试验研究
鸡大肠杆菌的药敏试验
周国瑾
（江苏省金坛市直溪畜牧兽医站。金坛２１３２００）
摘要：为了解我市流行的鸡大肠杆菌对药物的敏感情况，从常州地区３个养鸡场采集的６０份病料进行病原分离，在分离得到的菌株中挑选９株进行药敏试验。试验选择强力霉素、安普霉素、阿米卡星等１５种药敏纸片，进行药敏试验。药敏试验结果表明：不论是标准菌株还是所分离的大肠杆菌对安普霉素、阿米卡星的都具有高度敏感性；新霉素、庆大霉素、头孢噻肟钠、恩诺沙星、环丙沙星敏感性居中；红霉素、复方新诺明抑菌作用较低。此试验旨在选择对大肠杆
菌无耐药性或耐药性低的药物为大肠杆菌病的药物防治提供理论依据。关键词：大肠杆菌；病理变化；药敏试验；耐药性
Ｄ０１：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．１６７１－６０２７．２０１４．０９．００８
１病原学
大肠杆菌为革兰氏染色阴性的短小杆菌，为兼性厌氧菌，不形成芽孢和荚膜，大多数菌株有周鞭毛，具有运动性。在普通培养基上生长良好。部分菌株在血液培养基上培养，
肠埃希氏菌引起的一种传染病。由于该病病型较多，其临诊
表现也有差异。其特征有心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、输
卵管炎、滑膜炎、大肠杆菌性肉芽肿和脐炎等病变。
本文就金坛地区３个鸡场５周龄鸡发生本发生的以精神不振，采食减少、腹泻等为病症，部分死亡，剖检有疑似大
肠杆菌病的病例进行病原分离鉴定，从分离出的菌株中挑选９株进行药敏试验，旨在为鸡大肠杆菌病的诊断和治疗提供参考。现将实验方法和结果报告如下：４．１试验材料
４．１．１标准菌株大肠杆菌标准株０１、０７８、购自中国兽医药品监察所。
大肠杆菌分离株，来自常州地区，经分离得到的９株鸡大肠杆菌，分别为Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３。４．１．２试剂及器材
ＬＢ培养基：胰蛋白胨１０９，酵母提取物５９，ＮａＣｌ１０９定容到１Ｌ摇匀条ｐＨ至７．０高压蒸汽灭菌。麦康凯培养基：蛋白胨２０９，氯化钠５９，乳糖ｌＯｇ，琼脂２０９，Ｈ２０１０００ｍＬ，１％中性红溶液３。４ｍＬ，１％结晶紫０．１ｍＬ，ｐＨ７．４，高压蒸汽灭菌。药敏试纸片共１５种：氟苯尼考、安普霉素、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、环丙沙星、恩诺沙星、乳酸诺氟沙星、复方新诺明左氟沙星、黏菌素、阿莫西林、头孢噻肟钠、头孢氨苄。以上药敏试纸片均为５“ｇ，片，由杭州天和微生物有限公司生产制造。
实验设备有超净台、酒精灯、培养皿、接种环等。４．２试验方法和结果
４．２．１
可出现溶血现象。用麦康凯培养基上培养时，生长出圆形、隆
起的红色菌落；在伊红美蓝琼脂上培养，大多数菌落呈黑色，并由金属光泽。
大肠杆菌对干燥的抵抗力很强，在鸡舍、粪便、尘埃、垫料、孵化器内的绒毛、破壳蛋等环境中可存活数周或数月之久，成为环境中的常在菌。兽医上常用的消毒药可以杀灭大肠杆菌。２流行病学
本病四季均可发生，但以冬春寒冷和气温多变季节多发。在自然条件下，本病可发生于各种年龄的鸡，但多发生于雏鸡，特别是３。６周龄内的雏鸡最为易感。发病率一般在３０％～６９％之间，死亡率４２％～７５％，致死率可高达１００％。
随粪便污染蛋壳的Ｅ．ｃｏｌｉ可感染鸡胚，造成鸡胚在孵化期死
亡。或者被感染的鸡胚虽可孵出雏鸡，但在第１周内即死于脐炎或以卵黄感染而引起生长缓慢。
一般情况下，养殖场的大肠杆菌病可通过呼吸道感染而引起。本病常与某些细菌及病毒同时感染。Ｒａｎｄａｌｌ．Ｃ（１９８４）曾从大肠杆菌病死雏病理材料中同时分离到变形杆菌、葡萄球菌和假单胞菌、呼肠孤病毒和腺病毒。
本病的传染源主要是被上述血清型的致病病性Ｅ．ｃｏｌｉ所污染的卵、病鸡及其分泌物、排泄物，被污染的饲料、饮水、垫草和尘土等。感染途径为消化道和呼吸道，鼠和臭虫是该病病原体的携带者。３临床症状
病禽精神不振，不爱活动，常呆立于禽舍一隅，羽毛松乱。两翅下垂，食欲减少等一般性病状。由于大肠杆菌病的临诊病型不同，可以出现肠炎、败血症、呼吸道炎、输卵管炎、眼炎、关节炎、神经症状、肿头综合征等为主的相应的症状。４药敏试验
禽大肠杆菌病（ａｖｉａｎｃｏｌｉｂａｃｉｌｌｏｓｉｓ）是由一定血清型的大
细菌的分离和培养剖解病鸡观察病变，取病变部位
（如肝，小肠）进行细菌的分离。具体方法：用灭菌的接种环挑取部分组织在麦康凯培养基进行三区划线。３７。ｃ培养２４ｈ观
察时候有单个红色菌落；同时取－４，部分组织放到ＩＪＢ液体
培养基，３７℃培养２４ｈ进行增菌。如麦康凯培养基没有形成菌落，用ＬＢ培养的菌液在麦康凯培养基进行三区划线，３７％培养２４ｈ观察是否形成单个红色菌落。
４．２．２细菌的药敏试验对分离的细菌进行药敏试验，采用纸片扩散法。在“超净台”中，用经酒精灯火焰灭菌的接种环
２０１４年第０９期
万方数据
●
试验研究
挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌均匀涂布到麦康凯琼脂平板上。具体方法：用灭菌接种环取适量细菌分别在平
杆菌对安普霉素、阿米卡星都具有高度敏感性；新霉素、庆大霉素、头孢噻肟钠、恩诺沙星、环丙沙星敏感性居中；而对氟
皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的１，２。然
后，找到第二点划线至平皿的１／２，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。
苯尼考、环丙沙星、复方新诺明、头孢氨苄的抑菌作用较低，甚至已产生耐药性。安普霉素、阿米卡星、庆大霉素及新霉素
均为氨基糖苷类抗生素，对金葡菌、绿脓杆菌、大肠杆菌及变
将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，去药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按
几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴７片），每种药敏片的名称要记住。
形杆菌等均有效。此项试验证实：氨基糖苷类抗生素不仅对
标准菌株具有较强的抗菌活性，而且对各种临床菌株也具有较强的抗菌活性。掌握鸡致病性大肠杆菌的耐药情况，通过药敏试验寻找疗效最好的药物，是解决大肠杆菌病的主要手段。
禽大肠杆菌病是由多种血清型的致病性大肠杆菌所引
将平皿培养基置于３７。Ｃ温箱中培养２４ｈ后，观察效果。
用以上的方法对金坛三个鸡场疑似感染禽大肠杆菌的
起的不同类型禽病的总称。大肠杆菌是健康畜禽肠道中的常在菌，可分为致病性和非致病性两大类。由于其抗原性复杂血清型多样，临床病变复杂，且常与病毒性疾病和其他细菌性疾病并发或继发，给养鸡业带来相当大的危害，该病的防治尤为重要。该病的防治原则是加强管理，保持环境卫生，控
制促发因素，搞好预防，才能使疾病得到有效的控制。而药物
病鸡进行剖解，取肝脏部位进行细菌分离。结果其中在麦康
凯培养基分离５株大肠细菌。没有生长细菌的用砧培养基增菌液在麦康凯培养基继续分离细菌，分离到４株大肠杆菌。然后对９株禽大肠杆菌进行药敏试验。
４．２．３药敏试验结果在涂有细菌的麦康凯培养基平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在制片周围一定距离内的细菌生长受到抑制。过夜培养后形成
防治仍是目前采用的主要方法，但由于用药不当或药物滥
用，加速了细菌耐药性的产生。因此在临床用药时，建议先对致病菌进行药敏试验，选用敏感药物，同时注意不要长时间
一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。其直径大
小与药物浓度、划线细菌浓度有直接关系。（见表１）
判定标准：抑菌圈直径（书）≥１８ｍｍ为高度敏感，以“＋＋＋”表示；抑菌圈直径１８ｍｍ＞（书）≥１４ｍｍ为中度敏感，以“＋＋”表示；抑菌圈直径１４＞（书）≥ｌＯｍｍ为低度敏感，以
使用同一种药物，应多种高敏抗菌药交替使用，以防止长期使用某种抗菌药而产生抗药性。
参考文献
【ｌ】陆承平主编．兽医微生物学［Ｍ］（三版）一Ｃ京：中国农业出版社，
２００１，２１３—２２３．
［２】冯元璋．鸡大肠杆菌病［Ｊ］Ｉ中国兽医科技，１９８９，１：２０－２２．【３】甘孟侯主编．禽病诊断与防治【Ｍ】．北京：中国农业大学出版社，
２００１：１５９—１６６．
“＋”表示；抑菌圈直径ｌＯｍｍ＞（书）为耐药，以“一”表示。
５讨论
此项试验结果证实：不论是标准菌株还是所分离的大肠
表１
【４】高崧．我国部分地区１０５个禽病原性大肠杆菌的药敏试验【Ｊ】．中
１１株大肠杆菌药敏试验结果
●・
２０１４年第０９期
万方数据
试验研究
韩国两栖宠物出口对中国壶菌病输入风险预测
王晓龙１，王思睿１，张子群２★，朱蕴绮１
（１．东北林业大学保护医学与生态安全研究中心，哈尔滨１５００４０；２．黑龙江省检验检疫局。哈尔滨１５００００）摘要：近年来，壶茵病已经成为危害全球两栖类种群数量的最重要的真茵性传染病，引起全球的高度重视。由于其
传播扩散能力极强，对有着两栖类贸易往来的国家来说是巨大的潜在威胁。在亚洲，韩国是继日本之后第二个证实在本土存在壶茵的国家。随着韩国两栖类宠物对中国出口数量的增加，明确其壶茵输出对我国的风险极其重要。本文根
据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准，运用释放评估、接触暴露评估、后果评估技术整合得到韩国壶茵的输出风险评估结果以及壶茵输入后定植和传播的可能性评估结果。研究发现韩国壶茵对我国的输出风险评估和输入后定
植传播的可能性评估结果均为“高”。韩国因两栖类宠物贸易输出引起的壶茵病对我国输入性风险较高，而且一旦传
入其定植、扩散的风险也为高风险。
关键词：两栖类宠物；壶茵；输入；风险评估；韩国
Ｄ０１：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．１６７１—６０２７．２０１４．０９．００９
目前，全球两栖类的种类和数量正在急剧下降，其衰退
速度比鸟类和哺乳类还快。研究发现壶菌病近３０年来已经使全球２００种两栖类灭绝，全球一半的两栖类种群数量下降。
该病在自然条件下主要通过水体传播，而国际贸易和盲目引种已经越来越成为壶菌跨境传播的另一个重要的传播渠道，
根据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《进出境动物和动物产品风险分析程序和技术要求））（ｓＮｒｒ２４８６—２０１０），对从韩国进口两栖类动物时，其壶菌病输入风险进行分析。１．１进口两栖类壶茸输入风险评价
１．１．１基础评估
１．１．１．１释放评估按照行业标准规定，就生物因子、国家因子和商品因子划定风险因素分析范围，所得数据经与我国相
大大增加了疾病传播风险，一旦传人并定植传播开来，将会对输
入国土著两栖类造成毁灭性打击。如在国际贸易中，北美牛蛙（Ｒ．ｃａｔｅｓｂｅｉａｎａ）将壶菌病传播到了世界许多地方。在澳大利亚从被广泛引入的两栖类中也发现有感染壶菌病的个体。
中国已经成为继日、美之后韩国的第三大贸易伙伴。其境内动物资源中爬虫类、两栖类、鸟类居多。２００９年，根据韩国境内报道的壶菌案例，中韩两栖爬虫类动物贸易已经处于壶菌风险之中，鉴于我国境内尚未分离到壶菌病原，因此开
关国家或行业标准比较得出初步判断结果，以世界各国一般
管理水平等为参照，以高、中、低描述。
１．１．１．２接触暴露评估方法同１．１．１．１。
１．１．１．３后果评估方法同１．１．１．１。１．１．２综合评估
１．１．２．１释放评估和接触暴露综合评估利用１．１．１．１和１．１．１．２结果和工具表（表４）确定释放评估和接触暴露综合淖估结果，备用。
展两栖类壶菌风险输人分析，确保我国两栖类出口贸易意义
重大。
本研究主要分析了韩国出口两栖类及其衍生物到中国
１．１．２．２后果评估与释放、接触综合评估利用１．１．１．３和
１．１．２．１结果和工具表（表５）确定后果评估与释放、接触综
时可能存在的风险及风险等级。
１
合评估结果，备用。
１．１．２．３进口两栖类壶菌传人风险评价本风险评价是基于前述所有评估结果之上的最终评估，以高、中、低描述。
研究方法
★通讯作者
基金项目：国家质检总局科技计划（２０１２１Ｋ００９）资助。
１．２壹酋输入后定植和传播风Ｉ噎－分晰按照行业标准规定，
就释放途径、接触途径、定植和传播途径，以及定植和传播的
・－＋－．－４．－．－４－－一＋一＋一＋－－－＇Ｉ－－．－４－．－４－－＋－＋．－４－．－４－－．－＋－．－４－－．－＋－－．－４－－一＋．－４－．－－＋－－．－４－－＋．－４－－一＋－－－４－－．－４－－．－＋－．－４－－．－４－－一＋－－－６－－－４－－・
国预防兽医学报，１９９８，０５．
［８］李六金，等．兽医微生物学实验实习指导［Ｍ］．西安：陕西科学技术
出版社，１９９９．
【９】东秀珠，等．常见细菌系统鉴定手册【Ｍ】．北京：科学出版社，２００１．【１ｏ］李永清，等禽大肠杆菌病防制研究进展Ｄｌ中国兽医学报，２０００，０４．［１１】谢永平，等．母鹅大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验们．Ｃｈｉｎａ
Ｐｏｕｌｔｒｙ
【５］曹斌，等．鸡大肠埃希氏菌地方菌株的致病性与药敏试验【Ｊ】．中国
动物检疫，２００３，０３．
【６】６李富金，等．山东省不同地区治疗禽大肠杆菌病的用药调查及菌
株耐药性分析田．中国兽药杂志，２００６，０２．
【７】姚火春主编．兽医微生物学实验指导［Ｍ］（二版）．北京：中国农业
出版社，２００２：２３—５０．
２００１，２３（２４）：１９—２０．
２０１４年第０９期
万方数据
●
鸡大肠杆菌的药敏试验
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：
周国瑾
江苏省金坛市直溪畜牧兽医站,金坛,213200
畜牧兽医科技信息
Chinese Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine2014(9)
本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_yfsyxjz201409008.aspx
试验研究
鸡大肠杆菌的药敏试验
周国瑾
（江苏省金坛市直溪畜牧兽医站。金坛２１３２００）
摘要：为了解我市流行的鸡大肠杆菌对药物的敏感情况，从常州地区３个养鸡场采集的６０份病料进行病原分离，在分离得到的菌株中挑选９株进行药敏试验。试验选择强力霉素、安普霉素、阿米卡星等１５种药敏纸片，进行药敏试验。药敏试验结果表明：不论是标准菌株还是所分离的大肠杆菌对安普霉素、阿米卡星的都具有高度敏感性；新霉素、庆大霉素、头孢噻肟钠、恩诺沙星、环丙沙星敏感性居中；红霉素、复方新诺明抑菌作用较低。此试验旨在选择对大肠杆
菌无耐药性或耐药性低的药物为大肠杆菌病的药物防治提供理论依据。关键词：大肠杆菌；病理变化；药敏试验；耐药性
Ｄ０１：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．１６７１－６０２７．２０１４．０９．００８
１病原学
大肠杆菌为革兰氏染色阴性的短小杆菌，为兼性厌氧菌，不形成芽孢和荚膜，大多数菌株有周鞭毛，具有运动性。在普通培养基上生长良好。部分菌株在血液培养基上培养，
肠埃希氏菌引起的一种传染病。由于该病病型较多，其临诊
表现也有差异。其特征有心包炎、肝周炎、气囊炎、腹膜炎、输
卵管炎、滑膜炎、大肠杆菌性肉芽肿和脐炎等病变。
本文就金坛地区３个鸡场５周龄鸡发生本发生的以精神不振，采食减少、腹泻等为病症，部分死亡，剖检有疑似大
肠杆菌病的病例进行病原分离鉴定，从分离出的菌株中挑选９株进行药敏试验，旨在为鸡大肠杆菌病的诊断和治疗提供参考。现将实验方法和结果报告如下：４．１试验材料
４．１．１标准菌株大肠杆菌标准株０１、０７８、购自中国兽医药品监察所。
大肠杆菌分离株，来自常州地区，经分离得到的９株鸡大肠杆菌，分别为Ａ１、Ａ２、Ａ３、Ｂ１、Ｂ２、Ｂ３、Ｃ１、Ｃ２、Ｃ３。４．１．２试剂及器材
ＬＢ培养基：胰蛋白胨１０９，酵母提取物５９，ＮａＣｌ１０９定容到１Ｌ摇匀条ｐＨ至７．０高压蒸汽灭菌。麦康凯培养基：蛋白胨２０９，氯化钠５９，乳糖ｌＯｇ，琼脂２０９，Ｈ２０１０００ｍＬ，１％中性红溶液３。４ｍＬ，１％结晶紫０．１ｍＬ，ｐＨ７．４，高压蒸汽灭菌。药敏试纸片共１５种：氟苯尼考、安普霉素、阿米卡星、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、环丙沙星、恩诺沙星、乳酸诺氟沙星、复方新诺明左氟沙星、黏菌素、阿莫西林、头孢噻肟钠、头孢氨苄。以上药敏试纸片均为５“ｇ，片，由杭州天和微生物有限公司生产制造。
实验设备有超净台、酒精灯、培养皿、接种环等。４．２试验方法和结果
４．２．１
可出现溶血现象。用麦康凯培养基上培养时，生长出圆形、隆
起的红色菌落；在伊红美蓝琼脂上培养，大多数菌落呈黑色，并由金属光泽。
大肠杆菌对干燥的抵抗力很强，在鸡舍、粪便、尘埃、垫料、孵化器内的绒毛、破壳蛋等环境中可存活数周或数月之久，成为环境中的常在菌。兽医上常用的消毒药可以杀灭大肠杆菌。２流行病学
本病四季均可发生，但以冬春寒冷和气温多变季节多发。在自然条件下，本病可发生于各种年龄的鸡，但多发生于雏鸡，特别是３。６周龄内的雏鸡最为易感。发病率一般在３０％～６９％之间，死亡率４２％～７５％，致死率可高达１００％。
随粪便污染蛋壳的Ｅ．ｃｏｌｉ可感染鸡胚，造成鸡胚在孵化期死
亡。或者被感染的鸡胚虽可孵出雏鸡，但在第１周内即死于脐炎或以卵黄感染而引起生长缓慢。
一般情况下，养殖场的大肠杆菌病可通过呼吸道感染而引起。本病常与某些细菌及病毒同时感染。Ｒａｎｄａｌｌ．Ｃ（１９８４）曾从大肠杆菌病死雏病理材料中同时分离到变形杆菌、葡萄球菌和假单胞菌、呼肠孤病毒和腺病毒。
本病的传染源主要是被上述血清型的致病病性Ｅ．ｃｏｌｉ所污染的卵、病鸡及其分泌物、排泄物，被污染的饲料、饮水、垫草和尘土等。感染途径为消化道和呼吸道，鼠和臭虫是该病病原体的携带者。３临床症状
病禽精神不振，不爱活动，常呆立于禽舍一隅，羽毛松乱。两翅下垂，食欲减少等一般性病状。由于大肠杆菌病的临诊病型不同，可以出现肠炎、败血症、呼吸道炎、输卵管炎、眼炎、关节炎、神经症状、肿头综合征等为主的相应的症状。４药敏试验
禽大肠杆菌病（ａｖｉａｎｃｏｌｉｂａｃｉｌｌｏｓｉｓ）是由一定血清型的大
细菌的分离和培养剖解病鸡观察病变，取病变部位
（如肝，小肠）进行细菌的分离。具体方法：用灭菌的接种环挑取部分组织在麦康凯培养基进行三区划线。３７。ｃ培养２４ｈ观
察时候有单个红色菌落；同时取－４，部分组织放到ＩＪＢ液体
培养基，３７℃培养２４ｈ进行增菌。如麦康凯培养基没有形成菌落，用ＬＢ培养的菌液在麦康凯培养基进行三区划线，３７％培养２４ｈ观察是否形成单个红色菌落。
４．２．２细菌的药敏试验对分离的细菌进行药敏试验，采用纸片扩散法。在“超净台”中，用经酒精灯火焰灭菌的接种环
２０１４年第０９期
万方数据
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试验研究
挑取适量细菌培养物，以划线方式将细菌均匀涂布到麦康凯琼脂平板上。具体方法：用灭菌接种环取适量细菌分别在平
杆菌对安普霉素、阿米卡星都具有高度敏感性；新霉素、庆大霉素、头孢噻肟钠、恩诺沙星、环丙沙星敏感性居中；而对氟
皿边缘相对四点涂菌，以每点开始划线涂菌至平皿的１，２。然
后，找到第二点划线至平皿的１／２，依次划线，直至细菌均匀密布于平皿。
苯尼考、环丙沙星、复方新诺明、头孢氨苄的抑菌作用较低，甚至已产生耐药性。安普霉素、阿米卡星、庆大霉素及新霉素
均为氨基糖苷类抗生素，对金葡菌、绿脓杆菌、大肠杆菌及变
将镊子于酒精灯火焰灭菌后略停，去药敏片贴到平皿培养基表面。为了使药敏片与培养基紧密相贴，可用镊子轻按
几下药敏片。为了使能准确的观察结果，要求药敏片能有规律的分布于平皿培养基上；一般可在平皿中央贴一片，外周可等距离贴若干片（外周一般可贴７片），每种药敏片的名称要记住。
形杆菌等均有效。此项试验证实：氨基糖苷类抗生素不仅对
标准菌株具有较强的抗菌活性，而且对各种临床菌株也具有较强的抗菌活性。掌握鸡致病性大肠杆菌的耐药情况，通过药敏试验寻找疗效最好的药物，是解决大肠杆菌病的主要手段。
禽大肠杆菌病是由多种血清型的致病性大肠杆菌所引
将平皿培养基置于３７。Ｃ温箱中培养２４ｈ后，观察效果。
用以上的方法对金坛三个鸡场疑似感染禽大肠杆菌的
起的不同类型禽病的总称。大肠杆菌是健康畜禽肠道中的常在菌，可分为致病性和非致病性两大类。由于其抗原性复杂血清型多样，临床病变复杂，且常与病毒性疾病和其他细菌性疾病并发或继发，给养鸡业带来相当大的危害，该病的防治尤为重要。该病的防治原则是加强管理，保持环境卫生，控
制促发因素，搞好预防，才能使疾病得到有效的控制。而药物
病鸡进行剖解，取肝脏部位进行细菌分离。结果其中在麦康
凯培养基分离５株大肠细菌。没有生长细菌的用砧培养基增菌液在麦康凯培养基继续分离细菌，分离到４株大肠杆菌。然后对９株禽大肠杆菌进行药敏试验。
４．２．３药敏试验结果在涂有细菌的麦康凯培养基平板上，抗菌药物在琼脂内向四周扩散，其浓度呈梯度递减，因此在制片周围一定距离内的细菌生长受到抑制。过夜培养后形成
防治仍是目前采用的主要方法，但由于用药不当或药物滥
用，加速了细菌耐药性的产生。因此在临床用药时，建议先对致病菌进行药敏试验，选用敏感药物，同时注意不要长时间
一个抑菌圈，抑菌圈越大，说明该菌对此药敏感性越大，反之越小，若无抑菌圈，则说明该菌对此药具有耐药性。其直径大
小与药物浓度、划线细菌浓度有直接关系。（见表１）
判定标准：抑菌圈直径（书）≥１８ｍｍ为高度敏感，以“＋＋＋”表示；抑菌圈直径１８ｍｍ＞（书）≥１４ｍｍ为中度敏感，以“＋＋”表示；抑菌圈直径１４＞（书）≥ｌＯｍｍ为低度敏感，以
使用同一种药物，应多种高敏抗菌药交替使用，以防止长期使用某种抗菌药而产生抗药性。
参考文献
【ｌ】陆承平主编．兽医微生物学［Ｍ］（三版）一Ｃ京：中国农业出版社，
２００１，２１３—２２３．
［２】冯元璋．鸡大肠杆菌病［Ｊ］Ｉ中国兽医科技，１９８９，１：２０－２２．【３】甘孟侯主编．禽病诊断与防治【Ｍ】．北京：中国农业大学出版社，
２００１：１５９—１６６．
“＋”表示；抑菌圈直径ｌＯｍｍ＞（书）为耐药，以“一”表示。
５讨论
此项试验结果证实：不论是标准菌株还是所分离的大肠
表１
【４】高崧．我国部分地区１０５个禽病原性大肠杆菌的药敏试验【Ｊ】．中
１１株大肠杆菌药敏试验结果
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２０１４年第０９期
万方数据
试验研究
韩国两栖宠物出口对中国壶菌病输入风险预测
王晓龙１，王思睿１，张子群２★，朱蕴绮１
（１．东北林业大学保护医学与生态安全研究中心，哈尔滨１５００４０；２．黑龙江省检验检疫局。哈尔滨１５００００）摘要：近年来，壶茵病已经成为危害全球两栖类种群数量的最重要的真茵性传染病，引起全球的高度重视。由于其
传播扩散能力极强，对有着两栖类贸易往来的国家来说是巨大的潜在威胁。在亚洲，韩国是继日本之后第二个证实在本土存在壶茵的国家。随着韩国两栖类宠物对中国出口数量的增加，明确其壶茵输出对我国的风险极其重要。本文根
据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准，运用释放评估、接触暴露评估、后果评估技术整合得到韩国壶茵的输出风险评估结果以及壶茵输入后定植和传播的可能性评估结果。研究发现韩国壶茵对我国的输出风险评估和输入后定
植传播的可能性评估结果均为“高”。韩国因两栖类宠物贸易输出引起的壶茵病对我国输入性风险较高，而且一旦传
入其定植、扩散的风险也为高风险。
关键词：两栖类宠物；壶茵；输入；风险评估；韩国
Ｄ０１：１０．３９６９／Ｊ．ＩＳＳＮ．１６７１—６０２７．２０１４．０９．００９
目前，全球两栖类的种类和数量正在急剧下降，其衰退
速度比鸟类和哺乳类还快。研究发现壶菌病近３０年来已经使全球２００种两栖类灭绝，全球一半的两栖类种群数量下降。
该病在自然条件下主要通过水体传播，而国际贸易和盲目引种已经越来越成为壶菌跨境传播的另一个重要的传播渠道，
根据中华人民共和国出入境检验检疫行业标准《进出境动物和动物产品风险分析程序和技术要求））（ｓＮｒｒ２４８６—２０１０），对从韩国进口两栖类动物时，其壶菌病输入风险进行分析。１．１进口两栖类壶茸输入风险评价
１．１．１基础评估
１．１．１．１释放评估按照行业标准规定，就生物因子、国家因子和商品因子划定风险因素分析范围，所得数据经与我国相
大大增加了疾病传播风险，一旦传人并定植传播开来，将会对输
入国土著两栖类造成毁灭性打击。如在国际贸易中，北美牛蛙（Ｒ．ｃａｔｅｓｂｅｉａｎａ）将壶菌病传播到了世界许多地方。在澳大利亚从被广泛引入的两栖类中也发现有感染壶菌病的个体。
中国已经成为继日、美之后韩国的第三大贸易伙伴。其境内动物资源中爬虫类、两栖类、鸟类居多。２００９年，根据韩国境内报道的壶菌案例，中韩两栖爬虫类动物贸易已经处于壶菌风险之中，鉴于我国境内尚未分离到壶菌病原，因此开
关国家或行业标准比较得出初步判断结果，以世界各国一般
管理水平等为参照，以高、中、低描述。
１．１．１．２接触暴露评估方法同１．１．１．１。
１．１．１．３后果评估方法同１．１．１．１。１．１．２综合评估
１．１．２．１释放评估和接触暴露综合评估利用１．１．１．１和１．１．１．２结果和工具表（表４）确定释放评估和接触暴露综合淖估结果，备用。
展两栖类壶菌风险输人分析，确保我国两栖类出口贸易意义
重大。
本研究主要分析了韩国出口两栖类及其衍生物到中国
１．１．２．２后果评估与释放、接触综合评估利用１．１．１．３和
１．１．２．１结果和工具表（表５）确定后果评估与释放、接触综
时可能存在的风险及风险等级。
１
合评估结果，备用。
１．１．２．３进口两栖类壶菌传人风险评价本风险评价是基于前述所有评估结果之上的最终评估，以高、中、低描述。
研究方法
★通讯作者
基金项目：国家质检总局科技计划（２０１２１Ｋ００９）资助。
１．２壹酋输入后定植和传播风Ｉ噎－分晰按照行业标准规定，
就释放途径、接触途径、定植和传播途径，以及定植和传播的
・－＋－．－４．－．－４－－一＋一＋一＋－－－＇Ｉ－－．－４－．－４－－＋－＋．－４－．－４－－．－＋－．－４－－．－＋－－．－４－－一＋．－４－．－－＋－－．－４－－＋．－４－－一＋－－－４－－．－４－－．－＋－．－４－－．－４－－一＋－－－６－－－４－－・
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２０１４年第０９期
万方数据
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鸡大肠杆菌的药敏试验
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：
周国瑾
江苏省金坛市直溪畜牧兽医站,金坛,213200
畜牧兽医科技信息
Chinese Journal of Animal Husbandry and Veterinary Medicine2014(9)
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