1、 目的
通过微生物挑战性试验，确定臭氧发生器或紫外灯在一定时间内对的灭菌效果。 2. 适用范围
用于企业所有臭氧发生器及紫外灯消毒效果的验证。 3. 责任范围
验证小组成员对本方案负责。 4. 概述
臭氧是一种广谱高效灭菌剂，具有强烈杀菌消毒作用。在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O 2）和单个氧原子（O ），后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为氧分子（O 2），不存在任何有毒残留物，为无污染消毒剂。 5. 验证内容 5.1 验证范围：
验证安装的臭氧发生器及紫外灯在各个车间在规定时间内的灭菌效果，以确定合理的消毒时间及消毒设施的消毒效果。 5.2 验证所需文件：
产品检验规定与方法、产品接触面菌落总数测定操作规程 5.3 可接受标准：
臭氧发生器、紫外等在开启一定时间内消毒室内微生物沉降菌应达＜10CFU/m3, 内包材消毒间包材消毒后微生物菌落总数应﹤10CFU/个。 5.4 车间空间消毒效果验证试验步骤： 5.4.1 准备工作：
5.4.1．1配制营养琼脂培养基、灭菌平皿、生理盐水；
5.4.1.2采样前将准备好的营养琼脂培养基置36℃±1℃培养24h ，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。 5.4.2 微生物验证试验：
分别验证制作间、陈化间、灌装间、内包材消毒间在臭氧发生器、紫外灯开启10分钟、20分钟、30分钟后对各车间空间的消毒效果。方法如下：
5.4.2.1在制作间、陈化间、灌装间、内包材消毒间的臭氧或紫外灯分别定时10分钟、20分钟、30
分钟，停机10分钟后检验员进入已消毒的空间，同时关闭车间的进出门禁止无关人员进入。 取样数量及方法：室内面积不超过30m 2，在对角线上设里、中、外三点位置距墙1m ；室内面积超过30m 2，设东、西、南、北、中5点，周围4点距墙1m 。采样时，将含营养琼脂培养基的平板（直径9cm ）置采样点（约桌面高度），打开平皿盖，使平板在空气中暴露5min 。
5.4.2.2将已采集的培养基在1h 内送实验室，于36℃±1℃培养48h 观察结果，计数平板上细菌菌落
总数。
5.4.2.3重复以上步骤分别做三组验证试验。 5.5 内包材消毒效果验证：
内包材消毒间使用臭氧发生器进行消毒，分别验证臭氧开启10分钟、20分钟、30分钟对内包材的消 毒效果。以确定最佳的消毒时间及验证消毒的效果：
方法如下：取同一批次的内包材放置于内包材消毒间，臭氧发生器设定为规定的时间进行消毒，停机
10分钟后取样。
5.5. 1 开启臭氧发生器10分钟后，随机抽取10个内包材，检测其菌落总数； 5.5.2 开启臭氧发生器20分钟后，随机抽取10个内包材，检测其菌落总数； 5.5.3 开启臭氧发生器30分钟后，随机抽取10个内包材，检测其菌落总数；
5.5.4将已采集的样品在1h 内送微生物实验室，用事先经灭菌的无菌生理盐水浸湿的无菌脱脂棉
签由下而上螺旋擦拭内包材的表面，将擦拭过的棉签装入事先已灭菌的锥形瓶内（内盛100ml 灭菌生理盐水）取其浸出液为检验对象，于36℃±1℃培养48h 观察结果，计数平板上细菌菌落总数。将观察结果并记录于菌落总数检测原始记录表。
5.5.5 验证周期：
实验室对已确定的消毒时间每个月对内包材消毒的消毒效果进行一次再验证，设定合适的
臭氧发生器的时间后，停机10分钟后于内包材消毒间随机抽取同一批次的10个内包材，检测其菌落总数以验证内包材的消毒效果。
6 验证结果及再验证周期：
6.1验证结束后，验证小组应依据验证真实情况对验证做出评价和结论。
6.2实验室负责监督检验臭氧发生器及紫外灯的灭菌效果，若出现异常及时采取纠正及预防
措施。 6.3再验证周期：
6.3.1化验室每月组织人员验证车间空间及内包材的消毒效果，若出现异常及时上报管理者代表。 不良影响，经验证小组批准后设备才能正式投入使用。 7、相关文件
7.1产品检验规定和方法
7.2产品接触面菌落总数测定操作规程 9、相关记录
9.1臭氧、紫外灯消毒灭菌效果验证试验记录 9.2验证报告
9.3菌落总数检测原始记录表
6.3.2当消毒设施发生变更或维修后均应再次进行验证，确认变更条件对生产工艺无
1、 目的
通过微生物挑战性试验，确定臭氧发生器或紫外灯在一定时间内对的灭菌效果。 2. 适用范围
用于企业所有臭氧发生器及紫外灯消毒效果的验证。 3. 责任范围
验证小组成员对本方案负责。 4. 概述
臭氧是一种广谱高效灭菌剂，具有强烈杀菌消毒作用。在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O 2）和单个氧原子（O ），后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶，从而破坏其细胞膜，将它杀死。多余的氧原子则会自行重新结合成为氧分子（O 2），不存在任何有毒残留物，为无污染消毒剂。 5. 验证内容 5.1 验证范围：
验证安装的臭氧发生器及紫外灯在各个车间在规定时间内的灭菌效果，以确定合理的消毒时间及消毒设施的消毒效果。 5.2 验证所需文件：
产品检验规定与方法、产品接触面菌落总数测定操作规程 5.3 可接受标准：
臭氧发生器、紫外等在开启一定时间内消毒室内微生物沉降菌应达＜10CFU/m3, 内包材消毒间包材消毒后微生物菌落总数应﹤10CFU/个。 5.4 车间空间消毒效果验证试验步骤： 5.4.1 准备工作：
5.4.1．1配制营养琼脂培养基、灭菌平皿、生理盐水；
5.4.1.2采样前将准备好的营养琼脂培养基置36℃±1℃培养24h ，取出检查有无污染，将污染培养基剔除。 5.4.2 微生物验证试验：
分别验证制作间、陈化间、灌装间、内包材消毒间在臭氧发生器、紫外灯开启10分钟、20分钟、30分钟后对各车间空间的消毒效果。方法如下：
5.4.2.1在制作间、陈化间、灌装间、内包材消毒间的臭氧或紫外灯分别定时10分钟、20分钟、30
分钟，停机10分钟后检验员进入已消毒的空间，同时关闭车间的进出门禁止无关人员进入。 取样数量及方法：室内面积不超过30m 2，在对角线上设里、中、外三点位置距墙1m ；室内面积超过30m 2，设东、西、南、北、中5点，周围4点距墙1m 。采样时，将含营养琼脂培养基的平板（直径9cm ）置采样点（约桌面高度），打开平皿盖，使平板在空气中暴露5min 。
5.4.2.2将已采集的培养基在1h 内送实验室，于36℃±1℃培养48h 观察结果，计数平板上细菌菌落
总数。
5.4.2.3重复以上步骤分别做三组验证试验。 5.5 内包材消毒效果验证：
内包材消毒间使用臭氧发生器进行消毒，分别验证臭氧开启10分钟、20分钟、30分钟对内包材的消 毒效果。以确定最佳的消毒时间及验证消毒的效果：
方法如下：取同一批次的内包材放置于内包材消毒间，臭氧发生器设定为规定的时间进行消毒，停机
10分钟后取样。
5.5. 1 开启臭氧发生器10分钟后，随机抽取10个内包材，检测其菌落总数； 5.5.2 开启臭氧发生器20分钟后，随机抽取10个内包材，检测其菌落总数； 5.5.3 开启臭氧发生器30分钟后，随机抽取10个内包材，检测其菌落总数；
5.5.4将已采集的样品在1h 内送微生物实验室，用事先经灭菌的无菌生理盐水浸湿的无菌脱脂棉
签由下而上螺旋擦拭内包材的表面，将擦拭过的棉签装入事先已灭菌的锥形瓶内（内盛100ml 灭菌生理盐水）取其浸出液为检验对象，于36℃±1℃培养48h 观察结果，计数平板上细菌菌落总数。将观察结果并记录于菌落总数检测原始记录表。
5.5.5 验证周期：
实验室对已确定的消毒时间每个月对内包材消毒的消毒效果进行一次再验证，设定合适的
臭氧发生器的时间后，停机10分钟后于内包材消毒间随机抽取同一批次的10个内包材，检测其菌落总数以验证内包材的消毒效果。
6 验证结果及再验证周期：
6.1验证结束后，验证小组应依据验证真实情况对验证做出评价和结论。
6.2实验室负责监督检验臭氧发生器及紫外灯的灭菌效果，若出现异常及时采取纠正及预防
措施。 6.3再验证周期：
6.3.1化验室每月组织人员验证车间空间及内包材的消毒效果，若出现异常及时上报管理者代表。 不良影响，经验证小组批准后设备才能正式投入使用。 7、相关文件
7.1产品检验规定和方法
7.2产品接触面菌落总数测定操作规程 9、相关记录
9.1臭氧、紫外灯消毒灭菌效果验证试验记录 9.2验证报告
9.3菌落总数检测原始记录表
6.3.2当消毒设施发生变更或维修后均应再次进行验证，确认变更条件对生产工艺无