【中图分类号】：R283 【文献标识码】：A 【文章编号】：1004-597X(2007)10-0032-02 【摘要】采用HPLC法测定不同炮制方法厚朴中的厚朴酚及和厚朴酚的含量，结果表明不同炮制方法对二者的存在着较大的影响，以生姜炙方法最优，其含量与生品相近。 【关键词】厚朴；HPLC；厚朴酚；和厚朴酚 Differently concocts the method to the thick plain center thick plain phenol and with the thick plain phenol influence Chen Duanduan 【Abstract】uses the HPLC law determination differently to concoct the method thick plain center the thick plain phenol and with the thick plain phenol content，finally indicated differently concocts the method to have a more tremendous influence to the two，by ginger method most superior，its content is close with living. 【Key word】thick is plain; HPLC; Thick plain phenol; With thick plain phenol 厚朴为木兰科植物厚朴M ag nolia of f icnalis Rehd. etW ils或凹叶厚朴M. of f icinalis Rehd. etW ils. var. biloba R rha. etW ils 的干燥干皮、根皮和枝皮。厚朴是常用的中药，具有行气燥湿降逆平喘的功效。用于脘腹胀痛，宿食不消，呕吐，泻痢，气逆喘咳等。此前已有不少有关于厚朴炮制后其主要成分厚朴酚及和厚朴酚含量变化的研究[1,2]，以及其中厚朴挥发油的化学成分的研究[3]。但由于在炮制过程中，有炮制方法、炮制程度及炮制辅料等多个因素的不同会引起其有效成分含量的差异，而且现今在各个炮制环节上没有较为详尽和稳定的操作上的标准，致使厚朴在炮制过程中各个因素显得紊乱，从而影响到厚朴饮片的质量。本文采用RP-HPLC法测定厚朴生品和不同炮制方法得到的炮制品中的厚朴酚与和厚朴酚含量，进而确定其有效的及最佳炮制工艺，为制定厚朴的质量标准提供依据。 1 材料与仪器 高效液相色谱仪(Dionex P680型；UVD2170u紫外检测器)，AT201型电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)，微量进样器(安捷伦)，0.22μm的微孔滤膜，试剂全部为分析纯。厚朴药材来源于湖北恩施GAP产地。 2 炮制品的制备 2.1 生厚朴：去粗皮，洗净，切丝，60℃下烘干； 2.2 姜炙厚朴：按药典方法处理，取厚朴丝，加姜汁，拌匀，闷润至姜汁吸尽，用文火炒干； 2.3 姜浸厚朴：取厚朴丝，加姜汁拌匀，闷润至姜汁吸尽，烘干； 2.4 酒炙厚朴：取厚朴丝，加酒，拌匀，闷润至姜汁吸尽，用文火炒干。 3 含量测定 3.1 色谱条件。色谱柱：Diamonsil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5μm)；流动相:甲醇-水(73∶27) ；波长：294 nm；理论塔板数以厚朴酚峰计不低于4000。 3.2 对照品溶液的制备及标准曲线的测定。分别称取经五氧化二磷干燥至恒重的厚朴酚、和厚朴酚适量,至于25ml容量瓶中，用甲醇分别制成浓度为151.02 μg/ml的厚朴酚对照品溶液和153.46μg/ml的和厚朴酚对照品溶液。精密取各不同体积的标准液，稀释，在上述色谱条件下分别进样10μl测定。以峰面积A1 为纵坐标,对照品浓度C1 (μg/ml) 为横坐标，求回归方程。厚朴酚为：A1 =0.2421C1 -1.324，r1 = 0.9996，线性范围26.23 ～151.02μg/ml；和厚朴酚为：为A2 = 0.2134C2-0.958，r2 = 0.9998,线性范围29.12 ～153.46μg/ml。 3.3 供试品溶液的制备。分别取上述4种不同炮制的样品，粉碎(过三号筛) 0.04～0.05 g,精密称定，置50 ml的磨口锥形瓶中,精密加入甲醇25 ml，称重，超声处理20min,取出放冷至室温,称重,用溶剂补足减少的甲醇量,摇匀,滤过,取续滤液再用0.22μm的干微孔滤膜滤过,滤液即为供试品溶液。 3.4 样品的测定。分别吸取供试品溶液,在上述色谱条件下各进样10μl,进行HPLC分析,测得结果如下,见表1。 表1 不同炮制方法样品含量的测定结果(n=6) 3.5 精密度与稳定性测定。取等量的厚朴酚对照溶液和和厚朴酚对照品溶液混合,按同样色谱条件进行HPLC分析,每次进样10μl,连续进样5次,计算厚朴酚、和厚朴酚的含量。和厚朴酚的RSD为1.21%，厚朴酚的RSD为1.34%，表明仪器精密度良好。此外，分别在0、2、4、6、8，24 h测定厚朴酚对照溶液和和厚朴酚对照品溶液混合液，其厚朴酚的RSD为1.80%，和厚朴酚的RSD为1.06%，表明二者稳定性良好。 3.6 加样回收率测定。采用回收率测定的方法,取已含量的生厚朴样品分别加入定量的对照品溶液,按供试品溶液制备项下方法进行操作,按同样色谱条件进行HPLC分析,分别进样10μl,计算厚朴酚、和厚朴酚的含量,结果表明,和厚朴酚与厚朴酚的平均加样回收率分别为99.54% ( RSD为0.54%) 与100.38% (RSD为0.75% ),表明回收率良好。 4 小结 从本实验在相同条件下测定了厚朴生品和三种不同炮制品中的厚朴酚及和厚朴酚的含量，结果可以表明，不同的炮制方法，对厚朴的二者标志性成分厚朴酚与和厚朴酚存在较大的影响，其中以生品含量最高，三种炮制方法中，以姜炙方法最优。 参考文献 [1] 林世俊，郑广东. 厚朴不同炮制品含量测定的比较[J].中国中药杂志，1993，18 (1) ：27-27. [2] 曾诠，宋学华，张泉，等. 厚朴及其炮制品中厚朴酚与和厚朴酚含量测定[J].中草药，1996，27 (1) ：11211. [3] 曾诠，周干南，屠万，等. 气质联用研究厚朴及其炮制品中挥发油[J]. 中草药，1997，28 (2) ：81283. 作者单位：362000 福建省泉州市中医院
【中图分类号】：R283 【文献标识码】：A 【文章编号】：1004-597X(2007)10-0032-02 【摘要】采用HPLC法测定不同炮制方法厚朴中的厚朴酚及和厚朴酚的含量，结果表明不同炮制方法对二者的存在着较大的影响，以生姜炙方法最优，其含量与生品相近。 【关键词】厚朴；HPLC；厚朴酚；和厚朴酚 Differently concocts the method to the thick plain center thick plain phenol and with the thick plain phenol influence Chen Duanduan 【Abstract】uses the HPLC law determination differently to concoct the method thick plain center the thick plain phenol and with the thick plain phenol content，finally indicated differently concocts the method to have a more tremendous influence to the two，by ginger method most superior，its content is close with living. 【Key word】thick is plain; HPLC; Thick plain phenol; With thick plain phenol 厚朴为木兰科植物厚朴M ag nolia of f icnalis Rehd. etW ils或凹叶厚朴M. of f icinalis Rehd. etW ils. var. biloba R rha. etW ils 的干燥干皮、根皮和枝皮。厚朴是常用的中药，具有行气燥湿降逆平喘的功效。用于脘腹胀痛，宿食不消，呕吐，泻痢，气逆喘咳等。此前已有不少有关于厚朴炮制后其主要成分厚朴酚及和厚朴酚含量变化的研究[1,2]，以及其中厚朴挥发油的化学成分的研究[3]。但由于在炮制过程中，有炮制方法、炮制程度及炮制辅料等多个因素的不同会引起其有效成分含量的差异，而且现今在各个炮制环节上没有较为详尽和稳定的操作上的标准，致使厚朴在炮制过程中各个因素显得紊乱，从而影响到厚朴饮片的质量。本文采用RP-HPLC法测定厚朴生品和不同炮制方法得到的炮制品中的厚朴酚与和厚朴酚含量，进而确定其有效的及最佳炮制工艺，为制定厚朴的质量标准提供依据。 1 材料与仪器 高效液相色谱仪(Dionex P680型；UVD2170u紫外检测器)，AT201型电子天平(梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司)，微量进样器(安捷伦)，0.22μm的微孔滤膜，试剂全部为分析纯。厚朴药材来源于湖北恩施GAP产地。 2 炮制品的制备 2.1 生厚朴：去粗皮，洗净，切丝，60℃下烘干； 2.2 姜炙厚朴：按药典方法处理，取厚朴丝，加姜汁，拌匀，闷润至姜汁吸尽，用文火炒干； 2.3 姜浸厚朴：取厚朴丝，加姜汁拌匀，闷润至姜汁吸尽，烘干； 2.4 酒炙厚朴：取厚朴丝，加酒，拌匀，闷润至姜汁吸尽，用文火炒干。 3 含量测定 3.1 色谱条件。色谱柱：Diamonsil C18柱(250 mm ×4.6 mm，5μm)；流动相:甲醇-水(73∶27) ；波长：294 nm；理论塔板数以厚朴酚峰计不低于4000。 3.2 对照品溶液的制备及标准曲线的测定。分别称取经五氧化二磷干燥至恒重的厚朴酚、和厚朴酚适量,至于25ml容量瓶中，用甲醇分别制成浓度为151.02 μg/ml的厚朴酚对照品溶液和153.46μg/ml的和厚朴酚对照品溶液。精密取各不同体积的标准液，稀释，在上述色谱条件下分别进样10μl测定。以峰面积A1 为纵坐标,对照品浓度C1 (μg/ml) 为横坐标，求回归方程。厚朴酚为：A1 =0.2421C1 -1.324，r1 = 0.9996，线性范围26.23 ～151.02μg/ml；和厚朴酚为：为A2 = 0.2134C2-0.958，r2 = 0.9998,线性范围29.12 ～153.46μg/ml。 3.3 供试品溶液的制备。分别取上述4种不同炮制的样品，粉碎(过三号筛) 0.04～0.05 g,精密称定，置50 ml的磨口锥形瓶中,精密加入甲醇25 ml，称重，超声处理20min,取出放冷至室温,称重,用溶剂补足减少的甲醇量,摇匀,滤过,取续滤液再用0.22μm的干微孔滤膜滤过,滤液即为供试品溶液。 3.4 样品的测定。分别吸取供试品溶液,在上述色谱条件下各进样10μl,进行HPLC分析,测得结果如下,见表1。 表1 不同炮制方法样品含量的测定结果(n=6) 3.5 精密度与稳定性测定。取等量的厚朴酚对照溶液和和厚朴酚对照品溶液混合,按同样色谱条件进行HPLC分析,每次进样10μl,连续进样5次,计算厚朴酚、和厚朴酚的含量。和厚朴酚的RSD为1.21%，厚朴酚的RSD为1.34%，表明仪器精密度良好。此外，分别在0、2、4、6、8，24 h测定厚朴酚对照溶液和和厚朴酚对照品溶液混合液，其厚朴酚的RSD为1.80%，和厚朴酚的RSD为1.06%，表明二者稳定性良好。 3.6 加样回收率测定。采用回收率测定的方法,取已含量的生厚朴样品分别加入定量的对照品溶液,按供试品溶液制备项下方法进行操作,按同样色谱条件进行HPLC分析,分别进样10μl,计算厚朴酚、和厚朴酚的含量,结果表明,和厚朴酚与厚朴酚的平均加样回收率分别为99.54% ( RSD为0.54%) 与100.38% (RSD为0.75% ),表明回收率良好。 4 小结 从本实验在相同条件下测定了厚朴生品和三种不同炮制品中的厚朴酚及和厚朴酚的含量，结果可以表明，不同的炮制方法，对厚朴的二者标志性成分厚朴酚与和厚朴酚存在较大的影响，其中以生品含量最高，三种炮制方法中，以姜炙方法最优。 参考文献 [1] 林世俊，郑广东. 厚朴不同炮制品含量测定的比较[J].中国中药杂志，1993，18 (1) ：27-27. [2] 曾诠，宋学华，张泉，等. 厚朴及其炮制品中厚朴酚与和厚朴酚含量测定[J].中草药，1996，27 (1) ：11211. [3] 曾诠，周干南，屠万，等. 气质联用研究厚朴及其炮制品中挥发油[J]. 中草药，1997，28 (2) ：81283. 作者单位：362000 福建省泉州市中医院