Jour nal of M athematical M edicine
文章编号:1004-4337(2003) 06-0528-02 中图分类号:
文献标识码:TQ 460. 6
N O . 6 2003V o l . 16A
桑椹子多糖的提取及含量测定
薛 梅 杜 华 王鲁石* 但建明 陈宏伟
(石河子大学师范学院 石河子832003)
摘 要: 用水提醇沉法提取桑椹子多糖, 并用酚-硫酸比色法测定其含量。结果显示, 桑椹子中多糖含量为9. 33%, 平均回收率为101. 86%。
关键词: 桑椹子; 多糖; 提取; 含量测定
桑椹子(Fr uctus M ori Albae ) 为多年生桑科植物桑(M or us alba L. ) 的果穗, 又名桑果、桑实、桑枣、乌椹、黑椹等。其干燥果穗呈长圆形, 长1～2cm, 直径6～10mm, 表面紫红色或紫黑色。果穗由30～60个瘦果聚合而成, 瘦果卵圆形, 稍扁, 长2～5mm , 外具膜质苞片4枚。质油滑, 气微, 味微酸而
甜。我国许多地区都有分布, 主产于江苏、浙江、河北等地。药用全草, 性味甘寒, 补肝、益肾、熄风、滋液。中医用于治疗肝肾阴亏、消渴、便秘、目暗、耳鸣、关节不利等症。文献报道, 桑椹子中含鞣酸、维生素、挥发油等成分[1], 多糖成分未见报道。为了开发利用这一药用植物资源, 本实验对桑椹子用石油醚、乙醚、除去脂溶性杂质, 用80%乙醇提取除去所含单糖、低聚糖及甙类等干扰性成分后, 再用水提醇沉法制得桑椹子粗多糖并采用酚-硫酸比色法对其多糖含量进行了测定[2], 结果令人满意。1 仪器及样品
UV -2401P C 紫外分光光度计(日本岛津); 索氏提取器; 桑椹子购自新疆石河子大学医学院附院中药店, 粉碎后备用。2 标准曲线的绘制
2. 1 标准葡萄糖溶液的配制
精确称取干燥恒重的葡萄糖25. 2mg , 加适量水溶解, 转移至250ml 容量瓶中, 加水至刻度, 摇匀, 配成浓度为100. 8μg ·ml -1标准葡萄糖溶液备用。2. 2 5%苯酚试剂的配制
取苯酚100g , 加铝片0. 1g 和Na HCO 30. 05g , 蒸馏, 收集182℃馏份, 称取7. 5g , 加水150ml 溶解, 置棕色瓶内放冰箱备用。
2. 3 标准曲线绘制
精确量取葡萄糖标准溶液0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7m l 置干燥试管中, 分别加水使成1. 0ml, 再分别加入5%苯酚溶液1. 6ml, 摇匀, 然后加浓H 2SO 47. 0m l, 充分摇匀, 室温放置25min, 同时做一空白, 在490nm 处有最大吸收。将上述实
验数据做回归处理得回归方程:A =0. 06871C +6. 18571×10-3, r =0. 99861。3 多糖的提取及精制
桑椹子粉碎后, 称取100g , 置索氏提取器中, 依次用石油醚(30～60℃) 、乙醚和80%乙醇回流提取4h 。残渣挥干溶剂后, 再以水回流提取4h , 减压浓缩至一半体积, 加入0. 1%活性炭, 脱色, 过滤, 滤液加入95%乙醇使溶液含醇80%, 静置过夜, 过滤, 残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤, 得桑椹子多糖, 60℃烘干备用。4 换算因素测定
精确称取60℃干燥恒重的桑椹子多糖20mg , 水溶解后定容到100ml 容量瓶中, 摇匀, 做为多糖储备液。
精确量取多糖储备液0. 2ml , 加水至1ml , 按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式计算换算因素:
f =W /CD
式中, W 为多糖重量(μg ) , C 为多糖液中葡萄糖的浓度(μg ·ml -1) , D 为多糖的稀释因素, 测得f =1. 83。5 样品测定
精密称取桑椹子粉末0. 20g , 用80%乙醇浸泡过夜, 再于索氏提取器中用80%乙醇回流2h , 残渣挥去溶剂后, 继续以水回流提取2h , 反复洗至250ml 容量瓶中, 定容, 摇匀成为样品液。测定时, 精密吸取样品液1ml, 按测定标准曲线同样方法测其吸光度值, 按下式计算多糖含量:
多糖含量%=CDf /W ×100
式中, C 为样品溶液的葡萄糖的浓度(μg ·ml -1) , D 为样品溶液的稀释因素, f 为换算因素, W 为样品的重量(μg ) , 测得平均结果为9. 33%。6 回收率测定
精密称取桑椹子粉末0. 15g , 精密加入多糖7mg , 再于索氏
石河子大学药学院
数理医药学杂志
文章编号:1004-4337(2003) 06-0529-03 中图分类号:R 961 文献标识码:A
2003年第16卷第6期
阿司匹林的多方位分析研究
黄雪梅 蔡 军
(浙江省湖州师范学院生命学科学院02631班 湖州313000)
摘 要: 阿司匹林是当今人们最熟悉的一种药物, 它的效力绝非仅限于医治头痛脑热的小毛病, 许多令人鼓舞的最新研究表明, 阿司匹林能够治疗许许多多严重疾患。
关键词: 阿司匹林; 乙酰水杨酸; 解热镇痛; 衍生物
1 阿司匹林的发展史
阿司匹林从发明至今已有百年的历史, 在这100年里, 它从一个治疗头痛的药物, 直至被飞往月球的“太阳神十号”作为急救药品之一。人们不断地发现阿司匹林的新效用, 它因此被称为“神奇药”。
2300多年前, 西方医学的奠基人、希腊生理和医学家希波克拉底就已发现, 水杨柳树的叶和皮具有镇痛和退热作用, 但弄不清它的有效成份。
阿司匹林的发明起源于随处可见的柳树。在中国和西方, 人们自古以来就知道柳树皮具有解热镇痛的神奇功效, 在缺医少药的年代里, 人们常常将它作为治疗发烧的廉价“良药”, 在许多偏远的地方, 当产妇生育时, 人们也往往让她咀嚼柳树皮, 作为镇痛的药物。人们一直无法知道柳树皮里究竟含有什么物质, 以致于具有这样神奇的功效, 直至1800年, 人们才从柳树皮中提炼出了具有解热镇痛作用的有效成分——水杨酸, 由此解开这个千年之谜。早在1853年夏尔·弗雷德里克·热拉尔(Gerha rdt) 就用水杨酸与醋酐合成了乙酰水杨酸, 但没能引起人们的重视; 1898年德国化学家菲·霍夫曼(Felit 提取器中用80%乙醇回流2h , 残渣挥去溶剂后, 连续以水回流提取2h , 反复洗至250ml 容量瓶中定容。摇匀后, 精确移取1ml, 按测定标准曲线同样方法测其吸光度值, 按样品测定同样的方法进行提取和测定。计算多糖含量, 平均回收率为101. 86%。7 讨论
多糖广泛存在于自然界, 具有多种生物活性, 是理想的免疫增强剂, 它能激活免疫细胞, 提高机体的免疫功能, 不仅能促进T 细胞、B 细胞、N K 细胞、L AK 细胞、TD 细胞等免疫细胞的功能, 还能促进白间素、干扰素等细胞因子的产生。多糖作为非细胞毒物质, 对正常细胞无毒副作用是其突出优点[3]。在抗肿瘤、抗病毒、抗衰老等药物研究中, 多糖类药物的研制已成为当今世界新药的发展方向之一。我们首次从桑椹子中
Ho ffmann) 又进行了合成, 并为他父亲治疗风湿关节炎, 疗效极好; 1899年由德莱塞(Dreser ) 介绍到临床, 并取名为阿司匹林(Aspirin ) 。我国于1958年开始生产。到目前为止, 已应用百年, 成为医药史上三大经典药物之一, 至今它仍是世界上应用最广泛的解热、镇痛和抗炎药, 也是作为比较和评价其他药物的标准制剂。2 化学角度分析2. 1 理化性质
白色结晶或结晶性粉末, 无臭或微带醋酸臭, 味微酸。易溶于乙醇, 溶于氯仿和乙醚, 微溶于水, 性质不稳定, 在潮湿空气中可缓缓分解成水杨酸和醋酸而略带酸臭味, 故贮藏时应置于密闭、干燥处, 以防分解。2. 2 合成
按美国专利2, 731, 492叙述的方法, 在5677. 5升塘玻璃反映器上装配水冷回流冷凝器、温度计与自动温度记录器以及高速搅拌器。本法初用先制备母液, 即将1532公斤醋酐(15mol) 溶于1200公斤甲苯中, 然后向此母液中加入1382公斤水杨酸(10mo l) , 在高效冷凝器下加热反应混合物至88～92℃, 并在此温度下保温20小时, 随即将反应混合物转移至提取出多糖, 并对其含量进行了测定。桑椹子多糖的结构组成和生理活性有待进一步研究。
参 考 文 献
1 《中华本草》编委会编. 《中华本草》. 第二册. 上海科学技术出版社, 1999, 5, 531.
2 周静, 李艳, 薛梅, 等. 酸浆果多糖的提取及含量测定. 数理医药学杂志, 2000, 13(3):242.
3 何燕, 吴雄志, 曾升平. 中药多糖的免疫调节作用. 四川中医,
2001, 19(2):15～17.
收稿日期:2003-08-25
Jour nal of M athematical M edicine
文章编号:1004-4337(2003) 06-0528-02 中图分类号:
文献标识码:TQ 460. 6
N O . 6 2003V o l . 16A
桑椹子多糖的提取及含量测定
薛 梅 杜 华 王鲁石* 但建明 陈宏伟
(石河子大学师范学院 石河子832003)
摘 要: 用水提醇沉法提取桑椹子多糖, 并用酚-硫酸比色法测定其含量。结果显示, 桑椹子中多糖含量为9. 33%, 平均回收率为101. 86%。
关键词: 桑椹子; 多糖; 提取; 含量测定
桑椹子(Fr uctus M ori Albae ) 为多年生桑科植物桑(M or us alba L. ) 的果穗, 又名桑果、桑实、桑枣、乌椹、黑椹等。其干燥果穗呈长圆形, 长1～2cm, 直径6～10mm, 表面紫红色或紫黑色。果穗由30～60个瘦果聚合而成, 瘦果卵圆形, 稍扁, 长2～5mm , 外具膜质苞片4枚。质油滑, 气微, 味微酸而
甜。我国许多地区都有分布, 主产于江苏、浙江、河北等地。药用全草, 性味甘寒, 补肝、益肾、熄风、滋液。中医用于治疗肝肾阴亏、消渴、便秘、目暗、耳鸣、关节不利等症。文献报道, 桑椹子中含鞣酸、维生素、挥发油等成分[1], 多糖成分未见报道。为了开发利用这一药用植物资源, 本实验对桑椹子用石油醚、乙醚、除去脂溶性杂质, 用80%乙醇提取除去所含单糖、低聚糖及甙类等干扰性成分后, 再用水提醇沉法制得桑椹子粗多糖并采用酚-硫酸比色法对其多糖含量进行了测定[2], 结果令人满意。1 仪器及样品
UV -2401P C 紫外分光光度计(日本岛津); 索氏提取器; 桑椹子购自新疆石河子大学医学院附院中药店, 粉碎后备用。2 标准曲线的绘制
2. 1 标准葡萄糖溶液的配制
精确称取干燥恒重的葡萄糖25. 2mg , 加适量水溶解, 转移至250ml 容量瓶中, 加水至刻度, 摇匀, 配成浓度为100. 8μg ·ml -1标准葡萄糖溶液备用。2. 2 5%苯酚试剂的配制
取苯酚100g , 加铝片0. 1g 和Na HCO 30. 05g , 蒸馏, 收集182℃馏份, 称取7. 5g , 加水150ml 溶解, 置棕色瓶内放冰箱备用。
2. 3 标准曲线绘制
精确量取葡萄糖标准溶液0. 1、0. 2、0. 3、0. 4、0. 5、0. 6、0. 7m l 置干燥试管中, 分别加水使成1. 0ml, 再分别加入5%苯酚溶液1. 6ml, 摇匀, 然后加浓H 2SO 47. 0m l, 充分摇匀, 室温放置25min, 同时做一空白, 在490nm 处有最大吸收。将上述实
验数据做回归处理得回归方程:A =0. 06871C +6. 18571×10-3, r =0. 99861。3 多糖的提取及精制
桑椹子粉碎后, 称取100g , 置索氏提取器中, 依次用石油醚(30～60℃) 、乙醚和80%乙醇回流提取4h 。残渣挥干溶剂后, 再以水回流提取4h , 减压浓缩至一半体积, 加入0. 1%活性炭, 脱色, 过滤, 滤液加入95%乙醇使溶液含醇80%, 静置过夜, 过滤, 残渣用乙醚、无水乙醇反复洗涤, 得桑椹子多糖, 60℃烘干备用。4 换算因素测定
精确称取60℃干燥恒重的桑椹子多糖20mg , 水溶解后定容到100ml 容量瓶中, 摇匀, 做为多糖储备液。
精确量取多糖储备液0. 2ml , 加水至1ml , 按测定标准曲线同样的方法测其吸光度值。按下式计算换算因素:
f =W /CD
式中, W 为多糖重量(μg ) , C 为多糖液中葡萄糖的浓度(μg ·ml -1) , D 为多糖的稀释因素, 测得f =1. 83。5 样品测定
精密称取桑椹子粉末0. 20g , 用80%乙醇浸泡过夜, 再于索氏提取器中用80%乙醇回流2h , 残渣挥去溶剂后, 继续以水回流提取2h , 反复洗至250ml 容量瓶中, 定容, 摇匀成为样品液。测定时, 精密吸取样品液1ml, 按测定标准曲线同样方法测其吸光度值, 按下式计算多糖含量:
多糖含量%=CDf /W ×100
式中, C 为样品溶液的葡萄糖的浓度(μg ·ml -1) , D 为样品溶液的稀释因素, f 为换算因素, W 为样品的重量(μg ) , 测得平均结果为9. 33%。6 回收率测定
精密称取桑椹子粉末0. 15g , 精密加入多糖7mg , 再于索氏
石河子大学药学院
数理医药学杂志
文章编号:1004-4337(2003) 06-0529-03 中图分类号:R 961 文献标识码:A
2003年第16卷第6期
阿司匹林的多方位分析研究
黄雪梅 蔡 军
(浙江省湖州师范学院生命学科学院02631班 湖州313000)
摘 要: 阿司匹林是当今人们最熟悉的一种药物, 它的效力绝非仅限于医治头痛脑热的小毛病, 许多令人鼓舞的最新研究表明, 阿司匹林能够治疗许许多多严重疾患。
关键词: 阿司匹林; 乙酰水杨酸; 解热镇痛; 衍生物
1 阿司匹林的发展史
阿司匹林从发明至今已有百年的历史, 在这100年里, 它从一个治疗头痛的药物, 直至被飞往月球的“太阳神十号”作为急救药品之一。人们不断地发现阿司匹林的新效用, 它因此被称为“神奇药”。
2300多年前, 西方医学的奠基人、希腊生理和医学家希波克拉底就已发现, 水杨柳树的叶和皮具有镇痛和退热作用, 但弄不清它的有效成份。
阿司匹林的发明起源于随处可见的柳树。在中国和西方, 人们自古以来就知道柳树皮具有解热镇痛的神奇功效, 在缺医少药的年代里, 人们常常将它作为治疗发烧的廉价“良药”, 在许多偏远的地方, 当产妇生育时, 人们也往往让她咀嚼柳树皮, 作为镇痛的药物。人们一直无法知道柳树皮里究竟含有什么物质, 以致于具有这样神奇的功效, 直至1800年, 人们才从柳树皮中提炼出了具有解热镇痛作用的有效成分——水杨酸, 由此解开这个千年之谜。早在1853年夏尔·弗雷德里克·热拉尔(Gerha rdt) 就用水杨酸与醋酐合成了乙酰水杨酸, 但没能引起人们的重视; 1898年德国化学家菲·霍夫曼(Felit 提取器中用80%乙醇回流2h , 残渣挥去溶剂后, 连续以水回流提取2h , 反复洗至250ml 容量瓶中定容。摇匀后, 精确移取1ml, 按测定标准曲线同样方法测其吸光度值, 按样品测定同样的方法进行提取和测定。计算多糖含量, 平均回收率为101. 86%。7 讨论
多糖广泛存在于自然界, 具有多种生物活性, 是理想的免疫增强剂, 它能激活免疫细胞, 提高机体的免疫功能, 不仅能促进T 细胞、B 细胞、N K 细胞、L AK 细胞、TD 细胞等免疫细胞的功能, 还能促进白间素、干扰素等细胞因子的产生。多糖作为非细胞毒物质, 对正常细胞无毒副作用是其突出优点[3]。在抗肿瘤、抗病毒、抗衰老等药物研究中, 多糖类药物的研制已成为当今世界新药的发展方向之一。我们首次从桑椹子中
Ho ffmann) 又进行了合成, 并为他父亲治疗风湿关节炎, 疗效极好; 1899年由德莱塞(Dreser ) 介绍到临床, 并取名为阿司匹林(Aspirin ) 。我国于1958年开始生产。到目前为止, 已应用百年, 成为医药史上三大经典药物之一, 至今它仍是世界上应用最广泛的解热、镇痛和抗炎药, 也是作为比较和评价其他药物的标准制剂。2 化学角度分析2. 1 理化性质
白色结晶或结晶性粉末, 无臭或微带醋酸臭, 味微酸。易溶于乙醇, 溶于氯仿和乙醚, 微溶于水, 性质不稳定, 在潮湿空气中可缓缓分解成水杨酸和醋酸而略带酸臭味, 故贮藏时应置于密闭、干燥处, 以防分解。2. 2 合成
按美国专利2, 731, 492叙述的方法, 在5677. 5升塘玻璃反映器上装配水冷回流冷凝器、温度计与自动温度记录器以及高速搅拌器。本法初用先制备母液, 即将1532公斤醋酐(15mol) 溶于1200公斤甲苯中, 然后向此母液中加入1382公斤水杨酸(10mo l) , 在高效冷凝器下加热反应混合物至88～92℃, 并在此温度下保温20小时, 随即将反应混合物转移至提取出多糖, 并对其含量进行了测定。桑椹子多糖的结构组成和生理活性有待进一步研究。
参 考 文 献
1 《中华本草》编委会编. 《中华本草》. 第二册. 上海科学技术出版社, 1999, 5, 531.
2 周静, 李艳, 薛梅, 等. 酸浆果多糖的提取及含量测定. 数理医药学杂志, 2000, 13(3):242.
3 何燕, 吴雄志, 曾升平. 中药多糖的免疫调节作用. 四川中医,
2001, 19(2):15～17.
收稿日期:2003-08-25