非无菌产品微生物限度检查用培养基
适用性验证
文件编号：XXXX
目 录
1.验证目的„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 2.参照标准„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 3.验证项目„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 4.验证工作小组及职责„„„„„„„„„„„„„„„„„1 5.试验材料„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2 6.试验过程„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 7.验证周期„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4 8.附件„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4
1、验证目的：
需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数用培养基应进行培养基的适应性检查，本次验证的目的是为了确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基适合需氧菌总数计数、霉菌和酵母菌总数计数的测定。 2、参照标准：《中国药典》2015年版四部
3、验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基适用性验证 4.验证小组及职责 4.1 验证小组
4.2 验证职责
5.试验材料
5.1验证所用培养基：
5.2验证用菌株培养
5.2. 仪器设备：
5.2.1. XXXXX立式压力蒸汽灭菌器 5.2.2.XXXX水平流净化工作台 5.2.3.XXXXXX干燥箱
5.2.4.XXXXX型霉菌培养箱 (20～25℃) 5.2.5. XXXXX电热恒温培养箱(30～35℃) 5.3. 稀释剂： 0.9%无菌氯化钠溶液 6.试验过程 6.1菌液制备
取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培
养物，加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。
菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2〜8℃，可在24小时内使用。 6.2、适用性检查 培养基适用性检查
取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的菌悬液与黑曲霉的孢子悬液（均不大于100cfu），分别注入无菌平皿中，立即倾注适用性检查的胰酪大豆胨琼脂培养基，用于检查胰酪大豆胨琼脂培养基的需氧菌总数计数适用性。其中，接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的培养皿于30-35℃培养，时间不超过3天。接种白色念珠菌与黑曲霉的孢子的培养皿于30-35℃培养，时间不超过5天。
取白色念珠菌的菌悬液与黑曲霉的孢子悬液（均不大于100cfu），分别注入无菌平皿中，立即倾注适用性检查的沙氏葡萄糖琼脂培养基，用于检查沙氏葡萄糖琼脂培养基的霉菌和酵母菌总数计数适用性。培养温度为20-25℃，培养时间不超过5天。
上述每一试验菌株平行制备两个平皿，同时用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述实验。 阴性对照
为确认试验条件符合要求，同时进行培养基阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。
6.3、结果判定：若被检培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5-2范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致，则判该培养基适用性检查符合规定。
7 验证周期
同种培养基的不同批号，不同生产厂家均应进行适用性验证 8 附件
8.1 《需氧菌总数计数培养基适用性试验记录》 8.2《霉菌和酵母菌总数计数培养基适用性试验记录》 8.3《微生物检查用培养基适用性验证报告书》
需氧菌总数计数培养基适用性试验记录
霉菌和酵母菌总数计数培养基适用性试验记录
非无菌产品微生物限度检查用培养基适用性验证报告书
非无菌产品微生物限度检查用培养基
适用性验证
文件编号：XXXX
目 录
1.验证目的„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 2.参照标准„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 3.验证项目„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„1 4.验证工作小组及职责„„„„„„„„„„„„„„„„„1 5.试验材料„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„2 6.试验过程„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„3 7.验证周期„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4 8.附件„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„„4
1、验证目的：
需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数计数用培养基应进行培养基的适应性检查，本次验证的目的是为了确认胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基适合需氧菌总数计数、霉菌和酵母菌总数计数的测定。 2、参照标准：《中国药典》2015年版四部
3、验证项目：胰酪大豆胨琼脂培养基和沙氏葡萄糖琼脂培养基适用性验证 4.验证小组及职责 4.1 验证小组
4.2 验证职责
5.试验材料
5.1验证所用培养基：
5.2验证用菌株培养
5.2. 仪器设备：
5.2.1. XXXXX立式压力蒸汽灭菌器 5.2.2.XXXX水平流净化工作台 5.2.3.XXXXXX干燥箱
5.2.4.XXXXX型霉菌培养箱 (20～25℃) 5.2.5. XXXXX电热恒温培养箱(30～35℃) 5.3. 稀释剂： 0.9%无菌氯化钠溶液 6.试验过程 6.1菌液制备
取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的新鲜培养物，用0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的菌悬液；取黑曲霉的新鲜培
养物，加入3-5ml含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱，采用适宜的方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含0.05%（ml/ml）聚山梨酯80的0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的黑曲霉孢子悬液。
菌液制备后若在室温下放置，应在2小时内使用；若保存在2〜8℃，可在24小时内使用。 6.2、适用性检查 培养基适用性检查
取金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌的菌悬液与黑曲霉的孢子悬液（均不大于100cfu），分别注入无菌平皿中，立即倾注适用性检查的胰酪大豆胨琼脂培养基，用于检查胰酪大豆胨琼脂培养基的需氧菌总数计数适用性。其中，接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌的培养皿于30-35℃培养，时间不超过3天。接种白色念珠菌与黑曲霉的孢子的培养皿于30-35℃培养，时间不超过5天。
取白色念珠菌的菌悬液与黑曲霉的孢子悬液（均不大于100cfu），分别注入无菌平皿中，立即倾注适用性检查的沙氏葡萄糖琼脂培养基，用于检查沙氏葡萄糖琼脂培养基的霉菌和酵母菌总数计数适用性。培养温度为20-25℃，培养时间不超过5天。
上述每一试验菌株平行制备两个平皿，同时用相应的对照培养基替代被检培养基进行上述实验。 阴性对照
为确认试验条件符合要求，同时进行培养基阴性对照试验，阴性对照试验应无菌生长。
6.3、结果判定：若被检培养基上的菌落平均数与对照培养基上的菌落平均数的比值应在0.5-2范围内，且菌落形态大小与对照培养基上的菌落一致，则判该培养基适用性检查符合规定。
7 验证周期
同种培养基的不同批号，不同生产厂家均应进行适用性验证 8 附件
8.1 《需氧菌总数计数培养基适用性试验记录》 8.2《霉菌和酵母菌总数计数培养基适用性试验记录》 8.3《微生物检查用培养基适用性验证报告书》
需氧菌总数计数培养基适用性试验记录
霉菌和酵母菌总数计数培养基适用性试验记录
非无菌产品微生物限度检查用培养基适用性验证报告书