现代生物科技专题试题精选
基因工程
1．某DNA分子中含有某限制酶的一个识别序列，用该限制酶切割该DNA分子，可能形成的两个DNA片段是（ ）
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
A．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物 D．限制性核酸内切酶和DNA聚合酶是两类常用的工具酶
3．限制酶是一群核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BgIⅡ的辨识序列：
箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端，可以互补结合？其正确的末端互补序列为（ ）
A．BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B．BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C．BamHI和BgIⅡ；末端互补序列—GATC— D．EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT—
4．一环状DNA分子，设其长度为1。限制性内切酶A在其上的切点位于0.0处；限制性内切酶B在其上的切点位于0.3处；限制性内切酶C的切点未知。但C单独切或与A或B同时切的结果如下表，请确定C在该环状DNA分子的切点应位于图中的哪处（ ）
A．0.2和0.4处 B．0.4和0.6处 C．0.5和0.7处 D．0.6和0.9处
5．下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是（ ）
A．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
B．1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ 的基C．1为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠ 因
D．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ
6．土壤农杆菌是基因工程中将目的基因导入植物细胞时常用的中间媒介。它含有一个大型的Ti质粒（如右图所示），在侵染植物细胞的过程中，其中的T—DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是（ ）
A．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T—DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T—DNA的基因片段不被破坏
B．将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用CaCl2处理细菌以增加细胞壁的通透性 C．用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染正在组织培养中的植物细胞，再将被感染后的细胞培养成植株，就可能获得具有抗旱基因的植物
D．若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功
7．下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是（ ）
A．基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因
B．质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA C．限制性内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键 D．用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长 8．如图，有关工具酶功能的叙述错误的是（ ）
A．限制性内切酶可切断a处 B．DNA聚合酶可连接a处 C．解旋酶可使b处解开
D．DNA连接酶可以连接c处 9．下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是（ ）
10．用人的胰高血糖素基因制成的DNA探针，检测下列物质，不可能形成杂交分子的是（ ）
A．人胰岛A细胞中的DNA B．人胰岛A细胞中的mRNA C．人胰岛B细胞中的DNA D．人胰岛B细胞中的mRNA 11．下列关于转基因植物的叙述。正确的是（ ）
A．转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中 B．转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加 C．动物的生长激素基因转入植物后不能表达
D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题 12．蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（ ）
A．氨基酸结构 B．蛋白质空间结构 C．肽链结构 D．基因结构 13．科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改
变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性，该生物技术为
（ ）
A．基因工程 B．蛋白质工程 C．基因突变 D．细胞工程 14．下列关于蛋白质工程的叙述，不正确的是（ ）
A．实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系 B．基因工程是蛋白质工程的关键技术 C．蛋白质工程是对蛋白质分子的直接改造
D．蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程 15．下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是 （ ）
A．基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作
B．基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质 C．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作 D．基因工程完全不同于蛋白质工程 16．（10全国II）下列叙述符合基因工程概念的是（ ） A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 17．（10浙江理综）在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ）
A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C．将重组DNA分子导入烟草原生质体
D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 18．（07广东生物，23，2分）下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（ ）
A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因 B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒
D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良 19．（07广东生物，26，2分）在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（ ）
A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选
D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA
20．下面为植物组织培养过程流程图解，以下相关叙述不正确的是（ ）
植物叶片
A
．上述过程中脱分化发生在b步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用
B．再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程 C．从叶组织块到种苗形成的过程说明番茄叶片细胞具有全能性
D．人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题 根据实验结果，得出的结论正确的是（ ）
A．IBA属于细胞分裂素类植物激素，具有促进植物生长生理作用 B．愈伤组织分化的方向取决于其两者浓度的大小
C．6－BA属于生长素类植物激素，具有细胞分裂生理作用 D．6－BA属于生长素类植物激素，具有组织分化生理作用
22．下表为环腺苷酸（cAMP）和环鸟苷酸（cGMP）的浓度（M1
A．cAMP和cGMP的浓度对细胞的分裂和分化具有调控作用 B．cAMP含量增高时，则促进细胞分裂 C．cGMP含量增高时，则促进细胞分化 D．cAMP和cGMP对细胞分裂没有影响 23．（10南通二模）下列有关植物体细胞杂交技术的描述，不正确的是（ ）
A．利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株 B．获得原生质体的过程中需要纤维素酶和果胶酶 C．通常用聚乙二醇或灭活病毒诱导原生质体融合
D．可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞 24．（10南京三模）下列关于植物体细胞杂交的叙述，错误的是（ ） A．不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程
B．参与杂种细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体
C．植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远源杂种植株 D．杂种植株表现出的性状是基因选择性表达的结果
25.如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（ ）
A.图示“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B.愈伤组织的代谢是自养需氧型
C．上述过程中包含着有丝分裂，细胞分化和减数分裂等过程 D．“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果 26．（10扬州市四模）将基因型为Aa的植株的花粉和基因型为Bb的植株的花粉，除去细胞壁后，进行原生质体融合，可以得到多少种基因型不同的细胞（ ） A．6种 B．8种 C．10种 D．12种 27．（10盐城市三调）用植物细胞工程技术将天竺葵与香茅草进行杂交可产生驱蚊香草。下列有关培育过程的叙述，不正确的是（ ） A．原生质体的融合常用PEG作为诱导剂 B．形成的愈伤组织其代谢类型是自养需氧型
C．由杂种细胞→杂种植株，要通过有丝分裂和细胞的分化 D．该项生物工程技术可克服远缘杂交不亲和的障碍
28（10南通市三模）在动物细胞培养过程中，下列处理不恰当的是（ ）
A．培养液和培养用具要进行无菌处理 B．提供种类齐全的营养物质 C．提供纯氧以保证细胞的呼吸作用 D．保证提供适宜的温度和pH 29．（10苏北四市三模，9）下列关于细胞工程的叙述中，错误的是（ ） A．植物细胞融合必须先制备原生质体
B．试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面
C．动物细胞培养过程中要保持一定浓度的CO2，其目的是促进动物细胞呼吸 D．用于培养的植物器官或组织属于外植体
30．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有（ ）处不正确？
A．0 B．1 C．2 D．3 31．（10南通市三模，17）在试管牛的生产过程中，不是必需的操作是（ ）
A．卵母细胞的采集和培养 B．受精卵中导入抗病毒基因 C．精子的采集和获能 D．胚胎的早期培养和移植 32．（08上海生物）制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（ ）
①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植 A．①② B．①③ C．②③ D．③④ 33．（07天津）利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ）
A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C．将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 34．（10南通二模）下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是（ ）
A．采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用 B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程
C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D．受精作用完成的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体 35．（10苏北四市二模，23）下图是利用某植物（基因型为AaBb）产生的花粉进行单倍体育种的示意图，据图判断正确的有（ ）
花粉 ① 植株A ②
植株B
A．过程②通常使用的试剂是秋水仙素，作用时期为有丝分裂间期 B．通过过程①得到的植株A基因型为aaBB的可能性为1/4
C．过程①属于植物的组织培养，在此过程中必须使用一定量的植物激素 D．与杂交育种相比，该育种方法的优点是能明显提高变异幅度
36．（苏、锡、常、镇四市二）胚胎工程技术在生产中的应用不包括（ ）
A．移植胚胎干细胞使退化的组织修复并恢复正常功能 B．进行胚胎移植充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能 C．采用机械方法将早期胚胎分割产生同卵双胎 D．在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体 37．（10盐城市三调）英国研究者取人的皮肤细胞核与去核牛的卵细胞重组，培育出混合胚胎，但该胚胎只成活了3天。此项技术与一般治疗性克隆研究相比较，其发展优势是（ ） A．最终可培育产生转人类基因动物 B．可望解决人类卵细胞资源稀缺问题 C．可望有效解决器官移植产生的排斥反应 D．可望构建人体器官克隆体系 38．（10盐城市三调）下列生物工程技术中一定要来自同一个物种的是（ ）
①核移植中细胞核和细胞质来源 ②牛胚胎移植中公牛与母牛 ③牛胚胎移植中胚胎的供体与受体 ④植物体细胞杂交中两个体细胞 A．①②③④② B．③ C．①②③ D．②③ 39．（10南京三模）取某哺乳动物的染色体DNA被32P标记的精子与未被标记的卵细胞进行体外受精和早期胚胎培养。若不考虑染色体变异，下列关于该受精卵形成及其分裂所产生后代细胞的说法，错误的是（ ）
A．第二次卵裂结束时，最多有4个细胞带放射性
B．次级卵母细胞在受精作用过程中完成减数第二次分裂
C．取胚胎细胞制片观察，并不是每个细胞内都可以看到染色体 D．获能的精子与卵子相遇，释放顶体酶穿过透明带进入放射冠 40、（2010安徽安庆四校联考）现在有一个婴儿在出生后医院为他保留了脐带血，在以后他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病，就可以通过血液中的干细胞来为其治病，关于这个实例说法正确的是（ ）
A．用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，需要激发细胞的所有全能性 B．用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病
C．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术
D．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，应该长期给他使用免疫抑制药物 41．（10江苏生物）下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述，错误的是（ ） A．对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理
B．人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割 C．利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
D．一次给受体母羊植入多个胚胎，可增加双胞胎和多胞胎的比例 42．（10江苏生物老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β一淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降，某些基因的突变会导致β一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是（ ） A．胚胎移植技术 B．胚胎干细胞技术 C．单克隆抗体技术 D．基因治疗技术
43．当卵细胞达到（ ）时期时，才具备与精子受精的能力
A.减数第二次分裂后期 B.减数第一次分裂末期
C.减数第二次分裂中期 D. 减数第二次分裂结束成熟44（08江苏生物，6，2分）动物和人体内具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞。对下图的相关叙述中，错误的是（ ）
A．a过程表示干细胞能自我更新
B．b、c过程表示干细胞具有分化能力
C．a、b、c过程中细胞的遗传信息表达情况不同
D．b过程形成的细胞直接组成器官，可供器官移植使用 45．（10苏北四市二模，13）右图是某生态工程示意图，有关说法错误的是（ ） A．用玉米的副产品玉米芯生产木糖醇，可增加经济效益 B．用残渣来培育食用菌和蛆蛹，实现了物质的多级利用 C．用蛆蛹粪便作为有机肥还田，运用了能量循环再生的原理 D．该生态工程的运转离不开人的管理 46．（08广东生物，16，2分）要实现人与自然的和谐发展，下列措施最合理的是（ ）
A．通过生物技术手段，转化淀粉生产可再生能源 B．使用化学农药防治病虫害，保证粮食稳产 C．发展生态农业，实现物质和能量的多级利用 D．大力开垦湿地，扩大粮食种植面积 47．（07广东生物，16，2分）“猪一沼一茶”是华南山地丘陵地区常见的生态农业模式，由种植（茶树）、养殖（猪）、农户（人）和沼气生产（微生物）四个子系统构成。该生态农业模式（ ）
A．是由茶树、猪、人和微生物组成的生态系统 B．实现了物质和能量在系统中的多级循环利用 C．使整个生产过程进人了废物资源化的良性循环 D．注重系统内部的自身调节作用，不需要外部投人 48．（07重庆理综，1，6分）稻—鸭—萍共作是一种新兴的生态农业模式，其中，水生植物红萍（满江红）适生于荫蔽环境，可作为鸭子的饲料，鸭子能吃有害昆虫并供肥，促进水稻生长，对以此模式形成的生态系统，下列叙述错误的是C
A．该生态系统的主要功能是物质循环和能量流动 B．鸭子既是初级消费者，又是次级消费者
C．生物群落由水稻、红萍、鸭子和有害昆虫组成 D．水稻和红萍分层分布，能提高光能利用率 49．（07四川理综，3，6分）在社会主义新农村建设中，四川某地通过新建沼气池和植树造林，构建了新型农业生态系统（如图所示）下列有关叙述不正确的是C
沼 渣 沼 液 作
肥
A
B．该生态系统中，人的作用非常关键，植物是主要成分 C．该生态系统的建立，提高了各营养级间的能量传递效率 D．沼气池的建造和植树造林，提高了该生态系统的稳定性
50．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是（ ）
A．抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体
B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染
D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
51．为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和______________序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化_________键的形成。 52．（10扬州市四模，30）（8分）土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒（含冠瘿瘤基因），它携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。结构及转化过程如图所示，回答相关问题。
（1）若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即 ，将抗旱基因转移至Ti质粒的 中，且要保证复制起始位点和 不被破坏。然后在一定条件下将外植体在含有 的土壤农杆菌的稀释培养基上培养，使得抗旱基因转入植物细胞并整合到植物基因组中。 （2）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体通过 形成愈伤组织，再通过 产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。
（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，如果培育成的植株能适应干旱环境，还应进行 水平鉴定，以确定该变异能否遗传给后代。为获得纯合的转基因植株，还需要对转基因植株进行严格的 。 53．（10苏北四市三模，9）（7分）某研究小组进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作，
（1）实验步骤①所代表的反应过程是 ；在步骤②之前扩增H基因常采用的方法与体内DNA复制相比，反应体系需加入 种引物和 。
（2）某志愿者接种甲型H1Nl流感疫苗后，第15天感染甲型H1N1流感病毒，则体内细胞将迅速增殖分化形成 细胞，从而产生大量抗体。
（3）机体能合成数百万种特异性抗体，抗体种类如此多的原因是其结构中的 。
（4）在炎热的夏季，山西某地在未执行冷藏要求的情况下运输甲型H1N1流感疫苗，结果导致给学生注射的甲型H1N1流感疫苗无效，请分析疫苗失活的主要原因是 。 54．（10苏北四市二模，29）（8分）应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
资料1：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
资料2：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。
（1）过程①⑤所需要的工具酶有 ，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由 、 、启动子、终止子等部分组成。
（2）过程②将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法
是 。
通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。
（3）如果将过程③获得的早期胚胎进行如图分割，则操作正确的是 。
（4）通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有 和 等
突出优点。
55．（10南通市三模）（7分）2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”
获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
含重组质粒的土壤农杆菌 （1
）④过程应用的主要生物技术是
。 （
2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种
Bt
毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于 工程技术范畴。 （3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入____________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的 （基因），保证
T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用
位点，有利于___________。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。 ③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是 。
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是 。 56．（10盐城市三调）（8分）科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答：
（1）步骤①和②中常用的工具酶是 。 （ 2）经过①和②步骤后，有些质粒上的 基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。 （3）步骤③是 的过程。为了促进该过程，应该用 处理大肠杆菌。 （4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 。能在C中生长的大肠杆菌有 种。
（5）步骤⑤：用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”） 上，请在图中相应的位置上圈出来。 57．（10天津理综，7I，14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。 据图回答： （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。
（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 （填字母代号）。 A．启动子 B．tetR C．复制原点 D．ampR （3）过程①可采用的操作方法是 （填字母代号）。
A．农杆菌转化 B．大肠杆菌转化 C．显微注射 D．细胞融合
（4）过程②可采用的生物技术是 。
（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。 （6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 （填字母代号）技术。
A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．抗原—抗体杂交 D．PCR
58．（10江苏生物，27，8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 59．（10福建理综，32，10分）红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）期间要生产流程如右图。 （1）图中①所指的是 技术。
（2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。 （3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。
（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细59、胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成 60．（10南通二模）（8分）在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组
注：愈伤组织诱导率（%）＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%
（1）从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的
有利于食用稗胚形成愈伤组织，而添加 则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。
（3）影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。 实验步骤：
①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到 培养基上；② ； ③ 。
预期实验结果和结论： 。 61、（10苏北四市二模，27，6分）下图为单克隆抗体制备流程示意图。
（1）单克隆抗体制备技术的基础是 。
（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是 。在细胞
培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的 ，以保证生命活动的正常进行。
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／mL，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是 。 （4）若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是 。 62．（07安徽省六校四月高三联合考试，30）（20分）美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱，并顺利移植到7名患者体内。
其培育过程是：从患者的膀胱上取下普通邮票一半大小的活细胞样本，膀胱从外到内是由三层构成，即肌肉、胶原质和膀胱上皮。研究人员将活细胞样本中胶原质剥下，将肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养，约一周后将这些细胞放在一些海绵形状的可生物降解的由胶原质制成的“支架”上继续培养，再过7周左右，原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右，布满“支架”，膀胱上皮在内，肌肉在外。医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面。这样新器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分。培育过程如下图所示：
根据以上资料回答下列问题：
（1）a过程属于细胞工程中的 ，与植物组织培养的培养基相比，其培养基的主要不同点是含有 。该过程属于 代培养。从患者的膀胱上取下的活细胞样本，在培养之前，需用 酶处理，以分散细胞。
（2）b过程由数万个细胞繁殖到15亿个细胞是 的结果，由这些细胞再形成肌肉和膀胱上皮的过程要经过 。
（3）新器官与老器官的“重组”是否会导致基因重组？为什么？ ； 。 （4）“新膀胱”移植后，是否会引起免疫反应？为什么？ 。 63．（11分）现有甲乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的 身份参与此项研究，完成下列实验报告，并回答有关问题。 Ⅰ、实验材料：活的小白鼠胚胎。
Ⅱ、药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。 Ⅲ、实验原理：_______________________， 根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。 Ⅳ、实验步骤：
（1）制备细胞悬浮液：
把活的小白鼠胚胎放入在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。 （2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，_____________________。
②向A、B两培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀。C瓶不作处理，作为对照。
③_____________________。 （3）制作临时装片：
①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液以迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。 ②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的悬浮液。滴在与培养瓶有相同编号的 载玻片的中央，________________，3～5min后，盖上盖玻片，制成临时装片。 （4）镜检和统计：
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于__________期的细胞，并与 ________________对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该细胞总数的百分数（Q值）。 V、结果与结论：
经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3％、QB=12.5％、QC=0.1％，由此可知该实验的结论是____________________________________________。 64.（10全国新课标，40，15分）请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。 （2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是 (脱落酸、2
，
4-D)。 （4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势是 。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满足自身最佳生长的需要。
（5）据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。 65．（09山东理综）人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：
接种前，要对人参根进行 。
（2）用于离体培养的根切块，叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于
污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于 污染。
（3）用少量 酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 加热。 66、（09山东理综）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
请回答：
（1）过程①代表的是 。
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用 和 两种工具酶。 （3）过程③采用的实验技术是 ，获得的X是 。
对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，
与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。 67．（08海南生物，25，18分）某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的
（1）图中①表示的是该花粉培养过程中的 过程，②表示的是 过程，X代表的是过程，④表示的是诱导 （2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中 的种类及其浓度配比，最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明为成熟花粉具有 。（3）对植株进行 ，才能使其结实产生后代（乙），否则植株甲只有通过 的方式才能产生后代（丙）。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是 植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种。花药培养在育种上的特殊意义是 ，从而开辟育种新途径。 68、（2009海南生物，26，18分）请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题： （1）精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的过卵母细胞的放射冠和透明带。
（2）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂 期时，才具备受精能力。若在卵黄膜和透明带之间看到两个极体，则表明 过程已完成。 （3）动物的早期胚胎移植到同种且与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎，常用 激素对供体进行处理，其目的是获得更多的 ，经人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜 。
（4）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑葚期或囊
胚期阶段的早期胚胎进行 处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于 条件下。
69、2010广东深圳3月）牛胚胎移植的基本程序如图，请据图回答： 供体母牛 受体母牛
a
供体 分娩（胚胎移配种 b 质量检查、培养c
公牛 植的犊牛） （1）图中a、b、c过程分别是指
（2）供体母牛的主要职能是。
（3）为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是；理由是 。
（4）从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有 。
（5）你认为胚胎移植技术在生产实践中的主要意义有哪些。 70．（11分）自然界有一种含有叶绿体的原生动物――眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案。请你据所学知识，并结合题给信息完善该实验设计方案，并回答相关问题。
植物材料
↓
诱导出
愈伤组
↓
除去细胞壁，得到原生质动物胚胎细胞
培
融合的胚胎细胞培 ↓
分裂形成胚
↓
将胚胎移植到动植物杂
代孕母体的子交种出生实验原理：根据绿眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。
实验步骤设计如下：
（1）①中所选植物材料的细胞中，必须有的细胞器是 。 （2）③过程所用的酶是 。 （3）④过程除了用电刺激之外，还可以用 等做诱导因素。
（4）⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是 （至少答出2种）。
（5）你认为该动植物杂种细胞应该 （有或没有）细胞壁，理由是 。 71．（10南通二模）（8分）下图表示利用胚胎干细胞（ES细胞）所作的一系列研究，请据图分析回答：
（1）过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的___________，加入抗生素是为了___________________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
（2）过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有______________的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是_________。 （3）过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是 ，将获目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，其目的是____________________。
（4）过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须用X射线照射去除胸腺的小鼠，获得免疫缺陷小鼠，其目的是________ _________________________________，该过程研究的意义在于解决___________问题。 72．（10南京三模，7分）胚胎工程技术包含的内容很丰富，下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：
（1）应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于 ，为一次获得多个细胞B，往往需要向供体2内注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是 。
（2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是 。
（3）通过应用2获得小牛，涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是 。 （4）应用3中的细胞D取自囊胚的 ，细胞C取自牛胎儿的 。 （5）应用4中获得二分胚①和②，移植到受体牛中得到两只小牛，两只小牛的性别是 。 73、．（10盐城市三调）（8分）广西省水牛研究所科研人员利用克隆胚胎冷冻技术，使一头杂交母水牛顺利产下一头冷冻胚胎移植的体细胞克隆雌性水牛犊，取名“盼盼”，它的出生经历了一个严密复杂的科学操作过程（如下图所示）：
（1）当克隆牛“盼盼”性成熟后进行减数分裂，其初级卵母细胞内可以形成 个四分体。 （2）①、④过程主要采取 技术才能获得细胞群或囊胚，此时在培养液中常加入一定量的二氧化碳，其目的是 。③过程中常用方法是 。
（3）根据专家介绍，水牛克隆胚胎冷冻技术的研究成功，有利于水牛克隆技术的推广应用，其重要意义在于 （答出一点即可）。 74．（9分）2002年，我国自主完成的首批成年体细胞克隆牛在山东陆续降生。克隆牛有3个母亲，A牛提供细胞核即供体细胞，B牛提供去除细胞核的卵细胞即受体细胞，两种细胞在电脉冲的刺激下融合之后，通过细胞分裂形成早期胚胎，再将这个胚胎植入C牛子宫内。请回答下列问题： （1）培育出的克隆牛几乎是 牛复制品。这是因为控制牛性状遗传的物质主要存在于 中。
（2）如果多个供体细胞来自同一头牛，培育的这些牛性状上也不完全相同，请分析其原因：
① ② ③
在体细胞克隆技术出现之前，育种工作者已经开始采用胚胎分割移植方法来尽快繁育更多的优质牛。这种育种技术的主要步骤是：将经过人工受精得到的受精卵在试管内培养到8个细胞的胚胎时，进行胚胎分割，均分为4份，再分别移植到多头母牛的子宫内发育、分娩，就能得到多头所需要的小牛。
（3）胚胎分割移植要在受精卵培养到8个细胞的卵裂期前（包括8个细胞）进行，其主要原因是： 。
（4）通过胚胎分割移植培育出的这些小牛，其性别表现为 。 A．雌雄的可能性各占50%
B．全为雌性或全为雄性 C．全为雌性 D．全为雄性
（5）而通过体细胞克隆技术培育出的小牛，其性别则取决于 。这样人们就可以根据需要，有目的地控制小牛的性别。
（6）小牛出生后会跟随它看到的第一个大的行动目标行走，这种行为被称为 。 75．（10山东理综，35，8分）胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。
良种母牛采集
培养 A 分娩
良种公牛采集 精子（1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是_____；从良种公牛采集的精子需_____后才能进行受精作用。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供____气体以维持____。
（3）图中过程A称为_____，它在胚胎工程中的意义在于_____。
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是____；获得转基因母牛后，如果_____即说明目的基因已经表达。 76．（09四川理综，30I，12分）将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成一种特定的细胞（命名为M细胞），再将M细胞移植到糖尿病模型小鼠（胰岛细胞被特定药物破坏的小鼠）体内，然后小鼠的血糖浓度，结果如图所示（虚线表示正常小鼠的血糖浓度值）。请回答相关问题：
（1）实验用的胚胎干细胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用 酶将其分散成单个细胞。 （2）根据实验结果可以判定M细胞已具有 细胞的功能。说明判定的理由 。
（3）用胰岛素基因片段做探针，对小鼠胚胎干细胞和M细胞进行检测。请在下表的空格中
上述实验结果表明，胚胎干细胞通过 定向分化为M细胞。
（4）若将M细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，重组细胞能否分化为其他类型细胞？ ，请说明理由 。 77．（09宁夏理综，41，15分）右图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答： （1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_________期的内细胞团或胎儿的_____中分离得到的一类细胞。 （2）图中分化程度最低的干细胞是______。在体外培养条件下，培养液中加入___因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
（3）在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因___________的结果。
（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植
可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的______________细胞移植到患者体内。 （5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________，其原因是___________。
（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞NDA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______________期。
（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用__________细胞与骨髓细胞融合，经多交筛选最终得到能分泌__________________的杂交瘤细胞。 78．（08江苏生物，34B，6分）下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。 （1）进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光照14h，黑暗10h）饲养成年雌鼠，并注射促进性腺激素，目的是 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是 。再在37℃，5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎
（2）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是 。
（3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于 。
（4）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因 。 79．（10南通市三模）（7分）生态农业建设是建设社会主义新农村的重要内容之一。下面是两种生态农业模式：
模式1 鸡－猪－鱼立体养殖模式：一亩鱼池配6～8头猪，100～120只鸡，鱼池中各种鱼的比例大致为：花白鲢占20%，草鱼占40%，鲤鱼、鳙鱼占40%，每亩投放鱼苗4500尾。每天从鸡舍中收集新鲜的鸡粪晒干，经初步发酵后混入一定量饲料喂猪，猪粪喂鱼。
模式2 “四位一体”生态模式：以太阳能为动力，以沼气为纽带，将日光温室、沼气池、蔬菜种植和温室养猪相结合的一种新的农业生产模式。 请分析回答有关问题：
（1）在模式1中，必须注意某种鱼的投入数量，不宜超过该鱼在生态系统中的__________。鱼塘中不同鱼类生活在不同水层，体现了生物群落在垂直结构上具有____________的现象。 （2）右图表示是某池塘中鲢鱼平均尾重变化情况，由曲线可知，生物体的生长呈_____型曲线，根据图示结果，最佳捕捞时间是在投放后的_______个月左右。
（3）模式2中，光能输入生态系统的途径是_________，沼气池中的产甲烷杆菌在生态系统中属于________（成分）。
（4）建立以沼气为中心的“四位一体”生态工程主要遵循的生态工程原理是 。 80．（08江苏生物，26，8
分）江苏某农户创建的冬季生态型种植养殖模式如下图所示，请据
图回答下列问题。
（1）牛棚内产生的_________可扩散进入蔬菜大棚，提高蔬菜大棚，提高蔬菜的光合效率；蔬菜光合作用产生的__________可扩散进入牛棚。
（2）秸杆除了作为牛的饲料外，还可与牛粪混合堆入进行___________，腐熟的产物肥效提高，这是因为
。这种肥料用于蔬菜栽培可以提高蔬菜产
量。
（3）在牛的品系、饲料品种和用量不变的条件下，采用这种养殖模式，牛的生长速率明显提
高，其主要原因是 。
（4）牛棚保温所需的热能来源于牛身散热、地热、___________和__________。
（5）从生态系统主要功能的角度分析，这种种植养殖模式较好地实现了 。
81．（10苏北四市三模，9）（8分）人血中提取的血清白蛋白在临床上需求量很大，由于人类
免疫缺陷病毒（HIV）等病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。通过一
定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白
蛋白就成为可能。大致过程如下：
a．采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液，通过体外受精形成受精卵，进行体外培养形成胚胎，
然后再选出雌性奶牛胚胎供进一步使用。
b．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成细胞①；
c．取出细胞①的细胞核，注入去核奶牛卵细胞中，形成细胞②；
d．电脉冲刺激细胞②促使其形成早期胚胎；
e．将早期胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞数量很少，往往给雌牛注射 激素，使其超数排卵。
（2）采集的精子必须经过 作用，才能进行受精作用。
（3）细胞①和②中 （①、②）实现了基因重组。
（4）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是 。
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养过程
如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用 处理内细胞团，
使之分散成单个细胞。胚胎干细胞的结构特点是 。若想获取更多的基因型相同
的小牛，应采取 技术。在培养动物细胞时，培养液中加抗生素的目的是 。
1-5DCCAA 6-10DDDCD 11-15ADBCB 16-20BABBB 21-25BACBD 26-30CBCCA 31-35BADDC 36-40DBDDC 41-45BACDC 46-50 CCCCD 51、答案8．（1）对照（单一变量） （2）3 2 （3）
（4）GGATCT//CCTAGA 磷酸二酯键 52、（8分）（1）祛除瘤基因 T—DNA 用于转移T—DNA的基因片段 重组Ti质（2）脱分化 再分化 （3）DNA 自交 53．（7分）（1）逆转录 2 耐热的DNA聚合酶 （2）记忆 效应B（浆）（3）氨基酸种类、数目和排列次序不同，形成的空间结构不同 （4）高温导致疫苗蛋白质的变性或失活 54．（每空1分，共8分）
（1）限制酶、DNA连接酶 目的基因 标记基因（2）显微注射法 乳汁（3）B （4）目的性强 克服远缘杂交不亲和性（或能有效地打破物种的生殖隔离界限） 55．（8分）（除注明的外，其余每空1分） （1）植物组织培养（2）蛋白质（3）①启动子
②tms和tmr（2分） 目的基因（或外源DNA）准确插入
③在含卡那霉素的培养基能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长（4）GACGTC 56．（8分）（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶 （2）氨苄青霉素抗性 （3）将重组质粒（目的基因）导入大肠杆菌（受体细胞） CaCl2溶液 （4）含四环素抗性基因的大肠杆菌（含抗性基因的大肠杆菌给分，但回答含目的基因的大肠杆菌不给分） 2 （5）E （在两个菌落中圈一个也可给1分）
57、答案：（14分）（1）HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素（2）A（3）C（4）胚胎移植技术（5）全能（6）C 58、【答案】（1）0、2 （2）高
（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 （4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 （5）DNA连接
（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞
（7）蔗糖为唯一含碳营养物质 59、答案：（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培养液 （4）杂交瘤 60、60、答案：39．（8分） （1）2，4－D 6－BA
（2）①L3 ②甲组置于光照条件下培养，乙组置于黑暗条件下培养，其它条件相同且适宜；③培养一段时间后，分别计数甲、乙两组中形成愈伤组织的个数并计算愈伤组织诱导率。 预期实验结果和结论：①如甲组的愈伤组织诱导率大于乙组的愈伤组织诱导率，则光照有利于愈伤组织的形成；②如甲组的愈伤组织诱导率小于乙组的愈伤组织诱导率，则黑暗有利于愈伤组织的形成；③如甲组的愈伤组织诱导率和乙组的愈伤组织诱导率相当，则光照、黑暗对愈伤组织的形成没有影响 61、答案：27．（6分）
（1）动物细胞培养 （2）筛选杂交瘤细胞 种类和数量（浓度）
（3）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）
（4）核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜（2分）
62、答案： （1）动物细胞培养 动物血清等 原 胰蛋白酶原 （2）细胞分裂 细胞分化
（3）不会 新器官与老器官“重组”遗传物质未改变，没有发生基因重组 （4）不会 用于移植的膀胱是由接受移植者的体内细胞培育产生，HLA抗原相同 63答案：42．（11分）
Ⅰ．有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体结构和数量变异（2分） Ⅳ．（2）①分别加入等量的细胞悬浮液（2分） ③把三个培养瓶放在37℃（或适宜温度）的恒温箱中培养
（3）②加1～2滴适宜浓度的龙胆紫溶液染色（2分） （4）有丝分裂中 小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片 Ⅴ．甲乙两种化学化学物质均有毒性，且乙的毒性比甲的毒性大（2分 64答案：（1）遗传特性 快 遗传信息 （2）微生物 （3）生根 细胞分裂素 2，4-D （4）逐渐减小 先增加后下降 不能 （5）降低 65、答案：（1）灭菌 消毒 （2）外植体 真菌（霉菌） 细菌 （3）果胶 （4）萃取 水浴 66、答案：（1）逆转录
（2）限制性核酸内切酶（限制酶、限制性内切酶） DNA连接酶（两空可以互换） （3）细胞融合 杂交瘤细胞
（4） A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的单克隆抗体 67、答案：25．（18分）（1）脱分化 再分化 胚状体 分化（或发育） 生根（每空1分，共5分）
（2）激素 单倍体 细胞的全能性（每空2分，共6分）
（3）染色体加倍（其他合理答案也给分） 无性生殖
乙（或经过染色体加倍） 一 多 缩短育种周期（ 68、答案：（1）顶体酶（2）初级 中 受精（3）生理状态 促性腺 卵母细胞 对物质的吸收具有选择透过性 （4）胚胎分割 冷冻（或液氮）
69、答案：（1）超数排卵 冲卵 胚胎移植（2）只产生具有优良遗传特性的胚胎 健康的体质和健康的繁殖能力 （3）胚胎分割移植 桑椹胚或囊胚期 此时还未出现细胞分化（4）体积小、细胞核大、核仁明显（5）胚胎移植技术可以加快优良种畜的繁殖速度，迅速推广新品种
70、答案：（11分）（1）叶绿体（2）纤维素酶和果胶酶（3）灭活的病毒、聚乙二醇（振动、离心等）（4）无菌、无毒的环境，营养，温度，pH，气体环境（5）没有 因为胚胎在母体子宫中完成胚胎发育 71、答案：（8分）（1）营养物质 防止杂菌污染（2）发育的全能性 原肠胚
（3）显微注射法 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时，使目的基因能够和发挥作用（4）去除胸腺，不能形成T细胞，不发生细胞免疫，使移植组织细胞不会被排斥 临床上供体器官不足和器官移植后免疫排斥等 72、答案：（7分）（1）供体1和供体2 注射一定量的性激素后会抑制下丘脑和垂体的活动，从而导致相关激素分泌量下降，进而引起自身性激素分泌量减少，影响排卵
（2）诱导精子获能（3）胚胎移植 （4）内细胞团 生殖腺（原始性腺 （5）雌性或雄性 73、答案：34．（8分）（1）25（2分）（2）动物细胞培养 调节培养液的pH 显微注射（2分）（3）在世界范围内使胚胎移植不受时空限制；建立胚胎库，保存品种资源和濒危物种等 74、答案：（9分）（1）A （供核牛） 细胞核
（2）①不同的环境条件可能形成不同的性状（环境条件不同） ②在培育过程中可能产生基因突变（基因突变） ③不同受体细胞中的线粒体带有不同的基因，（其他答案合理也可给分）
（3）此时细胞分化程度很小，细胞容易表达全能性，此时动物细胞具有全能性（分化一词不答不给分）
（4）B（5）供体细胞（提供细胞核的一方）。（6）印随（ 印随学习） 75、答案：（1）使卵母细胞成熟（或使卵母细胞获得受精能力）； 获能 （2）CO2； 培养液（基）的pH
（3）胚胎移植 提高优良母畜的繁殖率。
（4）显微注射法 牛奶中含有人类白细胞介素（或：牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素） 76、答案：（12分） （1）胰蛋白酶（1分）（2）胰岛B（1分）
胰岛B细胞分泌的胰岛素是唯一降血糖的激素（3分） （3）基因的选择性表达（胰岛素基因的表达）（2分）
（4）能（1分）
细胞核含有该物种所特有的全套遗传物质（细胞核的全能性）（2分） 77、答案：（1）囊胚 原始性腺细胞 （2）胚胎干细胞 分化诱导
（3）选择性表达 （4 )造血干 （5）红细胞 细胞中无细胞核 （6）间 （7）B淋巴 特异性抗体 78、答案：（1）促进排卵（或超数排卵） 使精子获能 囊胚 （2）容易获得纯合子并缩短育种时间 （3）小鼠甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因 （4）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达 生态工程 79．（7分）（每空1分）
（1）环境容纳量 分层（2）S 8
（3）生态系统中的主要生产者只能利用光能 分解者（4）物质循环再生 80、答案：（1）二氧化碳 氧气 （2）发酵 微生物将有机物分解为无机物 （3）牛棚内温度较高因而牛维持体温消耗的能量较少 （4）太阳光能 发酵产热 （5）物质的循环利用和能量的高效利用 81、答案：34．（8分）（1）促性腺激素 （2）获能 （3）①
（4）雌性转基因牛进入泌乳期后，可以从其乳汁中获得血清白蛋白
（5）胰蛋白酶 细胞体积小，细胞核大，核仁明显 胚胎分割移植 防止细菌污染
现代生物科技专题试题精选
基因工程
1．某DNA分子中含有某限制酶的一个识别序列，用该限制酶切割该DNA分子，可能形成的两个DNA片段是（ ）
2．下列有关基因工程的叙述，正确的是（ ）
A．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 B．目的基因导入受体细胞后，受体细胞即发生基因突变 C．目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物 D．限制性核酸内切酶和DNA聚合酶是两类常用的工具酶
3．限制酶是一群核酸切割酶，可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸碱基序列。下图为四种限制酶BamHI，EcoRI，HindⅢ以及BgIⅡ的辨识序列：
箭头表示每一种限制酶的特定切割部位，其中哪两种限制酶所切割出来的DNA片段末端，可以互补结合？其正确的末端互补序列为（ ）
A．BamHI和EcoRI；末端互补序列—AATT— B．BamHI和HindⅢ；末端互补序列—GATC— C．BamHI和BgIⅡ；末端互补序列—GATC— D．EcoRI和HindⅢ；末端互补序列—AATT—
4．一环状DNA分子，设其长度为1。限制性内切酶A在其上的切点位于0.0处；限制性内切酶B在其上的切点位于0.3处；限制性内切酶C的切点未知。但C单独切或与A或B同时切的结果如下表，请确定C在该环状DNA分子的切点应位于图中的哪处（ ）
A．0.2和0.4处 B．0.4和0.6处 C．0.5和0.7处 D．0.6和0.9处
5．下表为几种限制性核酸内切酶识别的序列和切割的位点。如图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用BamHⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是（ ）
A．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ
B．1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为BamHⅠ，4为PstⅠ 的基C．1为PstⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为BamHⅠ 因
D．1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ
6．土壤农杆菌是基因工程中将目的基因导入植物细胞时常用的中间媒介。它含有一个大型的Ti质粒（如右图所示），在侵染植物细胞的过程中，其中的T—DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程并通过土壤农杆菌向某种植物中导入抗旱基因，以下分析不合理的是（ ）
A．若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T—DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T—DNA的基因片段不被破坏
B．将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用CaCl2处理细菌以增加细胞壁的通透性 C．用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌去感染正在组织培养中的植物细胞，再将被感染后的细胞培养成植株，就可能获得具有抗旱基因的植物
D．若能够在植物细胞中检测到抗旱目的基因，则说明该基因工程项目获得成功
7．下面是四种不同质粒的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp为氨苄青霉素抗性基因，tet为四环素抗性基因，箭头表示同一种限制性内切酶的酶切位点。下列有关叙述正确的是（ ）
A．基因amp和tet是一对等位基因，常作为基因工程中的标记基因
B．质粒指细菌细胞中能自我复制的小型环状的DNA和动植物病毒的DNA C．限制性内切酶的作用部位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的氢键 D．用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养基上生长 8．如图，有关工具酶功能的叙述错误的是（ ）
A．限制性内切酶可切断a处 B．DNA聚合酶可连接a处 C．解旋酶可使b处解开
D．DNA连接酶可以连接c处 9．下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是（ ）
10．用人的胰高血糖素基因制成的DNA探针，检测下列物质，不可能形成杂交分子的是（ ）
A．人胰岛A细胞中的DNA B．人胰岛A细胞中的mRNA C．人胰岛B细胞中的DNA D．人胰岛B细胞中的mRNA 11．下列关于转基因植物的叙述。正确的是（ ）
A．转入到油菜的抗除草剂基因，可能通过花粉传入环境中 B．转抗虫基因的植物，不会导致昆虫群体抗性基因频率增加 C．动物的生长激素基因转入植物后不能表达
D．如转基因植物的外源基因来源于自然界，则不存在安全性问题 12．蛋白质工程中直接需要进行操作的对象是（ ）
A．氨基酸结构 B．蛋白质空间结构 C．肽链结构 D．基因结构 13．科学家将β干扰素基因进行定点突变导入大肠杆菌表达，使干扰素第17位的半胱氨酸改
变成丝氨酸，结果大大提高β-干扰素的抗病性活性，并且提高了储存稳定性，该生物技术为
（ ）
A．基因工程 B．蛋白质工程 C．基因突变 D．细胞工程 14．下列关于蛋白质工程的叙述，不正确的是（ ）
A．实施蛋白质工程的前提条件是了解蛋白质结构和功能的关系 B．基因工程是蛋白质工程的关键技术 C．蛋白质工程是对蛋白质分子的直接改造
D．蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程 15．下列有关基因工程和蛋白质工程的叙述，正确的是 （ ）
A．基因工程需对基因进行分子水平操作，蛋白质工程不对基因进行操作
B．基因工程合成的是天然存在的蛋白质，蛋白质工程合成的可以不是天然存在的蛋白质 C．基因工程是分子水平操作，蛋白质工程是细胞水平（或性状水平）操作 D．基因工程完全不同于蛋白质工程 16．（10全国II）下列叙述符合基因工程概念的是（ ） A．B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因
B．将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C．用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D．自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上 17．（10浙江理综）在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是（ ）
A．用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B．用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C．将重组DNA分子导入烟草原生质体
D．用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞 18．（07广东生物，23，2分）下列关于基因工程应用的叙述，正确的是（ ）
A．基因治疗就是把缺陷基因诱变成正常基因 B．基因诊断的基本原理是DNA分子杂交 C．一种基因探针能检测水体中的各种病毒
D．原核基因不能用来进行真核生物的遗传改良 19．（07广东生物，26，2分）在已知某小片段基因碱基序列的情况下，获得该基因的最佳方法是（ ）
A．用mRNA为模板逆转录合成DNA B．以4种脱氧核苷酸为原料人工合成 C．将供体DNA片段转入受体细胞中，再进一步筛选
D．由蛋白质的氨基酸序列推测mRNA
20．下面为植物组织培养过程流程图解，以下相关叙述不正确的是（ ）
植物叶片
A
．上述过程中脱分化发生在b步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用
B．再分化发生在d步骤，是愈伤组织重新分化成根或芽等器官的过程 C．从叶组织块到种苗形成的过程说明番茄叶片细胞具有全能性
D．人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困难或发芽率低等问题 根据实验结果，得出的结论正确的是（ ）
A．IBA属于细胞分裂素类植物激素，具有促进植物生长生理作用 B．愈伤组织分化的方向取决于其两者浓度的大小
C．6－BA属于生长素类植物激素，具有细胞分裂生理作用 D．6－BA属于生长素类植物激素，具有组织分化生理作用
22．下表为环腺苷酸（cAMP）和环鸟苷酸（cGMP）的浓度（M1
A．cAMP和cGMP的浓度对细胞的分裂和分化具有调控作用 B．cAMP含量增高时，则促进细胞分裂 C．cGMP含量增高时，则促进细胞分化 D．cAMP和cGMP对细胞分裂没有影响 23．（10南通二模）下列有关植物体细胞杂交技术的描述，不正确的是（ ）
A．利用植物体细胞杂交可以获得某种多倍体植株 B．获得原生质体的过程中需要纤维素酶和果胶酶 C．通常用聚乙二醇或灭活病毒诱导原生质体融合
D．可根据细胞中染色体数目和形态的差异来鉴定杂种细胞 24．（10南京三模）下列关于植物体细胞杂交的叙述，错误的是（ ） A．不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程
B．参与杂种细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体
C．植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远源杂种植株 D．杂种植株表现出的性状是基因选择性表达的结果
25.如图是“白菜一甘蓝”杂种植株的培育过程。下列说法正确的是（ ）
A.图示“白菜—甘蓝”植株不能结籽 B.愈伤组织的代谢是自养需氧型
C．上述过程中包含着有丝分裂，细胞分化和减数分裂等过程 D．“白菜—甘蓝”杂种植株具有的性状是基因选择性表达的结果 26．（10扬州市四模）将基因型为Aa的植株的花粉和基因型为Bb的植株的花粉，除去细胞壁后，进行原生质体融合，可以得到多少种基因型不同的细胞（ ） A．6种 B．8种 C．10种 D．12种 27．（10盐城市三调）用植物细胞工程技术将天竺葵与香茅草进行杂交可产生驱蚊香草。下列有关培育过程的叙述，不正确的是（ ） A．原生质体的融合常用PEG作为诱导剂 B．形成的愈伤组织其代谢类型是自养需氧型
C．由杂种细胞→杂种植株，要通过有丝分裂和细胞的分化 D．该项生物工程技术可克服远缘杂交不亲和的障碍
28（10南通市三模）在动物细胞培养过程中，下列处理不恰当的是（ ）
A．培养液和培养用具要进行无菌处理 B．提供种类齐全的营养物质 C．提供纯氧以保证细胞的呼吸作用 D．保证提供适宜的温度和pH 29．（10苏北四市三模，9）下列关于细胞工程的叙述中，错误的是（ ） A．植物细胞融合必须先制备原生质体
B．试管婴儿技术包括人工受精和胚胎移植两方面
C．动物细胞培养过程中要保持一定浓度的CO2，其目的是促进动物细胞呼吸 D．用于培养的植物器官或组织属于外植体
30．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有（ ）处不正确？
A．0 B．1 C．2 D．3 31．（10南通市三模，17）在试管牛的生产过程中，不是必需的操作是（ ）
A．卵母细胞的采集和培养 B．受精卵中导入抗病毒基因 C．精子的采集和获能 D．胚胎的早期培养和移植 32．（08上海生物）制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（ ）
①细胞培养 ②细胞融合 ③胚胎移植 ④细胞核移植 A．①② B．①③ C．②③ D．③④ 33．（07天津）利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（ ）
A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体
C．将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D．利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者 34．（10南通二模）下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是（ ）
A．采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用 B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程
C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成
D．受精作用完成的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体 35．（10苏北四市二模，23）下图是利用某植物（基因型为AaBb）产生的花粉进行单倍体育种的示意图，据图判断正确的有（ ）
花粉 ① 植株A ②
植株B
A．过程②通常使用的试剂是秋水仙素，作用时期为有丝分裂间期 B．通过过程①得到的植株A基因型为aaBB的可能性为1/4
C．过程①属于植物的组织培养，在此过程中必须使用一定量的植物激素 D．与杂交育种相比，该育种方法的优点是能明显提高变异幅度
36．（苏、锡、常、镇四市二）胚胎工程技术在生产中的应用不包括（ ）
A．移植胚胎干细胞使退化的组织修复并恢复正常功能 B．进行胚胎移植充分发挥雌性优良个体的繁殖潜能 C．采用机械方法将早期胚胎分割产生同卵双胎 D．在小鼠腹腔中培养杂交瘤细胞生产单克隆抗体 37．（10盐城市三调）英国研究者取人的皮肤细胞核与去核牛的卵细胞重组，培育出混合胚胎，但该胚胎只成活了3天。此项技术与一般治疗性克隆研究相比较，其发展优势是（ ） A．最终可培育产生转人类基因动物 B．可望解决人类卵细胞资源稀缺问题 C．可望有效解决器官移植产生的排斥反应 D．可望构建人体器官克隆体系 38．（10盐城市三调）下列生物工程技术中一定要来自同一个物种的是（ ）
①核移植中细胞核和细胞质来源 ②牛胚胎移植中公牛与母牛 ③牛胚胎移植中胚胎的供体与受体 ④植物体细胞杂交中两个体细胞 A．①②③④② B．③ C．①②③ D．②③ 39．（10南京三模）取某哺乳动物的染色体DNA被32P标记的精子与未被标记的卵细胞进行体外受精和早期胚胎培养。若不考虑染色体变异，下列关于该受精卵形成及其分裂所产生后代细胞的说法，错误的是（ ）
A．第二次卵裂结束时，最多有4个细胞带放射性
B．次级卵母细胞在受精作用过程中完成减数第二次分裂
C．取胚胎细胞制片观察，并不是每个细胞内都可以看到染色体 D．获能的精子与卵子相遇，释放顶体酶穿过透明带进入放射冠 40、（2010安徽安庆四校联考）现在有一个婴儿在出生后医院为他保留了脐带血，在以后他生长发育过程中如果出现了某种难治疗的疾病，就可以通过血液中的干细胞来为其治病，关于这个实例说法正确的是（ ）
A．用干细胞培育出人体需要的器官用来移植治病，需要激发细胞的所有全能性 B．用脐带血中的干细胞能够治疗这个孩子所有的疾病
C．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，需要用到细胞培养技术
D．如果要移植用他的干细胞培育出的器官，应该长期给他使用免疫抑制药物 41．（10江苏生物）下列关于利用胚胎工程技术繁殖优质奶羊的叙述，错误的是（ ） A．对受体母羊与供体母羊进行同期发情处理
B．人工授精后的一定时间内，收集供体原肠胚用于胚胎分割 C．利用胚胎分割技术可以获得两个基因型完全相同的胚胎
D．一次给受体母羊植入多个胚胎，可增加双胞胎和多胞胎的比例 42．（10江苏生物老年痴呆症患者的脑血管中有一种特殊的β一淀粉样蛋白体，它的逐渐积累可能导致神经元损伤和免疫功能下降，某些基因的突变会导致β一淀粉样蛋白体的产生和积累。下列技术不能用于老年痴呆症治疗的是（ ） A．胚胎移植技术 B．胚胎干细胞技术 C．单克隆抗体技术 D．基因治疗技术
43．当卵细胞达到（ ）时期时，才具备与精子受精的能力
A.减数第二次分裂后期 B.减数第一次分裂末期
C.减数第二次分裂中期 D. 减数第二次分裂结束成熟44（08江苏生物，6，2分）动物和人体内具有分裂和分化能力的细胞称为干细胞。对下图的相关叙述中，错误的是（ ）
A．a过程表示干细胞能自我更新
B．b、c过程表示干细胞具有分化能力
C．a、b、c过程中细胞的遗传信息表达情况不同
D．b过程形成的细胞直接组成器官，可供器官移植使用 45．（10苏北四市二模，13）右图是某生态工程示意图，有关说法错误的是（ ） A．用玉米的副产品玉米芯生产木糖醇，可增加经济效益 B．用残渣来培育食用菌和蛆蛹，实现了物质的多级利用 C．用蛆蛹粪便作为有机肥还田，运用了能量循环再生的原理 D．该生态工程的运转离不开人的管理 46．（08广东生物，16，2分）要实现人与自然的和谐发展，下列措施最合理的是（ ）
A．通过生物技术手段，转化淀粉生产可再生能源 B．使用化学农药防治病虫害，保证粮食稳产 C．发展生态农业，实现物质和能量的多级利用 D．大力开垦湿地，扩大粮食种植面积 47．（07广东生物，16，2分）“猪一沼一茶”是华南山地丘陵地区常见的生态农业模式，由种植（茶树）、养殖（猪）、农户（人）和沼气生产（微生物）四个子系统构成。该生态农业模式（ ）
A．是由茶树、猪、人和微生物组成的生态系统 B．实现了物质和能量在系统中的多级循环利用 C．使整个生产过程进人了废物资源化的良性循环 D．注重系统内部的自身调节作用，不需要外部投人 48．（07重庆理综，1，6分）稻—鸭—萍共作是一种新兴的生态农业模式，其中，水生植物红萍（满江红）适生于荫蔽环境，可作为鸭子的饲料，鸭子能吃有害昆虫并供肥，促进水稻生长，对以此模式形成的生态系统，下列叙述错误的是C
A．该生态系统的主要功能是物质循环和能量流动 B．鸭子既是初级消费者，又是次级消费者
C．生物群落由水稻、红萍、鸭子和有害昆虫组成 D．水稻和红萍分层分布，能提高光能利用率 49．（07四川理综，3，6分）在社会主义新农村建设中，四川某地通过新建沼气池和植树造林，构建了新型农业生态系统（如图所示）下列有关叙述不正确的是C
沼 渣 沼 液 作
肥
A
B．该生态系统中，人的作用非常关键，植物是主要成分 C．该生态系统的建立，提高了各营养级间的能量传递效率 D．沼气池的建造和植树造林，提高了该生态系统的稳定性
50．我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达，培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是（ ）
A．抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体
B．重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C．抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染
D．转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
51．为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
（2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为______个和_____个。
（3）根据表中数据，请在下图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和______________序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化_________键的形成。 52．（10扬州市四模，30）（8分）土壤农杆菌是一种能引起双子叶植物产生冠瘿瘤的土壤细菌，它带有一个大的质粒叫Ti质粒（含冠瘿瘤基因），它携带细菌DNA向宿主植物基因组转化所需信息的重要片段，只有T—DNA片段才转入植物细胞的基因组。结构及转化过程如图所示，回答相关问题。
（1）若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，为了使某种植物具有抗旱性状而又不引起植物产生冠瘿瘤，需对Ti质粒进行修饰，即 ，将抗旱基因转移至Ti质粒的 中，且要保证复制起始位点和 不被破坏。然后在一定条件下将外植体在含有 的土壤农杆菌的稀释培养基上培养，使得抗旱基因转入植物细胞并整合到植物基因组中。 （2）将上述外植体置于一个含有某种抗生素的合适培养基中进行筛选，发生转化的外植体通过 形成愈伤组织，再通过 产生不定芽和体细胞胚再长出整个植物。
（3）基因转化是否成功应对转基因植物进行鉴定，如果培育成的植株能适应干旱环境，还应进行 水平鉴定，以确定该变异能否遗传给后代。为获得纯合的转基因植株，还需要对转基因植株进行严格的 。 53．（10苏北四市三模，9）（7分）某研究小组进行了甲型H1N1流感病毒的疫苗研制工作，
（1）实验步骤①所代表的反应过程是 ；在步骤②之前扩增H基因常采用的方法与体内DNA复制相比，反应体系需加入 种引物和 。
（2）某志愿者接种甲型H1Nl流感疫苗后，第15天感染甲型H1N1流感病毒，则体内细胞将迅速增殖分化形成 细胞，从而产生大量抗体。
（3）机体能合成数百万种特异性抗体，抗体种类如此多的原因是其结构中的 。
（4）在炎热的夏季，山西某地在未执行冷藏要求的情况下运输甲型H1N1流感疫苗，结果导致给学生注射的甲型H1N1流感疫苗无效，请分析疫苗失活的主要原因是 。 54．（10苏北四市二模，29）（8分）应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：
资料1：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度。可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
资料2：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦。将疫苗藏身水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。
（1）过程①⑤所需要的工具酶有 ，构建的蜘蛛丝蛋白基因表达载体一般由 、 、启动子、终止子等部分组成。
（2）过程②将重组质粒导入山羊受体细胞时，采用最多也最有效的方法
是 。
通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。
（3）如果将过程③获得的早期胚胎进行如图分割，则操作正确的是 。
（4）通过⑤⑥⑦培育转基因莴苣，相比诱变育种和杂交育种方法，具有 和 等
突出优点。
55．（10南通市三模）（7分）2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”
获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：
含重组质粒的土壤农杆菌 （1
）④过程应用的主要生物技术是
。 （
2）杀虫基因（crylA）是人们根据几种
Bt
毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于 工程技术范畴。 （3）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制性内切酶作用位点），据图分析：
①人工改造时，要使抗虫基因表达，还应插入____________。
②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的是：第一，去除质粒上的 （基因），保证
T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长；第二，使质粒带有单一限制酶作用
位点，有利于___________。第三，使质粒大小合适，可以提高转化效率等。 ③若用限制酶Ⅰ分别切割改造过的理想质粒和带有抗虫基因的DNA分子，并构成重组Ti质粒。分别以含四环素和卡那霉素的培养基培养已成功导入抗虫基因的水稻胚细胞，观察到的细胞生长的现象是 。
（4）若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的粘性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是 。 56．（10盐城市三调）（8分）科学家将外源目的基因与大肠杆菌的质粒进行重组，并在大肠杆菌中成功表达。下图表示构建重组质粒和筛选含目的基因的大肠杆菌的过程。请据图回答：
（1）步骤①和②中常用的工具酶是 。 （ 2）经过①和②步骤后，有些质粒上的 基因内插入了外源目的基因，形成重组质粒。 （3）步骤③是 的过程。为了促进该过程，应该用 处理大肠杆菌。 （4）步骤④：将三角瓶内的大肠杆菌接种到含四环素的培养基C上培养，目的是筛选 。能在C中生长的大肠杆菌有 种。
（5）步骤⑤：用无菌牙签挑取C上的单个菌落，分别接种到D（含氨苄青霉素和四环素）和E（含四环素）两个培养基的相同位置上，一段时间后，菌落的生长状况如图所示。含目的基因的菌落位于（选填“D”或“E”） 上，请在图中相应的位置上圈出来。 57．（10天津理综，7I，14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。 据图回答： （1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行。
（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是 （填字母代号）。 A．启动子 B．tetR C．复制原点 D．ampR （3）过程①可采用的操作方法是 （填字母代号）。
A．农杆菌转化 B．大肠杆菌转化 C．显微注射 D．细胞融合
（4）过程②可采用的生物技术是 。
（5）对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的 性。 （6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 （填字母代号）技术。
A．核酸分子杂交 B．基因序列分析 C．抗原—抗体杂交 D．PCR
58．（10江苏生物，27，8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 个游离的磷酸基团。 （2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。 （3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 。 （4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。 （6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。 59．（10福建理综，32，10分）红细胞生成素（EPO）是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素（rhEPO）期间要生产流程如右图。 （1）图中①所指的是 技术。
（2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。 （3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。
（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细59、胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成 60．（10南通二模）（8分）在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组
注：愈伤组织诱导率（%）＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%
（1）从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的
有利于食用稗胚形成愈伤组织，而添加 则不利于食用稗胚愈伤组织的形成。
（3）影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。 实验步骤：
①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到 培养基上；② ； ③ 。
预期实验结果和结论： 。 61、（10苏北四市二模，27，6分）下图为单克隆抗体制备流程示意图。
（1）单克隆抗体制备技术的基础是 。
（2）细胞融合是随机的过程，在HAT培养基中培养，目的是 。在细胞
培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的 ，以保证生命活动的正常进行。
（3）为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞／mL，每孔滴入0.1ml细胞稀释液，其目的是 。 （4）若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是 。 62．（07安徽省六校四月高三联合考试，30）（20分）美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱，并顺利移植到7名患者体内。
其培育过程是：从患者的膀胱上取下普通邮票一半大小的活细胞样本，膀胱从外到内是由三层构成，即肌肉、胶原质和膀胱上皮。研究人员将活细胞样本中胶原质剥下，将肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养，约一周后将这些细胞放在一些海绵形状的可生物降解的由胶原质制成的“支架”上继续培养，再过7周左右，原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右，布满“支架”，膀胱上皮在内，肌肉在外。医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面。这样新器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分。培育过程如下图所示：
根据以上资料回答下列问题：
（1）a过程属于细胞工程中的 ，与植物组织培养的培养基相比，其培养基的主要不同点是含有 。该过程属于 代培养。从患者的膀胱上取下的活细胞样本，在培养之前，需用 酶处理，以分散细胞。
（2）b过程由数万个细胞繁殖到15亿个细胞是 的结果，由这些细胞再形成肌肉和膀胱上皮的过程要经过 。
（3）新器官与老器官的“重组”是否会导致基因重组？为什么？ ； 。 （4）“新膀胱”移植后，是否会引起免疫反应？为什么？ 。 63．（11分）现有甲乙两种可能有一定致畸、致癌作用的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性，并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的 身份参与此项研究，完成下列实验报告，并回答有关问题。 Ⅰ、实验材料：活的小白鼠胚胎。
Ⅱ、药品用具：胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、光学显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片。 Ⅲ、实验原理：_______________________， 根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数（以下称Q值），可判断该化学物质的毒性。 Ⅳ、实验步骤：
（1）制备细胞悬浮液：
把活的小白鼠胚胎放入在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。 （2）进行细胞培养：
①取A、B、C三个洁净的培养瓶，_____________________。
②向A、B两培养瓶中分别加入等量的化学物质甲、乙，并将培养瓶摇匀。C瓶不作处理，作为对照。
③_____________________。 （3）制作临时装片：
①当细胞繁殖到大约第8代左右时，同时从恒温箱中取出三个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，使培养的细胞从瓶壁上脱落，再加入动物细胞固定液以迅速杀死细胞并固定细胞分裂相。 ②静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的悬浮液。滴在与培养瓶有相同编号的 载玻片的中央，________________，3～5min后，盖上盖玻片，制成临时装片。 （4）镜检和统计：
把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于__________期的细胞，并与 ________________对比以确认发生上述变异的细胞，同时统计该期变异的细胞占该细胞总数的百分数（Q值）。 V、结果与结论：
经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：QA=1.3％、QB=12.5％、QC=0.1％，由此可知该实验的结论是____________________________________________。 64.（10全国新课标，40，15分）请回答：
（1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 。离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 。 （2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免 的污染。
（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ，而与 配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是 (脱落酸、2
，
4-D)。 （4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势是 。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满足自身最佳生长的需要。
（5）据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。 65．（09山东理综）人参是一种名贵中药材，其有效成分主要是人参皂苷。利用细胞培养技术生产人参皂苷的大致流程如下：
接种前，要对人参根进行 。
（2）用于离体培养的根切块，叫做 。培养几天后发现少数培养基被污染，若是有颜色的绒毛状菌落，属于
污染；若是有光泽的黏液状菌落，属于 污染。
（3）用少量 酶处理愈伤组织，获取单细胞或小细胞团，在液体培养基中进行悬浮培养，可有效提高人参皂苷合成量。
（4）人参皂苷易溶于水溶性（亲水性）有机溶液，从培养物干粉中提取人参皂苷宜选用 加热。 66、（09山东理综）人类在预防与诊疗传染性疾病过程中，经常使用疫苗和抗体。已知某传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，且疾苗生产和抗体制备的流程之一如下图：
请回答：
（1）过程①代表的是 。
（2）过程②构建A基因表过载体时，必须使用 和 两种工具酶。 （3）过程③采用的实验技术是 ，获得的X是 。
对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的 所制备的疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以疑似患者体内分离病毒，
与已知病毒进行 比较；或用图中的 进行特异性结合检测。 67．（08海南生物，25，18分）某二倍体植物是杂合体，图为其花药中未成熟花粉在适宜的
（1）图中①表示的是该花粉培养过程中的 过程，②表示的是 过程，X代表的是过程，④表示的是诱导 （2）图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过那一条途径主要取决于培养基成分中 的种类及其浓度配比，最后获得的来源于为成熟花粉的完整植株都称为植株（甲）。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明为成熟花粉具有 。（3）对植株进行 ，才能使其结实产生后代（乙），否则植株甲只有通过 的方式才能产生后代（丙）。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是 植株，该植株群体中每一植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种，该群体植株产生可育花粉的基因组成种类数为 种。花药培养在育种上的特殊意义是 ，从而开辟育种新途径。 68、（2009海南生物，26，18分）请回答下列与哺乳动物精子和卵子发生有关的问题： （1）精细胞经变形后，高尔基体发育形成精子的顶体，顶体内含有的过卵母细胞的放射冠和透明带。
（2）某动物排卵时，减数第一次分裂尚未完成，此时卵子处于卵母细胞阶段，当该细胞发育至减数第二次分裂 期时，才具备受精能力。若在卵黄膜和透明带之间看到两个极体，则表明 过程已完成。 （3）动物的早期胚胎移植到同种且与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。为了获得更多的早期胚胎，常用 激素对供体进行处理，其目的是获得更多的 ，经人工受精后可得到早期胚胎。用某染料鉴定胚胎细胞是否为活细胞时，发现活胚胎细胞不能被染色，其原因是活细胞膜 。
（4）若要通过胚胎移植获得遗传物质完全相同的两个新个体，可对发育到桑葚期或囊
胚期阶段的早期胚胎进行 处理，再植入到受体内。若要对早期胚胎进行长期保存，应将其置于 条件下。
69、2010广东深圳3月）牛胚胎移植的基本程序如图，请据图回答： 供体母牛 受体母牛
a
供体 分娩（胚胎移配种 b 质量检查、培养c
公牛 植的犊牛） （1）图中a、b、c过程分别是指
（2）供体母牛的主要职能是。
（3）为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是；理由是 。
（4）从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有 。
（5）你认为胚胎移植技术在生产实践中的主要意义有哪些。 70．（11分）自然界有一种含有叶绿体的原生动物――眼虫，这说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活。某同学提出问题“动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？”他尝试设计出下列具体的实验方案。请你据所学知识，并结合题给信息完善该实验设计方案，并回答相关问题。
植物材料
↓
诱导出
愈伤组
↓
除去细胞壁，得到原生质动物胚胎细胞
培
融合的胚胎细胞培 ↓
分裂形成胚
↓
将胚胎移植到动植物杂
代孕母体的子交种出生实验原理：根据绿眼虫的特点，动物细胞和植物细胞之间在理论上是可以实现杂交的。
实验步骤设计如下：
（1）①中所选植物材料的细胞中，必须有的细胞器是 。 （2）③过程所用的酶是 。 （3）④过程除了用电刺激之外，还可以用 等做诱导因素。
（4）⑤过程动物细胞体外培养需要满足的条件是 （至少答出2种）。
（5）你认为该动植物杂种细胞应该 （有或没有）细胞壁，理由是 。 71．（10南通二模）（8分）下图表示利用胚胎干细胞（ES细胞）所作的一系列研究，请据图分析回答：
（1）过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上，并加入动物血清、抗生素等物质，维持细胞不分化的状态。在此过程中，饲养层提供干细胞增殖所需的___________，加入抗生素是为了___________________，这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义。
（2）过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔，通过组织化学染色，用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素，这项研究利用了胚胎干细胞具有______________的特点。在哺乳动物早期发育过程中，囊胚的后一个阶段是_________。 （3）过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是 ，将获目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体，其目的是____________________。
（4）过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等人类组织和器官。实验时，必须用X射线照射去除胸腺的小鼠，获得免疫缺陷小鼠，其目的是________ _________________________________，该过程研究的意义在于解决___________问题。 72．（10南京三模，7分）胚胎工程技术包含的内容很丰富，下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：
（1）应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于 ，为一次获得多个细胞B，往往需要向供体2内注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是 。
（2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是 。
（3）通过应用2获得小牛，涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是 。 （4）应用3中的细胞D取自囊胚的 ，细胞C取自牛胎儿的 。 （5）应用4中获得二分胚①和②，移植到受体牛中得到两只小牛，两只小牛的性别是 。 73、．（10盐城市三调）（8分）广西省水牛研究所科研人员利用克隆胚胎冷冻技术，使一头杂交母水牛顺利产下一头冷冻胚胎移植的体细胞克隆雌性水牛犊，取名“盼盼”，它的出生经历了一个严密复杂的科学操作过程（如下图所示）：
（1）当克隆牛“盼盼”性成熟后进行减数分裂，其初级卵母细胞内可以形成 个四分体。 （2）①、④过程主要采取 技术才能获得细胞群或囊胚，此时在培养液中常加入一定量的二氧化碳，其目的是 。③过程中常用方法是 。
（3）根据专家介绍，水牛克隆胚胎冷冻技术的研究成功，有利于水牛克隆技术的推广应用，其重要意义在于 （答出一点即可）。 74．（9分）2002年，我国自主完成的首批成年体细胞克隆牛在山东陆续降生。克隆牛有3个母亲，A牛提供细胞核即供体细胞，B牛提供去除细胞核的卵细胞即受体细胞，两种细胞在电脉冲的刺激下融合之后，通过细胞分裂形成早期胚胎，再将这个胚胎植入C牛子宫内。请回答下列问题： （1）培育出的克隆牛几乎是 牛复制品。这是因为控制牛性状遗传的物质主要存在于 中。
（2）如果多个供体细胞来自同一头牛，培育的这些牛性状上也不完全相同，请分析其原因：
① ② ③
在体细胞克隆技术出现之前，育种工作者已经开始采用胚胎分割移植方法来尽快繁育更多的优质牛。这种育种技术的主要步骤是：将经过人工受精得到的受精卵在试管内培养到8个细胞的胚胎时，进行胚胎分割，均分为4份，再分别移植到多头母牛的子宫内发育、分娩，就能得到多头所需要的小牛。
（3）胚胎分割移植要在受精卵培养到8个细胞的卵裂期前（包括8个细胞）进行，其主要原因是： 。
（4）通过胚胎分割移植培育出的这些小牛，其性别表现为 。 A．雌雄的可能性各占50%
B．全为雌性或全为雄性 C．全为雌性 D．全为雄性
（5）而通过体细胞克隆技术培育出的小牛，其性别则取决于 。这样人们就可以根据需要，有目的地控制小牛的性别。
（6）小牛出生后会跟随它看到的第一个大的行动目标行走，这种行为被称为 。 75．（10山东理综，35，8分）胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术，可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。
良种母牛采集
培养 A 分娩
良种公牛采集 精子（1）从良种母牛采集的卵母细胞，都需要进行体外培养，其目的是_____；从良种公牛采集的精子需_____后才能进行受精作用。
（2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供____气体以维持____。
（3）图中过程A称为_____，它在胚胎工程中的意义在于_____。
（4）研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器，需将目的的基因导入牛受精卵，最常用的导入方法是____；获得转基因母牛后，如果_____即说明目的基因已经表达。 76．（09四川理综，30I，12分）将小鼠胚胎干细胞定向诱导分化成一种特定的细胞（命名为M细胞），再将M细胞移植到糖尿病模型小鼠（胰岛细胞被特定药物破坏的小鼠）体内，然后小鼠的血糖浓度，结果如图所示（虚线表示正常小鼠的血糖浓度值）。请回答相关问题：
（1）实验用的胚胎干细胞取自小鼠的早期囊胚，取出胚胎后一般用 酶将其分散成单个细胞。 （2）根据实验结果可以判定M细胞已具有 细胞的功能。说明判定的理由 。
（3）用胰岛素基因片段做探针，对小鼠胚胎干细胞和M细胞进行检测。请在下表的空格中
上述实验结果表明，胚胎干细胞通过 定向分化为M细胞。
（4）若将M细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，重组细胞能否分化为其他类型细胞？ ，请说明理由 。 77．（09宁夏理综，41，15分）右图为哺乳动物的胚胎干细胞及其分化的示意图。请回答： （1）胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_________期的内细胞团或胎儿的_____中分离得到的一类细胞。 （2）图中分化程度最低的干细胞是______。在体外培养条件下，培养液中加入___因子，可诱导该种干细胞向不同类型的组织细胞分化。
（3）在机体内，皮肤干细胞分化成皮肤细胞是机体细胞中基因___________的结果。
（4）某患者不能产生正常的白细胞，通过骨髓移植
可以达到治疗的目的，骨髓的治疗的实质是将上图的______________细胞移植到患者体内。 （5）若要克隆某种哺乳动物，从理论上分析，上述红细胞、白细胞神经细胞中不能选用作为供体的细胞是成熟的___________，其原因是___________。
（6）若某药物可抑制肝肿瘤细胞NDA的复制，使用该药物可使肝肿瘤细胞停留在细胞周期的______________期。
（7）在制备单克隆抗体过程中的细胞融合阶段，用__________细胞与骨髓细胞融合，经多交筛选最终得到能分泌__________________的杂交瘤细胞。 78．（08江苏生物，34B，6分）下面是以小鼠为对象进行的研究工作，请分析回答问题。 （1）进行小鼠胚胎工程操作时，首先在光控周期下（光照14h，黑暗10h）饲养成年雌鼠，并注射促进性腺激素，目的是 。然后从雌鼠输卵管中取出卵子，在一定条件下培养成熟；并从雄鼠附睾中取出精子，在一定条件下培养一段时间，目的是 。再在37℃，5%CO2条件下，精卵共同作用4h，冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化，第5天右以看到胚胎发生收缩，细胞间隙扩大，接着胚胎内部出现裂隙，这是胚胎
（2）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是 。
（3）如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中，由重组细胞发育成小鼠丙，则小鼠丙的基因来源于 。
（4）如果将外源基因导入小鼠受精卵，则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因 。 79．（10南通市三模）（7分）生态农业建设是建设社会主义新农村的重要内容之一。下面是两种生态农业模式：
模式1 鸡－猪－鱼立体养殖模式：一亩鱼池配6～8头猪，100～120只鸡，鱼池中各种鱼的比例大致为：花白鲢占20%，草鱼占40%，鲤鱼、鳙鱼占40%，每亩投放鱼苗4500尾。每天从鸡舍中收集新鲜的鸡粪晒干，经初步发酵后混入一定量饲料喂猪，猪粪喂鱼。
模式2 “四位一体”生态模式：以太阳能为动力，以沼气为纽带，将日光温室、沼气池、蔬菜种植和温室养猪相结合的一种新的农业生产模式。 请分析回答有关问题：
（1）在模式1中，必须注意某种鱼的投入数量，不宜超过该鱼在生态系统中的__________。鱼塘中不同鱼类生活在不同水层，体现了生物群落在垂直结构上具有____________的现象。 （2）右图表示是某池塘中鲢鱼平均尾重变化情况，由曲线可知，生物体的生长呈_____型曲线，根据图示结果，最佳捕捞时间是在投放后的_______个月左右。
（3）模式2中，光能输入生态系统的途径是_________，沼气池中的产甲烷杆菌在生态系统中属于________（成分）。
（4）建立以沼气为中心的“四位一体”生态工程主要遵循的生态工程原理是 。 80．（08江苏生物，26，8
分）江苏某农户创建的冬季生态型种植养殖模式如下图所示，请据
图回答下列问题。
（1）牛棚内产生的_________可扩散进入蔬菜大棚，提高蔬菜大棚，提高蔬菜的光合效率；蔬菜光合作用产生的__________可扩散进入牛棚。
（2）秸杆除了作为牛的饲料外，还可与牛粪混合堆入进行___________，腐熟的产物肥效提高，这是因为
。这种肥料用于蔬菜栽培可以提高蔬菜产
量。
（3）在牛的品系、饲料品种和用量不变的条件下，采用这种养殖模式，牛的生长速率明显提
高，其主要原因是 。
（4）牛棚保温所需的热能来源于牛身散热、地热、___________和__________。
（5）从生态系统主要功能的角度分析，这种种植养殖模式较好地实现了 。
81．（10苏北四市三模，9）（8分）人血中提取的血清白蛋白在临床上需求量很大，由于人类
免疫缺陷病毒（HIV）等病原体造成的威胁与日俱增，使人们对血液制品顾虑重重。通过一
定的生物工程技术，将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白
蛋白就成为可能。大致过程如下：
a．采集良种供体奶牛的卵母细胞和精液，通过体外受精形成受精卵，进行体外培养形成胚胎，
然后再选出雌性奶牛胚胎供进一步使用。
b．将人体血清白蛋白基因导入雌性奶牛胚胎细胞，形成细胞①；
c．取出细胞①的细胞核，注入去核奶牛卵细胞中，形成细胞②；
d．电脉冲刺激细胞②促使其形成早期胚胎；
e．将早期胚胎移植到母牛的子宫内，最终发育成转基因小牛。
请回答下列问题：
（1）一般情况下，良种奶牛所产生的能用于体外受精的卵母细胞数量很少，往往给雌牛注射 激素，使其超数排卵。
（2）采集的精子必须经过 作用，才能进行受精作用。
（3）细胞①和②中 （①、②）实现了基因重组。
（4）在实验过程a中要选择“雌性奶牛胚胎”的原因是 。
（5）运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞（ES细胞），培养过程
如下：早期胚胎→内细胞团→胚胎干细胞。在培养过程中，必须用 处理内细胞团，
使之分散成单个细胞。胚胎干细胞的结构特点是 。若想获取更多的基因型相同
的小牛，应采取 技术。在培养动物细胞时，培养液中加抗生素的目的是 。
1-5DCCAA 6-10DDDCD 11-15ADBCB 16-20BABBB 21-25BACBD 26-30CBCCA 31-35BADDC 36-40DBDDC 41-45BACDC 46-50 CCCCD 51、答案8．（1）对照（单一变量） （2）3 2 （3）
（4）GGATCT//CCTAGA 磷酸二酯键 52、（8分）（1）祛除瘤基因 T—DNA 用于转移T—DNA的基因片段 重组Ti质（2）脱分化 再分化 （3）DNA 自交 53．（7分）（1）逆转录 2 耐热的DNA聚合酶 （2）记忆 效应B（浆）（3）氨基酸种类、数目和排列次序不同，形成的空间结构不同 （4）高温导致疫苗蛋白质的变性或失活 54．（每空1分，共8分）
（1）限制酶、DNA连接酶 目的基因 标记基因（2）显微注射法 乳汁（3）B （4）目的性强 克服远缘杂交不亲和性（或能有效地打破物种的生殖隔离界限） 55．（8分）（除注明的外，其余每空1分） （1）植物组织培养（2）蛋白质（3）①启动子
②tms和tmr（2分） 目的基因（或外源DNA）准确插入
③在含卡那霉素的培养基能够生长，而在含四环素的培养基中不能生长（4）GACGTC 56．（8分）（1）限制性核酸内切酶、DNA连接酶 （2）氨苄青霉素抗性 （3）将重组质粒（目的基因）导入大肠杆菌（受体细胞） CaCl2溶液 （4）含四环素抗性基因的大肠杆菌（含抗性基因的大肠杆菌给分，但回答含目的基因的大肠杆菌不给分） 2 （5）E （在两个菌落中圈一个也可给1分）
57、答案：（14分）（1）HindⅢ和BamHⅠ；氨苄青霉素（2）A（3）C（4）胚胎移植技术（5）全能（6）C 58、【答案】（1）0、2 （2）高
（3）SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因 （4）质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化 （5）DNA连接
（6）鉴别和筛选含有目的基因的细胞
（7）蔗糖为唯一含碳营养物质 59、答案：（1）PCR （2）mRNA rhEPO （3）培养液 （4）杂交瘤 60、60、答案：39．（8分） （1）2，4－D 6－BA
（2）①L3 ②甲组置于光照条件下培养，乙组置于黑暗条件下培养，其它条件相同且适宜；③培养一段时间后，分别计数甲、乙两组中形成愈伤组织的个数并计算愈伤组织诱导率。 预期实验结果和结论：①如甲组的愈伤组织诱导率大于乙组的愈伤组织诱导率，则光照有利于愈伤组织的形成；②如甲组的愈伤组织诱导率小于乙组的愈伤组织诱导率，则黑暗有利于愈伤组织的形成；③如甲组的愈伤组织诱导率和乙组的愈伤组织诱导率相当，则光照、黑暗对愈伤组织的形成没有影响 61、答案：27．（6分）
（1）动物细胞培养 （2）筛选杂交瘤细胞 种类和数量（浓度）
（3）使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的（或单一细胞培养以保证抗体的纯度）
（4）核糖体、内质网、高尔基体、细胞膜（2分）
62、答案： （1）动物细胞培养 动物血清等 原 胰蛋白酶原 （2）细胞分裂 细胞分化
（3）不会 新器官与老器官“重组”遗传物质未改变，没有发生基因重组 （4）不会 用于移植的膀胱是由接受移植者的体内细胞培育产生，HLA抗原相同 63答案：42．（11分）
Ⅰ．有毒物质加入细胞培养液后，培养的动物细胞会发生染色体结构和数量变异（2分） Ⅳ．（2）①分别加入等量的细胞悬浮液（2分） ③把三个培养瓶放在37℃（或适宜温度）的恒温箱中培养
（3）②加1～2滴适宜浓度的龙胆紫溶液染色（2分） （4）有丝分裂中 小白鼠正常体细胞有丝分裂高倍显微镜照片 Ⅴ．甲乙两种化学化学物质均有毒性，且乙的毒性比甲的毒性大（2分 64答案：（1）遗传特性 快 遗传信息 （2）微生物 （3）生根 细胞分裂素 2，4-D （4）逐渐减小 先增加后下降 不能 （5）降低 65、答案：（1）灭菌 消毒 （2）外植体 真菌（霉菌） 细菌 （3）果胶 （4）萃取 水浴 66、答案：（1）逆转录
（2）限制性核酸内切酶（限制酶、限制性内切酶） DNA连接酶（两空可以互换） （3）细胞融合 杂交瘤细胞
（4） A蛋白 核酸（基因）序列 抗A蛋白的单克隆抗体 67、答案：25．（18分）（1）脱分化 再分化 胚状体 分化（或发育） 生根（每空1分，共5分）
（2）激素 单倍体 细胞的全能性（每空2分，共6分）
（3）染色体加倍（其他合理答案也给分） 无性生殖
乙（或经过染色体加倍） 一 多 缩短育种周期（ 68、答案：（1）顶体酶（2）初级 中 受精（3）生理状态 促性腺 卵母细胞 对物质的吸收具有选择透过性 （4）胚胎分割 冷冻（或液氮）
69、答案：（1）超数排卵 冲卵 胚胎移植（2）只产生具有优良遗传特性的胚胎 健康的体质和健康的繁殖能力 （3）胚胎分割移植 桑椹胚或囊胚期 此时还未出现细胞分化（4）体积小、细胞核大、核仁明显（5）胚胎移植技术可以加快优良种畜的繁殖速度，迅速推广新品种
70、答案：（11分）（1）叶绿体（2）纤维素酶和果胶酶（3）灭活的病毒、聚乙二醇（振动、离心等）（4）无菌、无毒的环境，营养，温度，pH，气体环境（5）没有 因为胚胎在母体子宫中完成胚胎发育 71、答案：（8分）（1）营养物质 防止杂菌污染（2）发育的全能性 原肠胚
（3）显微注射法 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以传给下一代，同时，使目的基因能够和发挥作用（4）去除胸腺，不能形成T细胞，不发生细胞免疫，使移植组织细胞不会被排斥 临床上供体器官不足和器官移植后免疫排斥等 72、答案：（7分）（1）供体1和供体2 注射一定量的性激素后会抑制下丘脑和垂体的活动，从而导致相关激素分泌量下降，进而引起自身性激素分泌量减少，影响排卵
（2）诱导精子获能（3）胚胎移植 （4）内细胞团 生殖腺（原始性腺 （5）雌性或雄性 73、答案：34．（8分）（1）25（2分）（2）动物细胞培养 调节培养液的pH 显微注射（2分）（3）在世界范围内使胚胎移植不受时空限制；建立胚胎库，保存品种资源和濒危物种等 74、答案：（9分）（1）A （供核牛） 细胞核
（2）①不同的环境条件可能形成不同的性状（环境条件不同） ②在培育过程中可能产生基因突变（基因突变） ③不同受体细胞中的线粒体带有不同的基因，（其他答案合理也可给分）
（3）此时细胞分化程度很小，细胞容易表达全能性，此时动物细胞具有全能性（分化一词不答不给分）
（4）B（5）供体细胞（提供细胞核的一方）。（6）印随（ 印随学习） 75、答案：（1）使卵母细胞成熟（或使卵母细胞获得受精能力）； 获能 （2）CO2； 培养液（基）的pH
（3）胚胎移植 提高优良母畜的繁殖率。
（4）显微注射法 牛奶中含有人类白细胞介素（或：牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素） 76、答案：（12分） （1）胰蛋白酶（1分）（2）胰岛B（1分）
胰岛B细胞分泌的胰岛素是唯一降血糖的激素（3分） （3）基因的选择性表达（胰岛素基因的表达）（2分）
（4）能（1分）
细胞核含有该物种所特有的全套遗传物质（细胞核的全能性）（2分） 77、答案：（1）囊胚 原始性腺细胞 （2）胚胎干细胞 分化诱导
（3）选择性表达 （4 )造血干 （5）红细胞 细胞中无细胞核 （6）间 （7）B淋巴 特异性抗体 78、答案：（1）促进排卵（或超数排卵） 使精子获能 囊胚 （2）容易获得纯合子并缩短育种时间 （3）小鼠甲（体细胞）的核基因和小鼠乙（卵细胞）的细胞质基因 （4）外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达 生态工程 79．（7分）（每空1分）
（1）环境容纳量 分层（2）S 8
（3）生态系统中的主要生产者只能利用光能 分解者（4）物质循环再生 80、答案：（1）二氧化碳 氧气 （2）发酵 微生物将有机物分解为无机物 （3）牛棚内温度较高因而牛维持体温消耗的能量较少 （4）太阳光能 发酵产热 （5）物质的循环利用和能量的高效利用 81、答案：34．（8分）（1）促性腺激素 （2）获能 （3）①
（4）雌性转基因牛进入泌乳期后，可以从其乳汁中获得血清白蛋白
（5）胰蛋白酶 细胞体积小，细胞核大，核仁明显 胚胎分割移植 防止细菌污染