第49卷第6期2010年6月农 药
AGROCHEMICALSVol. 49, No. 6Jun. 2010
二甲戊乐灵反应液的高效液相色谱分析
莫炳辉，韦志明，韦 勤
(广西化工研究院， 南宁 530001)
摘要：采用HPLC法，以C18柱为固定相，甲醇-水(体积比7∶3)为流动相，检测器检测波长为250 nm，外标法定量，
在室温条件下分离反应液中的3,4-二甲基苯胺、二甲戊乐灵及其他组分，并准确测定其含量。3-戊酮、 3,4-二甲基苯胺的变异系数为19.15‰，回收率为97%~102%，线性范围为0.2~10 g/L；回收3-戊酮的变异系数为15.30‰，率为96%~102%，线性范围为0.2~10 g/L；二甲戊乐灵的变异系数为26.86‰，回收率为98%~104%，线性范围为0.2~10 g/L。 关键词：高效液相色谱法；二甲戊乐灵 3,4-二甲基苯胺；3-戊酮；中图分类号：TQ450.7 文献标志码：A 文章编号：1006-0413(2010)06-0419-02
Analysis of Reaction Solution of Pendimethalin by HPLC
MO Bing-hui, WEI Zhi-ming, WEI Qin
(Guangxi Research Institute of Chemic Industry, Nanning 530001, China)
Abstract: A method for analysis of reaction solution of pendimethalin had been developed by adopting HPLC with the C18 column. They were detected at 250 nm and at room temperature, and the mobile phase included 70% methanol and 30% water. The RSD, recovery and linearity range for 3,4-dimethylaniline was respectively 19.15‰, 97-102% and 0.2-10 g/L, that for 3-pentanone respectively15.30‰, 96-102% and 0.2-10 g/L and that for pendimethalin respectively 26.86‰, 98-104% and 0.2-10 g/L.Key words: HPLC; 3,4-dimethylaniline; 3-pentanone; pendimethalin
二甲戊乐灵由美国氰胺公司于1972年开发，是一种选择性苗前二硝基苯胺类除草剂，该产品高效低毒，又因具有土壤对其吸附性强、不易淋溶、在土壤中移动性小、与环境友好等特点，故得到广泛使用。 二甲戊乐灵也是一种理想的芽前及芽后选择性除草剂，主要用于防除凤梨、甘蔗、菠萝、玉米、咖啡等耕地杂草，应用范围扩大，产量成倍增长。 目前二甲戊乐灵在国内市场上广泛使用，但它们的分析方法在国内介绍不多。 自
[1]
1980年文献第1次介绍二甲戊乐灵的分析方法以来，
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
带Waters2487型高效液相色谱仪(美国Waters公司)，2487程序双波波长紫外检测器，Waters515型高压泵，Reodyn手动进样阀。
二甲戊乐灵(质量分数99%，Dr.Ehrenstorfer-schäfers Lab.)，3,4-二甲基苯胺(质量分数99%，Merck Chemicals公司)，甲醇为分析纯，3-戊酮(质量分数98%，Aldrich公司)，蒸馏水为二次重蒸水。
待测样品为广西化工研究院工艺研究过程中的产品。 标准溶液：分别称取二甲戊乐灵、3,4-二甲基苯胺及以无3-戊酮约0.5 g(精确至0.000 2 g)于100 mL容量瓶中，水乙醇溶解并定容至刻度。
国外有大量有关二甲戊乐灵分析方法的介绍，但都是基于色谱法，李菊清等利用气相色谱法检测二甲戊乐灵，Vitali、Paul等
[2]
[3-4]
用高效液相色谱对二甲戊乐灵等
[5]
[6]
农药进行了分析，此外也有文章介绍了高效薄层色谱
及气相色谱-质谱联用仪进行相关分析，但研究合成二甲戊乐灵反应液中各组分的分离测试方法，还未见报道。对指导合成 探索其反应原料及产物的分析方法，条件的探索，优化工艺参数非常有意义。 本文结合研究用紫外检测需要及本课题实验条件，摸索出采用C18柱，器进行检测的高效液相色谱法，实验证明该法具有简单、快速、准确、重复性好等特点，适用于产品质量的常规分析工作。
1.2 色谱条件
大连依色谱柱为Hypersil BDS C18(4.6 mm×250 mm，利特公司)，甲醇-水(体积比7∶检测器检测波3)为流动相，长为250 nm，灵敏度为0.100 AUFS，柱温为室温，进样量为20 µL。
1.3 分析步骤
使其含有未反应原料，产物及 选取1个合成样品，
收稿日期：修返日期：2010-02-09，2010-03-15
基金项目：广西壮族自治区科学基金资助项目(桂科基0731029) 作者简介：莫炳辉(1976—)，男，高级工程师，从事农药和精细化工研究。 Tel：0771-3331758，E-mail：mbh_gxhgy@163.com。
420农 药 AGROCHEMICALS第49卷
副产物质量分数尽可能高并且含量接近0.5 g(准确至并将其溶于100 mL容量瓶中，以无水乙醇溶解0.0002 g)，
并定容。外标法定量。 供HPLC分析，
2.3 工作曲线
在选取的色谱操作条件下，分别配制质量浓度为二甲戊乐灵标准系0.2~10 g/L的3-戊酮、3,4-二甲基苯胺、列溶液(准确至0.000 2 g)，并进行色谱分析，绘制工作曲线，结果见表1。 本色谱条件测定3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的线性范围均为0.2~10 g/L。
表1 3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的线性回归方程
组分 线性回归方程(y=) 线性相关系数
0.014 25+12.80 0.998 3 9
-0.010 25+17.21x 0.999 3,4-二甲基苯胺 2
二甲戊乐灵 0.007 602+10.99x 0.999 7
2 结果与讨论
2.1 色谱条件的优化
以甲醇-水(体积比7∶3)为流动相，是因为分离柱为在用极性有机溶剂甲醇的比例高于Hypersil BDS C18柱，
待测组分的容量因子较小，分离效果不70%作流动相时，
好，尤其是副产物N-硝基(1-乙基丙基)-2,6-二硝基-3,4-二甲基苯胺与二甲戊乐灵非常重叠；而在用甲醇的比例低于70%作流动相时，发现二甲戊乐灵、副3,4-二甲基苯胺、产物及3-戊酮色谱峰有些拖尾，而且峰形变宽。 在用以甲
方法准确度醇-水(体积比7∶3)为流动相时，此时的色谱峰峰形较好，2.4
利用分析样品的回收率和最低检出限来考察方法的准峰形变尖且对称，基线平稳。 2.2 色谱的分离与测定
在上述色谱操作条件下典型色谱图见图1，可看出：待测物质及其他组分的分离较完全，峰形对称，基线平稳。
确度，称取已知含量且含量相近的3-戊酮、3,4-二甲基苯胺量已知质量浓度的3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵标准品，定容。 按上述色谱条件分别测定3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的含量，求其回收率。 以2倍噪音求得此方法中3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的最低检出限，其结果为3-戊酮回收率96%~102%，最低检出限最低检出限0.2 mg/L；3,4-二甲基苯胺回收率97%~102%，
和二甲戊乐灵样品4批于100 mL容量瓶中，分别加入一定
二甲戊乐灵回收率98%~104%，最低检出限1.2 mg/L。0.5 mg/L；
2.5 方法精密度
1为3-戊酮， 2为3,4-二甲基苯胺， 3为副产物， 4为二甲戊乐灵
选取具有代表性的含有3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的反应液，按上述色谱条件平行测定5次。 考查此方法的精密度，分析结果见表2。
-
图1 样品的色谱图
表2 3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵
质量浓度/(g·L1) 平均值/(g·L1) 标准偏差(n=5) 变异系数/‰ 组分
3 0.52130.50270.51780.52000.5099 0.5143 0.00787 15.303,4-二甲基苯胺 0.4687，0.4516，0.4700，0.4735，0.4598 0.4647 0.00890 19.15二甲戊乐灵 0.5568，0.5732，0.5698，0.5400，0.5436 0.5567 0.01495 26.86
-
2.6 结论
实验结果表明：方法提出的3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵混合物的分析方法具有较高的准确度和较好的精密度，并且操作简单，方便，能作为常规分析方法。
[4]
Liquid Chromatography after Solid-phase Extraction[J]. J
Chromatogr, 1994, 660(1/2): 251-257.
PAUL B, ALASDAIR M C, RALF H. Determination of Seventeen
参考文献：
[1] [2] [3]
PESTEMER W, MANN W. Herbicide Residues in Some Herbs[J]. Z Lebensm Unters Forsch, 1980, 171(4): 272-277.
李菊清, 周孝瑞, 曾件武. 二甲戊乐灵的气相色谱分析[J]. 分析化学, 2001, 29(5): 614.
VITALI P, VENTURINI E, BONORA C, et al. Determination of Triazines and Dinitroanilines in Waters by High-performance
s-Triazine Herbicides and Derivatives by High-pressure Liquid Chromatography[J]. J Agric Food Chem, 1981, 29(6): 219-222.[5] CHRISTINE G, PETER H. Identification and Quantitative of
Currently Important Pesticides by HPTLC[J]. Z Lebensm-unters Forsch, 1991, 192(1): 40-45.
[6] PEREZ R A, SANCHEZ-BRUNETE C, MIGUEL E, et al.
Analytical Methods for the Determination in Soil of Herbicides Used in Forestry by GC-NPD and GC/MS[J]. J Agric Food Chem 1998, 46(5): 1864-1869.
责任编辑：李新
第49卷第6期2010年6月农 药
AGROCHEMICALSVol. 49, No. 6Jun. 2010
二甲戊乐灵反应液的高效液相色谱分析
莫炳辉，韦志明，韦 勤
(广西化工研究院， 南宁 530001)
摘要：采用HPLC法，以C18柱为固定相，甲醇-水(体积比7∶3)为流动相，检测器检测波长为250 nm，外标法定量，
在室温条件下分离反应液中的3,4-二甲基苯胺、二甲戊乐灵及其他组分，并准确测定其含量。3-戊酮、 3,4-二甲基苯胺的变异系数为19.15‰，回收率为97%~102%，线性范围为0.2~10 g/L；回收3-戊酮的变异系数为15.30‰，率为96%~102%，线性范围为0.2~10 g/L；二甲戊乐灵的变异系数为26.86‰，回收率为98%~104%，线性范围为0.2~10 g/L。 关键词：高效液相色谱法；二甲戊乐灵 3,4-二甲基苯胺；3-戊酮；中图分类号：TQ450.7 文献标志码：A 文章编号：1006-0413(2010)06-0419-02
Analysis of Reaction Solution of Pendimethalin by HPLC
MO Bing-hui, WEI Zhi-ming, WEI Qin
(Guangxi Research Institute of Chemic Industry, Nanning 530001, China)
Abstract: A method for analysis of reaction solution of pendimethalin had been developed by adopting HPLC with the C18 column. They were detected at 250 nm and at room temperature, and the mobile phase included 70% methanol and 30% water. The RSD, recovery and linearity range for 3,4-dimethylaniline was respectively 19.15‰, 97-102% and 0.2-10 g/L, that for 3-pentanone respectively15.30‰, 96-102% and 0.2-10 g/L and that for pendimethalin respectively 26.86‰, 98-104% and 0.2-10 g/L.Key words: HPLC; 3,4-dimethylaniline; 3-pentanone; pendimethalin
二甲戊乐灵由美国氰胺公司于1972年开发，是一种选择性苗前二硝基苯胺类除草剂，该产品高效低毒，又因具有土壤对其吸附性强、不易淋溶、在土壤中移动性小、与环境友好等特点，故得到广泛使用。 二甲戊乐灵也是一种理想的芽前及芽后选择性除草剂，主要用于防除凤梨、甘蔗、菠萝、玉米、咖啡等耕地杂草，应用范围扩大，产量成倍增长。 目前二甲戊乐灵在国内市场上广泛使用，但它们的分析方法在国内介绍不多。 自
[1]
1980年文献第1次介绍二甲戊乐灵的分析方法以来，
1 实验部分
1.1 仪器与试剂
带Waters2487型高效液相色谱仪(美国Waters公司)，2487程序双波波长紫外检测器，Waters515型高压泵，Reodyn手动进样阀。
二甲戊乐灵(质量分数99%，Dr.Ehrenstorfer-schäfers Lab.)，3,4-二甲基苯胺(质量分数99%，Merck Chemicals公司)，甲醇为分析纯，3-戊酮(质量分数98%，Aldrich公司)，蒸馏水为二次重蒸水。
待测样品为广西化工研究院工艺研究过程中的产品。 标准溶液：分别称取二甲戊乐灵、3,4-二甲基苯胺及以无3-戊酮约0.5 g(精确至0.000 2 g)于100 mL容量瓶中，水乙醇溶解并定容至刻度。
国外有大量有关二甲戊乐灵分析方法的介绍，但都是基于色谱法，李菊清等利用气相色谱法检测二甲戊乐灵，Vitali、Paul等
[2]
[3-4]
用高效液相色谱对二甲戊乐灵等
[5]
[6]
农药进行了分析，此外也有文章介绍了高效薄层色谱
及气相色谱-质谱联用仪进行相关分析，但研究合成二甲戊乐灵反应液中各组分的分离测试方法，还未见报道。对指导合成 探索其反应原料及产物的分析方法，条件的探索，优化工艺参数非常有意义。 本文结合研究用紫外检测需要及本课题实验条件，摸索出采用C18柱，器进行检测的高效液相色谱法，实验证明该法具有简单、快速、准确、重复性好等特点，适用于产品质量的常规分析工作。
1.2 色谱条件
大连依色谱柱为Hypersil BDS C18(4.6 mm×250 mm，利特公司)，甲醇-水(体积比7∶检测器检测波3)为流动相，长为250 nm，灵敏度为0.100 AUFS，柱温为室温，进样量为20 µL。
1.3 分析步骤
使其含有未反应原料，产物及 选取1个合成样品，
收稿日期：修返日期：2010-02-09，2010-03-15
基金项目：广西壮族自治区科学基金资助项目(桂科基0731029) 作者简介：莫炳辉(1976—)，男，高级工程师，从事农药和精细化工研究。 Tel：0771-3331758，E-mail：mbh_gxhgy@163.com。
420农 药 AGROCHEMICALS第49卷
副产物质量分数尽可能高并且含量接近0.5 g(准确至并将其溶于100 mL容量瓶中，以无水乙醇溶解0.0002 g)，
并定容。外标法定量。 供HPLC分析，
2.3 工作曲线
在选取的色谱操作条件下，分别配制质量浓度为二甲戊乐灵标准系0.2~10 g/L的3-戊酮、3,4-二甲基苯胺、列溶液(准确至0.000 2 g)，并进行色谱分析，绘制工作曲线，结果见表1。 本色谱条件测定3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的线性范围均为0.2~10 g/L。
表1 3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的线性回归方程
组分 线性回归方程(y=) 线性相关系数
0.014 25+12.80 0.998 3 9
-0.010 25+17.21x 0.999 3,4-二甲基苯胺 2
二甲戊乐灵 0.007 602+10.99x 0.999 7
2 结果与讨论
2.1 色谱条件的优化
以甲醇-水(体积比7∶3)为流动相，是因为分离柱为在用极性有机溶剂甲醇的比例高于Hypersil BDS C18柱，
待测组分的容量因子较小，分离效果不70%作流动相时，
好，尤其是副产物N-硝基(1-乙基丙基)-2,6-二硝基-3,4-二甲基苯胺与二甲戊乐灵非常重叠；而在用甲醇的比例低于70%作流动相时，发现二甲戊乐灵、副3,4-二甲基苯胺、产物及3-戊酮色谱峰有些拖尾，而且峰形变宽。 在用以甲
方法准确度醇-水(体积比7∶3)为流动相时，此时的色谱峰峰形较好，2.4
利用分析样品的回收率和最低检出限来考察方法的准峰形变尖且对称，基线平稳。 2.2 色谱的分离与测定
在上述色谱操作条件下典型色谱图见图1，可看出：待测物质及其他组分的分离较完全，峰形对称，基线平稳。
确度，称取已知含量且含量相近的3-戊酮、3,4-二甲基苯胺量已知质量浓度的3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵标准品，定容。 按上述色谱条件分别测定3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的含量，求其回收率。 以2倍噪音求得此方法中3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的最低检出限，其结果为3-戊酮回收率96%~102%，最低检出限最低检出限0.2 mg/L；3,4-二甲基苯胺回收率97%~102%，
和二甲戊乐灵样品4批于100 mL容量瓶中，分别加入一定
二甲戊乐灵回收率98%~104%，最低检出限1.2 mg/L。0.5 mg/L；
2.5 方法精密度
1为3-戊酮， 2为3,4-二甲基苯胺， 3为副产物， 4为二甲戊乐灵
选取具有代表性的含有3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵的反应液，按上述色谱条件平行测定5次。 考查此方法的精密度，分析结果见表2。
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图1 样品的色谱图
表2 3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵
质量浓度/(g·L1) 平均值/(g·L1) 标准偏差(n=5) 变异系数/‰ 组分
3 0.52130.50270.51780.52000.5099 0.5143 0.00787 15.303,4-二甲基苯胺 0.4687，0.4516，0.4700，0.4735，0.4598 0.4647 0.00890 19.15二甲戊乐灵 0.5568，0.5732，0.5698，0.5400，0.5436 0.5567 0.01495 26.86
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2.6 结论
实验结果表明：方法提出的3-戊酮、3,4-二甲基苯胺和二甲戊乐灵混合物的分析方法具有较高的准确度和较好的精密度，并且操作简单，方便，能作为常规分析方法。
[4]
Liquid Chromatography after Solid-phase Extraction[J]. J
Chromatogr, 1994, 660(1/2): 251-257.
PAUL B, ALASDAIR M C, RALF H. Determination of Seventeen
参考文献：
[1] [2] [3]
PESTEMER W, MANN W. Herbicide Residues in Some Herbs[J]. Z Lebensm Unters Forsch, 1980, 171(4): 272-277.
李菊清, 周孝瑞, 曾件武. 二甲戊乐灵的气相色谱分析[J]. 分析化学, 2001, 29(5): 614.
VITALI P, VENTURINI E, BONORA C, et al. Determination of Triazines and Dinitroanilines in Waters by High-performance
s-Triazine Herbicides and Derivatives by High-pressure Liquid Chromatography[J]. J Agric Food Chem, 1981, 29(6): 219-222.[5] CHRISTINE G, PETER H. Identification and Quantitative of
Currently Important Pesticides by HPTLC[J]. Z Lebensm-unters Forsch, 1991, 192(1): 40-45.
[6] PEREZ R A, SANCHEZ-BRUNETE C, MIGUEL E, et al.
Analytical Methods for the Determination in Soil of Herbicides Used in Forestry by GC-NPD and GC/MS[J]. J Agric Food Chem 1998, 46(5): 1864-1869.
责任编辑：李新