抗肿瘤新药临床前安全性评价

药品评价2004年第1卷第1期

一43一

新观察

抗肿瘤新药临床前安全性评价

刘宗潮

朱孝峰周军民李志铭

(中山大学肿瘤防治中心，广州，510060)

【摘要】大多数药物均具有两重性，一方面能治疗疾病，另一方面又具有副反应，抗肿瘤药更是如此。因此，对新的抗肿瘤药物进行安全性评价就显得更加重要。为了更正确地评价抗肿瘤药物的安全性，特提出抗肿瘤药物临床前安全性评价的基本要求和抗肿瘤药物毒理学研究中需要讨论的一些问题。【关键词】抗肿瘤药物；安全性；评价

【中图分类号】R979．1，R965．3

【文献标识码】A

【文章编号】1672-2809(2004)01—0043—04

drugs

at-senUCenter,SunYniversity,

PreclinicalsafetyevaluationofnewantiLiuZongchao,Zhu

tumor

in,LiZhimXiaofen&ZhouJunming．(Cancer

Guangzhou,510060)

AbstractSois

even

Most0Idrugshavedoubleeffects，onesideistotreatdiseasesandanotherissideeffect．moreantitumordrug．Therefore，thesafetyevaluationof

a

newant

itumordrugappearsto

paper

pre-

beveryimordrugmoreportant．Inordertoevaluatethesafetyofantitum

sents

accurately．This

basicrequirementofpreclinicalordrugandsomeproblemsafetyevaluationofantitumsofneed-

fuldiscussioninstudiesofantitumordrugtoxicology．Wehopetoexploreregular，obtainreal

knowl-

ordrugstudiesedgeandpromotedevelopmentofantitumcussion．ordsKeyw

antitumordrug；safety；evaluation

eansofexchangingexperienceanddis—bym

作者简介：刘宗潮，男，教授，主要从事抗癌药物药理学研究2．5供试品检查试验【1】取供试品．分别用两个厂家

试验，或该品种在最低有效浓度时仍有干扰作用但采用某种方法能消除这种干扰，该品种方可采用细菌内毒素检查方法。本文按中国药典2000年版二部附录ⅪXF细菌内毒素检查法应用指导原则的规定．用两个厂家的鲎试剂进行了3个批号的供试品的干扰试验，结果表明，供试品在1：3稀释液下对

的鲎试剂考察其内毒素限值。结果见表4。由表4可

知，3批供试品每lml大蒜素氯化钠注射液含内毒素量均小于1．5EU。

表4大蒜素氯化钠注射液细菌内毒素检查试验结果

Theresultsofendotoxintest

试验均没有于扰作用，本品可以采用细菌内毒素检

查法控制其标准。

根据试验结果。确定大蒜素氯化钠注射液细菌内毒素检查方法如下：取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录ⅪE)．每lml大蒜素氯化钠注射

3讨论

药物要采用细菌内毒素检查法控制其质量．需首先进行干扰试验。观察一定浓度的供试品对鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应有无干扰(增强或抑制)，确认该品种在一定浓度下不干扰细菌内毒素

液含内毒素量应小于1．5EU。4参考文献

【1】国家药典委员会编．中华人民共和国药典(--部)．北京：化学工业

出版社。2000．86，204(收稿日期2004-03-15

修回t3期2004-04—14)

药物是人们用来防治疾病、延长寿命、提高生

活质量的有力武器。因此，药物必须具备安全、有效、质量可控，三者缺一不可[11。然而，任何药物都具有两重性，就拿抗肿瘤药物来说，它一方面可以杀灭肿瘤细胞，使患者的生理、生化机能恢复正常，另一方面也可危及机体。产生不良反应，甚至严重的毒副作用。判断一个抗肿瘤药物能否用于临床的原则是药物对患者机体所产生的有利作用应超过或大大超过其有害效应。走进美国FDA，人们便会看见“Safety，Safety，Safety”三个大字。FDA把食品和药品安全性看得头等重要。我们相信这也是我国所有

药品审评工作者和药物研发人员的共识。

药物安全性评价的最终目的是确保临床用药的安全刚。既然抗肿瘤药物几乎都有毒副作用，因此．对一个新的抗肿瘤药物进行临床前的安全性评价就显得十分重要。现结合我们在抗肿瘤新药研发工作中的体会来探讨抗肿瘤新药临床前安全性评价的基本要求，并提出一些抗肿瘤药物毒理学研究中需要讨论的问题。通过交流和讨论，探索规律，获得真知，推动抗肿瘤药物研究的进展。

1

抗肿瘤药物临床前安全性评价的基本要求

抗肿瘤药物作用的对象是肿瘤细胞。从目前所

知大多数肿瘤细胞的代谢酶系统与正常细胞的代

谢酶系统只是数量上的差异，而无本质上的不同，

抗肿瘤药物难于区分正常细胞与肿瘤细胞。因此，对于一个抗肿瘤新药很难期待它临床上不发生任何不良反应。关键是要对可能发生的各种毒副反应要有深入全面的了解，为临床用药提出可预测性的

不良反应及其对策。药物研发部门提供真实可靠的

试验资料是确保药物安全性评价严肃性和科学性的前提，为此。不少国家制定了药物安全性评价的标准，而且以立法的形式，加以强化，这就大大加强了药物安全性评价规范执行的力度[41。非临床安全性研究质量管理规范(Good

Laboratory

Practice。简

称GLP)作为药物临床前安全性评价的标准已得到世界各国同行的普遍认可。GLP的目的是尽量减少

实验误差。为药物临床前安全性评价提供可信度高

的实验数据及实验结果。GLP的内容丰富，而又环环相扣，前一环节出错，势必影响到以后各个环节的真实性，主要有：

1．1人员组成：任何规范都是靠人去完成的，因此，

实验人员业务和思想素质的高低，学术风格的严谨

DrugReevaluation，2004V

01．1No．1直接影响到实验的结果和结论。实验人员分工要明确，职责要分明。实验总负责人除了有广博的专业知识和丰富的实践经验外．对整个实验必须要有全面的了解。在实验总负责人的指导下，训练有素的其他人员分别负责实验操作、动物饲养与管理、仪

器的保养与维修，质量监督。

1．2大小合适布局合理的实验设施：GLP要求的实

验设施包括实验室动物的饲养管理设施；实验用品、动物饲料和垫料的供应及存放设施：试验药物

和各种试剂的调配、存放和处理设施；清洁消毒设

施；相应实验仪器存放地点等。

1．3制订标准操作规程(StandardOperationProce．

dures

SOP)：标准的操作规程是保证实验过程有机

联系、工作有序进行的规范。SOP应包括受试药物

的接收、保管、领取、配制、贮存等项目：实验动物的

选择、预订、接收、称重、检疫、饲料、饲养管理、动物

房的清洁卫生消毒制度等；各种给药方法和剂量计

算方法；各种仪器的接收、清洁、校准、测试和维修

保养；各种观察指标的测试记录，数据处理、各种实

验资料总结与书写等。

1．4制订切实可行的试验方案：为了减少试验方案在试验时的变更，在制订试验方案前．应阅读有关

资料，用少量动物做预试验，实验总负责人根据预

试验制订一个切实可行的试验方案。主要内容包括

试验标题，研究目的，受试药品及对照品，委托单位

(或委托人)，试验参加人员，实验开始和结束日期，采用的试验系统，动物的种类、年龄、体重、来源、饲养，给药途径，剂量，给药次数，时间间隔，观察指标，取样方法。使用仪器型号，数据处理与统计，记录保存地址，质量保证负责人批准，委托单位(或委托人)的批准。

1．5试验方案的实施：整个试验必须在实验总负责人的指导下，按SOP和试验方案进行。试验过程中所观察的指标和实验所用的数据必须完整记录。对记录的任何变更均不得覆盖原有记录。用单线划标记。写上变更内容，说明原因，注明日期，并作签名。

实验总负责人应关注和检查实验实施情况。试验者发现实验异常或未预测到的情况必须立即向实验

总负责人汇报，同时作详细记录。

1．6实验报告的书写：实验报告包括实验题目．研究目的，受试药品及对照品，委托单位(或委托人)，试验参加人员，实验开始和结束日期，采用的试验

药品评价2004年第1卷第1期

系统，动物种类，年龄，体重来源，饲养，给药途径，剂量，给药次数，时间间隔，观察指标的描述，数据

处理方法，数据用图或表说明结果，难于用文字描

述的现象，应附上照片。对实验结果除了分析和讨

论外，应交代本次实验的偏离(deviation)情况。从SOP的角度阐明本次实验在具体操作过程中有无偏

离标准的操作规程。哪些条件未能达到，偏离的程

度如何，数据结果及结论的可靠性；在实验报告中

还应包括标本，原始记录和总结报告的保存地址。

实验总负责人及有关实验人员签字。

1．7质量保证：每个GLP实验室应具有质量保证

机制，保证实验设施实验仪器，实验人员素质，实验方法，实验方案等符合GLP的准则和标准。质量监督应从SOP、实验设施、仪器、实验人员、记录、试验

方案、总结报告，归档等方面检查是否符合GLP规范。

1．8经得起严格检查：GLP体系涉及面广点多．每

一个点及其相互衔接都存在硬件和软件问题，实验

材料及结果必须经得起主管部门及有关部门的检查。实验数据不能有假，有假一定可以查出。

2抗肿瘤药物毒理学研究中需要讨论的一些问题

毒理学试验资料是抗肿瘤药物安全性评价的重要依据。我国“新药审评办法”把新药临床前的毒

理学研究分为：急性毒性试验；长期毒性试验；局部用药毒性研究试验；全身用药的过敏性，溶血性，血

管刺激性试验；致突变试验；生殖毒性试验；致癌试验；依赖性试验。结合抗肿瘤药物的特点，毒理学研究的项目和范围应用所侧重，有些可以做透，有些

可以少做或不做。

2．1

性毒性试验：急性毒性试验结果习惯以LD50

来表示，也可以用最大耐受量(MTD)表示。临床试

验确定最初给药剂量时，并不需要精确的动物LD50值，但根据LD50值及实验动物治疗有效量，可以推出该药物的安全指数(L050值／ED50值)。安全指数大，药物安全性也大。抗肿瘤药物的安全指数一般是比较小的，有效剂量与毒性剂量比较接近，引起中毒的可能性也大。测定LD50时最好选用纯系的

小鼠和大鼠分别测出小鼠和大鼠的LD50值。如果

用Beagle狗或猴子测出最大耐受量将会更好。剂量安排多数采用单次给药，也可以五天多次给药。五天多次给药更符合临床。其他如给药途径，观察时间，观察项目等在“新药审批办法”中已有规定。

一45—

2．2长期毒性试验：长期毒性试验的目的是观察连续给予受试药物后由于积蓄而对动物机体产生的毒性反应和其严重程度，提供毒性反应的靶器官及其损害的可逆性。确定无毒性反应剂量，为拟定人

用剂量提供参考。

2．2．1

实验动物：至少用两种动物，啮齿类动物常

用大白鼠，非啮齿类动物常用Beagle狗，加用猴子会更好。一个新药在多种动物实验中。能得到较一致性的反应，则说明该药的共性大，移用到人体时，效应的一致性机会就大。我国“新药审批办法”对毒理研究要求用两种和两种以上动物试验，其目的也是为了使新药临床前安全性评价更接近临床，更有实验价值。

2．2．2剂量安排：按我国“新药审评办法”规定，慢性长毒常用三个剂量。大动物也可用两个剂量。高剂量组应有部分动物出现毒性反应或死亡(不超过百分之二十)；低剂量组应略高于药物对动物的有效量或临床试验用剂量而不出现任何观察指标的异常。抗肿瘤药物的安全指数小，在药效试验中最高疗效的剂量非常接近中毒(或死亡)剂量；抗肿瘤药物的药效学试验一般用小白鼠或裸鼠。毒理学试验用大鼠，Beagle狗或猴子。同样一公斤体重。动物越小其体表面积越大；药效试验一般用药7～10次，不必给合临床，而毒理学试验用药周期要参考推荐

临床试验用药持续时间考虑。即动物试验连续给药

期必须为临床试验给药期的三至四倍。这样一来要

确定毒理学试验的最高剂量常遇到困难，有时偏

低，多数情况下偏高。致使停药后过多的动物出现

严重的毒性反应或死亡率超百分之二。为了较准确

介定毒理学试验最高剂量，我们提出两点意见供参考。一是进行药效学试验时不要为了追求提高抑制率而提高动物实验治疗剂量，提高剂量使抑瘤率达

到90％以上，不等于说明临床有效性好，最高剂量

的抑瘤率能达到60％～70％，说此化合物已有抗肿瘤作用。二是选用2～3个剂量(少许动物)作为毒理研究的最高剂量，严格按照GLP规范进行毒理学研究的预试验。从中选出一个最理想的剂量作为正式毒理研究的最高剂量。

2．2．3给药途径：我国“新药审批办法”规定给药途径应与推荐临床试验的给药途径相同。

2．2．4试验周期：临床试验用药期为1至3d者，毒性试验给药期为2w；7d者为4w；30d者为12w；30d

eevaluation，2004V01．tNo．1DrugR

以上者。毒性试验给药期至少半年。抗肿瘤药物毒性较大，临床上极少为长期连续性给药。多数为单次给药或一周给药2～3次，作为一个疗程，间隔21d再作第二疗程，以此类推总算为5～6个疗程。毒理学研究也可考虑为间断性给药。每周给药2～3次，停药21d，疗程总数为10～12个。

2．2．5观察指标：按我国“新药审批办法”规定，长毒试验观察指标应包括一般体征、体重，食物消耗量。外观，行为，尿常规，血常规，血液生化、肝肾功能，重要器官(包括大脑、小脑、脑干、垂体、脊髓、甲状腺、心、肺、肾、胰、脾、肾上腺、子宫、卵巢、睾丸、前列腺、胃、小肠、大肠等)的肉眼观察和病理观察。大动物应检查心率和心电图。

上述的观察指标是基本的也是非常重要的。随着新技术、方法的发展。有些新的技术和新方法也可以引进到抗肿瘤药物毒理学研究的观察指标。人类P450是存在于肝脏微粒体混合功能氧化酶系

(mixedfunctionoxidasesystem，MFSO)的主要成分，

渗出皮下会导致局部炎症，严重者会导致局部组织坏死。所以对一个新的抗肿瘤药物必须做局部刺激性试验。

2．4全身用药的过敏性试验及溶血性试验：凡是新的抗菌素抗肿瘤药物应作过敏性试验；有肼结构的药物必须做溶血性试验。是否所有的新抗肿瘤药均

应做过敏性和溶血性试验可以进行讨论。

2．5致变、致癌和生殖毒性试验：近几年来新药遗传毒性评价方法亦有很大的发展17]，但大多数抗肿瘤药物具有致变、致癌作用，估计用药后10～15年才能长出肿瘤。临床上我们亦见过多个此病例。对确诊患恶性肿瘤的病人如伴有怀孕，临术上多数建议终止妊娠才作治疗。肿瘤病人治疗后，医生总是建议5年复查无复发才好考虑生育。如果一个作用机理全新、疗效好，其他毒性反应不大的药物，即使有致变及生殖毒性作用，也应当放宽审评。甚至三致试验可以免做。

2．6依赖性试验：多数抗肿瘤药物为细胞毒性药物，不易进入脑脊液，对中枢神经系统影响极少。如

是一组由许多同工酶组成的超基因大家族。对许多内源、外源性化合物在体内I相生物转化中有重要

在药效试验和长毒试验中发现动物对药物有依赖

性，出现戒断症状，必须进行药物的依赖性试验。3参考文献

【1】中华人民共和国卫生部．新药审批办法，1985

【2】孙曼琴．药物的安全性评价．国外医药抗生素分册，1998，19(3)：235【3】胡昌勤，金少鸿．抗感染新药安全性评价的基本要求及临床前毒

理学研究原则．国外医药抗生素分册，1994，15(3)：178【4】

叶祖光．国际药物安全性评价的规范化现状．世界科学技术，

1999，1，20

作用，在药理学、毒理学研究中起着重要作用。目前

欧美各国已经将P450及其同工酶测定用于新药的筛选及代谢研究，并把它列为新药申报必须进行的一项实验151。可用体内及体外模型进行代谢和毒性的实验研究。从而缩短动物和人类间种属差异，为临床合理用药提供依据。近几年来，生物芯片技术在生物学领域中取得了飞速的发展，生物芯片技术也开始用于药物的毒理学研究，包括基因芯片技术在药物毒理机制研究中的应用[63；发现毒理学中药物中毒的预测；化学物代谢特性分析与评价；药物临床前安全性评价等。

2-3局部用药的毒性试验：绝大多数抗肿瘤药物均具有不同程度的刺激性，静脉注射会引起静脉炎。

【5】马磉，钱蓓丽．人类细胞色素P450s研究概况及其在新药安全

性评价中的应用．中国药新杂志，2002，11(1)：36

【6】王全军．毒理芯片技术在药物毒理学中的应用．国外医学药学分

册。2003，30(2)：110

【7】张天宝．新药遗传毒性评价方法的研究现状和发展趋势．癌变-畸变突变．2002．14(4)：243(收稿日期2004-03-15

修回日期2004-03-31)

国家食品药品监督管理局发布2004年第一期违法药品广告公告

2004年4月5Et，国家食品药品监督管理局发布了2004年第一期违法药品广告公告。

为加强药品广告的监督管理，严厉打击违法发布药品广告行为，规范药品广告发布秩序，依据《广告法》、《药品管理法》和《药品管理法实施条例》，各省、自治区、直辖市药品监督管理部门2004年1月至2月依法查处未经审批刊播的、使用过期失效文号的、伪造冒用批准文号的、处方药在大众媒介发布广告的、禁止广告宣传的品种进行宣传的药品广告1459份。国家食品药品监督管理局将各省(区、市)药品监督管理部门在检查中发现的违法广告次

在5次以上的药品及其药品生产企业和相关情况予以汇总公布。(2004．04．15)

药品评价2004年第1卷第1期

一43一

新观察

抗肿瘤新药临床前安全性评价

刘宗潮

朱孝峰周军民李志铭

(中山大学肿瘤防治中心，广州，510060)

【摘要】大多数药物均具有两重性，一方面能治疗疾病，另一方面又具有副反应，抗肿瘤药更是如此。因此，对新的抗肿瘤药物进行安全性评价就显得更加重要。为了更正确地评价抗肿瘤药物的安全性，特提出抗肿瘤药物临床前安全性评价的基本要求和抗肿瘤药物毒理学研究中需要讨论的一些问题。【关键词】抗肿瘤药物；安全性；评价

【中图分类号】R979．1，R965．3

【文献标识码】A

【文章编号】1672-2809(2004)01—0043—04

drugs

at-senUCenter,SunYniversity,

PreclinicalsafetyevaluationofnewantiLiuZongchao,Zhu

tumor

in,LiZhimXiaofen&ZhouJunming．(Cancer

Guangzhou,510060)

AbstractSois

even

Most0Idrugshavedoubleeffects，onesideistotreatdiseasesandanotherissideeffect．moreantitumordrug．Therefore，thesafetyevaluationof

a

newant

itumordrugappearsto

paper

pre-

beveryimordrugmoreportant．Inordertoevaluatethesafetyofantitum

sents

accurately．This

basicrequirementofpreclinicalordrugandsomeproblemsafetyevaluationofantitumsofneed-

fuldiscussioninstudiesofantitumordrugtoxicology．Wehopetoexploreregular，obtainreal

knowl-

ordrugstudiesedgeandpromotedevelopmentofantitumcussion．ordsKeyw

antitumordrug；safety；evaluation

eansofexchangingexperienceanddis—bym

作者简介：刘宗潮，男，教授，主要从事抗癌药物药理学研究2．5供试品检查试验【1】取供试品．分别用两个厂家

试验，或该品种在最低有效浓度时仍有干扰作用但采用某种方法能消除这种干扰，该品种方可采用细菌内毒素检查方法。本文按中国药典2000年版二部附录ⅪXF细菌内毒素检查法应用指导原则的规定．用两个厂家的鲎试剂进行了3个批号的供试品的干扰试验，结果表明，供试品在1：3稀释液下对

的鲎试剂考察其内毒素限值。结果见表4。由表4可

知，3批供试品每lml大蒜素氯化钠注射液含内毒素量均小于1．5EU。

表4大蒜素氯化钠注射液细菌内毒素检查试验结果

Theresultsofendotoxintest

试验均没有于扰作用，本品可以采用细菌内毒素检

查法控制其标准。

根据试验结果。确定大蒜素氯化钠注射液细菌内毒素检查方法如下：取本品，依法检查(中国药典2000年版二部附录ⅪE)．每lml大蒜素氯化钠注射

3讨论

药物要采用细菌内毒素检查法控制其质量．需首先进行干扰试验。观察一定浓度的供试品对鲎试剂与细菌内毒素的凝集反应有无干扰(增强或抑制)，确认该品种在一定浓度下不干扰细菌内毒素

液含内毒素量应小于1．5EU。4参考文献

【1】国家药典委员会编．中华人民共和国药典(--部)．北京：化学工业

出版社。2000．86，204(收稿日期2004-03-15

修回t3期2004-04—14)

药物是人们用来防治疾病、延长寿命、提高生

活质量的有力武器。因此，药物必须具备安全、有效、质量可控，三者缺一不可[11。然而，任何药物都具有两重性，就拿抗肿瘤药物来说，它一方面可以杀灭肿瘤细胞，使患者的生理、生化机能恢复正常，另一方面也可危及机体。产生不良反应，甚至严重的毒副作用。判断一个抗肿瘤药物能否用于临床的原则是药物对患者机体所产生的有利作用应超过或大大超过其有害效应。走进美国FDA，人们便会看见“Safety，Safety，Safety”三个大字。FDA把食品和药品安全性看得头等重要。我们相信这也是我国所有

药品审评工作者和药物研发人员的共识。

药物安全性评价的最终目的是确保临床用药的安全刚。既然抗肿瘤药物几乎都有毒副作用，因此．对一个新的抗肿瘤药物进行临床前的安全性评价就显得十分重要。现结合我们在抗肿瘤新药研发工作中的体会来探讨抗肿瘤新药临床前安全性评价的基本要求，并提出一些抗肿瘤药物毒理学研究中需要讨论的问题。通过交流和讨论，探索规律，获得真知，推动抗肿瘤药物研究的进展。

1

抗肿瘤药物临床前安全性评价的基本要求

抗肿瘤药物作用的对象是肿瘤细胞。从目前所

知大多数肿瘤细胞的代谢酶系统与正常细胞的代

谢酶系统只是数量上的差异，而无本质上的不同，

抗肿瘤药物难于区分正常细胞与肿瘤细胞。因此，对于一个抗肿瘤新药很难期待它临床上不发生任何不良反应。关键是要对可能发生的各种毒副反应要有深入全面的了解，为临床用药提出可预测性的

不良反应及其对策。药物研发部门提供真实可靠的

试验资料是确保药物安全性评价严肃性和科学性的前提，为此。不少国家制定了药物安全性评价的标准，而且以立法的形式，加以强化，这就大大加强了药物安全性评价规范执行的力度[41。非临床安全性研究质量管理规范(Good

Laboratory

Practice。简

称GLP)作为药物临床前安全性评价的标准已得到世界各国同行的普遍认可。GLP的目的是尽量减少

实验误差。为药物临床前安全性评价提供可信度高

的实验数据及实验结果。GLP的内容丰富，而又环环相扣，前一环节出错，势必影响到以后各个环节的真实性，主要有：

1．1人员组成：任何规范都是靠人去完成的，因此，

实验人员业务和思想素质的高低，学术风格的严谨

DrugReevaluation，2004V

01．1No．1直接影响到实验的结果和结论。实验人员分工要明确，职责要分明。实验总负责人除了有广博的专业知识和丰富的实践经验外．对整个实验必须要有全面的了解。在实验总负责人的指导下，训练有素的其他人员分别负责实验操作、动物饲养与管理、仪

器的保养与维修，质量监督。

1．2大小合适布局合理的实验设施：GLP要求的实

验设施包括实验室动物的饲养管理设施；实验用品、动物饲料和垫料的供应及存放设施：试验药物

和各种试剂的调配、存放和处理设施；清洁消毒设

施；相应实验仪器存放地点等。

1．3制订标准操作规程(StandardOperationProce．

dures

SOP)：标准的操作规程是保证实验过程有机

联系、工作有序进行的规范。SOP应包括受试药物

的接收、保管、领取、配制、贮存等项目：实验动物的

选择、预订、接收、称重、检疫、饲料、饲养管理、动物

房的清洁卫生消毒制度等；各种给药方法和剂量计

算方法；各种仪器的接收、清洁、校准、测试和维修

保养；各种观察指标的测试记录，数据处理、各种实

验资料总结与书写等。

1．4制订切实可行的试验方案：为了减少试验方案在试验时的变更，在制订试验方案前．应阅读有关

资料，用少量动物做预试验，实验总负责人根据预

试验制订一个切实可行的试验方案。主要内容包括

试验标题，研究目的，受试药品及对照品，委托单位

(或委托人)，试验参加人员，实验开始和结束日期，采用的试验系统，动物的种类、年龄、体重、来源、饲养，给药途径，剂量，给药次数，时间间隔，观察指标，取样方法。使用仪器型号，数据处理与统计，记录保存地址，质量保证负责人批准，委托单位(或委托人)的批准。

1．5试验方案的实施：整个试验必须在实验总负责人的指导下，按SOP和试验方案进行。试验过程中所观察的指标和实验所用的数据必须完整记录。对记录的任何变更均不得覆盖原有记录。用单线划标记。写上变更内容，说明原因，注明日期，并作签名。

实验总负责人应关注和检查实验实施情况。试验者发现实验异常或未预测到的情况必须立即向实验

总负责人汇报，同时作详细记录。

1．6实验报告的书写：实验报告包括实验题目．研究目的，受试药品及对照品，委托单位(或委托人)，试验参加人员，实验开始和结束日期，采用的试验

药品评价2004年第1卷第1期

系统，动物种类，年龄，体重来源，饲养，给药途径，剂量，给药次数，时间间隔，观察指标的描述，数据

处理方法，数据用图或表说明结果，难于用文字描

述的现象，应附上照片。对实验结果除了分析和讨

论外，应交代本次实验的偏离(deviation)情况。从SOP的角度阐明本次实验在具体操作过程中有无偏

离标准的操作规程。哪些条件未能达到，偏离的程

度如何，数据结果及结论的可靠性；在实验报告中

还应包括标本，原始记录和总结报告的保存地址。

实验总负责人及有关实验人员签字。

1．7质量保证：每个GLP实验室应具有质量保证

机制，保证实验设施实验仪器，实验人员素质，实验方法，实验方案等符合GLP的准则和标准。质量监督应从SOP、实验设施、仪器、实验人员、记录、试验

方案、总结报告，归档等方面检查是否符合GLP规范。

1．8经得起严格检查：GLP体系涉及面广点多．每

一个点及其相互衔接都存在硬件和软件问题，实验

材料及结果必须经得起主管部门及有关部门的检查。实验数据不能有假，有假一定可以查出。

2抗肿瘤药物毒理学研究中需要讨论的一些问题

毒理学试验资料是抗肿瘤药物安全性评价的重要依据。我国“新药审评办法”把新药临床前的毒

理学研究分为：急性毒性试验；长期毒性试验；局部用药毒性研究试验；全身用药的过敏性，溶血性，血

管刺激性试验；致突变试验；生殖毒性试验；致癌试验；依赖性试验。结合抗肿瘤药物的特点，毒理学研究的项目和范围应用所侧重，有些可以做透，有些

可以少做或不做。

2．1

性毒性试验：急性毒性试验结果习惯以LD50

来表示，也可以用最大耐受量(MTD)表示。临床试

验确定最初给药剂量时，并不需要精确的动物LD50值，但根据LD50值及实验动物治疗有效量，可以推出该药物的安全指数(L050值／ED50值)。安全指数大，药物安全性也大。抗肿瘤药物的安全指数一般是比较小的，有效剂量与毒性剂量比较接近，引起中毒的可能性也大。测定LD50时最好选用纯系的

小鼠和大鼠分别测出小鼠和大鼠的LD50值。如果

用Beagle狗或猴子测出最大耐受量将会更好。剂量安排多数采用单次给药，也可以五天多次给药。五天多次给药更符合临床。其他如给药途径，观察时间，观察项目等在“新药审批办法”中已有规定。

一45—

2．2长期毒性试验：长期毒性试验的目的是观察连续给予受试药物后由于积蓄而对动物机体产生的毒性反应和其严重程度，提供毒性反应的靶器官及其损害的可逆性。确定无毒性反应剂量，为拟定人

用剂量提供参考。

2．2．1

实验动物：至少用两种动物，啮齿类动物常

用大白鼠，非啮齿类动物常用Beagle狗，加用猴子会更好。一个新药在多种动物实验中。能得到较一致性的反应，则说明该药的共性大，移用到人体时，效应的一致性机会就大。我国“新药审批办法”对毒理研究要求用两种和两种以上动物试验，其目的也是为了使新药临床前安全性评价更接近临床，更有实验价值。

2．2．2剂量安排：按我国“新药审评办法”规定，慢性长毒常用三个剂量。大动物也可用两个剂量。高剂量组应有部分动物出现毒性反应或死亡(不超过百分之二十)；低剂量组应略高于药物对动物的有效量或临床试验用剂量而不出现任何观察指标的异常。抗肿瘤药物的安全指数小，在药效试验中最高疗效的剂量非常接近中毒(或死亡)剂量；抗肿瘤药物的药效学试验一般用小白鼠或裸鼠。毒理学试验用大鼠，Beagle狗或猴子。同样一公斤体重。动物越小其体表面积越大；药效试验一般用药7～10次，不必给合临床，而毒理学试验用药周期要参考推荐

临床试验用药持续时间考虑。即动物试验连续给药

期必须为临床试验给药期的三至四倍。这样一来要

确定毒理学试验的最高剂量常遇到困难，有时偏

低，多数情况下偏高。致使停药后过多的动物出现

严重的毒性反应或死亡率超百分之二。为了较准确

介定毒理学试验最高剂量，我们提出两点意见供参考。一是进行药效学试验时不要为了追求提高抑制率而提高动物实验治疗剂量，提高剂量使抑瘤率达

到90％以上，不等于说明临床有效性好，最高剂量

的抑瘤率能达到60％～70％，说此化合物已有抗肿瘤作用。二是选用2～3个剂量(少许动物)作为毒理研究的最高剂量，严格按照GLP规范进行毒理学研究的预试验。从中选出一个最理想的剂量作为正式毒理研究的最高剂量。

2．2．3给药途径：我国“新药审批办法”规定给药途径应与推荐临床试验的给药途径相同。

2．2．4试验周期：临床试验用药期为1至3d者，毒性试验给药期为2w；7d者为4w；30d者为12w；30d

eevaluation，2004V01．tNo．1DrugR

以上者。毒性试验给药期至少半年。抗肿瘤药物毒性较大，临床上极少为长期连续性给药。多数为单次给药或一周给药2～3次，作为一个疗程，间隔21d再作第二疗程，以此类推总算为5～6个疗程。毒理学研究也可考虑为间断性给药。每周给药2～3次，停药21d，疗程总数为10～12个。

2．2．5观察指标：按我国“新药审批办法”规定，长毒试验观察指标应包括一般体征、体重，食物消耗量。外观，行为，尿常规，血常规，血液生化、肝肾功能，重要器官(包括大脑、小脑、脑干、垂体、脊髓、甲状腺、心、肺、肾、胰、脾、肾上腺、子宫、卵巢、睾丸、前列腺、胃、小肠、大肠等)的肉眼观察和病理观察。大动物应检查心率和心电图。

上述的观察指标是基本的也是非常重要的。随着新技术、方法的发展。有些新的技术和新方法也可以引进到抗肿瘤药物毒理学研究的观察指标。人类P450是存在于肝脏微粒体混合功能氧化酶系

(mixedfunctionoxidasesystem，MFSO)的主要成分，

渗出皮下会导致局部炎症，严重者会导致局部组织坏死。所以对一个新的抗肿瘤药物必须做局部刺激性试验。

2．4全身用药的过敏性试验及溶血性试验：凡是新的抗菌素抗肿瘤药物应作过敏性试验；有肼结构的药物必须做溶血性试验。是否所有的新抗肿瘤药均

应做过敏性和溶血性试验可以进行讨论。

2．5致变、致癌和生殖毒性试验：近几年来新药遗传毒性评价方法亦有很大的发展17]，但大多数抗肿瘤药物具有致变、致癌作用，估计用药后10～15年才能长出肿瘤。临床上我们亦见过多个此病例。对确诊患恶性肿瘤的病人如伴有怀孕，临术上多数建议终止妊娠才作治疗。肿瘤病人治疗后，医生总是建议5年复查无复发才好考虑生育。如果一个作用机理全新、疗效好，其他毒性反应不大的药物，即使有致变及生殖毒性作用，也应当放宽审评。甚至三致试验可以免做。

2．6依赖性试验：多数抗肿瘤药物为细胞毒性药物，不易进入脑脊液，对中枢神经系统影响极少。如

是一组由许多同工酶组成的超基因大家族。对许多内源、外源性化合物在体内I相生物转化中有重要

在药效试验和长毒试验中发现动物对药物有依赖

性，出现戒断症状，必须进行药物的依赖性试验。3参考文献

【1】中华人民共和国卫生部．新药审批办法，1985

【2】孙曼琴．药物的安全性评价．国外医药抗生素分册，1998，19(3)：235【3】胡昌勤，金少鸿．抗感染新药安全性评价的基本要求及临床前毒

理学研究原则．国外医药抗生素分册，1994，15(3)：178【4】

叶祖光．国际药物安全性评价的规范化现状．世界科学技术，

1999，1，20

作用，在药理学、毒理学研究中起着重要作用。目前

欧美各国已经将P450及其同工酶测定用于新药的筛选及代谢研究，并把它列为新药申报必须进行的一项实验151。可用体内及体外模型进行代谢和毒性的实验研究。从而缩短动物和人类间种属差异，为临床合理用药提供依据。近几年来，生物芯片技术在生物学领域中取得了飞速的发展，生物芯片技术也开始用于药物的毒理学研究，包括基因芯片技术在药物毒理机制研究中的应用[63；发现毒理学中药物中毒的预测；化学物代谢特性分析与评价；药物临床前安全性评价等。

2-3局部用药的毒性试验：绝大多数抗肿瘤药物均具有不同程度的刺激性，静脉注射会引起静脉炎。

【5】马磉，钱蓓丽．人类细胞色素P450s研究概况及其在新药安全

性评价中的应用．中国药新杂志，2002，11(1)：36

【6】王全军．毒理芯片技术在药物毒理学中的应用．国外医学药学分

册。2003，30(2)：110

【7】张天宝．新药遗传毒性评价方法的研究现状和发展趋势．癌变-畸变突变．2002．14(4)：243(收稿日期2004-03-15

修回日期2004-03-31)

国家食品药品监督管理局发布2004年第一期违法药品广告公告

2004年4月5Et，国家食品药品监督管理局发布了2004年第一期违法药品广告公告。

为加强药品广告的监督管理，严厉打击违法发布药品广告行为，规范药品广告发布秩序，依据《广告法》、《药品管理法》和《药品管理法实施条例》，各省、自治区、直辖市药品监督管理部门2004年1月至2月依法查处未经审批刊播的、使用过期失效文号的、伪造冒用批准文号的、处方药在大众媒介发布广告的、禁止广告宣传的品种进行宣传的药品广告1459份。国家食品药品监督管理局将各省(区、市)药品监督管理部门在检查中发现的违法广告次

在5次以上的药品及其药品生产企业和相关情况予以汇总公布。(2004．04．15)