植物病毒学复习题
1. 你是怎么认识病毒的害与益的？请举例说明。
害：病毒危害多种多样：侵害人体，影响人类健康，造成畜、禽等动物的传染疾病；危害农作物使其致病，影响产量和质量。病毒确实有害，特别是经济全球化，人口城市化，加上气候变暖，环境恶化，更加剧了新兴病毒的发生和原有病毒的传播、危害。举例：据报道，马铃薯卷叶病毒和马铃薯Y 病毒的一些株系，常使块茎的产量减少50-80%。 益：1. 对生命科学理论研究的意义：对生命的起源的认识；
2.逆转录病毒的发现和对中心法则的补充：RNA 肿瘤病毒：发现逆转录酶，证明遗传信息从RNA-DNA 的传递，从而修改和补充了中心法则；
3. 利用病毒制备疫苗；
4. 生物控制：利用昆虫病毒控制害虫具有专一性、高效性、安全性、流行性和持续性，对农林害虫防治和环境保护具有重要作用；
5. 环境保护：利用病毒及其制剂开展有害生物的控制，可使环境免受污染；
6. 花卉增色：郁金香观赏；
7. 病毒基因元件：启动子、35s 。
2. 目前国内外植物病毒研究的热点和前沿是什么？
热点：1. 病毒基因组及基因功能研究；2. 病毒与寄主植物相互关系研究；3. 生物技术培
养抗病品种；4. 病毒作为载体及载体元件的研究。
前沿：由于分子生物学的发展和电子显微镜的进步，对植物病毒的形态、结构、生物学
特性及理化特性都有深入的研究，近年来对植物病毒的研究已进入分子水平。
3. 病毒的发现能给我们什么样的启示？
在科学实践中，仅仅有了新的发现还是不够的，重要的是敢不敢或能不能面对自己发现
的事实，做出客观的分析，提出恰当的新概念、新理论，才对科学发展更为有益。
4. 举例说明植物病毒在农业中的地位及其应用前景
1. 利用昆虫病毒控制害虫具有专一性、高效性、安全性、流行性和持续性，对农林害虫防治和环境保护具有重要作用。2利用真菌病毒有可能防治植物真菌性病害。例如：采用粟疫病真菌的病原真菌的真菌病毒进行粟疫病的生物防治；噬菌体防治细菌性病害；棉铃虫核型多角体病毒杀虫剂 ；质型多角体病毒杀虫剂 。3. 环境保护：利用某些病毒及其制剂开展有害生物的控制，可使环境免受污染。4. 花卉增色：有些病毒或其类似病原侵染植物后，能使叶片或花瓣变色，增加观赏价值。如：郁金香杂色花、 香石竹杂色花、紫罗兰杂色花
（植物病毒在农业中有着非常重要的地位，因病毒式农业生产的大地，揭示病毒的致病本质及其发病规律，从而得以有效的控制。例如：烟草蚀纹花叶病毒可一直天仙子花叶病毒和PVY 对烟草的侵染。它具有广阔的应用前景。随着对自然界的病毒种类及其分布的深入了解，我们就可以更好的兴利除害，为现代农业和科技进步做出更大的贡献。）
5. 以TMV 为例来论述植物病毒胞间转移和长距离移动分别在病毒系统侵染过程的作用方式。
1. 植物细胞间的通道时胞间连丝，它在细胞之间起着信息传递，水分及有机物的运输和
分配等作用；TMV 在细胞内编码蛋白30ku 蛋白，运转蛋白一方面能够与胞间连丝相互作用，从而使胞间连丝孔径扩大，另一方面能够与病毒作用。综合作用结果得以使病毒顺利通过胞间连丝进行运转。
2.病毒在植物体内的远距离运转，主要靠植物疏导组织中的营养主流方向流动，但是病
毒也可以随营养等上、下双向移动。
将TMV 接种在番茄中部复叶尖端的小叶上，经过1-3天病毒可达整个小叶，经过3-5天
病毒已从叶脉、叶柄及茎等维管束转移到番茄植株顶部的生长点和根部组织；经过25天病毒已达全株的所有生长器官。
6. 从混合侵染植物病毒的寄主中生物学分离病毒的方法有哪些？
1. 参照柯赫法则的要求分离毒源
某种病毒必须经常和某种病害联系在一起；
这种病毒必须从寄主上分离到；
将这种病毒接种到健康寄主上，能表现出和原来同种病害一样的症状；
从接种发病植物上，能检测到这种病毒，并能再次分离到这种病毒。
2. 常用生物分离病毒的方法
枯斑寄主
过滤寄主
专化介体
病毒的稳定性，对酶的耐受性、病毒的沉降系数等差异来分离不同病毒（课件）
1. 分离寄主来分离病毒或株系；2、专化介体分离病毒或株系；3、病毒的物理特性：钝化温度（TIP ），稀释限点（DEP ），体外存活期（LIV ）；4、病毒的稳定性，对酶的耐受性，病毒的沉降系数等差异来分离不同的病毒。（书本P33）
7. 植物病毒的基因组核酸类型有哪些，并分别列举出其代表性的病毒？
dsDNA ：花椰菜花叶花叶病毒；ssDNA ：香蕉束顶病毒；daRNA:水稻矮缩病毒；（-）ssRNA ：马铃薯黄矮病毒，水稻条纹病毒；（+）ssRNA ：烟草花叶病毒。（09资料）
植物病毒的核酸类型:植物病毒的基因组多数为核糖核酸（RNA ），少数为脱氧核糖核酸（DNA ）。
根据核酸性质及功能，植物病毒基因组分为下列5种类型：正单链RNA(＋ssRNA) 病毒、负单链RNA （－ssRNA ）病毒 、双链RNA （dsRNA) 病毒 、单链DNA(ssDNA)病毒 、双链DNA(dsDNA)病毒。
a. 正单链RNA(positive single strand RNA，＋ssRNA) 病毒
单链RNA 可以直接翻译蛋白，起mRNA 的作用，故称为＋ssRNA 病毒。
最主要的病毒类型，70％以上的引起重要病害常见的植物病毒均为此种核酸类型。
b. 负单链RNA(negtive single strand RNA，－ssRNA) 病毒
单链RNA 不能起mRNA 的作用，必需先转录成互补链，才能翻译蛋白，故称为－ssRNA
病毒. 植物弹状病毒的基因组属这一类型。
c. 双链RNA(double strand RNA，dsRNA) 病毒
核酸为互补的双链RNA 。其中的负链RNA 转录出正链RNA ，才能作为mRNA 翻译蛋白,
植物呼肠孤病毒基因组属这一类型.
d. 单链DNA （ssDNA ）
DNA不能直接作为RNA 而起作用，所以DNA 病毒无＋、－之分。复制时单链DNA 先合成
双链DNA ，以常规途径转录mRNA 。 联体病毒科（Geminiviridae ）病毒含有这种类型基因组.
e. 双链DNA （dsDNA ）
核酸类型与高等动、植物的相同，为互补的双链DNA ，花椰菜花叶病毒属
（Caulimovirus ）、杆状DNA 病毒属（Badnavirus ）具有这种类型基因组.
8. 植物病毒分类的基本依据是什么？P91
1）病毒的粒体特征：1. 病毒粒体形态特征，2病毒粒体物理特性，3. 病毒基因组特性，
4. 病毒蛋白质特性，5. 病毒脂类的含量和特性，6病毒糖类的含量和特性
2）基因组构与复制：包括基因组结构；核酸复制策略，转录特点，翻译和翻译后的修饰
特点；病毒粒体蛋白的积累位点、装配位点、成熟和释放位点以及细胞病理学等
3）抗原性质：包括病毒血清学性质及其与抗原的关系
4）病毒生物学特性：包括病毒寄主范围；致病性及其与病变的关系；组织嗜性、病理学、
自然传播方式、传播介体和地理分布
9.ICVT 第8次分类报告的主要特点有哪些？请列举各核酸类型包括的1 个代表科、属、种（如：双链DNA －花椰菜花叶病毒科－花椰菜花叶病毒属－花椰菜花叶病毒）。
特点：①进一步明确了种作为最小病毒分类系统的最小阶元；②在每一个确定的种下面列出了至少一个、至多几十个不同的分离物以及它们在GenBank 上的登入号；③增加了许多反映病毒基因序列同源性关系的系统树图；④将原子分辨率的粒子三维结构插入到相对应的科或属中，使研究者对病毒粒子空间结构有更详细的了解。
例子：1. 双链DNA （dsDNA ）－花椰菜花叶病毒科－花椰菜花叶病毒属－花椰菜花叶病毒
2.单链DNA （ssDNA ）－矮缩病毒科—香蕉束顶病毒属—香蕉束顶病毒
3.双链RNA （dsRNA ）-呼肠孤病毒科-水稻病毒属-水稻齿叶矮化病毒
4.负单链RNA （（-）ssRNA ）-弹状病毒科-细胞质弹状病毒属-莴苣坏死黄化病毒
5.正单链RNA （（+）ssRNA ）-马铃薯Y 病毒科-马铃薯Y 病毒属-马铃薯Y 病毒
10. 类病毒的定义。试述类病毒与植物病毒的异同点。（提示：基因组结构和病毒粒子的结构特点，以及它们所引起症状等方面论述）。
定义：在侵染植物内能进行自我复制的，没有衣壳蛋白包被的，低分子量的单链闭合环状的RNA 分子。
相同点：都含有核酸，都是转性寄生物，不能单独进行复制、繁殖
不同点①耐热性：要使类病毒失活需要高于100℃
②高度的侵染活性：50-100个分子的类病毒可以引起成功的侵染，而病毒需要100万个粒体以上
③局限的存在部位：类病毒至今仅仅发现于细胞核中，其核酸在体外翻译体系和寄主体内都没有翻译产物的存在，因为其核酸分子上没有翻译起始密码子
④核酸组成的想进性：G/C比相近，55%-58%；有人比较了3种类病毒的核酸序列，发现其在很大程度上的同源性，个别核苷酸或者局部片段发生了变化，成为不同的病原，或者不同的株系。研究表明几个甚至一个核苷酸的不同，就会导致致病力的明显变化。 ⑤不显性感染：植物带有类病毒但不表现症状的现象极为普遍。经测试36个科的232种植物对马铃薯纺锤块茎类病毒的感病性，发现有11个科的138个种是感染的，但只有茄科和菊科的12种植物表现症状，即90%以上的寄主都是不显症感染，而且潜育期很长，有的几个月，有的甚至几年
⑥传播方式简单：类病毒主要通过农具、嫁接刀具等传播，大部分可以通过种子传播（有的可在种子中存活20年）；仅仅有危害马铃薯和番茄的三种类病毒被证明有节肢动物介体传播。
⑦没有病毒粒体,, 是环状ssRNA
11. 略述植物病毒症状学在病毒诊断上的意义
①根据典型症状, 排除常规病毒病害
②对一些具有特征性症状的病毒病, 只有掌握其特有症状, 便可以准确做出诊断
③对一些不具有特征性症状的病毒病, 可以将病毒的致病反应和非侵染性致病因子加以比较, 做出初步的判断
④在田间一旦被确认为病毒病, 便可以按照病毒的主要症状特征结合传染方式加以识别 ⑤病毒病虽然没有真菌、细菌病害那样的特征，但往往具有自己的特有的症状，便于直接判别，如明脉、斑驳、花叶、脉肿、耳突、蚀纹、环斑、脉带、条纹、线条和条点等，我们可以进一步根据其形状、大小、色泽加以判断
⑥病毒病的症状具有相对的稳定性，不同病毒有不同的症状类型，学会区别并准确描述它们，对病毒诊断很有用处。
12. 植物病毒病的外部症状主要有哪些类型，其对应寄主植物的组织病变分别是？
①花叶类型：明脉，斑驳，花叶，沿脉变色（镶脉），块斑，条纹、线条与条点，褪绿斑 ②环斑类型：环斑，环纹，线纹
③畸形生长：线叶，带化，畸叶，小叶，蕨叶，卷叶，疱斑，皱缩，耳突和脉肿，丛枝，丛簇，扁枝，肿枝，茎沟，肿胀，花变叶，拐节，矮化，矮缩，畸果，小果
④变色：主要指叶片的局部或全部颜色改变
⑤坏死与变质：坏死斑，坏死环，坏死纹，坏死条纹，沿脉坏死，叶脉坏死，顶尖坏死，星裂和纵裂
13. 植物病毒病的复杂性体现在哪些方面？
①病毒引起的外部症状类型：花叶，环斑，畸形，变色，坏死和变质。
②外部症状的复杂性：植物受病毒侵染后，所呈现的症状往往有个发展过程，一种病毒病可能观察到几种症状或无症状过程，几种病毒病在同一植物上也可能出现相似的症状。
③无症带毒：有些病毒侵染寄主后不产生可见的症状。
④隐症：有些病毒形成症状后在特定的环境条件下可暂时隐去症状。
⑤复合症状：寄主植物被两种以上病毒侵染时，特别是同时侵染时出现复合症状大部分是加重。
14. 某地稻田发生大面积黄化，有人说病毒引起，有人说是生理现象，你应根据哪些原则加以判断？（病毒病与生理病的区别）
一般可根据“五性”原则来判断：
1. 分散性：病害在田间是否均匀分布？
否：病毒病，有一定的发病中心，有轻有重。
是：生理病，成片成块发生，病情较一致。
2.系统性：病害全株性、再现性、不可恢复性？
否：生理病，不具全株性，再现性；环境改善，可以康复。
是：病毒病，分枝发病，全株相同；新芽、新叶再现病症；环境改善不可再恢复。
3.传染性：病害在田间分布和类型？
病毒病：从病害发生有明显的扩展蔓延过程。
生理病：病株分布均匀，发病时间一致。
4.鲜明性：发病部位是在新、嫩叶（枝）？
否：生理病，老枝、老叶更为明显。
是：病毒病，嫩枝、嫩叶更为明显。
5.特征性：病害是否特有的病征？
否：生理病，无特有的病征。
是：病毒病，花叶，斑驳，耳突，环斑，条纹等。
15. 在诊断植物病毒病的过程中，应如何灵活应用柯赫法则？新P132
柯赫法则常用于侵染性病害的诊断和鉴定，特别是新病害的鉴定。鉴于病毒不能在人工培养基上培养，应用柯赫法则时则需要做些相应的修订：
1. 某种病毒必须经常与某种病害联系在一起；
2. 这种病毒必须能从发病的寄主植物上分离到---通过生物学方法获理化方法，甩开非致病病原和其他污染物，分离出致病病毒；
3. 将这种致病病毒接种到健康寄主上，能再现原来同种病害的症状特征；
4. 从接种发病的植物上，能检测到这种病毒，并能再次分离到这种病毒。
16. 应如何区分植物病毒病与其他侵染性病害？怎样判断植物病毒病和非侵染性病害？（新P125）
植物病毒病与其他侵染性病害的主要区别是：①植物病害在植物表面没有肉眼可见的病症，而区别于线虫虫体、细菌菌脓、真菌的子实体等病征的出现；②系统侵染病毒病的症状在新长幼叶上更重，而其他侵染性病害则大多在老叶上症状更明显。
植物病毒病与非侵染性病害的区别是：①病毒病有发病中心或中心病株，病情有轻有重，早期病株点片分布，而非侵染性病害大多同时大面积发生，病情较一致；②发生病毒病的植株多为系统感染，症状分布不均一，新叶新梢上症状最为明显，而生理性病害大多比较均一，老叶、老枝更为明显；③病毒病具有传染性，非传染性病害没有传染扩散的过程；④病毒病害症状往往表现为花叶、黄化矮缩、丛生等，少数有脉带。环斑、耳突、斑驳、蚀纹等特征性症状。此外，随着气温的变化，特别是在高温条件下，植物病毒病时常发生隐症现象；⑤生理性病害不具全株性、再现性，环境改善，可以康复；病毒病
害分枝发病，全株相同，新芽、新叶再现病症，环境改善不可再恢复。
17. 如何利用常用的生物学方法区分TMV/CMV、PVX/PVY、RBSV/RDV？
1.TMV/CMV的区别：（TMV 能在心叶烟上产生枯斑寄主，而CMV 则系统花叶；TMV 蚜虫不传，CMV 蚜虫能传，这样，可通过心叶烟单斑分离获得TMV ，剔除CMV ；通过蚜虫接种，
①TMV 和CMV 在普通烟上都产生系统花叶，但TMV 在心叶烟上产生枯斑，CMV 在心叶烟上则还是系统花叶，这样我们就可以用心叶烟来分离TMV 。
②CMV 在黄瓜上产生系统花叶症状，而黄瓜对TMV 免疫，这样，我们可以利用黄瓜将CMV 从上述两种混合病毒混合侵染的病株中分离出来。
③TMV 蚜虫不传，CMV 蚜虫能传，通过蚜虫接种，分离获得TMV 。
2.PVX/PVY的区别：（PVX 能侵染曼陀罗，PVY 不侵染曼陀罗；PVX 蚜虫不传，PVY 蚜虫能传。）
①PVX 能侵染曼陀罗，PVY 不能侵染曼陀罗。
②PVX 蚜虫不传，PVY 蚜虫能传。
③PVX 在千日红上呈现红色边缘的坏死斑，普通烟感染PVY 后呈现沿脉及叶脉坏死症。
3.RBSV/RDV的区别：RBSV 寄主范围很窄，并不侵染稗草，而稗草对RDV 高度感染；RBSV 电光叶蝉不传，RDV 电光叶蝉能传。
18. 枯斑寄主、指示寄主、鉴别寄主的主要区别？
枯斑寄主：有些病毒侵染寄主植物后，会诱导寄主产生过敏反应，出现局部枯斑而不扩展成系统侵染。
指示寄主：指的是对那些潜育期特长，症状出现很慢的病毒（如果树中的病毒），为了及时做出诊断，将其转移（接种）到症状出现很快的寄主上，这种寄主就称为指示植物。 鉴别寄主：是用来鉴别某一病毒或其株系的具有特定反应的植物。
鉴别寄主与枯斑寄主的主要区别：
①症状类型：枯斑只是特征性反应的一种症状类型，鉴别寄主的特征性反应除了枯斑，还有其他类型的症状反应，比如：红叶症。
②范围不同：鉴别寄主包括单一的鉴别寄主和鉴别寄主谱，枯斑寄主一般是单一的植物寄主。
鉴别寄主和指示寄主的区别：
①用途不同：鉴别寄主主要用于鉴别、分离病毒和病毒的定量，指示植物主要用于检测病原物的存在。
②范围不同：鉴别寄主包括单一的鉴别寄主和鉴别寄主谱。
19. 如何鉴定病毒与类病毒？简述其依据的原理和方法。（结合第10题）
类病毒与病毒的区别：病院以无衣壳包被的RNA 形式存在于植物体内，不能从病组织中检测出类似病毒的粒体；侵染性RNA 的分子含量特低，且在病细胞中照样能自主复制；侵染性RNA 仅由一种分子所组成。
病毒鉴定采用生物学实验，病株汁液体外性状测定，血清学实验，电子显微镜技术，分子生物学技术。
类病毒无法用血清学和电镜诊断，一般采用生物鉴定、凝胶电泳、互补脱氧核糖核酸杂交。
20. 植物病毒病常见的实验诊断方法有哪些，任选其中一种简述其原理及步骤。
实验室诊断方法有：
1. 生物学实验：枯斑寄主、过滤寄主、专化介体
2. 病株汁液体的外形状测定
3. 血清学实验：沉淀反应、凝集反应、标记抗体反应（ELISA 、斑点免疫测定、免疫电子显微镜技术）
4. 电子显微镜技术：免疫电镜技术、超薄切片法、负染技术、叶浸蘸法
5. 分子生物学技术：聚合酶链式反应（PCR ）、核酸杂交
血清学实验——酶联免疫吸附反应（ELISA ）原理：（1）抗原或抗体能以物理性吸附于固相载体表面，是蛋白质和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。
21.PCR 的中文全称，并试述PCR 的原理及其在植物正单链RNA 病毒（如：马铃薯Y 病毒）检测中应用。
⑴聚合酶链式反应
⑵原理：在DNA 聚合酶催化下，以母链DNA 为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等，体外复制出与母链模板DNA 互补的子链DNA 的过程
⑶步骤：变性（模板的变性）、退火（模板DNA 与引物的退火（复性））、延伸（引物的延伸）
根据马铃薯Y 病毒的外壳蛋白基因序列，设计合成一对寡核苷酸引物，从感染PVY 的马铃薯田间病叶组织中提取病毒的RNA ，进行cDNA 合成及PCR 扩增，得到一条特异PCR 扩增产物，与理论设计的基因片段大小一致，说明植物带毒。
22. 试述酶联免疫吸附反应（ELISA ）间接法的主要实验流程。
间接法的主要实验程序：先用待测的病毒样品包被酶标板，是抗原吸附在微皿孔壁上；洗去多余的抗原及杂物，加入特异性的兔抗血清IgG(一抗) ；孵育后洗去未和抗原结合的多余抗体，加入酶标羊抗兔IgG （二抗）；最后加入底物。如有颜色反应，证明抗原-特异性抗体-酶标二抗复合物的存在，从而确定病毒的存在。（新P151）
①取150ul 抗原包被在酶标板上，37℃温育2h ；②倒出酶标板中的液体，PBST 洗板三次，每次3min ；③加入稀释好的抗体，150ul/孔，37℃温育1h ；④倒出酶标板中的液体，PBST 洗板三次，每次3min ；⑤加入稀释好的碱性磷酸酶标记羊抗兔IgG ，150ul/孔，37℃温育1h ；⑥倒出酶标板中的液体，PBST 洗板三次，每次3min ；⑦加入1mg/ml的生色底物（硝基苯磷酸盐），150ul/孔，37℃温育10-30min ；⑧用酶标仪检测，阳性结果判断方法。（注：书本158-159）
23. 试述植物病毒在循回增殖型的传毒蚜虫中的大致循回增殖过程。
病毒经过蚜虫口针，进入中肠，穿透肠壁到血淋巴，然后转入脂肪体细胞内增殖，再将细胞运转到唾腺的唾液中，最后病毒随唾液返回口针，蚜虫为害取食时就传染到植物细胞内。（病毒在蚜虫体内增殖算，病毒进入活细胞后脱壳，病毒核酸复制，亚基因组翻译出蛋白质，包括衣壳蛋白，然后核酸和衣壳蛋白组成新的病毒粒子，从得毒到有传毒能力，期间有一个潜育期，故称循回性病毒。）
24. 抗原、半抗原、抗原决定簇及抗体的定义。
抗原：在动物集体内可以激发产生抗体的异体物质称作抗原
半抗原：仅具备免疫原性不具备反应原性的抗原称作半抗原
抗原决定簇：又称抗原表位，指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。
抗体：机体在抗原物质刺激下，由B 细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应的抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
25. 如何根据植物病毒的传播方式和传毒特点制定病毒病害控制方案？
植物病毒的传播方式：机械传播，嫁接传播，菟丝子传播，种子传播，介体传播
传毒特点：非循回型传染（非持久性病毒），多为口针传毒；
循回型传染：增殖型（持久性传毒）和非增值型（持久性传毒和非持久性传
毒。
方案：以CMV 为例
⑴检疫措施：综合治理，防治为主，对烟草种子种苗的检疫，防治病毒的传入。 ⑵无病种子及无性繁殖材料：①建立无病留种田，清除田间的杂草，去除越冬的蚜虫；②种苗消毒与热处理，烟草种子中的CMV 通过360℃热处理3-4周可达到防治的目的；③茎尖和原生质体的脱毒培养
⑶农业防治：①合理布局，不要在烟区四周种植蔬菜，桃树等，减少蚜虫的危害；②选用抗病品种和耐病品种，选择蚜虫不易生长的品种如云烟87，云烟85等；③注意田间管理，及时清理田间杂草，翻耕灭茬；④利用地上覆盖物避蚜防病，利用黄板诱蚜测报，如银灰色塑料膜或透明塑料地膜可以有效的避蚜防病；⑤加强水肥的管理，适期适量灌水和排水，合理施肥；⑤适期播种和合理密植，低温不适合蚜虫的生长，早播，早移栽可以减少蚜虫的危害；⑥合理使用化学药剂防治蚜虫。
⑷生物防治：通过释放烟蚜茧蜂直接防治蚜虫，减少CMV 病毒的传播。
26. 影响植物病毒病流行的因素有哪些？
1. 生物因子的影响①寄主植物：农作物、野生植物及杂草等②病毒：病毒的种类和株系
与病毒的传播和流行息息相关③生物介体：昆虫、螨类、线虫、真菌、菟丝子④种子、花粉和无性繁殖体⑤农业措施：耕作制度和栽培制度⑥人、动物及社会因素
2.非生物因子的影响①气候：温度、湿度、气流、光等②土壤：肥水、微量元素
27. 如何利用农业系列栽培措施控制植物病毒病害？（书本214-220） ⑴作物合理布局：①合理的田园规划②邻作、间作与套作③轮作；
⑵利用抗病和耐病品种⑶适期播种与合理密植；⑷利用地上覆盖物避蚜防病：①利用银灰色塑料反光薄膜避蚜防病；②利用地面覆盖物和纱网避蚜防病；⑸加强水肥管理：①适期适量灌水和排水，合理搭配肥料种类、用量，适时施用，可以增强作物的抗病力；②作物增加一定比例的磷肥，往往可以提高抗病毒病的能力；③作物增施氮肥可加重病毒病症状，但是可以恢复一定的产量。⑹田园卫生：保持田园卫生，减少带毒介体昆虫的栖息和越冬场所，降解寄主植物病残体中的TMV 黄瓜绿斑驳花叶病毒等。⑺其它农业措施：①利用自然条件优势控制病毒病；②选择适宜土质与调节土壤酸碱度；③利用陈旧种子减少毒源；④消灭野鼠。
28. 植物病毒的传播方式有哪些？
介体传播：昆虫（蚜虫，叶蝉，飞虱），螨类，线虫，真菌，菟丝子
非介体传播：种子和花粉传染，嫁接传染，汁液接触传染，病残体与水流传染毒。
29. 简述植物病毒在寄主内的复制过程
以（+）RNA 病毒为例，病毒的复制过程如下：
①病毒粒体进入寄主细胞，脱壳，释放RNA ；
②RNA 与核糖体结合，翻译出病毒复制酶等与复制相关的基因产物；
③复制酶以（+）RNA 为模板合成（-）RNA 链，并形成双链复制型；
④从复制型产生子代（+）RNA 链；
⑤以病毒RNA 为模板合成外壳蛋白；
⑥外壳蛋白亚基和RNA 组装成新的病毒粒体。
（①病毒粒体吸附②侵入寄主细胞③脱壳：病毒感染性核酸从衣壳内释放出来④基因表达⑤复制大量的基因组及合成外壳蛋白⑥病毒粒体装配⑦扩散或释放）
30. 简述植物病毒和介体昆虫的生物学传毒关系
关系：偱回型和非偱回型（新P75）
植物病毒学复习题
1. 你是怎么认识病毒的害与益的？请举例说明。
害：病毒危害多种多样：侵害人体，影响人类健康，造成畜、禽等动物的传染疾病；危害农作物使其致病，影响产量和质量。病毒确实有害，特别是经济全球化，人口城市化，加上气候变暖，环境恶化，更加剧了新兴病毒的发生和原有病毒的传播、危害。举例：据报道，马铃薯卷叶病毒和马铃薯Y 病毒的一些株系，常使块茎的产量减少50-80%。 益：1. 对生命科学理论研究的意义：对生命的起源的认识；
2.逆转录病毒的发现和对中心法则的补充：RNA 肿瘤病毒：发现逆转录酶，证明遗传信息从RNA-DNA 的传递，从而修改和补充了中心法则；
3. 利用病毒制备疫苗；
4. 生物控制：利用昆虫病毒控制害虫具有专一性、高效性、安全性、流行性和持续性，对农林害虫防治和环境保护具有重要作用；
5. 环境保护：利用病毒及其制剂开展有害生物的控制，可使环境免受污染；
6. 花卉增色：郁金香观赏；
7. 病毒基因元件：启动子、35s 。
2. 目前国内外植物病毒研究的热点和前沿是什么？
热点：1. 病毒基因组及基因功能研究；2. 病毒与寄主植物相互关系研究；3. 生物技术培
养抗病品种；4. 病毒作为载体及载体元件的研究。
前沿：由于分子生物学的发展和电子显微镜的进步，对植物病毒的形态、结构、生物学
特性及理化特性都有深入的研究，近年来对植物病毒的研究已进入分子水平。
3. 病毒的发现能给我们什么样的启示？
在科学实践中，仅仅有了新的发现还是不够的，重要的是敢不敢或能不能面对自己发现
的事实，做出客观的分析，提出恰当的新概念、新理论，才对科学发展更为有益。
4. 举例说明植物病毒在农业中的地位及其应用前景
1. 利用昆虫病毒控制害虫具有专一性、高效性、安全性、流行性和持续性，对农林害虫防治和环境保护具有重要作用。2利用真菌病毒有可能防治植物真菌性病害。例如：采用粟疫病真菌的病原真菌的真菌病毒进行粟疫病的生物防治；噬菌体防治细菌性病害；棉铃虫核型多角体病毒杀虫剂 ；质型多角体病毒杀虫剂 。3. 环境保护：利用某些病毒及其制剂开展有害生物的控制，可使环境免受污染。4. 花卉增色：有些病毒或其类似病原侵染植物后，能使叶片或花瓣变色，增加观赏价值。如：郁金香杂色花、 香石竹杂色花、紫罗兰杂色花
（植物病毒在农业中有着非常重要的地位，因病毒式农业生产的大地，揭示病毒的致病本质及其发病规律，从而得以有效的控制。例如：烟草蚀纹花叶病毒可一直天仙子花叶病毒和PVY 对烟草的侵染。它具有广阔的应用前景。随着对自然界的病毒种类及其分布的深入了解，我们就可以更好的兴利除害，为现代农业和科技进步做出更大的贡献。）
5. 以TMV 为例来论述植物病毒胞间转移和长距离移动分别在病毒系统侵染过程的作用方式。
1. 植物细胞间的通道时胞间连丝，它在细胞之间起着信息传递，水分及有机物的运输和
分配等作用；TMV 在细胞内编码蛋白30ku 蛋白，运转蛋白一方面能够与胞间连丝相互作用，从而使胞间连丝孔径扩大，另一方面能够与病毒作用。综合作用结果得以使病毒顺利通过胞间连丝进行运转。
2.病毒在植物体内的远距离运转，主要靠植物疏导组织中的营养主流方向流动，但是病
毒也可以随营养等上、下双向移动。
将TMV 接种在番茄中部复叶尖端的小叶上，经过1-3天病毒可达整个小叶，经过3-5天
病毒已从叶脉、叶柄及茎等维管束转移到番茄植株顶部的生长点和根部组织；经过25天病毒已达全株的所有生长器官。
6. 从混合侵染植物病毒的寄主中生物学分离病毒的方法有哪些？
1. 参照柯赫法则的要求分离毒源
某种病毒必须经常和某种病害联系在一起；
这种病毒必须从寄主上分离到；
将这种病毒接种到健康寄主上，能表现出和原来同种病害一样的症状；
从接种发病植物上，能检测到这种病毒，并能再次分离到这种病毒。
2. 常用生物分离病毒的方法
枯斑寄主
过滤寄主
专化介体
病毒的稳定性，对酶的耐受性、病毒的沉降系数等差异来分离不同病毒（课件）
1. 分离寄主来分离病毒或株系；2、专化介体分离病毒或株系；3、病毒的物理特性：钝化温度（TIP ），稀释限点（DEP ），体外存活期（LIV ）；4、病毒的稳定性，对酶的耐受性，病毒的沉降系数等差异来分离不同的病毒。（书本P33）
7. 植物病毒的基因组核酸类型有哪些，并分别列举出其代表性的病毒？
dsDNA ：花椰菜花叶花叶病毒；ssDNA ：香蕉束顶病毒；daRNA:水稻矮缩病毒；（-）ssRNA ：马铃薯黄矮病毒，水稻条纹病毒；（+）ssRNA ：烟草花叶病毒。（09资料）
植物病毒的核酸类型:植物病毒的基因组多数为核糖核酸（RNA ），少数为脱氧核糖核酸（DNA ）。
根据核酸性质及功能，植物病毒基因组分为下列5种类型：正单链RNA(＋ssRNA) 病毒、负单链RNA （－ssRNA ）病毒 、双链RNA （dsRNA) 病毒 、单链DNA(ssDNA)病毒 、双链DNA(dsDNA)病毒。
a. 正单链RNA(positive single strand RNA，＋ssRNA) 病毒
单链RNA 可以直接翻译蛋白，起mRNA 的作用，故称为＋ssRNA 病毒。
最主要的病毒类型，70％以上的引起重要病害常见的植物病毒均为此种核酸类型。
b. 负单链RNA(negtive single strand RNA，－ssRNA) 病毒
单链RNA 不能起mRNA 的作用，必需先转录成互补链，才能翻译蛋白，故称为－ssRNA
病毒. 植物弹状病毒的基因组属这一类型。
c. 双链RNA(double strand RNA，dsRNA) 病毒
核酸为互补的双链RNA 。其中的负链RNA 转录出正链RNA ，才能作为mRNA 翻译蛋白,
植物呼肠孤病毒基因组属这一类型.
d. 单链DNA （ssDNA ）
DNA不能直接作为RNA 而起作用，所以DNA 病毒无＋、－之分。复制时单链DNA 先合成
双链DNA ，以常规途径转录mRNA 。 联体病毒科（Geminiviridae ）病毒含有这种类型基因组.
e. 双链DNA （dsDNA ）
核酸类型与高等动、植物的相同，为互补的双链DNA ，花椰菜花叶病毒属
（Caulimovirus ）、杆状DNA 病毒属（Badnavirus ）具有这种类型基因组.
8. 植物病毒分类的基本依据是什么？P91
1）病毒的粒体特征：1. 病毒粒体形态特征，2病毒粒体物理特性，3. 病毒基因组特性，
4. 病毒蛋白质特性，5. 病毒脂类的含量和特性，6病毒糖类的含量和特性
2）基因组构与复制：包括基因组结构；核酸复制策略，转录特点，翻译和翻译后的修饰
特点；病毒粒体蛋白的积累位点、装配位点、成熟和释放位点以及细胞病理学等
3）抗原性质：包括病毒血清学性质及其与抗原的关系
4）病毒生物学特性：包括病毒寄主范围；致病性及其与病变的关系；组织嗜性、病理学、
自然传播方式、传播介体和地理分布
9.ICVT 第8次分类报告的主要特点有哪些？请列举各核酸类型包括的1 个代表科、属、种（如：双链DNA －花椰菜花叶病毒科－花椰菜花叶病毒属－花椰菜花叶病毒）。
特点：①进一步明确了种作为最小病毒分类系统的最小阶元；②在每一个确定的种下面列出了至少一个、至多几十个不同的分离物以及它们在GenBank 上的登入号；③增加了许多反映病毒基因序列同源性关系的系统树图；④将原子分辨率的粒子三维结构插入到相对应的科或属中，使研究者对病毒粒子空间结构有更详细的了解。
例子：1. 双链DNA （dsDNA ）－花椰菜花叶病毒科－花椰菜花叶病毒属－花椰菜花叶病毒
2.单链DNA （ssDNA ）－矮缩病毒科—香蕉束顶病毒属—香蕉束顶病毒
3.双链RNA （dsRNA ）-呼肠孤病毒科-水稻病毒属-水稻齿叶矮化病毒
4.负单链RNA （（-）ssRNA ）-弹状病毒科-细胞质弹状病毒属-莴苣坏死黄化病毒
5.正单链RNA （（+）ssRNA ）-马铃薯Y 病毒科-马铃薯Y 病毒属-马铃薯Y 病毒
10. 类病毒的定义。试述类病毒与植物病毒的异同点。（提示：基因组结构和病毒粒子的结构特点，以及它们所引起症状等方面论述）。
定义：在侵染植物内能进行自我复制的，没有衣壳蛋白包被的，低分子量的单链闭合环状的RNA 分子。
相同点：都含有核酸，都是转性寄生物，不能单独进行复制、繁殖
不同点①耐热性：要使类病毒失活需要高于100℃
②高度的侵染活性：50-100个分子的类病毒可以引起成功的侵染，而病毒需要100万个粒体以上
③局限的存在部位：类病毒至今仅仅发现于细胞核中，其核酸在体外翻译体系和寄主体内都没有翻译产物的存在，因为其核酸分子上没有翻译起始密码子
④核酸组成的想进性：G/C比相近，55%-58%；有人比较了3种类病毒的核酸序列，发现其在很大程度上的同源性，个别核苷酸或者局部片段发生了变化，成为不同的病原，或者不同的株系。研究表明几个甚至一个核苷酸的不同，就会导致致病力的明显变化。 ⑤不显性感染：植物带有类病毒但不表现症状的现象极为普遍。经测试36个科的232种植物对马铃薯纺锤块茎类病毒的感病性，发现有11个科的138个种是感染的，但只有茄科和菊科的12种植物表现症状，即90%以上的寄主都是不显症感染，而且潜育期很长，有的几个月，有的甚至几年
⑥传播方式简单：类病毒主要通过农具、嫁接刀具等传播，大部分可以通过种子传播（有的可在种子中存活20年）；仅仅有危害马铃薯和番茄的三种类病毒被证明有节肢动物介体传播。
⑦没有病毒粒体,, 是环状ssRNA
11. 略述植物病毒症状学在病毒诊断上的意义
①根据典型症状, 排除常规病毒病害
②对一些具有特征性症状的病毒病, 只有掌握其特有症状, 便可以准确做出诊断
③对一些不具有特征性症状的病毒病, 可以将病毒的致病反应和非侵染性致病因子加以比较, 做出初步的判断
④在田间一旦被确认为病毒病, 便可以按照病毒的主要症状特征结合传染方式加以识别 ⑤病毒病虽然没有真菌、细菌病害那样的特征，但往往具有自己的特有的症状，便于直接判别，如明脉、斑驳、花叶、脉肿、耳突、蚀纹、环斑、脉带、条纹、线条和条点等，我们可以进一步根据其形状、大小、色泽加以判断
⑥病毒病的症状具有相对的稳定性，不同病毒有不同的症状类型，学会区别并准确描述它们，对病毒诊断很有用处。
12. 植物病毒病的外部症状主要有哪些类型，其对应寄主植物的组织病变分别是？
①花叶类型：明脉，斑驳，花叶，沿脉变色（镶脉），块斑，条纹、线条与条点，褪绿斑 ②环斑类型：环斑，环纹，线纹
③畸形生长：线叶，带化，畸叶，小叶，蕨叶，卷叶，疱斑，皱缩，耳突和脉肿，丛枝，丛簇，扁枝，肿枝，茎沟，肿胀，花变叶，拐节，矮化，矮缩，畸果，小果
④变色：主要指叶片的局部或全部颜色改变
⑤坏死与变质：坏死斑，坏死环，坏死纹，坏死条纹，沿脉坏死，叶脉坏死，顶尖坏死，星裂和纵裂
13. 植物病毒病的复杂性体现在哪些方面？
①病毒引起的外部症状类型：花叶，环斑，畸形，变色，坏死和变质。
②外部症状的复杂性：植物受病毒侵染后，所呈现的症状往往有个发展过程，一种病毒病可能观察到几种症状或无症状过程，几种病毒病在同一植物上也可能出现相似的症状。
③无症带毒：有些病毒侵染寄主后不产生可见的症状。
④隐症：有些病毒形成症状后在特定的环境条件下可暂时隐去症状。
⑤复合症状：寄主植物被两种以上病毒侵染时，特别是同时侵染时出现复合症状大部分是加重。
14. 某地稻田发生大面积黄化，有人说病毒引起，有人说是生理现象，你应根据哪些原则加以判断？（病毒病与生理病的区别）
一般可根据“五性”原则来判断：
1. 分散性：病害在田间是否均匀分布？
否：病毒病，有一定的发病中心，有轻有重。
是：生理病，成片成块发生，病情较一致。
2.系统性：病害全株性、再现性、不可恢复性？
否：生理病，不具全株性，再现性；环境改善，可以康复。
是：病毒病，分枝发病，全株相同；新芽、新叶再现病症；环境改善不可再恢复。
3.传染性：病害在田间分布和类型？
病毒病：从病害发生有明显的扩展蔓延过程。
生理病：病株分布均匀，发病时间一致。
4.鲜明性：发病部位是在新、嫩叶（枝）？
否：生理病，老枝、老叶更为明显。
是：病毒病，嫩枝、嫩叶更为明显。
5.特征性：病害是否特有的病征？
否：生理病，无特有的病征。
是：病毒病，花叶，斑驳，耳突，环斑，条纹等。
15. 在诊断植物病毒病的过程中，应如何灵活应用柯赫法则？新P132
柯赫法则常用于侵染性病害的诊断和鉴定，特别是新病害的鉴定。鉴于病毒不能在人工培养基上培养，应用柯赫法则时则需要做些相应的修订：
1. 某种病毒必须经常与某种病害联系在一起；
2. 这种病毒必须能从发病的寄主植物上分离到---通过生物学方法获理化方法，甩开非致病病原和其他污染物，分离出致病病毒；
3. 将这种致病病毒接种到健康寄主上，能再现原来同种病害的症状特征；
4. 从接种发病的植物上，能检测到这种病毒，并能再次分离到这种病毒。
16. 应如何区分植物病毒病与其他侵染性病害？怎样判断植物病毒病和非侵染性病害？（新P125）
植物病毒病与其他侵染性病害的主要区别是：①植物病害在植物表面没有肉眼可见的病症，而区别于线虫虫体、细菌菌脓、真菌的子实体等病征的出现；②系统侵染病毒病的症状在新长幼叶上更重，而其他侵染性病害则大多在老叶上症状更明显。
植物病毒病与非侵染性病害的区别是：①病毒病有发病中心或中心病株，病情有轻有重，早期病株点片分布，而非侵染性病害大多同时大面积发生，病情较一致；②发生病毒病的植株多为系统感染，症状分布不均一，新叶新梢上症状最为明显，而生理性病害大多比较均一，老叶、老枝更为明显；③病毒病具有传染性，非传染性病害没有传染扩散的过程；④病毒病害症状往往表现为花叶、黄化矮缩、丛生等，少数有脉带。环斑、耳突、斑驳、蚀纹等特征性症状。此外，随着气温的变化，特别是在高温条件下，植物病毒病时常发生隐症现象；⑤生理性病害不具全株性、再现性，环境改善，可以康复；病毒病
害分枝发病，全株相同，新芽、新叶再现病症，环境改善不可再恢复。
17. 如何利用常用的生物学方法区分TMV/CMV、PVX/PVY、RBSV/RDV？
1.TMV/CMV的区别：（TMV 能在心叶烟上产生枯斑寄主，而CMV 则系统花叶；TMV 蚜虫不传，CMV 蚜虫能传，这样，可通过心叶烟单斑分离获得TMV ，剔除CMV ；通过蚜虫接种，
①TMV 和CMV 在普通烟上都产生系统花叶，但TMV 在心叶烟上产生枯斑，CMV 在心叶烟上则还是系统花叶，这样我们就可以用心叶烟来分离TMV 。
②CMV 在黄瓜上产生系统花叶症状，而黄瓜对TMV 免疫，这样，我们可以利用黄瓜将CMV 从上述两种混合病毒混合侵染的病株中分离出来。
③TMV 蚜虫不传，CMV 蚜虫能传，通过蚜虫接种，分离获得TMV 。
2.PVX/PVY的区别：（PVX 能侵染曼陀罗，PVY 不侵染曼陀罗；PVX 蚜虫不传，PVY 蚜虫能传。）
①PVX 能侵染曼陀罗，PVY 不能侵染曼陀罗。
②PVX 蚜虫不传，PVY 蚜虫能传。
③PVX 在千日红上呈现红色边缘的坏死斑，普通烟感染PVY 后呈现沿脉及叶脉坏死症。
3.RBSV/RDV的区别：RBSV 寄主范围很窄，并不侵染稗草，而稗草对RDV 高度感染；RBSV 电光叶蝉不传，RDV 电光叶蝉能传。
18. 枯斑寄主、指示寄主、鉴别寄主的主要区别？
枯斑寄主：有些病毒侵染寄主植物后，会诱导寄主产生过敏反应，出现局部枯斑而不扩展成系统侵染。
指示寄主：指的是对那些潜育期特长，症状出现很慢的病毒（如果树中的病毒），为了及时做出诊断，将其转移（接种）到症状出现很快的寄主上，这种寄主就称为指示植物。 鉴别寄主：是用来鉴别某一病毒或其株系的具有特定反应的植物。
鉴别寄主与枯斑寄主的主要区别：
①症状类型：枯斑只是特征性反应的一种症状类型，鉴别寄主的特征性反应除了枯斑，还有其他类型的症状反应，比如：红叶症。
②范围不同：鉴别寄主包括单一的鉴别寄主和鉴别寄主谱，枯斑寄主一般是单一的植物寄主。
鉴别寄主和指示寄主的区别：
①用途不同：鉴别寄主主要用于鉴别、分离病毒和病毒的定量，指示植物主要用于检测病原物的存在。
②范围不同：鉴别寄主包括单一的鉴别寄主和鉴别寄主谱。
19. 如何鉴定病毒与类病毒？简述其依据的原理和方法。（结合第10题）
类病毒与病毒的区别：病院以无衣壳包被的RNA 形式存在于植物体内，不能从病组织中检测出类似病毒的粒体；侵染性RNA 的分子含量特低，且在病细胞中照样能自主复制；侵染性RNA 仅由一种分子所组成。
病毒鉴定采用生物学实验，病株汁液体外性状测定，血清学实验，电子显微镜技术，分子生物学技术。
类病毒无法用血清学和电镜诊断，一般采用生物鉴定、凝胶电泳、互补脱氧核糖核酸杂交。
20. 植物病毒病常见的实验诊断方法有哪些，任选其中一种简述其原理及步骤。
实验室诊断方法有：
1. 生物学实验：枯斑寄主、过滤寄主、专化介体
2. 病株汁液体的外形状测定
3. 血清学实验：沉淀反应、凝集反应、标记抗体反应（ELISA 、斑点免疫测定、免疫电子显微镜技术）
4. 电子显微镜技术：免疫电镜技术、超薄切片法、负染技术、叶浸蘸法
5. 分子生物学技术：聚合酶链式反应（PCR ）、核酸杂交
血清学实验——酶联免疫吸附反应（ELISA ）原理：（1）抗原或抗体能以物理性吸附于固相载体表面，是蛋白质和聚苯乙烯表面间的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫学活性；（2）抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物，而此种酶结合物仍能保持其免疫学和酶学活性；（3）酶结合物与相应抗原或抗体结合后，可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在，而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例的，因此，可以按底物显色的程度显示试验结果。
21.PCR 的中文全称，并试述PCR 的原理及其在植物正单链RNA 病毒（如：马铃薯Y 病毒）检测中应用。
⑴聚合酶链式反应
⑵原理：在DNA 聚合酶催化下，以母链DNA 为模板，以特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等，体外复制出与母链模板DNA 互补的子链DNA 的过程
⑶步骤：变性（模板的变性）、退火（模板DNA 与引物的退火（复性））、延伸（引物的延伸）
根据马铃薯Y 病毒的外壳蛋白基因序列，设计合成一对寡核苷酸引物，从感染PVY 的马铃薯田间病叶组织中提取病毒的RNA ，进行cDNA 合成及PCR 扩增，得到一条特异PCR 扩增产物，与理论设计的基因片段大小一致，说明植物带毒。
22. 试述酶联免疫吸附反应（ELISA ）间接法的主要实验流程。
间接法的主要实验程序：先用待测的病毒样品包被酶标板，是抗原吸附在微皿孔壁上；洗去多余的抗原及杂物，加入特异性的兔抗血清IgG(一抗) ；孵育后洗去未和抗原结合的多余抗体，加入酶标羊抗兔IgG （二抗）；最后加入底物。如有颜色反应，证明抗原-特异性抗体-酶标二抗复合物的存在，从而确定病毒的存在。（新P151）
①取150ul 抗原包被在酶标板上，37℃温育2h ；②倒出酶标板中的液体，PBST 洗板三次，每次3min ；③加入稀释好的抗体，150ul/孔，37℃温育1h ；④倒出酶标板中的液体，PBST 洗板三次，每次3min ；⑤加入稀释好的碱性磷酸酶标记羊抗兔IgG ，150ul/孔，37℃温育1h ；⑥倒出酶标板中的液体，PBST 洗板三次，每次3min ；⑦加入1mg/ml的生色底物（硝基苯磷酸盐），150ul/孔，37℃温育10-30min ；⑧用酶标仪检测，阳性结果判断方法。（注：书本158-159）
23. 试述植物病毒在循回增殖型的传毒蚜虫中的大致循回增殖过程。
病毒经过蚜虫口针，进入中肠，穿透肠壁到血淋巴，然后转入脂肪体细胞内增殖，再将细胞运转到唾腺的唾液中，最后病毒随唾液返回口针，蚜虫为害取食时就传染到植物细胞内。（病毒在蚜虫体内增殖算，病毒进入活细胞后脱壳，病毒核酸复制，亚基因组翻译出蛋白质，包括衣壳蛋白，然后核酸和衣壳蛋白组成新的病毒粒子，从得毒到有传毒能力，期间有一个潜育期，故称循回性病毒。）
24. 抗原、半抗原、抗原决定簇及抗体的定义。
抗原：在动物集体内可以激发产生抗体的异体物质称作抗原
半抗原：仅具备免疫原性不具备反应原性的抗原称作半抗原
抗原决定簇：又称抗原表位，指抗原分子中决定抗原特异性的特殊化学基团。
抗体：机体在抗原物质刺激下，由B 细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应的抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白。
25. 如何根据植物病毒的传播方式和传毒特点制定病毒病害控制方案？
植物病毒的传播方式：机械传播，嫁接传播，菟丝子传播，种子传播，介体传播
传毒特点：非循回型传染（非持久性病毒），多为口针传毒；
循回型传染：增殖型（持久性传毒）和非增值型（持久性传毒和非持久性传
毒。
方案：以CMV 为例
⑴检疫措施：综合治理，防治为主，对烟草种子种苗的检疫，防治病毒的传入。 ⑵无病种子及无性繁殖材料：①建立无病留种田，清除田间的杂草，去除越冬的蚜虫；②种苗消毒与热处理，烟草种子中的CMV 通过360℃热处理3-4周可达到防治的目的；③茎尖和原生质体的脱毒培养
⑶农业防治：①合理布局，不要在烟区四周种植蔬菜，桃树等，减少蚜虫的危害；②选用抗病品种和耐病品种，选择蚜虫不易生长的品种如云烟87，云烟85等；③注意田间管理，及时清理田间杂草，翻耕灭茬；④利用地上覆盖物避蚜防病，利用黄板诱蚜测报，如银灰色塑料膜或透明塑料地膜可以有效的避蚜防病；⑤加强水肥的管理，适期适量灌水和排水，合理施肥；⑤适期播种和合理密植，低温不适合蚜虫的生长，早播，早移栽可以减少蚜虫的危害；⑥合理使用化学药剂防治蚜虫。
⑷生物防治：通过释放烟蚜茧蜂直接防治蚜虫，减少CMV 病毒的传播。
26. 影响植物病毒病流行的因素有哪些？
1. 生物因子的影响①寄主植物：农作物、野生植物及杂草等②病毒：病毒的种类和株系
与病毒的传播和流行息息相关③生物介体：昆虫、螨类、线虫、真菌、菟丝子④种子、花粉和无性繁殖体⑤农业措施：耕作制度和栽培制度⑥人、动物及社会因素
2.非生物因子的影响①气候：温度、湿度、气流、光等②土壤：肥水、微量元素
27. 如何利用农业系列栽培措施控制植物病毒病害？（书本214-220） ⑴作物合理布局：①合理的田园规划②邻作、间作与套作③轮作；
⑵利用抗病和耐病品种⑶适期播种与合理密植；⑷利用地上覆盖物避蚜防病：①利用银灰色塑料反光薄膜避蚜防病；②利用地面覆盖物和纱网避蚜防病；⑸加强水肥管理：①适期适量灌水和排水，合理搭配肥料种类、用量，适时施用，可以增强作物的抗病力；②作物增加一定比例的磷肥，往往可以提高抗病毒病的能力；③作物增施氮肥可加重病毒病症状，但是可以恢复一定的产量。⑹田园卫生：保持田园卫生，减少带毒介体昆虫的栖息和越冬场所，降解寄主植物病残体中的TMV 黄瓜绿斑驳花叶病毒等。⑺其它农业措施：①利用自然条件优势控制病毒病；②选择适宜土质与调节土壤酸碱度；③利用陈旧种子减少毒源；④消灭野鼠。
28. 植物病毒的传播方式有哪些？
介体传播：昆虫（蚜虫，叶蝉，飞虱），螨类，线虫，真菌，菟丝子
非介体传播：种子和花粉传染，嫁接传染，汁液接触传染，病残体与水流传染毒。
29. 简述植物病毒在寄主内的复制过程
以（+）RNA 病毒为例，病毒的复制过程如下：
①病毒粒体进入寄主细胞，脱壳，释放RNA ；
②RNA 与核糖体结合，翻译出病毒复制酶等与复制相关的基因产物；
③复制酶以（+）RNA 为模板合成（-）RNA 链，并形成双链复制型；
④从复制型产生子代（+）RNA 链；
⑤以病毒RNA 为模板合成外壳蛋白；
⑥外壳蛋白亚基和RNA 组装成新的病毒粒体。
（①病毒粒体吸附②侵入寄主细胞③脱壳：病毒感染性核酸从衣壳内释放出来④基因表达⑤复制大量的基因组及合成外壳蛋白⑥病毒粒体装配⑦扩散或释放）
30. 简述植物病毒和介体昆虫的生物学传毒关系
关系：偱回型和非偱回型（新P75）