 [S]. 2010：373.
[2] Hu LF ，Li SP，Cao H，et al. GC-MS fingerprint of
Pogostemon cablin in China [J]. J Pharm Biomed Anal，
图3 广藿香油样品聚类分析结果
Fig 3 Hierarchical cluster analysis of Pogostemon cablin
oil samples
2006，42（2）：200-206.
[3] Yang Y ，Kinoshita K，Koyama K，et al. Anti-emetic
principles of Pogostemon cablin（Blanco ）Benth [J]. Phyto-medicine ，1999，6（2）：89-93.
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[5] Gokulakrishnan J ，Kuppusamy E，Shanmugam D，et
al. Pupicidal and repellent activities of Pogostemon cablin essential oil chemical compounds against medically important human vector mosquitoes [J]. Asian Pac J Trop Dis，2013，3（1）：26-31.
3 讨论
查阅相关文献，近年来对广藿香药材的研究较多，主要集中在原药材及其提取物的研究上。广藿香油作为广藿香的主要药效成分，在实际应用中替代原药材的应用越来越广泛，因此，市场上流通的广藿香油也越来越多。目前，对市场上流通的广藿香油的研究鲜有报道。本研究中，以广藿香油对照品的图谱为对照，建立了10批市售广藿香油的GC-MS 指纹图谱，并通过相似度评价和系统聚类分析的方法对10批样品进行了分析，初步了解市场上流通的广藿香油的质量情况。
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Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6 中南药学 2015年6月 第13卷 第6期
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sesquiterpene profile of patchouli，Pogostemon cablin，is correlated with a limited number of sesquiterpene synthases [J]. Arch Bi o c hem Biophys ，2006，454（2）：123-136. [8] Paul A ，Th a pa G ，Basu A，et al. Rapid plant regeneration，
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（收稿日期：2015-01-24；修回日期：2015-03-10）
近红外光谱法快速测定罗布麻叶中总黄酮含量
阿依古丽・塔什波拉提1，海热尼沙・黑提甫2，李慕春1，王爱霞1（1.新疆维吾尔自治区分析测试研究院，
乌鲁木齐 830011；2.新疆维吾尔自治区维吾尔医医院，乌鲁木齐 830011）
摘要：目的 建立罗布麻叶中总黄酮含量近红外光谱定量分析模型，快速测定罗布麻叶中总黄酮含量。方法
采集并用多种预处理近红外光谱，结 合偏最小二乘法（PLS ），建立 罗布麻叶中总黄酮含量的定量分析模型并对所建立的模型进行优化。结果 优化后定量模型的校正集预测值与测定值之间的相关系数RC 为0.979 6，校正集标准差（SEC ）为0.21，验证集标准差（SEP ）为0.13、交互检验验证集标准差（SECV ）为0.27。结论 该定量模型具 有较高的预测效果，建立的方法可快速定量分析罗布麻叶中总黄酮含量。关键词：罗布麻叶；总黄酮；近红外光谱；定量模型
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2015)06-0634-04doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2015.06.20
Rapid determination of the content of total fl avonoids in Apocynum
venetum folia by near infrared spectroscopy
Aygul ・Tashpolat 1, Hernisa・Hitip 2, LI Mu-chun1, WANG Ai-xia1 (1. Academy of Instrumental Analysis, Urumqi
830011; 2. Hospital of Xinjiang Traditional Ughur Medicine, Urumqi 830011)
Abstract: Objective To establish an NIR quantitative model to rapidly determine the total flavonoids content in Apocyni Veneti folia. Methods A quantitative model for the total flavonoids content in Apocyni Veneti folia was established by various pretreatment method combined with partial least squares regression (PLS). Results The internal cross validation determination coefficient was 0.979 6 with corrected mean-square error as 0.21, predicted mean-square deviation as 0.13, and internal cross-validation mean square error as 0.27 in the established quantitative model. Conclusion The above data showed good forecasting results and the quantitative analysis of total fl avonoids
基金项目：新疆维吾尔自治区科技支撑计划项目（No. 201232123）。
作者简介：阿依古丽・塔什波拉提，女，副研究员，主要从事天然产物基础研究与开发，Tel ：（0991）3857108，E-mail ：[email protected]
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中南药学 2015年6月 第13卷 第6期 Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6
GC-MS 法对市售广藿香油的成分分析及质量评价
杨银慧1，2 ，豆小文 2，孔维军 2，肖强1*，杨美华2*（1. 江西科技师范大学 江西省有机功能分子重点实验室，南
昌 330013；2. 中国医学科学院 中国协和医科大学药用植物研究所，北京 100193）
摘要：目的 对市售广藿香油进行成分分析及质量评价。方法 采用气相色谱串联质谱（GC-MS ）法对10批市售广藿香油进行化学成分分析，并建立化学指纹图谱。 结果 不同市售广藿香油成分有一定的差异，且部分样品与广藿香油对照品相比较差别较大，可以确定为伪品。结论 GC-MS 建立的指纹图谱简单准确，可用于市售广藿香油的成分分析、质量评价及真伪鉴别，为广藿香油的质量控制提供依据。关键词：广藿香油；GC-MS ；指纹图谱；质量控制
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2015)06-0631-04doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2015.06.019
Composition analysis and quality evaluation of commercial
Pogostemon cablin oil by GC-MS
YANG Yin-hui1, 2 , DOU Xiao-wen2, KONG Wei-jun2, XIAO Qiang1*, YANG Mei-hua2* (1. Jiangxi Key Laboratory
of Organic Chemistry, Jiangxi Normal University of Science & Technology, Nanchang 330013; 2. Institute of Medicinal Plant Development, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100193)
Abstract: Objective To study the quality and composition of commercial Pogostemon cablin oil. Methods Gas chromatography tandem mass spectrometry (GC-MS) was used to analyze the compositions and to establish the chemical fingerprint of commercial Pogostemon cablin oil samples. Results There were a few differences in different oil samples. Compared with Pogostemon cablin oil reference, one sample had big difference which could be considered a fake. Conclusion The study presented a simple and accurate method for the co m ponents analysis and quality control of commercial Pogostemon cablin oil. Key words: Pogostemon cablin oil; GC-MS; fi ngerprint; quality control
广藿香油为唇形科植物广藿香Pogostemon cablin（Blarico ）Benth. 的干燥地上部分经水蒸气蒸馏提取的挥发油 [1]。广藿香油的主要化学成分有广藿香醇、广藿香酮、广藿香烯、愈创木烯等[2] 。现代药理研究表明，广藿香油是广藿香药材的主要活性成分，具有止吐、 抗
[3-4] [5-6]
氧化、杀虫抑菌等作用，其在香水和食品行业也
[7-9]
有十分广泛的应用。查阅相关文献，近年来对广藿香药材的研究较多[10-11]，而关于市售广藿香油质量的研究尚未见报道。广藿 香油化学成分复杂，仅凭外观、颜色、气味及若干指标性成分分析很难判断其真伪优劣或评价其质量。中药指纹图谱能较全面地反映中药及其相关产品的内在质量和化学成分，是实现鉴别中药及其相关产品真实性、评价质量一致性和产品稳定性的可行模式 [12]，已被广泛用于中药和相关产品的质量评价[13-15] 。因此，本文对市售10批广藿香油进行了GC-MS 分析，以期对市售广藿香油的质量进行评价。
基金项目：海南省重大科技项目（No. ZDZX2013008）。
1 仪器与试药
Thermo ISQ GC-MS气相色谱-质谱联用仪（美国赛默飞世尔公司）；广藿香油对 照品（供鉴别用，批号：110832-200604，中国食品药品检定研究院）；色谱纯乙酸乙酯（美国Honeywell 公司）。
10批市售广藿香油样品购自商场和网店，依次标记为S1～S10，广藿香油对照品标记为S0。2 方法与结果
2.1 对照品溶液的制备
精密吸取5 μL 广藿香油的对照品置于1 mL棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。2.2 供试品溶液的制备
精密吸取5 μL 市售广藿香油，置于1 mL棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。2.3 GC-MS 分析条件
载气：氦气（纯度：99.99%），流速：1.5 mL・min －1；
作者简介：杨银慧，女，硕士研究生，主要从事中药质量分析与安全性研究，Tel ：（010）57833265，E-mail ：[email protected] *通讯作者：肖强，男，教授，主要从事天然产物全合成研究，Tel ：（0791）86422903，E-mail ：[email protected]；杨美华，女，研究员，主要从事中药质量控制与安全性研究，Tel ：（010）57833277，E-mail ：[email protected]
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Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6 中南药学 2015年6月 第13卷 第6期
色谱柱：Rtx-5ms 石英毛细管柱（30.0 m×250 μm ×0.25 μm ）；进样口温度：250 ℃，进样量：1 μL ，分流进样，分流比：20 ：1。程序升温，初始温度50 ℃，保持3 min ，以15 ℃・min －1升温至134 ℃，再以1 ℃・min －1
升温至143℃，保持5 min，再以5 ℃・min －1升温至230 ℃，保持1 min，再以15 ℃・min －1升温至250℃，保持5 min。电离方式EI ，离子源温度250 ℃，传输带温度250 ℃，离子扫描范围：40.0～500.0 amu，采集方式：SCAN 扫描。
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2.4 样品检测
分别取对照品和供试品溶液各1 μL ，按照“2.3”项下方法进样分析，广藿香油对照品和样品的总离子流图见图1。
2.4.1 参照峰的选择 通过对对照品以及10批样品的GC-MS 测定样品，比较保留时间和总离子流色谱图，确定对照品和供试品总离子流图中12号峰为百秋李醇（见图1）。因12号峰强度适中且峰形较好，因此选择其作为参照物峰。
1009080
×107
20.73
S0
12号
S8
R e l a t i v e A b u n d a n c e
[**************]
10.54
11.24
70
12.71
13.89
605040
12号
20.71
12.17
13.89
3020
11.24
12.71
23.49
16.44
14.77
19.86
16.76
18.37
22.33
23.49
19.86
16.44
16.20
16.65
18.39
22.33
100
10.27
24.32
10 12 14 16 18 20 22 24t /min10 12 14 16 18 20 22 24t /min
图 1 对照品（S0）和样品（S8）的总离子流色谱图
Fig 1 Total ionic current chromatogram of reference solution（S0）and sample solution（S8）
2.4.2 精密度试验 取“2.1”项下广藿香油对照品溶液，在“2.3”项条件下连续进样6次，记录总离子流色谱图。以百秋李醇色谱峰（指纹图谱中12号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有色谱峰的相对保留时间及相对峰面积比值进行统计。结果各主要共有峰相对峰面积RSD ＜1.8%，相对保留时间RSD ＜0.12%，表明该仪器的精密度良好，符合指纹图谱检测要求。
2.4.3 稳定性试验 取“2.1”项下广藿香油对照品溶液，在“2.3”项条件下分别在0、2、4、6、12、24 h依次进样，记录总离子流色谱图。以百秋李醇色谱峰（指纹图谱中12号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有色谱峰的相对保留时间及相对峰面积比值进行统计。结果各主要共有峰相对峰面积RSD ＜2.6%，相对保留时间RSD ＜0.16%，表明该对照品溶液在24 h内稳定，符合指纹图谱检测要求。
2.4.4 重复性试验 取广藿香油供试品平行制备6份，在“2.3”项条件下分别进样，记录总离子流色谱图。以百秋李醇色谱峰（指纹图谱中12号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有色谱峰的相对保留时间及相对峰面积比值进行统计。结果各主要共有峰相对峰面积RSD ＜2.3%，相对保留时间RSD ＜0.22%，表明该方法重复性较好，符合指纹图谱检测要求。2.5 指纹图谱的建立与评价
2.5.1 指纹图谱的建立 按“2.1”、“2.2”项下方法，制备对照品溶液和供试品溶液。按照“2.3”项下的方法分别吸取S0～S10广藿香油样品各1 μL 进样，得到对照品以及10批广藿香油GC-MS 指纹图谱（见图2）。根据相对保留时间，确定共有峰。将同时存在于对照品和样品中的具有良好分离度的13个稳定的峰作为特征指纹峰。从对照品和广藿香油的总离子流图中可以看出，
S4的化学成分和S0的化学成分截然不同，大多数存在于S0中的成分在S4中不含有，这可以判断出S4是伪品。其他样品的化学成分和S0相比较差异较小，仅相对含量不同，说明除S4外，其他样品的质量比较稳定。
图2 11批广藿香油的GC-MS 总离子流图
Fig 2 Total ion chromatography of 11 batches of Pogostemon cablin oil samples
2.5.2 共有指纹峰的确认 采用GC-MS ，结合NIST 数据库及文献检索确认了10批样品中12个共有峰，结果见表1。根据初步研究，共有峰面积占总色谱峰面积的90%以上，非共有峰面积占总色谱峰面积不到10%，该结果符合《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》标准。
2.5.3 相似度分析 采用国家药典委员会编写的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A 版”软件，将图谱数据导入指纹图谱相似性评价软件分析，以对照品S0图谱为参照图谱，进行色谱 峰匹配。S1～S10广藿香油样品与对照品S0之间的相似度分别为0.996、0.998、0.999、
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中南药学 2015年6月 第13卷 第6期 Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6
表1 广藿香油化学成分的共有峰
Tab 1 Common components of Pogostemon cablin oil
序号（No. ）
[**************]13
保留时 间（retention time）/min
11.2411.9212.1712.7112.9713.0413.1813.8916.4416.6519.8620.7323.49
化合物名称（compound name）β-广藿香烯（β-patchoulene ）反式-石竹烯（caryoph y llene ）α-愈创木烯（α-guaiene ）刺蕊草烯（sey c hellene ）α-广藿香烯（α-patchoulene ）广藿香烯（patchoulene ）γ-广藿香烯（γ-caryophyllene ）δ-愈创木烯（δ-guaiene ）异石竹烯（isocaryophyllene ）石竹烯氧化物（caryophyllene oxide）（－）-蓝桉醇[（－）-globulol]广藿香醇（patchouli alcohol）广藿香酮（pogostone ）
分子式（formula ）
C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24C 15H 24O C 15H 26O C 15H 26O C 12H 16O 4
CAS 号（CAS No.）
514-51-287-44-53691-12-120085-93-2560-32-71405-16-9508-55-43691-11-03724-42-31139-30-6489-41-85986-55-023800-56-8
0.576、0.999、0.998、0.996、0.998、0.999和0.998。10
批市售广藿香油样品与广藿香油对照品相比较，9批样品的相似度均＞0.99，表明其质量和标准品广藿香油质量基本一致，差异较小。S4样品与广藿香油对照品的相似度很低，初步判断该批样品为伪品。
2.5.4 系统聚类分析 采用 SPSS 19.0软件对10批广藿香油的气相色谱峰面积进行聚类分组，采用组间均联法（Ward method），以Squared Euclidean距离作为样品相似度的测度。聚类分析将10批市售广藿香油样品分为2类，结果见图3。10批市售广藿香油样品中，S4单独分为一类，说 明S4的内在质量和标准品油相差较大，是伪品。其余样品和S0聚为一类，说明除S4样品其他样品的内在质量和对照品质量相近。
结果显示：① 共有峰的分析：通过共有峰的相对保留时间和相对峰面积可知，10批样品中虽然9批样品均有12个共有峰，但不同样品中的各个峰的相对含量不同，这可能是由于广藿香油样品其化学成分的含量受产地、应用部位、提取方式等因素的影响；② 相似度分析：10批市售广藿香油除S4外，其余样品与广藿香油对照品之间的相似度均＞0.99，质量较稳定，相似度分析表明S4是伪品；③ 聚类分析：基于SPSS 19.0软件的聚类分析可知，除S4外的10批样品分布较集中，最终被聚为一类，说明除S4外的其余样品质量与标准的广藿香油相近，S4被单独聚为一类并且离散分布，与标准的广藿香油之间具有一定的差异性，此结果和相似度分析的结果相一致。10批市售广藿香油中部分样品的质量不稳定，这种质量不稳定的现象值得引起相关部门和消费者的注意，应对全国范围内市场上流通的广藿香油质量进行考察和评价，还应收集市场上更多更具有代表性的样本。本研究提示，其他市售药材的精油是否也存在类似的质量问题，值得有关单位及医药工作者高度关注。[1] 中国药典 2010 年版. 一部 [S]. 2010：373.
[2] Hu LF ，Li SP，Cao H，et al. GC-MS fingerprint of
Pogostemon cablin in China [J]. J Pharm Biomed Anal，
图3 广藿香油样品聚类分析结果
Fig 3 Hierarchical cluster analysis of Pogostemon cablin
oil samples
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3 讨论
查阅相关文献，近年来对广藿香药材的研究较多，主要集中在原药材及其提取物的研究上。广藿香油作为广藿香的主要药效成分，在实际应用中替代原药材的应用越来越广泛，因此，市场上流通的广藿香油也越来越多。目前，对市场上流通的广藿香油的研究鲜有报道。本研究中，以广藿香油对照品的图谱为对照，建立了10批市售广藿香油的GC-MS 指纹图谱，并通过相似度评价和系统聚类分析的方法对10批样品进行了分析，初步了解市场上流通的广藿香油的质量情况。
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Central South Pharmacy. June 2015, Vol. 13 No. 6 中南药学 2015年6月 第13卷 第6期
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（收稿日期：2015-01-24；修回日期：2015-03-10）
近红外光谱法快速测定罗布麻叶中总黄酮含量
阿依古丽・塔什波拉提1，海热尼沙・黑提甫2，李慕春1，王爱霞1（1.新疆维吾尔自治区分析测试研究院，
乌鲁木齐 830011；2.新疆维吾尔自治区维吾尔医医院，乌鲁木齐 830011）
摘要：目的 建立罗布麻叶中总黄酮含量近红外光谱定量分析模型，快速测定罗布麻叶中总黄酮含量。方法
采集并用多种预处理近红外光谱，结 合偏最小二乘法（PLS ），建立 罗布麻叶中总黄酮含量的定量分析模型并对所建立的模型进行优化。结果 优化后定量模型的校正集预测值与测定值之间的相关系数RC 为0.979 6，校正集标准差（SEC ）为0.21，验证集标准差（SEP ）为0.13、交互检验验证集标准差（SECV ）为0.27。结论 该定量模型具 有较高的预测效果，建立的方法可快速定量分析罗布麻叶中总黄酮含量。关键词：罗布麻叶；总黄酮；近红外光谱；定量模型
中图分类号：R917 文献标识码：A 文章编号：1672-2981(2015)06-0634-04doi:10.7539/j.issn.1672-2981.2015.06.20
Rapid determination of the content of total fl avonoids in Apocynum
venetum folia by near infrared spectroscopy
Aygul ・Tashpolat 1, Hernisa・Hitip 2, LI Mu-chun1, WANG Ai-xia1 (1. Academy of Instrumental Analysis, Urumqi
830011; 2. Hospital of Xinjiang Traditional Ughur Medicine, Urumqi 830011)
Abstract: Objective To establish an NIR quantitative model to rapidly determine the total flavonoids content in Apocyni Veneti folia. Methods A quantitative model for the total flavonoids content in Apocyni Veneti folia was established by various pretreatment method combined with partial least squares regression (PLS). Results The internal cross validation determination coefficient was 0.979 6 with corrected mean-square error as 0.21, predicted mean-square deviation as 0.13, and internal cross-validation mean square error as 0.27 in the established quantitative model. Conclusion The above data showed good forecasting results and the quantitative analysis of total fl avonoids
基金项目：新疆维吾尔自治区科技支撑计划项目（No. 201232123）。
作者简介：阿依古丽・塔什波拉提，女，副研究员，主要从事天然产物基础研究与开发，Tel ：（0991）3857108，E-mail ：[email protected]
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