硫酸苯酚法测多糖

一、 总糖含量标准曲线的绘制

准确称取无水葡萄糖10 mg,溶解后转入100 mL容量瓶定容。按表4所示操作。

表4 总糖含量标准曲线绘制方法

管号

标准葡萄

糖溶液

(mL)

蒸馏水

(mL)

6%苯酚

浓硫酸 2.0 1.8 1.4 1.0 0.6 0.2 0 0.2 0.6 1.0 1.4 1.8 0 1 2 3 4 5 各1.0 mL 各5.0 mL

摇匀后沸水加热10 min,冷却至室温后于490 nm处以0号管为

检测 空白对照,测光密度值,以葡萄糖含量为横坐标,吸光值为纵坐标作

标准曲线:Y=aX+b(Y为吸光值,X为葡萄糖质量/ug)。

二、 试液总糖含量的测定

用移液枪从总体积V中吸取一定体积V1ml的待测液,用蒸馏水补至体积为2 mL,加入6%苯酚1.0 mL,浓硫酸5.0 mL,空白对照以蒸馏水代替待测液,摇匀后沸水加热10 min,冷却后,在490 nm处测定吸光值为A。查标准曲线,算出总糖含量。

m(g)=1000000V1 V(A−b)/a

一、 总糖含量标准曲线的绘制

准确称取无水葡萄糖10 mg,溶解后转入100 mL容量瓶定容。按表4所示操作。

表4 总糖含量标准曲线绘制方法

管号

标准葡萄

糖溶液

(mL)

蒸馏水

(mL)

6%苯酚

浓硫酸 2.0 1.8 1.4 1.0 0.6 0.2 0 0.2 0.6 1.0 1.4 1.8 0 1 2 3 4 5 各1.0 mL 各5.0 mL

摇匀后沸水加热10 min,冷却至室温后于490 nm处以0号管为

检测 空白对照,测光密度值,以葡萄糖含量为横坐标,吸光值为纵坐标作

标准曲线:Y=aX+b(Y为吸光值,X为葡萄糖质量/ug)。

二、 试液总糖含量的测定

用移液枪从总体积V中吸取一定体积V1ml的待测液,用蒸馏水补至体积为2 mL,加入6%苯酚1.0 mL,浓硫酸5.0 mL,空白对照以蒸馏水代替待测液,摇匀后沸水加热10 min,冷却后,在490 nm处测定吸光值为A。查标准曲线,算出总糖含量。

m(g)=1000000V1 V(A−b)/a


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