北京地区设施中芍药灰霉病的研究

中圃蓉季暹掘

２０１０，２７（６）：７８—８３

ＣｈｉｎｅｓｅＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＢｕｌｌｅｔｉｎ

北京地区设施中芍药灰霉病的研究

陈士宁ｕ，刘燕ｕ，雷增普３

（１北京林业大学园林学院，北京１０００８３；２国家花卉工程技术研究中心，北京１０００８３；

３北京林业大学资源与环境学院，北京１０００８３）

摘要：芍药进入设施栽培后，常发生一种枝叶枯萎现象，危害严重。为明确病害发生原因，了解发病规

律，笔者对北京地区设施栽培的芍药枝叶枯萎现象进行定期观察。通过分离培养、病原茵形态特征和寄

主范围测定，鉴定该病为芍药灰霉病，其病原茵为半知茵亚门葡萄孢属灰葡萄孢Ｂｏｔｒｙｔｉｓ

ｃＪ∞ｅｔｃａＰｅｒｓ．。

研究表明，该茵生长产孢的温度范围是４￣２８℃。最适合的温度范围是ｌ铊４℃；ｐＨ２￣１１范围都可以生

长，最适的ｐＨ范围是３～５，ｐＨ为２时不能产孢；光照对茵落生长和产孢影响显著，给予一定光照有利于茵丝生长，黑暗有利于产孢，连续光照下不能产生孢子。关键词：芍药；芍药灰霉病；设施栽培中图分类号：ｓ４３６．８

文献标志码：Ａ

论文编号：２０１０．２３９４Ｍｏｕｌｄ

ｕｎｄｅｒＰｒｏｔｅｃｔｅｄＣｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｉｎ

Ｚｅｎｇｐｕ３

ＴｈｅＰａｔｈｏｇｅｎｏｆＨｅｒｂａｃｅｏｕｓＰｅｏｎｙＧｒａｙ

Ｃｈｅｎ

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Ｓｈｉｎｉｎ９１乞ＬｉｕＹａｈｌ‘Ｌｅｉ

ＬａｎｄｓｃａｐｅＡｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ

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Ｆｌｏｒｉｃｕｌｔｕｒｅ西咖她ＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，Ｂｅｉｊｉｎｇ

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ａｎｄ

ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｅｑｉｎｇＦｏｒｅｓｕｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３；

１０００８３；

３Ｓｅ￥ｏａｒ嘲ａｎｄＥｈ毫Ｉｆｒｏｎ玎ｌｅｒ时ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｅｑｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ

ｗｉｌｔ，ｃａｕｓｉｎｇｓｅｒｉｏｕｓｄａｍａｇｅ．ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｃＬ龇４ｆｙｔｈｅ

ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅ

１０００８３１

ａ

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｗｈｅｎｍｏｖｅｄｕｎｄｅｒｐｒｏｔｅｃｔｅｄｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，ｔｈｅｈｅｒｂａｃｅｏｕｓｐｅｏｎｙｏｆｔｅｎｓｕｆｆｅｒｓｆｒｏｍ

ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ

ｌｅａｆａｎｄｂｒａｎｃｈｒｅｇｕｌａｒｉｔｙｏｆｔｈｅ

ｄｉｓｅａｓｅ，ｔｈｅａｕｔｈｏｒｒｅｇｕｌａｒｌｙｏｂｓｅｒｖｅｄｔｈｅ

ｆｕｎｇｉ

ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ

ｏｆｔｈｅｇｌｓｅａｓｅ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｉｔｓｓｙｍｐｔｏｍ，ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ

ｈｏｓｔｒａｎｇｅ，ｉｔｗａｇｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｔｈａｔｔｈｅｗｉｌｔｗａｇ

ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｆｕｎｇｉｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｅｃｈａｒａｃｔｅｒｓ

ｃａｕｓｅｄｂｙｇｒａｙｍｏｕｌｄ．ＴｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｗａｇＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａＰｅｒｓ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｆｏｒｔｈｉｓｐａｔｈｏｇｅｎｇｒｏｗｔｈｏｐｔｉｍｕｍｆｒｏｍ

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３－５．Ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｄｍｙｃｅｌｉａｌ

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ｓｐｏｍｌａｔｉｏｎ，ｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎＷａｇａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ

ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ．ＴｈｅｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｉｇｈｔＣａｎｎｏｔｐｒｏｄｕｃｅｔｈｅｓｐｏｒｅｓ．

ｐｅｏｎｙ；ｐｅｏｎｙｇｒａｙｍｏｌｄ；ｐｒｏｔｅｃｔｅｄｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ

Ｏ引言

芍药（Ｐａｅｏｎｉａｌａｃｔｉｆｌｏｒａ）是中国的传统名花，其品种丰富，花大色艳，有“花相”的美誉。芍药的露地自然

开始研究利用设施栽培技术。设施环境温度适宜，但光照通风条件较差，常导致芍药灰霉病的大量发生［２１。

灰霉病潜育期短，发病迅速，一个生长季可多次侵染，造成茎叶腐烂，严重者导致整株枯死［３１。据欧美各国报道，露地栽培芍药灰霉病的病原有Ｂｏｔｏｍ＇ｓ

花期在５—６月，单朵花期仅为６－１０天【１１。为了延长芍

药的观赏期，实现芍药切花和盆花的产业化生产，人们

基金项目：国家“十一五”科技支撑计划课题，。优质、高效、低能耗设施园艺作物品种筛选及配套技术研究”（２∞６ＢＡＤ０７８０１）．

第一作者筒介：陈士宁，女，１９８５年出生，河北邯郸人，在读硕士，研究方向为园林植物栽培养护，课题方向为芍药抗病品种筛选。硕士期阃完成了对设施生产芍药主要病害的观察统计和病原菌的分离鉴定，并对主要病害进行了芍药不同品种抗病性的分级。筛选出设施栽培中综合抗病性较强的芍药品种。通信地址：１０００８３北京市海淀区清华东路３５号北京林业大学８３４信箱。Ｔｅｌ：０１０－６２３９１４４３。Ｅ－ｍａｒｌ：ｃｈｅｎｓｈｉｎｉｎ９１７＠１２６．ｏｏｍ．

通讯作者：刘燕，女，１９６３年出生，湖南永州人，教授，博士生导师．博士，研究方向主要有园林植物栽培应用，花卉现代化生产，园林植物资源保存与利用等，主要参加及主持科研项目１ｌ项，其中国家及部级项目８项．发表论著４０余部．通信地址：ｌ∞鸺３北京市海淀区清华东路３５号北京林业大学园林学院花卉教研室，Ｔｅｌ：０１０－６２３３６０６２，Ｅ－ｍａｉｈｃｈｂｌｙ＠，ｓｏｈｍｃｏｍ．收稿日期：２０１０－０８－ｌｌ，修回日期：２０１ｌ田２－１３．

陈士宁等：北京地区设施中芍药灰霉病的研究

・７９・

ｃ／ｎｅｒｅａ

ＰｅＴＳ．和最ｐａｅｏｎｉａｅＯｕ＆２种，主要是晟

ｐａｅｏｎｉａｅＯｕｄ．。在早春危害刚抽出的嫩茎基部和新芽，造成嫩茎腐烂枯死和芽枯，以后也可危害叶和花１４１，有学者认为中国大陆没有且ｐａｅｏｎｉａｅＯｕｄ．菌株，南京、上海等地的芍药灰霉病病原均为Ｂｏｔｒｙｔｉｓ

ｃｉｎｅｒｅａＰｅｒｓ．．

主要在花期后侵染叶片Ｄ】。芍药设施栽培在国内还处于起步阶段，关于设施栽培芍药灰霉病的研究还未见报道。笔者对北京地区设施栽培中普遍发生的芍药枝叶枯萎现象进行病原菌分离鉴定，确定其是由灰葡萄孢引起的灰霉病。并对病原生物学特性进行测定，以期了解该病的发生危害条件，为下一步的病害防治提供依据。ｌ材料和方法１．１试验时间、地点

温室病情观察于２００９年７月１０１０年７月，在北

京昌平区小汤山温室和北京林大林业科技股份有限公司进行，室内试验在国家花卉工程技术研究中心进行。１．２供试材料

芍药病害标样采自北京昌平区小汤山温室和北京林大林业科技股份有限公司温室。分别采取不同时期不同部位病组织，进行组织分离，获得优势病原菌株进行生物学特性测定。１．３病害症状观察

２００９年７月＿２０１０年７月对北京昌平区小汤山温

室和北京林大林业科技股份有限公司温室２处的芍药进行定期观察，对大量发生的茎叶枯萎现象进行症状记录和病情统计。１．４病原菌分离鉴定

１．４．１病原菌分离培养分别采集芍药病样４批，共１０６块组织，包括叶片，茎秆和败育花蕾等。用升汞表面消毒后按照常规组织分离法ｔ６１进行分离，纯化培养一定时间后，将分离物置于显微镜下，观察分生孢子梗、分生孢子、菌核的形态特征并测量其大小。

１．４．２分离物致病性测定采用离体叶片悬滴法接种。刮取ＰＳＡ上培养１５天的优势菌株菌落孢子，配成浓度为２．２４ｘ１０６个孢子／ｍＬ的孢子悬浮液。共接种５个叶

片，每叶片６个接种点，每接种点接种悬浮液４０止；加

滴同体积灭菌水做对照。覆保鲜膜保湿，放于２０℃人工气候箱中培养，每天观察发病状况。待发病后剪取新发病的芍药叶片病健交界处分离培养，产孢后在显微镜下观察是否与原接种菌相同。

１．４．３分离物寄主范围测定为具体确定优势分离物是灰葡萄孢还是芍药葡萄孢，需进行寄主范围测定，选择已经报道过的受灰葡萄孢危害而不受芍药葡萄孢侵染

的６种寄主植物：番茄、辣椒、青椒、白菜、百合和月季ｐｌ，芍药叶片做对照。在培养４天的优势菌株菌落边缘用灭菌打孔器打取直径为４ｍｍ的菌片，菌片贴接接种，设刺伤和无伤２种处理。逐日观察其发病情况。１．５病原茵生物学特性测定

１．５．１菌落培养和孢子计数的方法参考Ｄｏｅｈｌｅｍａｎｎ等人伸Ｉ的方法并加以改进，病原菌落纯化培养４天后用

灭菌的打孔器（ｄ剐ｎｕｎ）打取菌落边缘的菌块，移植到

ＰＳＡ培养基平板中央，分别置于各处理条件下培养，每处理３个重复，每天以十字交叉法测１次菌落直径。培养１５天，待菌落大量产孢后，用无菌水洗脱孢子。孢子悬液用磁力搅拌器搅拌１０ｍｉｎ后用４层灭菌纱布过滤，制备成孢子悬浮液，测量体积并用纽鲍尔血球计数板计数孢子浓度，从而算出每处理每皿的产孢量。每皿产孢量＝５００００ＡＢＶｏ式中，Ａ为５个中方格的孢子总数，曰为稀释倍数，ｙ为每皿配制孢子悬浮液的体积。

１．５．２温度对病原菌菌丝体生长和菌落产孢的影响在１６℃、２０℃、２４℃和２８℃的温度下培养，每处理３个重复，每天测量菌落直径，第１５天计数产孢量。

１．５．３光照对病原菌茵丝体生长和茵落产孢的影响在ｈ光照１１２ｈ黑暗）３种不同Ｉｘ，每处理３个１．５．４

ｐＨ值对病原菌茵丝体生长和菌落产孢的影响

ｍｏｌ／ＬＨＣｌ和ｌｍｏｌ／ＬＮａＯＨ调节ｐＨ值，使ＰＳＡ培观察小汤山基地温室、北京林大林业科技股份有限公司温室和小汤山大田的芍药灰霉病发病情况。发如果前期消毒工作没有做好，芍药在抽茎期即可ＰＳＡ平板中央接入供试菌块，分别置于４℃、１２℃、ＰＳＡ平板中央接入供试菌块，分别置于连续黑暗Ａ、连续光照Ｇ、光暗交替ＧＡ（１２光照条件下进行培养，光照强度为６０００重复。培养温度为２０℃，每天测量菌落直径，第１５天计数产孢量。

用ｌ养基ｐＨ为２～ｌｌ等ｌＯ个梯度。灭菌后倒入平皿，接入供试菌饼，置于２０℃恒温箱中培养。每处理３个重复。每天测量菌落直径，第１５天计数产孢量。２结果与分析

２．１灰霉病危害症状描述

现北京地区芍药灰霉病在露地栽培时仅有少量发生，而在温室内则发生严重，且在芍药生长的各阶段均可发生，芍药的叶、幼茎、花等器官均可受害。

发生灰霉病，这时的灰霉病破坏性很大，表现为芽鳞皮上部嫩茎先产生暗绿色病斑，后病部缢缩变褐色，病斑上部枝叶萎蔫弯垂，最后整枝枯死。展叶期叶柄容易受害，茎部完好，全部叶柄发病，叶片下垂萎蔫。花期

８０

中田丧孝通越ｈｔ￡Ｄ肌ｗ砒ｃ拈ｂｏｚｇ

ｃｎ

是该病侵染高峰期．主要危害花器和叶片。受害花瓣变色腐烂，病部覆盏灰色霉层，腐败的花瓣落在芍药下部叶片Ｌ．导致叶部出现灰霉病斑。叶片发病常见１。叶尖或叶缘，病斑较大，椭聊形或不规则水溃状。湿度太时可迅速扩展至整个叶片．病斑具不规则轮纹。在生长季后期落叶前．下部受光不足的叫片栏易成为灰霉摘的侵入点。病斑通过叶柄传染至茎秆，引起整枝萎蔫倒伏。湿度太时，整个茎秆密生灰色霉层，进而成

为新的侵染源，危害最重。后期在茎基部组织内产生黑色小茁核。

芍药班霉病发病严重程度和植株密度、环境湿度和芍药品种关系密切，湿度大时有些芍药品种染病率可以达到１００％。各时期发病症状见圈Ｉ。２．２痛样姐奴分离姑采

不同时期分别取芍药不同发埔部位组织材料进行病菌分离，分离结果见表Ｉ。

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围１芍药灰霉病症状田寰１芍药＆痔部位龠菌Ｈ离结果

※＃目目，年－月－口

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由表ｌ可知，发稿的叫片、茎秆和败育花蕾都可以分离到葡萄孢茁落，且葡萄孢为该病的优势病原菌落。由此可知该枝叶枯症状由芍药灰撵病引起。茎秆分离成功率最高，般育花蕾分离杂莳率较高，所以分离芍药灰霉病病原菌擐合适的部位为茎秆．

２

丛地从菌丝体或苗核上生出，粗９

５５０

ｇ－＇１３

２ｔｕｎａ，长２８０－

ＪＩｍ，长度变化太．灰色后转褐色：顶端呈Ｉ－＇２次分

桂．分枝的末端膨大，上密生小梗，聚生大量分生孢

子。分生孢子卵圆形、椭圆形、无色至漩荻褐色，（９扣

３芍药友霉病痛原茼的茔定

１分离物形态特征描进分离物在ＰＳＡ培养基上

１４吖１２２））岬×（６６嵋９（７乃）Ｉ肺。此外，还常形成小分生孢予．无色，球形．直径约３．５岬。茁落生长约１０

天后在培养基边缘首先长出黑色圆形的救生苗核，接

２．３

培养，菌落初为白色稀馥放射状苗缝体．生长迅速，４天即长满平皿。气生苗丝初茂盛后逐渐呈垫状、棉絮状。苗丝体颜色运渐加深．后期有时形成灰褐色隆起或球状物（图２）。

菌落眭满肌后即开始产孢，分生孢子梗散隹或成

着苗落表面也逐渐产生基生或半埋生菌拉，光照较弱

时常产生大型聚集苗棱。苗棱初期无色液滴状，中期灰绿色．后期黑色，形状不规则，大小为犯Ｏ－６Ａ（３７））ｍｍ×（１

４，－５

Ｓ（３３））ｍｍ。蓖核表面粗糙。并时

常在菌核上伴有水珠状分泌物。植株病部上的观察到

陈士宁等：北京地区最施中芍药灰霉捕的研究

＿＿

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ｄ＝ＰＳＡ＊＃｛±目＃￥￥ｚａ，５’ｃ４∞ｘ

■

围２病原蕾彩奄田

的病原菌孢子梗分技多，孢子较人工培养基上大。

２．３

２．３

３分离物昀寄主范围测定将分离菌接种于不同测

２分离物的致病力测定接种第４天观察到接种渡试植物上，结果见表２。测定结果表明，该菌的寄主范

浦下出现褐色小斑，以后病斑逐渐扩大。病斑黄褐色，具明显轮纹。室内接种症状与温室自然发病症状相似，对接种成功的病斑进行组织分离。获得葡萄孢苗落．根据柯赫式法则，该枝叶枯瘸是由葡萄孢引起的。

围很广．除芍药外还可侵染月季、番茄、青椒等，也能不

同程度的侵染辣椒、白菜和百合。由于选定哿主均为受灰葡萄艳侵染而不受芍药葡萄孢侵染的植物。由此

可以认为该分离菌为灰葡萄孢。

表２寄±范目ｗ定结｝

＆：＋＋＋－＃＃２＾目＊捕，☆ⅨｒⅢ＊＋¨《＃４ｘ目＆自．自ⅨｒⅨ＃＆Ｈ＆自＃Ⅲ．镕ⅨｒⅨ＊；＋＆＃６＾月ｍｍ’ｉ镕＊．币＆目．

２．３

４芍药灰算病痛原鉴定结果文献记载芍药灰霉病

．

的病原菌有芍药葡萄孢和灰葡萄孢ｍ．二者无论在发

病症状还是培养形态都及其相似，不易区分。但其在菌核大小和寄主范目上存在稳定差异。芍药葡萄孢菌

啦

●１２℃

●

■

巩

●

■２４℃

●

核小型，直径１¨２

５

ｒｎｍ，少有集结，散布在培养皿

■●

内，表面常有菌丝覆盖。而灰葡萄孢菌核直径２．５—１５ｍｍ．单生或聚生，常集结成大型不规则形的菌核，

聚集的苗核表面有疣或轮纹，单生苗核表面光滑．营核表面常有露滴状分泌物ｎ，奉试验观察到的芍药

灰霉病原菌生长后期产生太量聚集菌核，形态更接近后者。

Ⅻ镕∞帅鲫砷∞∞帅

℃，，－

■●▲

：３“０

芍药葡萄孢寄主范围窄，仅在牡丹、芍药、玉簪、多花黄精、铃兰和某些菊花上有报道。而灰葡萄孢的寄

主范孱很广泛．Ｓｔｒｉｄｅｒ列举了５０科１５０种受害植物．不

１０Ｌｊ＝，：，兰二二，…

０

１

２

３

４

，分：：・

５

朗３盘廑对灰葡萄孢蕾瘩生＊的髟晌裹３Ｔ同量度下蕾再产孢量

ｘｌｒ十孢予『皿

同感病植株间可交互感染”。Ｊｏｒｖｉ一曾断言，可蚍预测

该苗可发现于几乎所有取子叶植物，多数单子叶植物

和少数蕨类植物上，本试验的寄主范围测定结果显

示．该病原菌寄主范围广泛。所以结合上述２项特征，参考有关文献，将北京设摊栽培中发现并分离的芍药灰霉病病原菌鉴定为半知菌亚门葡萄孢属灰葡萄孢菌

Ｐｍ＆

｝”

２２

３６７

１８４８

７２９

９２

２．４芍药灰萄萄孢的生物学特性测定

ｌ温度对芍药灰葡萄孢生长和产孢的影响由圈３和表３可看到，芍药灰霉菌在４４８℃范围均可生长，

２．４

（Ｂｏｔｒ删ａｃｉｏ仃ｇａＰｅｔｓ）。

・８２－

中圄农孝通报ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｓｂ．ｏｒｇ．ｅｌｌ

１６－２４０Ｃ是其生长适温，以２０℃对其生长最有利。高于２０℃时菌落生长先快后慢，超过２８℃时生长速度逐渐减慢甚至停滞。低于２０℃时，菌落生长速度先慢后快，最终可以长满平皿。菌落培养４天即开始产孢，４￣２８℃均可产生孢子，其中２０℃下产孢量最大，４℃产孢较晚，产孢量少。

２．４．２光照对芍药灰葡萄孢生长和产孢的影响由图４和表４看到，芍药灰霉菌在光暗交替时生长速度最快，

要

襄韫

∞舳加∞∞如加

１００

Ｏ

ｌ

２

３

４

培养天数甩

图４光照对灰葡萄孢菌落生长的影响麦４不同光照下菌落产孢量

×ｌｏ．个孢子恤

黑暗条件下生长最慢。连续黑暗条件产孢量最大，光暗交替次之，连续光照下不能产生孢子。连续黑暗处理在后期容易形成大型环状分布聚集菌核，而光暗交替不产生菌核或产生散生不规则分布菌核。

ｐＨ值对芍药灰葡萄孢生长和产孢的影响由图５

基

襄

粗

∞蛳舳加印卯∞加Ｏ

４

培养天数ｍ

图５ｐＨ对灰葡萄孢菌落生长的影响

表５不同ｐＨ值条件下菌落产孢×ｌｏ．个孢子，皿

ｐＩ－Ｉ

５６７８９１０１１产孢量

７６３１

５３８１

３４７１

１８４０

６９３

１０１５

１２１５

和表５看出，芍药灰霉菌在ｐＨ５～１１时均可生长和产孢，ｐｎ＝５时生长速度最快，产孢量也最大，随着ｐＩ－－Ｉ值逐渐升高而生长速度减慢，产孢量减少，在ｐＨ－－－９时产孢量最少，而ｐＨｌ肛１１产孢量又有少量增加。

因为琼脂在酸性条件下经高温会解离，导致培养

基不凝固，本试验ｐＨ２一范围内菌落生长数据无法测

量。后补做ｐＨ２～５之间的试验，培养基先灭菌后用精密试纸调ｐＨ。接菌后放于２００Ｃ气候箱培养，每天测

量菌落直径。发现病原菌在ｐＨ３～５范围内均生长迅速，３天长满平皿，ｌ周后陆续产孢。ｐＨ＝２菌落生长速度逐渐减慢，最后停滞，菌落不再扩大。综合２次试验结果，认为灰葡萄孢菌落生长产孢最适的ｐＨ范围为

３—５。

３结论

（１）设施栽培因湿度大、通风条件差，芍药灰霉病发生严重。２年生盆栽芍药在花后发病率甚至可以达到１００％。主要花后危害叶片和茎秆，表现为枝叶枯萎。

（２）对该枝叶枯萎现象进行病原菌分离鉴定。根据发病症状、病原形态和寄主范围，将该病认定为芍药灰霉病，鉴定其病原茵为半知菌亚门葡萄孢属灰葡萄孢菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ

ｃｉｎｅｒｅｎＰｅｒｓ．）。

（３）对病原菌灰葡萄孢Ｂｏ舭＇ｓｃｉｎｅｒｅａＰｅ稻．进行

生物学测定，结果认为温度、光照和培养基的ｐＨ值对菌落生长和产孢影响很大。芍药灰葡萄孢在４．－２８。Ｃ范围均可生长和产孢，１６－－２４０Ｃ是其生长适温，以２０℃对其生长最有利。温度超过２８ｑＣ，菌落生长缓慢甚至停滞。不同光照条件下，光暗交替时菌落生长速度最快，连续黑暗条件下菌落生长最慢但产孢量最大，连续２—１１范围内均可生３￣５范围菌落生长最快。ｐＨ＝２时菌落生长速（１）对于芍药灰霉病的病原各地报道不一。欧美

ｐａｅｏｍａｅｍｄ

２种，主要是且ｐａｃｏｍａｅｏＩｌｄ．Ｈ。蓝

ｏｌｌｄ菌株，南京、

Ｐｅｔｓ：

２．４．３

光照下不能产生孢子。菌落在ｐＨ长，ｐＨ度逐渐减慢，最后停滞，菌落不再扩大，亦不能产生孢子。４讨论

各国报道芍药灰霉病的病原有ＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｃｒｃａＰｅｔｓ．和

Ｊ９ｌ

莹【习研究认为，中国没有Ｂｐａｃｏｎｉａｃ上海等地的芍药灰霉病病原均为劢丘弦西ｃｉｎ豳ｅａ喻璋【１川将洛阳、郑州地区的芍药灰霉病病原菌鉴定为

陈士宁等：北京地区设旌中芍药灰霉病的研究

・

８３

・

Ｂｏｔｏｍ＇ｓＰａｅｏａｉａｅ

Ｏｕｄ；陈晓红…１将四川药用芍药上的

灰霉病病原菌也鉴定为Ｂｏｔｒｙ矗＇ｓｐａｅｏａｉａｅＯｕｄ．。设施栽培芍药灰霉病的病原还未见相关报道。本试验通过对设施栽培芍药发病症状、病原形态及寄主范围的详细观察和测定，认为北京地区芍药设施栽培中大量发生的灰霉病病原菌为ＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｍａＰｅｒｓ．，这与蓝莹的鉴定结果一致，与瑜璋和陈晓红的结果有差异。中国到底有没有芍药葡萄孢菌株，其与灰葡萄孢在分布范围和危害症状上有何区别，还需进一步研究确认。

（２）光照、温度和ｐＨ是灰霉菌生长的必要条件。这些条件通过影响生理代谢来调节真菌的生长发育过程。认识灰霉菌生长发育的最佳条件是实验室研究灰霉菌的前提【１２１。目前关于芍药灰霉菌生物学特性的研究较少，但有很多研究人员ｏ¨习对番茄、草莓、葡萄、黄瓜等作物上的灰霉病菌做过详细的生物学研究，结果表明不同寄主的灰霉菌生物学特性大体相同，稍有差异。芍药灰霉菌的生物学测定可以参照对比农作物灰霉菌的已有研究。已有研究结果表明，灰霉菌菌丝在２￣３ｌ℃均能生长发育，以２０－２３℃为最适，病原菌在

ｐＨ

３～１１的范围内都能生长，ｐＨ为５时菌丝生长最快、

产孢量最高【Ⅲ。本试验所得温度和ｐＨ值范围与其相符。

（３）关于光照对灰霉菌生长的影响，各人说法不同。普遍上认为光照对菌落生长影响不大阳４１，但本试验结果显示光照对菌落生长和产孢有很大作用，给予适当光照有利于菌丝生长，而连续光照则不能产生孢子。

（４）琼脂在酸性条件下经高温会解离，导致培养基不凝固嘲，如果设置ｐＨ２４处理，需灭菌后调ｐＨ，操作不方便，且容易引起杂菌的污染。建议用ｐＨ５－６固体培养基培养灰葡萄孢菌或ｐＨ３－－－４液体培养基培养。蒸馏水配制ＰＳＡ培养基自然状态下ｐＨ值为５—７之间，ＰＳＡ培养基自然状态为ｐＨ８￣９，必须调ｐＨ后培养灰葡萄孢。

（５）本研究结果为研究芍药灰霉病发病规律和下一步的防治工作提供了依据。

参考文献

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ｆｒｕｃｔｏｓｅｓｐｅｃｉｆｉｃｍｍｓｐｏｒｔｅｒｆｉ－ｏｍｔｈｅｇｒａｙ

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北京地区设施中芍药灰霉病的研究

作者：作者单位：

陈士宁， 刘燕， 雷增普， Chen Shining， Liu Yan， Lei Zengpu

陈士宁,刘燕,Chen Shining,Liu Yan(北京林业大学园林学院,北京,100083;国家花卉工程技术研究中心,北京,100083)， 雷增普,Lei Zengpu(北京林业大学资源与环境学院,北京,100083)

中国农学通报

CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN2011,27(6)3次

刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：

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引用本文格式：陈士宁.刘燕.雷增普.Chen Shining.Liu Yan.Lei Zengpu 北京地区设施中芍药灰霉病的研究[期刊论文]-中国农学通报 2011(6)

中圃蓉季暹掘

２０１０，２７（６）：７８—８３

ＣｈｉｎｅｓｅＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅＢｕｌｌｅｔｉｎ

北京地区设施中芍药灰霉病的研究

陈士宁ｕ，刘燕ｕ，雷增普３

（１北京林业大学园林学院，北京１０００８３；２国家花卉工程技术研究中心，北京１０００８３；

３北京林业大学资源与环境学院，北京１０００８３）

摘要：芍药进入设施栽培后，常发生一种枝叶枯萎现象，危害严重。为明确病害发生原因，了解发病规

律，笔者对北京地区设施栽培的芍药枝叶枯萎现象进行定期观察。通过分离培养、病原茵形态特征和寄

主范围测定，鉴定该病为芍药灰霉病，其病原茵为半知茵亚门葡萄孢属灰葡萄孢Ｂｏｔｒｙｔｉｓ

ｃＪ∞ｅｔｃａＰｅｒｓ．。

研究表明，该茵生长产孢的温度范围是４￣２８℃。最适合的温度范围是ｌ铊４℃；ｐＨ２￣１１范围都可以生

长，最适的ｐＨ范围是３～５，ｐＨ为２时不能产孢；光照对茵落生长和产孢影响显著，给予一定光照有利于茵丝生长，黑暗有利于产孢，连续光照下不能产生孢子。关键词：芍药；芍药灰霉病；设施栽培中图分类号：ｓ４３６．８

文献标志码：Ａ

论文编号：２０１０．２３９４Ｍｏｕｌｄ

ｕｎｄｅｒＰｒｏｔｅｃｔｅｄＣｕｌｔｉｖａｔｉｏｎｉｎ

Ｚｅｎｇｐｕ３

ＴｈｅＰａｔｈｏｇｅｎｏｆＨｅｒｂａｃｅｏｕｓＰｅｏｎｙＧｒａｙ

Ｃｈｅｎ

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Ｓｈｉｎｉｎ９１乞ＬｉｕＹａｈｌ‘Ｌｅｉ

ＬａｎｄｓｃａｐｅＡｒｃｈｉｔｅｃｔｕｒｅ

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Ｆｌｏｒｉｃｕｌｔｕｒｅ西咖她ＲｅｓｅａｒｃｈＣｅｎｔｅｒ，Ｂｅｉｊｉｎｇ

ｅａｌｌｇｔ皓ａｎｄ

ａｎｄ

ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｅｑｉｎｇＦｏｒｅｓｕｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００８３；

１０００８３；

３Ｓｅ￥ｏａｒ嘲ａｎｄＥｈ毫Ｉｆｒｏｎ玎ｌｅｒ时ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｅｑｉｎｇＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｂｅｉｊｉｎｇ

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ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄｔｈｅ

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Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｗｈｅｎｍｏｖｅｄｕｎｄｅｒｐｒｏｔｅｃｔｅｄｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ，ｔｈｅｈｅｒｂａｃｅｏｕｓｐｅｏｎｙｏｆｔｅｎｓｕｆｆｅｒｓｆｒｏｍ

ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ

ｌｅａｆａｎｄｂｒａｎｃｈｒｅｇｕｌａｒｉｔｙｏｆｔｈｅ

ｄｉｓｅａｓｅ，ｔｈｅａｕｔｈｏｒｒｅｇｕｌａｒｌｙｏｂｓｅｒｖｅｄｔｈｅ

ｆｕｎｇｉ

ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ

ｏｆｔｈｅｇｌｓｅａｓｅ．Ａｃｃｏｒｄｉｎｇｔｏｉｔｓｓｙｍｐｔｏｍ，ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ

ｈｏｓｔｒａｎｇｅ，ｉｔｗａｇｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｔｈａｔｔｈｅｗｉｌｔｗａｇ

ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｆｕｎｇｉｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｅｃｈａｒａｃｔｅｒｓ

ｃａｕｓｅｄｂｙｇｒａｙｍｏｕｌｄ．ＴｈｅｐａｔｈｏｇｅｎｗａｇＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｒｅａＰｅｒｓ．Ｒｅｓｅａｒｃｈｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｆｏｒｔｈｉｓｐａｔｈｏｇｅｎｇｒｏｗｔｈｏｐｔｉｍｕｍｆｒｏｍ

ａｎｄｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎＷａｇ

ｌｉｇｈｔ

ｆｒｏｍ４—２８℃ｗｉｔｈｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｆｒｏｍ１６—２４℃．ｐＨｆｒｏｍ２－１１

ｇｒｏｗｔｈａｎｄ

ｗｉｔｈｔｈｅ

ｔｏ

３－５．Ｔｈｅｉｎｆｌｕｅｎｃｅｄｍｙｃｅｌｉａｌ

ｍｙｃｅｌｉａｌｇｒｏｗｔｈｗｈｉｌｅｄａｒｋｃｏｎｄｉｔｉｏｎｔｏＫｅｙｗｏｒｄｓ：ｈｅｒｂａｃｅｏｕｓ

ｓｐｏｍｌａｔｉｏｎ，ｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎＷａｇａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ

ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ．ＴｈｅｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｉｇｈｔＣａｎｎｏｔｐｒｏｄｕｃｅｔｈｅｓｐｏｒｅｓ．

ｐｅｏｎｙ；ｐｅｏｎｙｇｒａｙｍｏｌｄ；ｐｒｏｔｅｃｔｅｄｃｕｌｔｉｖａｔｉｏｎ

Ｏ引言

芍药（Ｐａｅｏｎｉａｌａｃｔｉｆｌｏｒａ）是中国的传统名花，其品种丰富，花大色艳，有“花相”的美誉。芍药的露地自然

开始研究利用设施栽培技术。设施环境温度适宜，但光照通风条件较差，常导致芍药灰霉病的大量发生［２１。

灰霉病潜育期短，发病迅速，一个生长季可多次侵染，造成茎叶腐烂，严重者导致整株枯死［３１。据欧美各国报道，露地栽培芍药灰霉病的病原有Ｂｏｔｏｍ＇ｓ

花期在５—６月，单朵花期仅为６－１０天【１１。为了延长芍

药的观赏期，实现芍药切花和盆花的产业化生产，人们

基金项目：国家“十一五”科技支撑计划课题，。优质、高效、低能耗设施园艺作物品种筛选及配套技术研究”（２∞６ＢＡＤ０７８０１）．

第一作者筒介：陈士宁，女，１９８５年出生，河北邯郸人，在读硕士，研究方向为园林植物栽培养护，课题方向为芍药抗病品种筛选。硕士期阃完成了对设施生产芍药主要病害的观察统计和病原菌的分离鉴定，并对主要病害进行了芍药不同品种抗病性的分级。筛选出设施栽培中综合抗病性较强的芍药品种。通信地址：１０００８３北京市海淀区清华东路３５号北京林业大学８３４信箱。Ｔｅｌ：０１０－６２３９１４４３。Ｅ－ｍａｒｌ：ｃｈｅｎｓｈｉｎｉｎ９１７＠１２６．ｏｏｍ．

通讯作者：刘燕，女，１９６３年出生，湖南永州人，教授，博士生导师．博士，研究方向主要有园林植物栽培应用，花卉现代化生产，园林植物资源保存与利用等，主要参加及主持科研项目１ｌ项，其中国家及部级项目８项．发表论著４０余部．通信地址：ｌ∞鸺３北京市海淀区清华东路３５号北京林业大学园林学院花卉教研室，Ｔｅｌ：０１０－６２３３６０６２，Ｅ－ｍａｉｈｃｈｂｌｙ＠，ｓｏｈｍｃｏｍ．收稿日期：２０１０－０８－ｌｌ，修回日期：２０１ｌ田２－１３．

陈士宁等：北京地区设施中芍药灰霉病的研究

・７９・

ｃ／ｎｅｒｅａ

ＰｅＴＳ．和最ｐａｅｏｎｉａｅＯｕ＆２种，主要是晟

ｐａｅｏｎｉａｅＯｕｄ．。在早春危害刚抽出的嫩茎基部和新芽，造成嫩茎腐烂枯死和芽枯，以后也可危害叶和花１４１，有学者认为中国大陆没有且ｐａｅｏｎｉａｅＯｕｄ．菌株，南京、上海等地的芍药灰霉病病原均为Ｂｏｔｒｙｔｉｓ

ｃｉｎｅｒｅａＰｅｒｓ．．

主要在花期后侵染叶片Ｄ】。芍药设施栽培在国内还处于起步阶段，关于设施栽培芍药灰霉病的研究还未见报道。笔者对北京地区设施栽培中普遍发生的芍药枝叶枯萎现象进行病原菌分离鉴定，确定其是由灰葡萄孢引起的灰霉病。并对病原生物学特性进行测定，以期了解该病的发生危害条件，为下一步的病害防治提供依据。ｌ材料和方法１．１试验时间、地点

温室病情观察于２００９年７月１０１０年７月，在北

京昌平区小汤山温室和北京林大林业科技股份有限公司进行，室内试验在国家花卉工程技术研究中心进行。１．２供试材料

芍药病害标样采自北京昌平区小汤山温室和北京林大林业科技股份有限公司温室。分别采取不同时期不同部位病组织，进行组织分离，获得优势病原菌株进行生物学特性测定。１．３病害症状观察

２００９年７月＿２０１０年７月对北京昌平区小汤山温

室和北京林大林业科技股份有限公司温室２处的芍药进行定期观察，对大量发生的茎叶枯萎现象进行症状记录和病情统计。１．４病原菌分离鉴定

１．４．１病原菌分离培养分别采集芍药病样４批，共１０６块组织，包括叶片，茎秆和败育花蕾等。用升汞表面消毒后按照常规组织分离法ｔ６１进行分离，纯化培养一定时间后，将分离物置于显微镜下，观察分生孢子梗、分生孢子、菌核的形态特征并测量其大小。

１．４．２分离物致病性测定采用离体叶片悬滴法接种。刮取ＰＳＡ上培养１５天的优势菌株菌落孢子，配成浓度为２．２４ｘ１０６个孢子／ｍＬ的孢子悬浮液。共接种５个叶

片，每叶片６个接种点，每接种点接种悬浮液４０止；加

滴同体积灭菌水做对照。覆保鲜膜保湿，放于２０℃人工气候箱中培养，每天观察发病状况。待发病后剪取新发病的芍药叶片病健交界处分离培养，产孢后在显微镜下观察是否与原接种菌相同。

１．４．３分离物寄主范围测定为具体确定优势分离物是灰葡萄孢还是芍药葡萄孢，需进行寄主范围测定，选择已经报道过的受灰葡萄孢危害而不受芍药葡萄孢侵染

的６种寄主植物：番茄、辣椒、青椒、白菜、百合和月季ｐｌ，芍药叶片做对照。在培养４天的优势菌株菌落边缘用灭菌打孔器打取直径为４ｍｍ的菌片，菌片贴接接种，设刺伤和无伤２种处理。逐日观察其发病情况。１．５病原茵生物学特性测定

１．５．１菌落培养和孢子计数的方法参考Ｄｏｅｈｌｅｍａｎｎ等人伸Ｉ的方法并加以改进，病原菌落纯化培养４天后用

灭菌的打孔器（ｄ剐ｎｕｎ）打取菌落边缘的菌块，移植到

ＰＳＡ培养基平板中央，分别置于各处理条件下培养，每处理３个重复，每天以十字交叉法测１次菌落直径。培养１５天，待菌落大量产孢后，用无菌水洗脱孢子。孢子悬液用磁力搅拌器搅拌１０ｍｉｎ后用４层灭菌纱布过滤，制备成孢子悬浮液，测量体积并用纽鲍尔血球计数板计数孢子浓度，从而算出每处理每皿的产孢量。每皿产孢量＝５００００ＡＢＶｏ式中，Ａ为５个中方格的孢子总数，曰为稀释倍数，ｙ为每皿配制孢子悬浮液的体积。

１．５．２温度对病原菌菌丝体生长和菌落产孢的影响在１６℃、２０℃、２４℃和２８℃的温度下培养，每处理３个重复，每天测量菌落直径，第１５天计数产孢量。

１．５．３光照对病原菌茵丝体生长和茵落产孢的影响在ｈ光照１１２ｈ黑暗）３种不同Ｉｘ，每处理３个１．５．４

ｐＨ值对病原菌茵丝体生长和菌落产孢的影响

ｍｏｌ／ＬＨＣｌ和ｌｍｏｌ／ＬＮａＯＨ调节ｐＨ值，使ＰＳＡ培观察小汤山基地温室、北京林大林业科技股份有限公司温室和小汤山大田的芍药灰霉病发病情况。发如果前期消毒工作没有做好，芍药在抽茎期即可ＰＳＡ平板中央接入供试菌块，分别置于４℃、１２℃、ＰＳＡ平板中央接入供试菌块，分别置于连续黑暗Ａ、连续光照Ｇ、光暗交替ＧＡ（１２光照条件下进行培养，光照强度为６０００重复。培养温度为２０℃，每天测量菌落直径，第１５天计数产孢量。

用ｌ养基ｐＨ为２～ｌｌ等ｌＯ个梯度。灭菌后倒入平皿，接入供试菌饼，置于２０℃恒温箱中培养。每处理３个重复。每天测量菌落直径，第１５天计数产孢量。２结果与分析

２．１灰霉病危害症状描述

现北京地区芍药灰霉病在露地栽培时仅有少量发生，而在温室内则发生严重，且在芍药生长的各阶段均可发生，芍药的叶、幼茎、花等器官均可受害。

发生灰霉病，这时的灰霉病破坏性很大，表现为芽鳞皮上部嫩茎先产生暗绿色病斑，后病部缢缩变褐色，病斑上部枝叶萎蔫弯垂，最后整枝枯死。展叶期叶柄容易受害，茎部完好，全部叶柄发病，叶片下垂萎蔫。花期

８０

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是该病侵染高峰期．主要危害花器和叶片。受害花瓣变色腐烂，病部覆盏灰色霉层，腐败的花瓣落在芍药下部叶片Ｌ．导致叶部出现灰霉病斑。叶片发病常见１。叶尖或叶缘，病斑较大，椭聊形或不规则水溃状。湿度太时可迅速扩展至整个叶片．病斑具不规则轮纹。在生长季后期落叶前．下部受光不足的叫片栏易成为灰霉摘的侵入点。病斑通过叶柄传染至茎秆，引起整枝萎蔫倒伏。湿度太时，整个茎秆密生灰色霉层，进而成

为新的侵染源，危害最重。后期在茎基部组织内产生黑色小茁核。

芍药班霉病发病严重程度和植株密度、环境湿度和芍药品种关系密切，湿度大时有些芍药品种染病率可以达到１００％。各时期发病症状见圈Ｉ。２．２痛样姐奴分离姑采

不同时期分别取芍药不同发埔部位组织材料进行病菌分离，分离结果见表Ｉ。

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围１芍药灰霉病症状田寰１芍药＆痔部位龠菌Ｈ离结果

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由表ｌ可知，发稿的叫片、茎秆和败育花蕾都可以分离到葡萄孢茁落，且葡萄孢为该病的优势病原菌落。由此可知该枝叶枯症状由芍药灰撵病引起。茎秆分离成功率最高，般育花蕾分离杂莳率较高，所以分离芍药灰霉病病原菌擐合适的部位为茎秆．

２

丛地从菌丝体或苗核上生出，粗９

５５０

ｇ－＇１３

２ｔｕｎａ，长２８０－

ＪＩｍ，长度变化太．灰色后转褐色：顶端呈Ｉ－＇２次分

桂．分枝的末端膨大，上密生小梗，聚生大量分生孢

子。分生孢子卵圆形、椭圆形、无色至漩荻褐色，（９扣

３芍药友霉病痛原茼的茔定

１分离物形态特征描进分离物在ＰＳＡ培养基上

１４吖１２２））岬×（６６嵋９（７乃）Ｉ肺。此外，还常形成小分生孢予．无色，球形．直径约３．５岬。茁落生长约１０

天后在培养基边缘首先长出黑色圆形的救生苗核，接

２．３

培养，菌落初为白色稀馥放射状苗缝体．生长迅速，４天即长满平皿。气生苗丝初茂盛后逐渐呈垫状、棉絮状。苗丝体颜色运渐加深．后期有时形成灰褐色隆起或球状物（图２）。

菌落眭满肌后即开始产孢，分生孢子梗散隹或成

着苗落表面也逐渐产生基生或半埋生菌拉，光照较弱

时常产生大型聚集苗棱。苗棱初期无色液滴状，中期灰绿色．后期黑色，形状不规则，大小为犯Ｏ－６Ａ（３７））ｍｍ×（１

４，－５

Ｓ（３３））ｍｍ。蓖核表面粗糙。并时

常在菌核上伴有水珠状分泌物。植株病部上的观察到

陈士宁等：北京地区最施中芍药灰霉捕的研究

＿＿

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■

围２病原蕾彩奄田

的病原菌孢子梗分技多，孢子较人工培养基上大。

２．３

２．３

３分离物昀寄主范围测定将分离菌接种于不同测

２分离物的致病力测定接种第４天观察到接种渡试植物上，结果见表２。测定结果表明，该菌的寄主范

浦下出现褐色小斑，以后病斑逐渐扩大。病斑黄褐色，具明显轮纹。室内接种症状与温室自然发病症状相似，对接种成功的病斑进行组织分离。获得葡萄孢苗落．根据柯赫式法则，该枝叶枯瘸是由葡萄孢引起的。

围很广．除芍药外还可侵染月季、番茄、青椒等，也能不

同程度的侵染辣椒、白菜和百合。由于选定哿主均为受灰葡萄艳侵染而不受芍药葡萄孢侵染的植物。由此

可以认为该分离菌为灰葡萄孢。

表２寄±范目ｗ定结｝

＆：＋＋＋－＃＃２＾目＊捕，☆ⅨｒⅢ＊＋¨《＃４ｘ目＆自．自ⅨｒⅨ＃＆Ｈ＆自＃Ⅲ．镕ⅨｒⅨ＊；＋＆＃６＾月ｍｍ’ｉ镕＊．币＆目．

２．３

４芍药灰算病痛原鉴定结果文献记载芍药灰霉病

．

的病原菌有芍药葡萄孢和灰葡萄孢ｍ．二者无论在发

病症状还是培养形态都及其相似，不易区分。但其在菌核大小和寄主范目上存在稳定差异。芍药葡萄孢菌

啦

●１２℃

●

■

巩

●

■２４℃

●

核小型，直径１¨２

５

ｒｎｍ，少有集结，散布在培养皿

■●

内，表面常有菌丝覆盖。而灰葡萄孢菌核直径２．５—１５ｍｍ．单生或聚生，常集结成大型不规则形的菌核，

聚集的苗核表面有疣或轮纹，单生苗核表面光滑．营核表面常有露滴状分泌物ｎ，奉试验观察到的芍药

灰霉病原菌生长后期产生太量聚集菌核，形态更接近后者。

Ⅻ镕∞帅鲫砷∞∞帅

℃，，－

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：３“０

芍药葡萄孢寄主范围窄，仅在牡丹、芍药、玉簪、多花黄精、铃兰和某些菊花上有报道。而灰葡萄孢的寄

主范孱很广泛．Ｓｔｒｉｄｅｒ列举了５０科１５０种受害植物．不

１０Ｌｊ＝，：，兰二二，…

０

１

２

３

４

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５

朗３盘廑对灰葡萄孢蕾瘩生＊的髟晌裹３Ｔ同量度下蕾再产孢量

ｘｌｒ十孢予『皿

同感病植株间可交互感染”。Ｊｏｒｖｉ一曾断言，可蚍预测

该苗可发现于几乎所有取子叶植物，多数单子叶植物

和少数蕨类植物上，本试验的寄主范围测定结果显

示．该病原菌寄主范围广泛。所以结合上述２项特征，参考有关文献，将北京设摊栽培中发现并分离的芍药灰霉病病原菌鉴定为半知菌亚门葡萄孢属灰葡萄孢菌

Ｐｍ＆

｝”

２２

３６７

１８４８

７２９

９２

２．４芍药灰萄萄孢的生物学特性测定

ｌ温度对芍药灰葡萄孢生长和产孢的影响由圈３和表３可看到，芍药灰霉菌在４４８℃范围均可生长，

２．４

（Ｂｏｔｒ删ａｃｉｏ仃ｇａＰｅｔｓ）。

・８２－

中圄农孝通报ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃａｓｂ．ｏｒｇ．ｅｌｌ

１６－２４０Ｃ是其生长适温，以２０℃对其生长最有利。高于２０℃时菌落生长先快后慢，超过２８℃时生长速度逐渐减慢甚至停滞。低于２０℃时，菌落生长速度先慢后快，最终可以长满平皿。菌落培养４天即开始产孢，４￣２８℃均可产生孢子，其中２０℃下产孢量最大，４℃产孢较晚，产孢量少。

２．４．２光照对芍药灰葡萄孢生长和产孢的影响由图４和表４看到，芍药灰霉菌在光暗交替时生长速度最快，

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图４光照对灰葡萄孢菌落生长的影响麦４不同光照下菌落产孢量

×ｌｏ．个孢子恤

黑暗条件下生长最慢。连续黑暗条件产孢量最大，光暗交替次之，连续光照下不能产生孢子。连续黑暗处理在后期容易形成大型环状分布聚集菌核，而光暗交替不产生菌核或产生散生不规则分布菌核。

ｐＨ值对芍药灰葡萄孢生长和产孢的影响由图５

基

襄

粗

∞蛳舳加印卯∞加Ｏ

４

培养天数ｍ

图５ｐＨ对灰葡萄孢菌落生长的影响

表５不同ｐＨ值条件下菌落产孢×ｌｏ．个孢子，皿

ｐＩ－Ｉ

５６７８９１０１１产孢量

７６３１

５３８１

３４７１

１８４０

６９３

１０１５

１２１５

和表５看出，芍药灰霉菌在ｐＨ５～１１时均可生长和产孢，ｐｎ＝５时生长速度最快，产孢量也最大，随着ｐＩ－－Ｉ值逐渐升高而生长速度减慢，产孢量减少，在ｐＨ－－－９时产孢量最少，而ｐＨｌ肛１１产孢量又有少量增加。

因为琼脂在酸性条件下经高温会解离，导致培养

基不凝固，本试验ｐＨ２一范围内菌落生长数据无法测

量。后补做ｐＨ２～５之间的试验，培养基先灭菌后用精密试纸调ｐＨ。接菌后放于２００Ｃ气候箱培养，每天测

量菌落直径。发现病原菌在ｐＨ３～５范围内均生长迅速，３天长满平皿，ｌ周后陆续产孢。ｐＨ＝２菌落生长速度逐渐减慢，最后停滞，菌落不再扩大。综合２次试验结果，认为灰葡萄孢菌落生长产孢最适的ｐＨ范围为

３—５。

３结论

（１）设施栽培因湿度大、通风条件差，芍药灰霉病发生严重。２年生盆栽芍药在花后发病率甚至可以达到１００％。主要花后危害叶片和茎秆，表现为枝叶枯萎。

（２）对该枝叶枯萎现象进行病原菌分离鉴定。根据发病症状、病原形态和寄主范围，将该病认定为芍药灰霉病，鉴定其病原茵为半知菌亚门葡萄孢属灰葡萄孢菌（Ｂｏｔｒｙｔｉｓ

ｃｉｎｅｒｅｎＰｅｒｓ．）。

（３）对病原菌灰葡萄孢Ｂｏ舭＇ｓｃｉｎｅｒｅａＰｅ稻．进行

生物学测定，结果认为温度、光照和培养基的ｐＨ值对菌落生长和产孢影响很大。芍药灰葡萄孢在４．－２８。Ｃ范围均可生长和产孢，１６－－２４０Ｃ是其生长适温，以２０℃对其生长最有利。温度超过２８ｑＣ，菌落生长缓慢甚至停滞。不同光照条件下，光暗交替时菌落生长速度最快，连续黑暗条件下菌落生长最慢但产孢量最大，连续２—１１范围内均可生３￣５范围菌落生长最快。ｐＨ＝２时菌落生长速（１）对于芍药灰霉病的病原各地报道不一。欧美

ｐａｅｏｍａｅｍｄ

２种，主要是且ｐａｃｏｍａｅｏＩｌｄ．Ｈ。蓝

ｏｌｌｄ菌株，南京、

Ｐｅｔｓ：

２．４．３

光照下不能产生孢子。菌落在ｐＨ长，ｐＨ度逐渐减慢，最后停滞，菌落不再扩大，亦不能产生孢子。４讨论

各国报道芍药灰霉病的病原有ＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｃｒｃａＰｅｔｓ．和

Ｊ９ｌ

莹【习研究认为，中国没有Ｂｐａｃｏｎｉａｃ上海等地的芍药灰霉病病原均为劢丘弦西ｃｉｎ豳ｅａ喻璋【１川将洛阳、郑州地区的芍药灰霉病病原菌鉴定为

陈士宁等：北京地区设旌中芍药灰霉病的研究

・

８３

・

Ｂｏｔｏｍ＇ｓＰａｅｏａｉａｅ

Ｏｕｄ；陈晓红…１将四川药用芍药上的

灰霉病病原菌也鉴定为Ｂｏｔｒｙ矗＇ｓｐａｅｏａｉａｅＯｕｄ．。设施栽培芍药灰霉病的病原还未见相关报道。本试验通过对设施栽培芍药发病症状、病原形态及寄主范围的详细观察和测定，认为北京地区芍药设施栽培中大量发生的灰霉病病原菌为ＢｏｔｒｙｔｉｓｃｉｎｅｍａＰｅｒｓ．，这与蓝莹的鉴定结果一致，与瑜璋和陈晓红的结果有差异。中国到底有没有芍药葡萄孢菌株，其与灰葡萄孢在分布范围和危害症状上有何区别，还需进一步研究确认。

（２）光照、温度和ｐＨ是灰霉菌生长的必要条件。这些条件通过影响生理代谢来调节真菌的生长发育过程。认识灰霉菌生长发育的最佳条件是实验室研究灰霉菌的前提【１２１。目前关于芍药灰霉菌生物学特性的研究较少，但有很多研究人员ｏ¨习对番茄、草莓、葡萄、黄瓜等作物上的灰霉病菌做过详细的生物学研究，结果表明不同寄主的灰霉菌生物学特性大体相同，稍有差异。芍药灰霉菌的生物学测定可以参照对比农作物灰霉菌的已有研究。已有研究结果表明，灰霉菌菌丝在２￣３ｌ℃均能生长发育，以２０－２３℃为最适，病原菌在

ｐＨ

３～１１的范围内都能生长，ｐＨ为５时菌丝生长最快、

产孢量最高【Ⅲ。本试验所得温度和ｐＨ值范围与其相符。

（３）关于光照对灰霉菌生长的影响，各人说法不同。普遍上认为光照对菌落生长影响不大阳４１，但本试验结果显示光照对菌落生长和产孢有很大作用，给予适当光照有利于菌丝生长，而连续光照则不能产生孢子。

（４）琼脂在酸性条件下经高温会解离，导致培养基不凝固嘲，如果设置ｐＨ２４处理，需灭菌后调ｐＨ，操作不方便，且容易引起杂菌的污染。建议用ｐＨ５－６固体培养基培养灰葡萄孢菌或ｐＨ３－－－４液体培养基培养。蒸馏水配制ＰＳＡ培养基自然状态下ｐＨ值为５—７之间，ＰＳＡ培养基自然状态为ｐＨ８￣９，必须调ｐＨ后培养灰葡萄孢。

（５）本研究结果为研究芍药灰霉病发病规律和下一步的防治工作提供了依据。

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作者：作者单位：

陈士宁， 刘燕， 雷增普， Chen Shining， Liu Yan， Lei Zengpu

陈士宁,刘燕,Chen Shining,Liu Yan(北京林业大学园林学院,北京,100083;国家花卉工程技术研究中心,北京,100083)， 雷增普,Lei Zengpu(北京林业大学资源与环境学院,北京,100083)

中国农学通报

CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN2011,27(6)3次

刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：

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引用本文格式：陈士宁.刘燕.雷增普.Chen Shining.Liu Yan.Lei Zengpu 北京地区设施中芍药灰霉病的研究[期刊论文]-中国农学通报 2011(6)