2016-2017学年度第二学期高二生物测试（一）
生物技术实践
1．（2011年）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和
。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、
和无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
2．（2012年）为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在ＭＳ培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。
回答下列问题：
（1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为 和 两类。上述培养基中，6-BA属于 类生长调节剂。
（2）在该实验中，自变量是 ，因变量是 ，自变量的取值范围是 。
（3）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基。
（4）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入 （填“6-BA”或“IAA”）。
3.（2013年Ⅰ卷）回答下列有关泡菜制作的习题：
（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行的过程。该过程发生在乳酸菌的中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、和等。
（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是，原因是：。
4.（2013年Ⅱ卷）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。 回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用___________法或_____________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用__________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A___________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_________；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明____________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的____________。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______________。
5.（2014年I卷）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
注：“+”表示有，“－”表示无。
据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；
6.（2014年Ⅱ卷）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后 的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________________； 然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37, 据此可得出每升水样中的活菌数为___________。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过______________灭菌， 在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是___________。
（3）示意图A和B中，____________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中____________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高____________的利用率。
7．（2015年）已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用__________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用_________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶分微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以___________为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用__________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用__________法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕_________℃设计后续实验。
2011年【答案】（1）原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法（3）强（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰
【解析】⑴该同学筛选能降解原油的菌株，可以将样品稀释液置于以原油为唯一碳源的固体培养基中培养，该培养基功能上属于选择培养基。⑵菌株的接种方法，常用的有两种：平板划线法和稀释涂布平板法。⑶菌株分解周围的营养物质，出现分解圈，分解圈大说明该菌株的降解能力强。⑷实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；微生物的
培养要求严格的无菌技术，操作时在酒精灯火焰附近进行，避免周围其他细菌的污染。 2012年【解析】本题主要是对植物组培知识的考察，提问涉及必修一和必修三的一些知识，再加上以实验分析的形式考察中学生物实验的基础知识，综合性强，并不局限于选修一，是为“选修可以考察必修”一说的集中体现。
第（１）问第一空考察必需元素的分类（可分为大量元素 微量元素），必修一的基础知识，选修一教材上亦有原句。
第（１）问第二空考察植物生长调节剂的知识。中学生物必修一提及植物体内5大植物激素，分别为生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类、乙烯类、脱落酸类，要求掌握植物生长调节剂的名称；常见选修一的植物组织培养实验中又重点分析了生长素类、细胞分裂素类，要求识记二者比例对植物脱分化的影响（生长素多有利于生根，细胞分裂素多有利于长芽）；由表格易知IAA比例上升抑制长芽，为生长素（吲哚乙酸），故6-BA为细胞分裂素。 第（2）问考察中学生物实验的基础知识，自变量是IAA（6-BA浓度不变），取值范围是０到０.５；因变量是丛芽数（即再生丛芽外植体的比率和再生丛芽外植体上的丛芽平均数） 第（3）问直接从表格中可读出。
第（4）问参阅第（１）问第二空解析
【答案】（１）大量元素 微量元素 细胞分裂素（２）IAA浓度 丛芽外植体的比率及丛芽平均数 ０～０.５mg/L （３）１（４）6-BA
2013年I卷【答案】（1）消灭杂菌增加乳酸菌含量
（2）无氧呼吸细胞质
（3）温度、食盐用量、腌制时间
（4）乳酸菌数量增加，杂菌数量较少乳酸菌比杂菌更为耐酸
【解析】（1）盐水中可能含有杂菌，制作泡菜时，所用盐水需要煮沸，以便杀死盐水中的杂菌。陈泡菜中含有现成的乳酸菌，加入后，可以缩短制作时间。
（2）乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行无氧呼吸的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质基质中。
（3）在泡菜的制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素有温度过高、食盐用量不足、腌制时间等。
（4）从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐发酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，其他杂菌较少；原因是酸性条件下，不利于杂菌生存，增加乳酸菌的数量。
【试题点评】本题通过考查泡菜制作的相关基础知识，主要考查识记能力和对相关知识的判断能力。
4.（2013年Ⅱ卷）【答案】：（1）划线稀释涂布（或涂布）（2）涂布（3）敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A弱耐药菌（4）A
【解析】：本题考查微生物的培养和应用。
（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。
（2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。
（3）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。
（4）实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。
5.（2014年I卷）【答案】（1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红色 透明圈
（3）不能 液体培养基不能分离单菌落 不能 乙培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
【解析】（1）纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，如下图：
（2）刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
（3）分离和鉴别纤维素分解菌的培养基位固体培养基，且需以纤维素为唯一碳源。 2014年Ⅱ卷【答案】（1）检测培养基平板灭菌是否合格
（2）灼烧 3.8×10 7将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
营养物质 （3）B （4）溶解氧
【解析】涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，如果灭菌不合格，
可在空白平板上发现菌落，所以用此法可检测培养基平板灭菌是否合格。每升水样中
的活菌数为（39+38+37）/3=38,再除以0.1乘以100，这是1毫升的菌数量，再乘以1000就是1升中的菌数，故为3.8×10。用平板划线法先用灼烧灭菌再划线。振荡培养可使培养基中各营养分配的均匀和溶氧量大，所以菌的生长也快。
2015年（1）苏丹III（或苏丹IV） 萃取法
（2）脂肪
（3）血细胞计数板 稀释涂布平板 7
（4）45 40
2016-2017学年度第二学期高二生物测试（一）
生物技术实践
1．（2011年）有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出高效降解原油的菌株。回答问题：
（1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于培养基。
（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和
。
（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈说明该菌株的降解能力。
（4）通常情况下，在微生物培养过程中实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、
和无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
2．（2012年）为了探究6-BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在ＭＳ培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基（见下表），灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率（m），以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数（n），结果如下表。
回答下列问题：
（1）按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为 和 两类。上述培养基中，6-BA属于 类生长调节剂。
（2）在该实验中，自变量是 ，因变量是 ，自变量的取值范围是 。
（3）从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是 号培养基。
（4）为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入 （填“6-BA”或“IAA”）。
3.（2013年Ⅰ卷）回答下列有关泡菜制作的习题：
（1）制作泡菜是，所用盐水煮沸，其目的是。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是。
（2）泡菜制作过程中，乳酸发酵过程即为乳酸菌进行的过程。该过程发生在乳酸菌的中。
（3）泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有、和等。
（4）从开始制作到泡菜质量最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是，原因是：。
4.（2013年Ⅱ卷）临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。 回答下列问题：
（1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用___________法或_____________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。
（2）取该单菌落适当稀释，用__________法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。
（3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A___________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_________；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明____________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的____________。
（4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______________。
5.（2014年I卷）植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解。回答下列问题:
（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将分解成。
（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的。
（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表）：
注：“+”表示有，“－”表示无。
据表判断，培养基甲（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；培养基乙（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是；
6.（2014年Ⅱ卷）为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等工作。回答下列问题：
（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后 的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是______________________________； 然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37, 据此可得出每升水样中的活菌数为___________。
（2）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，接种环通过______________灭菌， 在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线，这样做的目的是___________。
（3）示意图A和B中，____________表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。
（4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养，结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中____________的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高____________的利用率。
7．（2015年）已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产。回答有关问题：
（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用__________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可选用_________（填“萃取法”或“水蒸气蒸馏法”）从菌体中提取。
（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶分微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以___________为碳源的固体培养基进行培养。
（3）若要测定培养液中微生物B的菌体数，可在显微镜下用__________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用__________法进行计数。
（4）为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度，某同学测得相同时间内，在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg，则上述三个温度中，________℃条件下该酶活力最小。为了进一步确定该酶的最适温度，应围绕_________℃设计后续实验。
2011年【答案】（1）原油选择（2）平板划线法稀释涂布平板法（3）强（4）干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰
【解析】⑴该同学筛选能降解原油的菌株，可以将样品稀释液置于以原油为唯一碳源的固体培养基中培养，该培养基功能上属于选择培养基。⑵菌株的接种方法，常用的有两种：平板划线法和稀释涂布平板法。⑶菌株分解周围的营养物质，出现分解圈，分解圈大说明该菌株的降解能力强。⑷实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌；微生物的
培养要求严格的无菌技术，操作时在酒精灯火焰附近进行，避免周围其他细菌的污染。 2012年【解析】本题主要是对植物组培知识的考察，提问涉及必修一和必修三的一些知识，再加上以实验分析的形式考察中学生物实验的基础知识，综合性强，并不局限于选修一，是为“选修可以考察必修”一说的集中体现。
第（１）问第一空考察必需元素的分类（可分为大量元素 微量元素），必修一的基础知识，选修一教材上亦有原句。
第（１）问第二空考察植物生长调节剂的知识。中学生物必修一提及植物体内5大植物激素，分别为生长素类、细胞分裂素类、赤霉素类、乙烯类、脱落酸类，要求掌握植物生长调节剂的名称；常见选修一的植物组织培养实验中又重点分析了生长素类、细胞分裂素类，要求识记二者比例对植物脱分化的影响（生长素多有利于生根，细胞分裂素多有利于长芽）；由表格易知IAA比例上升抑制长芽，为生长素（吲哚乙酸），故6-BA为细胞分裂素。 第（2）问考察中学生物实验的基础知识，自变量是IAA（6-BA浓度不变），取值范围是０到０.５；因变量是丛芽数（即再生丛芽外植体的比率和再生丛芽外植体上的丛芽平均数） 第（3）问直接从表格中可读出。
第（4）问参阅第（１）问第二空解析
【答案】（１）大量元素 微量元素 细胞分裂素（２）IAA浓度 丛芽外植体的比率及丛芽平均数 ０～０.５mg/L （３）１（４）6-BA
2013年I卷【答案】（1）消灭杂菌增加乳酸菌含量
（2）无氧呼吸细胞质
（3）温度、食盐用量、腌制时间
（4）乳酸菌数量增加，杂菌数量较少乳酸菌比杂菌更为耐酸
【解析】（1）盐水中可能含有杂菌，制作泡菜时，所用盐水需要煮沸，以便杀死盐水中的杂菌。陈泡菜中含有现成的乳酸菌，加入后，可以缩短制作时间。
（2）乳酸发酵的过程即为乳酸菌进行无氧呼吸的过程。该过程发生在乳酸菌细胞的细胞质基质中。
（3）在泡菜的制作过程中，影响亚硝酸盐含量的因素有温度过高、食盐用量不足、腌制时间等。
（4）从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐发酸，这段时间内泡菜坛中乳酸菌数量增加，其他杂菌较少；原因是酸性条件下，不利于杂菌生存，增加乳酸菌的数量。
【试题点评】本题通过考查泡菜制作的相关基础知识，主要考查识记能力和对相关知识的判断能力。
4.（2013年Ⅱ卷）【答案】：（1）划线稀释涂布（或涂布）（2）涂布（3）敏感不敏感该致病菌对C的敏感性比对A弱耐药菌（4）A
【解析】：本题考查微生物的培养和应用。
（1）分离菌落常用稀释涂布平板法或划线涂布法。
（2）取该单菌落适当稀释，用涂布法接种于固体培养基表面，适宜温度培养。
（3）含抗生素的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对该抗生素有敏感性，周围没有透明圈的说明该抗生素不具有敏感性。透明圈越大的敏感性越强。
（4）实验结果抗生素A对该致病菌的作用最好。
5.（2014年I卷）【答案】（1）纤维二糖 葡萄糖 （2）红色 透明圈
（3）不能 液体培养基不能分离单菌落 不能 乙培养基中没有纤维素，不会形成CR-纤维素红色复合物，即使出现单菌落也不能确定其为纤维素分解菌
【解析】（1）纤维素是一种由葡萄糖首尾相连而成的高分子化合物，是含量最丰富的多糖类物质。纤维素能被土壤中某些微生物分解利用，如下图：
（2）刚果红与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素酶分解后，红色复合物无法形成，出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。
（3）分离和鉴别纤维素分解菌的培养基位固体培养基，且需以纤维素为唯一碳源。 2014年Ⅱ卷【答案】（1）检测培养基平板灭菌是否合格
（2）灼烧 3.8×10 7将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落
营养物质 （3）B （4）溶解氧
【解析】涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，如果灭菌不合格，
可在空白平板上发现菌落，所以用此法可检测培养基平板灭菌是否合格。每升水样中
的活菌数为（39+38+37）/3=38,再除以0.1乘以100，这是1毫升的菌数量，再乘以1000就是1升中的菌数，故为3.8×10。用平板划线法先用灼烧灭菌再划线。振荡培养可使培养基中各营养分配的均匀和溶氧量大，所以菌的生长也快。
2015年（1）苏丹III（或苏丹IV） 萃取法
（2）脂肪
（3）血细胞计数板 稀释涂布平板 7
（4）45 40