乳酸的测定
——EDTA 滴定乳酸钙法
1实验原理
1.1 乙二胺四乙酸（简称EDTA ，常用H 4Y 表示）难溶于水，通常使用其二钠盐配制标准溶液。标定EDTA 溶液常用的基准物有Zn 、ZnO 、CaCO 3、Bi 、Cu 、MgSO 4·7H 2O 、Hg 、Ni 、Pb 等。通常选用其中与被测组分相同的物质作基准物，这样滴定条件较一致。
EDTA 溶液若用于测定石灰石或白云石中CaO 、MgO 的含量，则宜用CaCO 3为基准物。首先可加HCl 溶液与之作用，其反应如下：
CaCO 3+2HCl═CaCl 2+H2O+CO2↑
然后把溶液转移到容量瓶中并稀释，制成钙标准溶液。吸取一定量钙标准溶液，调节酸度至pH ≥12，用钙指示剂作指示剂以EDTA 滴定至溶液从酒红色变为纯蓝色，即为终点，其变色原理如下：钙指示剂（常以H 2Ind 表示）在溶液中按下式电离：
H 3Ind ═2H ++HInd 2-
在pH ≥12溶液中，HInd 2-与Ca 2+离子形成比较稳定的络离子，反应如下：
HInd +Ca2+═CaInd +H+ 2--
纯蓝色酒红色
所以在钙标准溶液中加入钙指示剂，溶液呈酒红色，当用EDTA 溶液滴定时，由于EDTA 与Ca 2+离子形成比CaInd 络离子更稳定的络离子CaY ，因此在滴定终点附-2-
近，CaInd 络离子不断转化为较稳定的CaY 络离子，而钙指示剂则被游离了出来，其反应可表示如下：
CaInd +H2Y ═CaY + HInd+H2O -2-2-2--2-
酒红色 无色 纯蓝色
由于CaY 离子无色，所以到达终点时溶液由酒红色变成纯蓝色。
用此法测定钙，若Mg 2+离子共存（在调节溶液酸度为pH ≥12时，Mg 2+离子将形成Mg(OH)2沉淀），此共存的少量Mg 2+离子不仅不干扰钙的测定，而且会使终点比Ca 2+离子单独存在时更敏锐。当Ca 2+、Mg 2+离子共存时，终点由酒红色变到纯蓝色，当Ca 2+离子单独存在时则由酒红色变紫蓝色，所以测定单独存在的Ca 2+离子时，常常加入少量Mg 2+离子溶液。
滴定至终点后蓝色很快又返回至紫红色又称终点回头。此现象是由钙镁盐类的悬浮性颗粒所致，影响测定。存在这样情况，可加盐酸酸化，便可除去碱度，后用NaOH 溶液中和。
2器皿和试剂
酸式滴定管；乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na2O8.2H2O ) ，CaCO 3，镁溶液（溶解1g MgSO4·7H 2O 于水中，稀释至200mL ），NaOH 溶液（20%溶液），盐酸溶液（1+1）钙指示剂（固体指示剂）
3实验步骤
3.1 0.05mol·L -1EDTA 溶液的配制：
准确称取乙二胺四乙酸二钠18.612g ，溶解于500-600mL 水中，稀释至1L ，如混浊，应过滤，转移至1000mL 细口瓶中，摇匀。
3.2 以CaCO 3为基准物标定EDTA 溶液
3.2.1 0.05mol·L -1钙标准溶液的配制：
置CaCO 3基准物于称量瓶中，在110 C 干燥2小时，冷却后，准确称取1.25-1.30g 碳酸钙于150mL 烧杯中，盖上表面皿，加水润湿，再从杯嘴边逐滴加入数毫升HCl 2-
溶液（1+1）淋洗入杯中，直至CaCO 3完全反应，待冷却后转移至250mL 容量瓶中，洗净表面皿物质至容量瓶，稀释至刻度，摇匀。计算准确浓度C 0。
3.2.2 用钙标准溶液标定EDTA 溶液：
用移液管移取25.00mL 标准钙溶液于250mL 锥形瓶中，加入约25 mL水，2mL 镁溶液，5mL20%NaOH溶液,2mLHCl 溶液（1+4）及约10mg （米粒大小）钙指示剂，摇匀后，用EDTA 溶液滴定至溶液从红色变为纯蓝色，即为终点。测定三次，取平均值。
3.3 用EDTA 溶液滴定乳酸钙：
取发酵液2ml ，滴到盛有50mL 蒸馏水的250mL 锥形瓶中，加2mL 镁溶液，5mL20%NaOH溶液,2mLHCl 溶液（1+4）及约10mg （米粒大小）钙指示剂，摇匀后，用EDTA 溶液滴定至溶液从红色变为纯蓝色，即为终点。测定平行样，取平均值。
4计算
C 1=C0*25/V1
C 1 ——EDTA 标准溶液浓度（mol/L）
C 0 ——CaCO 3基准溶液浓度（mol/L）
V 1 ——25mLCaCO 3 基准液消耗EDTA 溶液体积（mL ）
W 1=C1*(V2/1000)*218.2/(2/1000)=C1*V2*308.3/2
W 1 ——乳酸钙（CH 3CHOHCOO 2Ca·5H 2O ） 含量（g/L）
C 1 ——EDTA 标准溶液浓度（mol/L）
V 2 ——发酵液消耗EDTA 溶液体积（mL ）
308.3——乳酸钙(（CH 3CHOHCOO ）2Ca·5H 2O ）摩尔质量（g/mol）
W 2=2*C1*(V2/1000)*90/(2/1000)=2*C1*V2*90/2=90*C1*V2 W 2——乳酸含量（g/L）
C 1 ——EDTA 标准溶液浓度（mol/L）
V 2 ——发酵液消耗EDTA 溶液体积（mL ）
90 ——乳酸（CH 3CHOHCOOH ）摩尔质量（g/mol） *一分子乳酸钙由两分子乳酸和一分子Ca 2+ 结合而成。
乳酸的测定
——EDTA 滴定乳酸钙法
1实验原理
1.1 乙二胺四乙酸（简称EDTA ，常用H 4Y 表示）难溶于水，通常使用其二钠盐配制标准溶液。标定EDTA 溶液常用的基准物有Zn 、ZnO 、CaCO 3、Bi 、Cu 、MgSO 4·7H 2O 、Hg 、Ni 、Pb 等。通常选用其中与被测组分相同的物质作基准物，这样滴定条件较一致。
EDTA 溶液若用于测定石灰石或白云石中CaO 、MgO 的含量，则宜用CaCO 3为基准物。首先可加HCl 溶液与之作用，其反应如下：
CaCO 3+2HCl═CaCl 2+H2O+CO2↑
然后把溶液转移到容量瓶中并稀释，制成钙标准溶液。吸取一定量钙标准溶液，调节酸度至pH ≥12，用钙指示剂作指示剂以EDTA 滴定至溶液从酒红色变为纯蓝色，即为终点，其变色原理如下：钙指示剂（常以H 2Ind 表示）在溶液中按下式电离：
H 3Ind ═2H ++HInd 2-
在pH ≥12溶液中，HInd 2-与Ca 2+离子形成比较稳定的络离子，反应如下：
HInd +Ca2+═CaInd +H+ 2--
纯蓝色酒红色
所以在钙标准溶液中加入钙指示剂，溶液呈酒红色，当用EDTA 溶液滴定时，由于EDTA 与Ca 2+离子形成比CaInd 络离子更稳定的络离子CaY ，因此在滴定终点附-2-
近，CaInd 络离子不断转化为较稳定的CaY 络离子，而钙指示剂则被游离了出来，其反应可表示如下：
CaInd +H2Y ═CaY + HInd+H2O -2-2-2--2-
酒红色 无色 纯蓝色
由于CaY 离子无色，所以到达终点时溶液由酒红色变成纯蓝色。
用此法测定钙，若Mg 2+离子共存（在调节溶液酸度为pH ≥12时，Mg 2+离子将形成Mg(OH)2沉淀），此共存的少量Mg 2+离子不仅不干扰钙的测定，而且会使终点比Ca 2+离子单独存在时更敏锐。当Ca 2+、Mg 2+离子共存时，终点由酒红色变到纯蓝色，当Ca 2+离子单独存在时则由酒红色变紫蓝色，所以测定单独存在的Ca 2+离子时，常常加入少量Mg 2+离子溶液。
滴定至终点后蓝色很快又返回至紫红色又称终点回头。此现象是由钙镁盐类的悬浮性颗粒所致，影响测定。存在这样情况，可加盐酸酸化，便可除去碱度，后用NaOH 溶液中和。
2器皿和试剂
酸式滴定管；乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2Na2O8.2H2O ) ，CaCO 3，镁溶液（溶解1g MgSO4·7H 2O 于水中，稀释至200mL ），NaOH 溶液（20%溶液），盐酸溶液（1+1）钙指示剂（固体指示剂）
3实验步骤
3.1 0.05mol·L -1EDTA 溶液的配制：
准确称取乙二胺四乙酸二钠18.612g ，溶解于500-600mL 水中，稀释至1L ，如混浊，应过滤，转移至1000mL 细口瓶中，摇匀。
3.2 以CaCO 3为基准物标定EDTA 溶液
3.2.1 0.05mol·L -1钙标准溶液的配制：
置CaCO 3基准物于称量瓶中，在110 C 干燥2小时，冷却后，准确称取1.25-1.30g 碳酸钙于150mL 烧杯中，盖上表面皿，加水润湿，再从杯嘴边逐滴加入数毫升HCl 2-
溶液（1+1）淋洗入杯中，直至CaCO 3完全反应，待冷却后转移至250mL 容量瓶中，洗净表面皿物质至容量瓶，稀释至刻度，摇匀。计算准确浓度C 0。
3.2.2 用钙标准溶液标定EDTA 溶液：
用移液管移取25.00mL 标准钙溶液于250mL 锥形瓶中，加入约25 mL水，2mL 镁溶液，5mL20%NaOH溶液,2mLHCl 溶液（1+4）及约10mg （米粒大小）钙指示剂，摇匀后，用EDTA 溶液滴定至溶液从红色变为纯蓝色，即为终点。测定三次，取平均值。
3.3 用EDTA 溶液滴定乳酸钙：
取发酵液2ml ，滴到盛有50mL 蒸馏水的250mL 锥形瓶中，加2mL 镁溶液，5mL20%NaOH溶液,2mLHCl 溶液（1+4）及约10mg （米粒大小）钙指示剂，摇匀后，用EDTA 溶液滴定至溶液从红色变为纯蓝色，即为终点。测定平行样，取平均值。
4计算
C 1=C0*25/V1
C 1 ——EDTA 标准溶液浓度（mol/L）
C 0 ——CaCO 3基准溶液浓度（mol/L）
V 1 ——25mLCaCO 3 基准液消耗EDTA 溶液体积（mL ）
W 1=C1*(V2/1000)*218.2/(2/1000)=C1*V2*308.3/2
W 1 ——乳酸钙（CH 3CHOHCOO 2Ca·5H 2O ） 含量（g/L）
C 1 ——EDTA 标准溶液浓度（mol/L）
V 2 ——发酵液消耗EDTA 溶液体积（mL ）
308.3——乳酸钙(（CH 3CHOHCOO ）2Ca·5H 2O ）摩尔质量（g/mol）
W 2=2*C1*(V2/1000)*90/(2/1000)=2*C1*V2*90/2=90*C1*V2 W 2——乳酸含量（g/L）
C 1 ——EDTA 标准溶液浓度（mol/L）
V 2 ——发酵液消耗EDTA 溶液体积（mL ）
90 ——乳酸（CH 3CHOHCOOH ）摩尔质量（g/mol） *一分子乳酸钙由两分子乳酸和一分子Ca 2+ 结合而成。