实验六 水果硬糖中还原糖量的测定
一、实验内容
用直接滴定法测定水果硬糖中还原糖的含量。
二、实验目的与要求
1、进一步巩固和规范氧化还原滴定操作。
2、理解还原糖测定原理及操作要点。
3、掌握水果硬糖中还原糖测定的操作技能。
4、学会控制反应条件，掌握提高还原糖测定精密度的方法。
三、实验原理
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。以次甲基蓝作指示剂，在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。最后根据样品液消耗体积，计算还原糖量（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液）。
四、试剂
（1）碱性酒石酸铜甲液：称取15.00 g硫酸铜（CuSO 4 ·5H 2O ）及0.05 g
次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000 mL。
（2）碱性酒石酸铜乙液：称取50.00 g 酒石酸钾钠及75 g 氢氧化钠，溶于水中，再加入4g 亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000 mL贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
（3）葡萄糖标准溶液：精确称取1.0000 g经过（99±1）℃干燥至恒重的纯葡萄糖，加水溶解后加入5 mL盐酸，并以水稀释至1000 mL。此溶液每毫升相当于1.0mg 葡萄糖。
五、仪器
酸式滴定管，可调式电炉（带石棉板）、电子天平（1mg ）、150mL 锥形瓶、250 mL容量瓶、玻璃珠
六、操作方法
1、样品处理：准确称取（准确至0.01g ）样品（提前研成粉末）置于250 mL 容量瓶中加水溶解定容，摇匀，即为样液。
2、标定碱性酒石酸铜溶液
吸取5.0 mL碱性酒石酸铜甲液及5.0 mL乙液，置于150 mL锥形瓶中，加水10 mL ，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 mL 葡萄糖标准溶液，控制在2 min 内加热至沸，趁沸以每1滴/2s 的速度继续滴加葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖或其他还原糖标准溶液的总体积，同时平行操作3份，取其平均值，计算每10 mL（甲、乙液各5 mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量（mg ）。
ｍ1＝Ｖ1×ｍ2
式中：ｍ1－10 mL碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各5 mL）相当于还原糖（以葡
萄糖计）的质量，mg ；
Ｖ1－平均消耗还原糖标准溶液的体积，mL
ｍ2－1mL 还原糖标准溶液相当于还原糖的质量，1mg
3、样品液预测
吸取5.0mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL 乙液，置于150mL 锥形瓶中，加水10mL ，加入玻璃珠2粒，控制在2 min 内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每1滴/2s的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积（样品中还原糖浓度根据预测加以调节，以0.1g/100g为宜，即控制样液消耗体积在10mL 左右，否则误差大）。
4、样品溶液的测定
吸取5.0 mL碱性酒石酸铜甲液及5.0 mL乙液，置于150 mL锥形瓶中，加水10 mL ，加入玻璃珠2粒，从滴定管加比预测体积少1mL 的样品溶液，控制在2 min内加热至沸，准确沸腾30s ，趁沸继续以每1滴/2s的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。同法平行操作3次，求平均消耗体积。
七、结果处理
1、数据记录
2、结果计算
ｍ１
X ＝——————————×100
ｍ× (V2／250 )×100
式中：X － 样品中还原糖的含量（以某种还原糖计），g/100g
ｍ1－ 10mL碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各5mL ）相当于还原糖（以葡萄
糖计）的质量，mg
ｍ － 样品质量（或体积），g （mL ）
V 2 － 测定时平均消耗样品溶液体积，mL
250－ 样品液总体积，mL
八、说明
本法对滴定操作条件要求很严。对碱性酒石酸铜溶液的标定，样品液必须预测，样品液测定的操作条件与预测条件均应保持一致。
实验六 水果硬糖中还原糖量的测定
一、实验内容
用直接滴定法测定水果硬糖中还原糖的含量。
二、实验目的与要求
1、进一步巩固和规范氧化还原滴定操作。
2、理解还原糖测定原理及操作要点。
3、掌握水果硬糖中还原糖测定的操作技能。
4、学会控制反应条件，掌握提高还原糖测定精密度的方法。
三、实验原理
样品经除去蛋白质后，在加热条件下，直接滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液，还原糖将二价铜还原为氧化亚铜。以次甲基蓝作指示剂，在终点稍过量的还原糖将蓝色的氧化型次甲基蓝还原为无色的还原型次甲基蓝。最后根据样品液消耗体积，计算还原糖量（用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液）。
四、试剂
（1）碱性酒石酸铜甲液：称取15.00 g硫酸铜（CuSO 4 ·5H 2O ）及0.05 g
次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000 mL。
（2）碱性酒石酸铜乙液：称取50.00 g 酒石酸钾钠及75 g 氢氧化钠，溶于水中，再加入4g 亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000 mL贮存于橡胶塞玻璃瓶中。
（3）葡萄糖标准溶液：精确称取1.0000 g经过（99±1）℃干燥至恒重的纯葡萄糖，加水溶解后加入5 mL盐酸，并以水稀释至1000 mL。此溶液每毫升相当于1.0mg 葡萄糖。
五、仪器
酸式滴定管，可调式电炉（带石棉板）、电子天平（1mg ）、150mL 锥形瓶、250 mL容量瓶、玻璃珠
六、操作方法
1、样品处理：准确称取（准确至0.01g ）样品（提前研成粉末）置于250 mL 容量瓶中加水溶解定容，摇匀，即为样液。
2、标定碱性酒石酸铜溶液
吸取5.0 mL碱性酒石酸铜甲液及5.0 mL乙液，置于150 mL锥形瓶中，加水10 mL ，加入玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9 mL 葡萄糖标准溶液，控制在2 min 内加热至沸，趁沸以每1滴/2s 的速度继续滴加葡萄糖标准溶液或其他还原糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖或其他还原糖标准溶液的总体积，同时平行操作3份，取其平均值，计算每10 mL（甲、乙液各5 mL）碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量（mg ）。
ｍ1＝Ｖ1×ｍ2
式中：ｍ1－10 mL碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各5 mL）相当于还原糖（以葡
萄糖计）的质量，mg ；
Ｖ1－平均消耗还原糖标准溶液的体积，mL
ｍ2－1mL 还原糖标准溶液相当于还原糖的质量，1mg
3、样品液预测
吸取5.0mL 碱性酒石酸铜甲液及5.0mL 乙液，置于150mL 锥形瓶中，加水10mL ，加入玻璃珠2粒，控制在2 min 内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加样品溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变浅时，以每1滴/2s的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积（样品中还原糖浓度根据预测加以调节，以0.1g/100g为宜，即控制样液消耗体积在10mL 左右，否则误差大）。
4、样品溶液的测定
吸取5.0 mL碱性酒石酸铜甲液及5.0 mL乙液，置于150 mL锥形瓶中，加水10 mL ，加入玻璃珠2粒，从滴定管加比预测体积少1mL 的样品溶液，控制在2 min内加热至沸，准确沸腾30s ，趁沸继续以每1滴/2s的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。同法平行操作3次，求平均消耗体积。
七、结果处理
1、数据记录
2、结果计算
ｍ１
X ＝——————————×100
ｍ× (V2／250 )×100
式中：X － 样品中还原糖的含量（以某种还原糖计），g/100g
ｍ1－ 10mL碱性酒石酸铜溶液（甲、乙液各5mL ）相当于还原糖（以葡萄
糖计）的质量，mg
ｍ － 样品质量（或体积），g （mL ）
V 2 － 测定时平均消耗样品溶液体积，mL
250－ 样品液总体积，mL
八、说明
本法对滴定操作条件要求很严。对碱性酒石酸铜溶液的标定，样品液必须预测，样品液测定的操作条件与预测条件均应保持一致。