分析化学(FENXIHUAXUE) 研究简报第12期
2003年12月ChineseJournalofAnalyticalChemistry1476～1478第31卷
混合线性分析法同时测定安痛定注射液中三组分含量
耿玉珍
1
31
唐 峰 刘 葵
21
2
(山东农业大学化学与材料科学学院,泰安271018) (泰山医学院,泰安271000)
摘 要 将一种新近发展的多元校正方法———混合线性分析法,用于安痛定注射液中氨基比林、安替比林、巴比妥含量的同时测定。在220～250nm内取16个波长测量7组标准混合溶液的吸光度矢量作为校正集,以最小二乘法求得系数矢量作为各组分的纯光谱,用混合线性分析法进行数据处理。氨基比林、安替比林、巴比妥的标准回收率分别为99.0%～100.3%、99.0%～100.8%和98.5%～101.1%。用于安痛定注射液中氨基比林、安替比林、巴比妥三组分含量的测定,经t检验,其测定结果与标准法相比,两者间无显著性差异。关键词 混合线性分析法,氨基比林,安替比林,巴比妥,紫外分光光度法
1 引 言
安痛定注射液是一种解热镇痛药,其三组分———氨基比林、安替比林、巴比妥的含量,用标准方法测定,操作繁琐、费时费力,不适于自动化和大批量样品的处理,而且不易得到满意的结果。
近些年,化学计量学为分析化学注入了新的活力,提出了多种不经分离同时测定多组分的新方法。这些方法具有操作简捷、不易引起污染和可进行大批量样品处理的优点,与计算机连用可实现自动化。
1
Berger等提出的混合线性分析(hybridlinearanalysis,HLA)法,结合多种多元校正方法的优点,简单、准确,能较好地避开背景的干扰
。这种方法的基本原理是,若混合体系中各组分吸光度加和性成立,预测集与校正集包含相同背景,样品中各组分的纯光谱是相应光谱的线性组合,且组分浓度(C)与其光谱响应存在线性关系:C=Sb,式中S为预测集的观测光谱,b为较正矢量,根据文献的方法,从已知标准求得b矢量,即可由该式求出被测组分的浓度。本文将HLA法应用于安痛定注射液中氨基比林、安替比林和巴比妥含量的同时测定,结果良好。
1
2,3
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
UV22000型分光光度计(上海尤尼柯仪器公司)。自编程序,在PC机上运行。
氨基比林、安替比林和巴比妥(淄博化学试剂厂)标准贮备溶液:以0.002molΠLNaOH为溶剂,分别配制成2gΠL,分别稀释成200、200和100mgΠL,作为贮备液。所用试剂为分析纯以上,水为二次蒸馏水。2.2 实验方法
在25mL容量瓶中,准确加入适量混合组分,用0.002molΠLNaOH稀释至刻度,摇匀,用1cm比色皿,以溶剂为参比,在200～280nm波长范围内,每隔2nm测量吸光度。
3 结果和讨论
3.1 吸收光谱
在0.002molΠLNaOH溶液中,氨基比林、安替比林和巴比妥的吸收光谱见图1。由图1可以看出,氨基比林、安替比林和巴比妥的最大吸收波长分别为226、242和238nm,三者的吸收光谱严重重叠,宜应用分辨效果较好的数学模型进行计算。3.2 溶剂的选择
实验表明,在0.001～0.004molΠLNaOH溶液中,氨基比林、安替比林和巴比妥三组分的吸光度都较
2002211230收稿;2003204212接受本文系山东农业大学资助
第12期耿玉珍等:混合线性分析法同时测定安痛定注射液中三组分含量14 77
大且稳定;而在水溶液中,氨基比林、安替比林的灵
敏度基本不变,巴比妥的灵敏度明显降低。本实验选择0.002molΠLNaOH溶液作为溶剂。3.3 线性关系考察
分别配制不同浓度的氨基比林、安替比林和巴比妥溶液,于最大吸收波长处分别测定吸光度;氨基比林的浓度在0～24mgΠL间的回归方程为y=-0.00309+0.0376x,r=0.9998;安替比林浓度在0～12mgΠL间的回归方程为y=0.0016+0.0472x,r=0.9996;巴比妥浓度在0～8mgΠL间的回归方程为
y=0.0030+0.0577x,r=0.9995。
图1 吸收光谱
Fig.1 Absorptionspectra
1.氨基比林(aminopyrine);2.安替比林(antipyrine);3.巴比妥
3.4 测量波长的选择及吸光度的加和性
根据图1,在波长220～250nm范围内,三组分的(barbitone)。吸收曲线斜率都较小,测量误差较小,所以选择220
～250nm作为测量的波长范围。分别以间隔2nm和间隔4nm作为测量点进行实验,结果表明:间隔2nm时误差较小。所以本文选择在220～250nm波长范围内,间隔2nm共16个波长作为测量点。
分别在220、226、230、236、240、246和250nm处进行吸光度加和性实验。当三组分总浓度不超过40mgΠL时,其吸光度具有良好的加和性,加和值与实测值的误差不超过5%,满足测定需要。3.5 校正集及待测组分的纯光谱
4
按安痛定注射液处方比例,在各组分标示量±20%范围内,按正交设计原则,取适量贮备液,用0.002molΠLNaOH溶液稀释,配制7组标准混合溶液,所含氨基比林、安替比林和巴比妥的浓度(mgΠL)比分别为16.00∶7.20∶3.60,18.00∶8.00∶3.96,20.00∶8.80∶4.32,22.00∶9.60∶2.88,24.00∶8.00∶3.24,16.00∶9.60∶4.32和18.00∶8.80∶3.96。在所选择的波长测定吸光度值构成校正矩阵A,并用最小二乘
)-1,求得系数矩阵K中的各列作为各组分纯光谱。法K=Ac(cc′
3.6 样品分析3.6.1 模拟样品分析 按4.5配制校正集标准混合溶液的方法,配制6组不同浓度比的标准混合溶液
作为模拟样品。各溶液分别在220～250nm扫描,间隔2nm读数,用HAL法计算,结果见表1。
表1 混合标准溶液分析结果样品
Samples1
组分
Components
AM
ANBAAMANBAAMANBAAMANBAAMANBAAMAN加入量
Adeed(mgΠL)
16.00
6.402.8818.007.203.2420.008.003.6022.008.803.9624.009.604.3216.007.20测得量
Found(mgΠL)
15.93
6.452.8618.057.133.2019.977.923.6221.988.813.9023.779.624.3415.977.16回收率
Recovery(%)
99.6100.899.3100.399.098.899.999.0100.699.9100.198.599.0100.2100.599.899.4相对标准偏差
RSD(%,n=5)
0.31.74.80.90.43.10.61.82.31.31.42.60.80.71.71.11.52
3
4
5
6
3AM:氨基比林(aminopyrine);AN:安替比林(antipyrine);BA:巴比妥(barbitone)
1478分析化学第31卷
3.6.2 实际样品分析 取安痛定注射液1mL,置于100mL容量瓶,加0.002molΠLNaOH至刻度,摇匀。
再取1mL置于25mL容量瓶,以同样NaOH稀释至刻度,摇匀,用本方法测定,以样品标示量的百分率表
5
示的结果见表2。同时用标准方法测定安痛定注射液中3组分含量,结果见表2。经t检验,本法测定结果与标准法相比,所得氨基比林、安替比林和巴比妥的t绝对值分别为1.71、1.22和2.12,均小于临界t值2.31(a=0.05),表明两者间无显著性差异。
表2 安痛定注射液中氨基比林、安替比林和巴比妥含量测定结果(标示量%)Table2 Determinationresultsofaminopyrine,antipyrine,barbitoneinantongdinginjection(%statedamount)
序号
No.12345
x
分析化学(FENXIHUAXUE) 研究简报第12期
2003年12月ChineseJournalofAnalyticalChemistry1476～1478第31卷
混合线性分析法同时测定安痛定注射液中三组分含量
耿玉珍
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31
唐 峰 刘 葵
21
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(山东农业大学化学与材料科学学院,泰安271018) (泰山医学院,泰安271000)
摘 要 将一种新近发展的多元校正方法———混合线性分析法,用于安痛定注射液中氨基比林、安替比林、巴比妥含量的同时测定。在220～250nm内取16个波长测量7组标准混合溶液的吸光度矢量作为校正集,以最小二乘法求得系数矢量作为各组分的纯光谱,用混合线性分析法进行数据处理。氨基比林、安替比林、巴比妥的标准回收率分别为99.0%～100.3%、99.0%～100.8%和98.5%～101.1%。用于安痛定注射液中氨基比林、安替比林、巴比妥三组分含量的测定,经t检验,其测定结果与标准法相比,两者间无显著性差异。关键词 混合线性分析法,氨基比林,安替比林,巴比妥,紫外分光光度法
1 引 言
安痛定注射液是一种解热镇痛药,其三组分———氨基比林、安替比林、巴比妥的含量,用标准方法测定,操作繁琐、费时费力,不适于自动化和大批量样品的处理,而且不易得到满意的结果。
近些年,化学计量学为分析化学注入了新的活力,提出了多种不经分离同时测定多组分的新方法。这些方法具有操作简捷、不易引起污染和可进行大批量样品处理的优点,与计算机连用可实现自动化。
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Berger等提出的混合线性分析(hybridlinearanalysis,HLA)法,结合多种多元校正方法的优点,简单、准确,能较好地避开背景的干扰
。这种方法的基本原理是,若混合体系中各组分吸光度加和性成立,预测集与校正集包含相同背景,样品中各组分的纯光谱是相应光谱的线性组合,且组分浓度(C)与其光谱响应存在线性关系:C=Sb,式中S为预测集的观测光谱,b为较正矢量,根据文献的方法,从已知标准求得b矢量,即可由该式求出被测组分的浓度。本文将HLA法应用于安痛定注射液中氨基比林、安替比林和巴比妥含量的同时测定,结果良好。
1
2,3
2 实验部分
2.1 仪器与试剂
UV22000型分光光度计(上海尤尼柯仪器公司)。自编程序,在PC机上运行。
氨基比林、安替比林和巴比妥(淄博化学试剂厂)标准贮备溶液:以0.002molΠLNaOH为溶剂,分别配制成2gΠL,分别稀释成200、200和100mgΠL,作为贮备液。所用试剂为分析纯以上,水为二次蒸馏水。2.2 实验方法
在25mL容量瓶中,准确加入适量混合组分,用0.002molΠLNaOH稀释至刻度,摇匀,用1cm比色皿,以溶剂为参比,在200～280nm波长范围内,每隔2nm测量吸光度。
3 结果和讨论
3.1 吸收光谱
在0.002molΠLNaOH溶液中,氨基比林、安替比林和巴比妥的吸收光谱见图1。由图1可以看出,氨基比林、安替比林和巴比妥的最大吸收波长分别为226、242和238nm,三者的吸收光谱严重重叠,宜应用分辨效果较好的数学模型进行计算。3.2 溶剂的选择
实验表明,在0.001～0.004molΠLNaOH溶液中,氨基比林、安替比林和巴比妥三组分的吸光度都较
2002211230收稿;2003204212接受本文系山东农业大学资助
第12期耿玉珍等:混合线性分析法同时测定安痛定注射液中三组分含量14 77
大且稳定;而在水溶液中,氨基比林、安替比林的灵
敏度基本不变,巴比妥的灵敏度明显降低。本实验选择0.002molΠLNaOH溶液作为溶剂。3.3 线性关系考察
分别配制不同浓度的氨基比林、安替比林和巴比妥溶液,于最大吸收波长处分别测定吸光度;氨基比林的浓度在0～24mgΠL间的回归方程为y=-0.00309+0.0376x,r=0.9998;安替比林浓度在0～12mgΠL间的回归方程为y=0.0016+0.0472x,r=0.9996;巴比妥浓度在0～8mgΠL间的回归方程为
y=0.0030+0.0577x,r=0.9995。
图1 吸收光谱
Fig.1 Absorptionspectra
1.氨基比林(aminopyrine);2.安替比林(antipyrine);3.巴比妥
3.4 测量波长的选择及吸光度的加和性
根据图1,在波长220～250nm范围内,三组分的(barbitone)。吸收曲线斜率都较小,测量误差较小,所以选择220
～250nm作为测量的波长范围。分别以间隔2nm和间隔4nm作为测量点进行实验,结果表明:间隔2nm时误差较小。所以本文选择在220～250nm波长范围内,间隔2nm共16个波长作为测量点。
分别在220、226、230、236、240、246和250nm处进行吸光度加和性实验。当三组分总浓度不超过40mgΠL时,其吸光度具有良好的加和性,加和值与实测值的误差不超过5%,满足测定需要。3.5 校正集及待测组分的纯光谱
4
按安痛定注射液处方比例,在各组分标示量±20%范围内,按正交设计原则,取适量贮备液,用0.002molΠLNaOH溶液稀释,配制7组标准混合溶液,所含氨基比林、安替比林和巴比妥的浓度(mgΠL)比分别为16.00∶7.20∶3.60,18.00∶8.00∶3.96,20.00∶8.80∶4.32,22.00∶9.60∶2.88,24.00∶8.00∶3.24,16.00∶9.60∶4.32和18.00∶8.80∶3.96。在所选择的波长测定吸光度值构成校正矩阵A,并用最小二乘
)-1,求得系数矩阵K中的各列作为各组分纯光谱。法K=Ac(cc′
3.6 样品分析3.6.1 模拟样品分析 按4.5配制校正集标准混合溶液的方法,配制6组不同浓度比的标准混合溶液
作为模拟样品。各溶液分别在220～250nm扫描,间隔2nm读数,用HAL法计算,结果见表1。
表1 混合标准溶液分析结果样品
Samples1
组分
Components
AM
ANBAAMANBAAMANBAAMANBAAMANBAAMAN加入量
Adeed(mgΠL)
16.00
6.402.8818.007.203.2420.008.003.6022.008.803.9624.009.604.3216.007.20测得量
Found(mgΠL)
15.93
6.452.8618.057.133.2019.977.923.6221.988.813.9023.779.624.3415.977.16回收率
Recovery(%)
99.6100.899.3100.399.098.899.999.0100.699.9100.198.599.0100.2100.599.899.4相对标准偏差
RSD(%,n=5)
0.31.74.80.90.43.10.61.82.31.31.42.60.80.71.71.11.52
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3AM:氨基比林(aminopyrine);AN:安替比林(antipyrine);BA:巴比妥(barbitone)
1478分析化学第31卷
3.6.2 实际样品分析 取安痛定注射液1mL,置于100mL容量瓶,加0.002molΠLNaOH至刻度,摇匀。
再取1mL置于25mL容量瓶,以同样NaOH稀释至刻度,摇匀,用本方法测定,以样品标示量的百分率表
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示的结果见表2。同时用标准方法测定安痛定注射液中3组分含量,结果见表2。经t检验,本法测定结果与标准法相比,所得氨基比林、安替比林和巴比妥的t绝对值分别为1.71、1.22和2.12,均小于临界t值2.31(a=0.05),表明两者间无显著性差异。
表2 安痛定注射液中氨基比林、安替比林和巴比妥含量测定结果(标示量%)Table2 Determinationresultsofaminopyrine,antipyrine,barbitoneinantongdinginjection(%statedamount)
序号
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