基因工程原理,把吴乃虎主编的好好看一下,基本没啥问题!
分子生物学不要忽略任何一部分,最好前后总结到一起,同时书的最后那几章比较简单的内容也要好好看,07年出的大题RAPD,就是最后简单讲得内容!同时了解最近几年的分子生物学研究成就及其进展.07年的人类基因组测序计划的相关内容就是很好的证明!!
和中国农科院历年考博试题
2002年中国农科院博士入学基因工程概论试题
一、简答题
1、聚丙烯酰胺、琼脂糖在DNA电泳中的区别是什么？
2、举出动物转基因的两种方法，并说明其原理。
3、双脱氧法测序的原理。
4、以拟南芥或玉米为例，说明转座子标签法进行基因转移的原理。
5、Southern印迹的原理及应用。
三、试论述植物基因工程研究进展以及在农业生产上的意义。
2001年中国农科院博士入学基因工程概论试题
一、名词解释
1、限制性内切酶 2、同裂酶 3、核酶 4、2μ环 5、hat选择
6、Ti质粒 7、T-DNA 8、同功tRNA 9、反义tRNA 10、有义链
11、α互补 12、基因文库 13、cDNA 14、染色体步查
二．简答题
1、举两种植物基因转移的方法?简述其原理。
2、Southern印迹的基本原理，这种方法有何应用。
3、噬菌体与cos作载体有何区别？
4、AFLP的原理及其应用
5、普通PCR与RAPD有何区别，何谓普通PCR？
6、何谓双元载体，简述其组装过程及其作用机理？
三、判断题
1、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体
2、进入细菌的外来DNA之所以被降解，是因为细菌只修饰自身DNA，不修饰外来DNA
3、只有粘粒端才可以被连接起来
4、用自身作引物合成的cDNA链，往往cDNA并不完整
1998年中国农科院博士入学基因工程概论试题
一、什么是基因工程，基因工程在农业生产上有何意义？
二、简答：
1、聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳应用有何特点？
2、举两种植物基因转移的方法?简述其原理。
3、双脱氧法测序的原理
4、转座子标签法克隆植物基因的原理
5、Southern印迹的基本原理，这种方法有何应用？
6、在DNA复制过程中会形成一种复制体（replisome）的结构，它是由哪几部分组成的？
7、Sanger测序法的基本原理是什么？
1999年中国农科院博士入学基因工程概论试题
一．名词解释：
1．CDNA 2 Ti质粒 3. 2u环 4. HAT选择 5 a互补 6 YAC 7 转导 8 基因文库 9 限制性内切酶 10 染色体步查
二．问答题：
1 举例说明两种植物转基因的方法。
2 Phagmid和cosmid作为载体的特点。
3 AFLF原理及其应用。
4 双元载体的概念及构建原理。
5 Southern吸印杂交的原理及应用。
1995年中国农科院博士入学基因工程概论试题同98年
1994年中国农科院博士入学基因工程概论试题
1 AP-PCR和普通PCR的区别。
2 用于植物动物的基因转移方法有何区别。
3 植物基因组和动物基因组结构有何区别。
4 目前已克隆转录因子有那些，采用什么方法克隆。
5 RNA的自我剪切有几种方法其过程。
6 获得某一基因，如何得知其功能。
7 评价转基因安全性。
基因工程原理2003年试题考了5个名词解释（20分），5个判断题（10分），简答题（30分），问答题（40分）。名词解释、判断题我大都记不清了。
简答：1. RNAi（RNA干涉）的工作机理和作用。
2. 双脱氧测序法的原理。
3. 基因芯片的种类和工作原理。
4. PCR的工作原理。
问答：1. 研究DNA与蛋白质相互作用的方法有几种。
2. 如何提高外源基因片段在原核细胞中的表达量。
3 叙述功能基因组学的内容与意义。
名词： 脉冲电场电泳法
RNA保护（RNA protection）
（80%的题都出自这里）
1． 什么是基因工程？试述在农业生产上的意义。
2． 聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖电泳在应用中有何不同和特点。
3． 双脱氧法测序的基本原理是什么？
4． SOUTHERN印迹的基本原理及其应用。
5． 试述两种转基因方法并说明其原理.
6． 双元载体的概念及其构件原理
7． AFLP的原理及其应用.
8． PLASMID和COSMID作为载体的特点.
9． 试述RFLP
10． 试述转座子标签法克隆目基因
11． 试述定位克隆技术
12． 试述RNA编辑.
13． 试述YAC
14． 试述染色体步移
15． 试述基因芯片
我想基因工程原理无非就是这些基本原理，2004年的论述题是获得一个克隆怎么研究功能，
生化题
一、 名词解释：
拼接体 异构酶 变构酶 锌指蛋白，RNAi ，Western blotting, RT-PCR,顺式作用元件，反式
作用因子，核酶，结构域，分子伴侣，复制体，蛋白质靶向到位
二、 问答题
1简述真核生物基因表达的主要调控环节和蛋白质合成后靶向运送的类型
2生物大分子之间的相互作用是生命现象的具体表现，试以蛋白质之间以及蛋白质与核酸分
子之间的相互作用为例加以说明
3真核与原核转录的区别
4生物膜有那些主要的生物功能清举例说明膜蛋白参与那些重要的生命过程
5酶调控是代谢调控的实质，为什么?酶水平调节层次
6何谓蛋白质的磷酸化和脱磷酸化，试以实例说明其对生长和发育的调节的作用
大题同2004基因工程题
向老外求全文的信函模板
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Dear Mr./Mrs.: ________（作者名）
I am a graduate student of NanJing Medical University in China. I major in "________"（您的专业）.
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Sincerely: ___________（您的名字）
My Email address is: ____________________ （你的email地址）
原创】sci论文写作经验
原创】sci论文写作经验 ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ 7654321(金币+8):多谢分享！
关于写SCI文章，我也向谈谈我的感受。我介绍一下我写SCI文章的具体过程。
1.要写一篇好的文章，思路的创新性和试验数据的可靠性是非常重要的两个条件
要想思路创新，有两种方法。
1）如果你个人对某个领域进行了多年的研究，在你的潜意识中觉得某些问题解
决的关键应该在于某个方面的深入研究，如果当时很少有人注意此方面研究，你
首先开始该方面的研究，那么你的文章就有很好的创新。但是用这种方法进行创
新性的前提是你在该领越有多年的研究经历。否则很有可能会导致研究的失败。
因为你认为有创新的东西可能是人家已经做过研究了（只是研究失败，所以没有报道），或者你的思路本身就是一个错误。所以如果你只是一个研究生，为了保证毕业的论文要求，我觉得还是走第二条路。
2）就是二次创新。举个例子。如果在最近三年有不同的作者发了两篇文章，一
篇文章报道因素A对提高玉米的抗逆性有很大影响，第二篇报道因素B对小麦的抗
逆性有很大影响。那么你就可以参考以上两个作者的研究方法，研究因素A和因
素B对水稻抗逆性的影响。这样做出来的文章一般情况下能够发在和以上两篇文
章档次差不多的杂志。
我就是按照第二种方法开展我的博士论文研究的。
要保证试验数据的可靠，首先你要选用在你的领域中普遍采用的试验方法，
最简单的方法，是找几篇和你搞的研究类似的SCI文章，参考他们的研究方法。
试验结束后，就要立即进行总结数据，写文章，我的步骤如下：
1.将所有的试验结果整理成图和表，尽力挖掘图和表中的信息，越多越好。在这
个过程中你尽可能和不同的研究人员探讨你的试验结果，因为不同的人对同一张
表和图有不同的看法。这样会给你写文章的思路。
2.分析完图表好，你应该找到你这个试验结果的Key point，一定要保证这个Key
point具有较大的新意，或者说一个到这个Key point 有一种振奋人心的感觉。
然后从所有图表中找出能够论证你这个Key point 的图和表。
合理安排你的图和表，如果可能的话尽可能用图。
Result以后，就是Discussion（这是一篇文章的精华）
可以将discussion分为若干段落，可以是并列关系或者递进关系。
但是要保证每一段都有一个主题，即每一段讨论一个主要话题。
这每一段中，要说明一下几点：
1）你的研究结果说明什么，有什么意义
2）你的研究结果和别人的类似研究结果有什么异同，如果不同的话，那么可以
讨论一些产生差异的可能原因。
3）如果你在研究结果中出现非常新的东西，用以前别人的理论很难解释，那么
你可以提出你的假设理论来解释试验中非常新的东西，一定要做到能自圆其说。
在Discussion的最后要总结一下，告诉别人你这个研究的几个主要结果。
之一-----指导思想、选题立项篇
指导思想 1、 追求卓越，在知识上要绝对专业，坚决反对侥幸心理。
2、 相信NSFC申请是公平的，大家靠实力竞争，必须花大力气写标书；如果你认为NSFC只有关系，你就不用继续往下看了。
3、 NSFC是一个系统工程，需要花很多时间和精力，而不仅仅是几页标书，是智慧沉淀的结晶。
4、 不要把NSFC看的高不可及，你要相信自己的创意，哪怕你只是一名一年级硕士生。
5、 机会主义是有的，但我们没有什么其它的资本，只能消灭标书里一切可能的失败因素，加上完美的选题和课题设计，彻底征服评委，不给评委任何黑掉你的机会。
6、 基金申请不同于实际研究课题设计，必须把个人兴趣与NSFC兴趣结合起来，投其所好。 选题立项
1、 基金申请成败关键还是选题要好，提前半年，刚入行的提前一年进行课题搜索。
2、 老板指定的题未必是好题，最好自己选题，如何立项应该是研究生学习最重要的一课，毕业后你会发现，没有人会指点你什么课题有价值了，在中国学术的沙漠里，只剩下你自己了。
3、 好课题是对学科深刻理解的条件下产生的，大量翻阅文献吧，汲取知识的同时千万别忘了思考，你发现别人存在漏洞的时候，好课题就离你不远了。
4、 选题最好以问题为导向，不要以技术为导向，找到问题了，课题就找到了。而拿着新技术去找需要解决的问题，效果多数不好，但还是大有人在，比如RNAi。
5、 解放思想，发散思维，多方法多学科交叉，一般都会比较受人青睐，容易申请到基金，但不能为了交叉而强行交叉。
6、 创新性新技术、新理论的课题要有一定的理论与技术基础，最好有工作基础，没有你也要东拼西凑，这是在中国，NSFC似乎讨厌空中楼阁。
7、 临床课题研究最好别选临床应用方向，而选应用基础研究。
8、 选择自己熟悉，有工作基础的领域，别跨越太远。你是在要钱，记住了，你不装的像一个行家，NSFC是不会给钱的。
9、 重要科学问题的切入点准确，切忌过宽、过大，只要体现一定的新意和研究价值就行了，能得诺贝尔奖的课题NSFC是不给钱的。
10、 没有人做过的课题不能做为立项的依据，但NSFC资助的项目必须是国际上没人做过的，而不是国内空白。 11、 如果是捕捉科研前沿性的课题，最好设计周密，尤其是目的和结果的一致性、可获得性和可预期性，通过课题实施所获得的结果必须能充分支持与研究目标相一致的结论。
12、 热点课题不一定是好课题，热点上的人也很热。但在还没热起来的热点，一定是一个好课题，标书评审滞后半年，比如最开始的一批SARS课题。有时也不防设计一些非热点但是对与科研有价值的课题，发挥出奇不意的效果。
13、 临床课题可以是当前没有好办法治疗的疾病，急需解决的临床问题，而在国际上检索的文献只有几篇的那种。
14、 本人不主张以最新的重量级文献做指导，你会发现，很多人跟你的想法惊人的一致。有人特别反对跟风。
15、 一定要到NSFC检索一下类似课题的历年资助情况，太多、太少都不好。最好是最近二年逐渐增加的资助领域。
之二-----立题依据篇
1、 题目要有新意，吸引人，既要概括主题，容易懂，又要有些少见的新词或缩写，调胃口。
2、 5000字左右，最多两页半，不包括文献，行距字体大小适中。
3、 国内外研究现状及分析一定要准确，甚至是中庸，绝不能偏激，不然不同意你的专家会
带着逆反心理看你标书，你死定了。
4、 课题研究的具体问题和研究意义，则必须说的声泪俱下。应该达到的境界是：连你自己
都认为这个课题不做就没有天理，尽管这个课题可能不咋样。当然如果有实力，可以解决关
键的科学性问题，那再好不过。然而课题意义不是最重要的，但常常被撰写得份量过重，课
题总体构想、大体实施方案及可能的预期结果才是人们最关心的。
5、 要把复杂的事说简单。既要论述充分，写作又要简练。剔除所有不必要的知识细节、理
论和概念，要舍得割肉才行。越简单，出错越少，专家不懂的越少（他们有时确实有知识盲
点）。有人主张“要让评委看过之后，感叹您idea的精妙，却不太明白您的理论依据”，我认
为在面上项目不太合适，在重点项目还可以。我赞同“写出来的理论，要让人家能欣赏”。“写
出来的理论，要让人家看不懂”，这份申请书很危险。
6、 立论依据要非常突出：理论性课题一定要有新观点，应用性一定要实用，与现有理论或
方法具有明显的先进性，总之要让人感觉到有意义。
7、 一定要有可预见的成果，至少画一张大饼，但看上去要象真的才行。基金委的专家是撒
把米就叫你下蛋的，如果你说：“吃完米，明儿再下”，那你就只有饿着了。
8、 任何重要的论点都要有文献标注，有文献就等于没有疑问。参考文献要新，最好是当年
的。而且一定要引上Science、Nature、Annual Reviews系列杂志的近期文献，增加自己立
论依据的权威性。最好包括已有工作基础，将已有相关结果以及发表的杂志列上，可以增加
可信度。
9、 一定多让本实验室的人修改，特别是中过基金的前辈，要改15遍以上才行。请外人修
改时要“防人之心不可无”。
10、 标书的评委参差不齐，评审意见也差异悬殊。好的标书最容易受到高水平评委的赏识，
只要你的题好，这些评委是好征服的。难就难在如何让水平差的评委通过你的标书。我认为
除了运气好，少碰到一些这样的评委之外，关键的一点就是让他们看懂你的标书；第二就是
标书不能太长，他是看不下去的；第三就是实验设计在不失科学性、先进性的条件下，尽可
能简单，千万别让他觉得你比他高很多，那样你死定了。所以一份好的标书是在高水平教授
和低水平教授之间的平衡，写的非常玄妙的标书通常中不了。
11、 评审专家通常是本专业的，也可能不是，尤其是交叉学科投递的项目，评审专家未必
对你的研究领域特别熟悉。所以尽可能少引入非常专业的概念，如果不可避免，也要解释清
楚。
12、 文字写作要有适当的弹性，不能把话说死，留有余地。因为你肯定会碰到不同意你课
题的专家，除非你运气实在好。对于赞同你课题的同行，只需证明你具备完成课题的实力就行了，这点容易做到。标书的目的其实就是征服对你课题不同意，甚至存在偏见的评审。所
以立题依据的写作实际上就是一种心理诱导过程（哈哈，骗子可能最拿手了），你开始的观
点应该处于偏见评委和你真实观点之间，稍偏你一方，处于容忍范围，他不会立即提出反对，
下一步再偏一点儿，逐渐下去到最后，他还是没提出反对，你就胜利了，要钱成功！
13、 本人不赞同把认为重要的句子字体增粗或下面打点以示关键，但这也许对于一些评委
管用。
之三-----研究方案、预期研究结果篇
研究方案篇 1、 研究目标要明确要精，提法要准确、恰当；内容要详细但文字不宜过多，且一定不能写得太具体。关键的问题要突出，一定要准确，且要有一定难度，但不必写的太具体，否则有时会出现mission impossible。
2、 可行性分析是你说服评委的第二次机会，可按成熟的理论基础（理论上可行）、研究目标在现有技术条件下的可实现性（技术上可行）、本单位现有技术设备实验材料的完备（设备材料可行）、课题组成员完成课题能力（知识技能上可行）等几方面分层论述。可以找一家比自己单位强的合作伙伴，把他们的软硬件条件也加进去。
3、 创新点要切合实际，要有所发挥，但语气要肯定，指出国际国内研究的先进性和创新性，点明理论和现实意义。
4、 研究内容要集中，与研究目标紧密一致，只做支撑课题最关键最必要的内容。不可为多作实验显示劳动量或增加预算而使研究内容过泛。
5、 实验方案和技术路线合理、可靠、可行，没漏洞是最重要的。思路好，材料独特，方法独特新颖，会增加获得资助的机会。技术当然是越新越好，但未必需要采用最时髦的研究手段，不能为了技术而研究。
6、 研究内容及方案切忌复杂，步骤最好有一流程图。研究方法、技术路线、实验方案不能太具体化，容易出漏洞。但你必须让评委认为你十分了解实验技术的整个过程，可以尽可能多的应用技术术语和技术缩写，写出主要实验材料和实验过程。
7、 技术方法一定是本实验是已经建立的，至少是有相关实验基础，或虚拟的基础。所有关键技术要有文献出处，最好是自己实验室发表的，有文献就等于没有疑问。如果本单位力量弱，可挂靠较强的研究机构，
从而使评审相信你能完成课题。关键实验材料必须已经具备，或可以获得。这些问题应该附有相应的证据。 预期结果篇 预期结果要考虑对基础和实用双重的价值。
以发表论文和申请专利结题比较容易。最好突出SCI收录杂志的影响因子，给基金委的专家们觉得，您的实力确实不一般。因为最终结题情况，是基金委专家们最关心的事情，他们当然愿意把基金支持能发表高水平文章的人。
之四-----工作基础、人员组成、个人简历篇
工作基础篇 1、 工作基础是你说服评委的第三次机会。课题科学先进、技术路线新颖合理可行、工作基础雄厚这三方面表述要紧密联系、前后呼应。
2、 一定要有基础。把实验室发表的所有文章搜集起来，找出与你设计课题相关的，只要沾边，都列上。自己最好在研究生一年级就发表综述，如果努力，第二年申请就来得及。如已发表高水平文章，基金申请基本没问题。文章与课题关系远一些无所谓，最好既相关，又不同。
3、 预实验结果很重要，而且是有硬data的结果，一定附上。但一定要慎重掌握，不要写的太多，评委会认为你的工作做的差不多了，没必要再申请基金了。只预期你的课题肯定有好的结果就行了。
4、 工作基础可以找个较强的合作单位，你就强壮起来了。
5、 有针对性地把研究队伍的相关工作经历、论文、成果等展示出来，但相关基金就最好别露富了。 人员组成篇 1、 主要成员6-10名，结构合理：高级研究人员（1-2人）；中级研究人员（2-3人）；技术人员及研究生（3-5人）
2、 参加人员技术力量的配备要合适，必须保证一定的劳动力。
3、 1名高职足够，多了浪费资源，现在NSFC限项很死的，我们的高职资源快耗竭了。
4、 中级人员是骨干，但在职的不要太多，1－2名。
5、 技术员2名左右，很重要呦，这是专业技术保障。
6、 研究生不能少于2名，这是主要劳力，地球人都知道。
7、 成员介绍要紧扣课题的研究内容和技术路线，既注重梯队、比例、技术力量等科研综合实力的展示，又注意与本课题相关
8、 最好不加入老先生，除非他是院士，答应给你基金。不过找个好的副高作课题指导，他的工作就相当于你的了。但恐怕他的基金还申请不过来呢，哪舍得把宝贵的名额给你呀。 个人简历篇 1、 申请者和项目组主要成员的学历和研究工作简历，近期已发表与本项目有关的主要论著目录和获得学术奖励情况及在本项目中承担的任务，所有复印件一定要附上，眼见才为实，别忘了扫描到电子版里去呦，评委看的是那个。
2、 申请者和项目组主要成员正在承担的科研项目情况，包括自然科学基金的项目，要注明项目的名称和编号、经费来源、起止年月、负责的内容等。完成的可以都列上，没结题的一定不要写了，基金委不同情富人，何况我们还是假装富的人。
3、 中级技术职称的推荐信或在职研究生申请项目的导师推荐信一定不要忘了。
4、 至于申请名分问题，就不好讲了，仔细研究申报指南吧，一切按常规，世界上就没有奇迹了。
5、 个人简历一定有针对性的倾向于课题方向，并与课题中各人的分工相一致。所从事的研究项目可适当给出，但不能过多，保证课题组有充足时间完成基金课题。
之五-----经费预算、摘要写作篇
经费预算篇 1、 要求按照《国家自然科学基金经费管理办法》认真填写，管理费：5 %
2、 2、 人员费：5 %雷打不动，人不值钱呀。
3、 实验材料费：60-70%必须占大头。
4、 仪器费
修了，NSFC舍不得。但如果有超过万元的仪器设备费，会给人研究条件不过硬的印象，基
金委当然希望把钱投到硬件条件好的单位，可以把基金用于刀刃上。
5、 了解当年NSFC资助力度，面上项目自由申请经费以此为标准
6、 实验材料开价要合理，不能狮子大开口。实验不够就把要求拉高些，技术先进些，二十
几万很快就能虚拟花光，很爽！但不能胡来，会死人的。败家要败得冠冕堂皇。 摘要写作
1、 摘要可能是标书最后写的部分了，但却是评委最先看的部分，很多标书在这一关就倒下
了。
2、 摘要字数少，但最忌讳写的平淡无奇。要激起评委浓厚的兴趣，要激发他万丈怒火，都
算胜利。哈哈，当然要努力后者。
3、 基于以上认识，摘要一定要语气坚定，旗帜鲜明，一反立题依据中的中庸之道。其实语
句的变化不大，只是删除有弹性的话就是了。
4、 摘要字数有限，资源宝贵，惜字如金，因此要特别注意重点突出，讲明现状、课题意义、
课题构想和预期结果。
5、 防止“头重脚轻”，削减一般性细节描述，多用概括性语句，讲明现状、课题意义、课题
构想和预期结果部分要相互平衡。 之六-----学科选口、善后工作篇
学科选口篇 1、 申报的方向和学部很重要，往往结果天壤之别。尽量避重就轻，在竞争不很激烈的领域申请，除非您有充分的把握。
2、 投到你老板能量比较集中的学科，是第一选择。
3、 仔细研读基金申报指南，洞悉各专业领域倾斜性项目和优先资助方向。
4、 仔细分析NSFC历年与你课题相关资助项目在各学科的分布，发现隔年资助或近几年资助递增学科，你基本找到钱在哪了。
5、 学科交叉鼓励，但尽可能投到你熟悉的学科。如果十分生疏，找个熟悉那学科的人作搭档，不然你会迷路的。 善后工作篇 1、 版面调整，清晰，层次分明，使版面简洁、易于阅读。
2、 坚决消灭错别字。
3、 完美5遍以上。
4、 合理行使基金委赋予的权利－回避制度自我保护，注意自己小领域的同行，防止个别在学术道德方面有些问题的评委把你黑掉。但你不能把所有同行都回避掉。
5、 仔细审查自己的申请人资格是否达到NSFC要求。
6、 仔细审查自己的项目组成人员（包括自己）有没有超项，同室撞车，害人害己。
7、 中国的国家自然科学基金当然由中国人审，如果你有充足的人缘，别浪费了这宝贵的资源，甚至很水的标书，也不要绝望，它很有机会变成黄金的。
3、
基因工程原理,把吴乃虎主编的好好看一下,基本没啥问题!
分子生物学不要忽略任何一部分,最好前后总结到一起,同时书的最后那几章比较简单的内容也要好好看,07年出的大题RAPD,就是最后简单讲得内容!同时了解最近几年的分子生物学研究成就及其进展.07年的人类基因组测序计划的相关内容就是很好的证明!!
和中国农科院历年考博试题
2002年中国农科院博士入学基因工程概论试题
一、简答题
1、聚丙烯酰胺、琼脂糖在DNA电泳中的区别是什么？
2、举出动物转基因的两种方法，并说明其原理。
3、双脱氧法测序的原理。
4、以拟南芥或玉米为例，说明转座子标签法进行基因转移的原理。
5、Southern印迹的原理及应用。
三、试论述植物基因工程研究进展以及在农业生产上的意义。
2001年中国农科院博士入学基因工程概论试题
一、名词解释
1、限制性内切酶 2、同裂酶 3、核酶 4、2μ环 5、hat选择
6、Ti质粒 7、T-DNA 8、同功tRNA 9、反义tRNA 10、有义链
11、α互补 12、基因文库 13、cDNA 14、染色体步查
二．简答题
1、举两种植物基因转移的方法?简述其原理。
2、Southern印迹的基本原理，这种方法有何应用。
3、噬菌体与cos作载体有何区别？
4、AFLP的原理及其应用
5、普通PCR与RAPD有何区别，何谓普通PCR？
6、何谓双元载体，简述其组装过程及其作用机理？
三、判断题
1、无论用哪种转化方法均可用PBR322作载体
2、进入细菌的外来DNA之所以被降解，是因为细菌只修饰自身DNA，不修饰外来DNA
3、只有粘粒端才可以被连接起来
4、用自身作引物合成的cDNA链，往往cDNA并不完整
1998年中国农科院博士入学基因工程概论试题
一、什么是基因工程，基因工程在农业生产上有何意义？
二、简答：
1、聚丙烯酰胺凝胶电泳和琼脂糖凝胶电泳应用有何特点？
2、举两种植物基因转移的方法?简述其原理。
3、双脱氧法测序的原理
4、转座子标签法克隆植物基因的原理
5、Southern印迹的基本原理，这种方法有何应用？
6、在DNA复制过程中会形成一种复制体（replisome）的结构，它是由哪几部分组成的？
7、Sanger测序法的基本原理是什么？
1999年中国农科院博士入学基因工程概论试题
一．名词解释：
1．CDNA 2 Ti质粒 3. 2u环 4. HAT选择 5 a互补 6 YAC 7 转导 8 基因文库 9 限制性内切酶 10 染色体步查
二．问答题：
1 举例说明两种植物转基因的方法。
2 Phagmid和cosmid作为载体的特点。
3 AFLF原理及其应用。
4 双元载体的概念及构建原理。
5 Southern吸印杂交的原理及应用。
1995年中国农科院博士入学基因工程概论试题同98年
1994年中国农科院博士入学基因工程概论试题
1 AP-PCR和普通PCR的区别。
2 用于植物动物的基因转移方法有何区别。
3 植物基因组和动物基因组结构有何区别。
4 目前已克隆转录因子有那些，采用什么方法克隆。
5 RNA的自我剪切有几种方法其过程。
6 获得某一基因，如何得知其功能。
7 评价转基因安全性。
基因工程原理2003年试题考了5个名词解释（20分），5个判断题（10分），简答题（30分），问答题（40分）。名词解释、判断题我大都记不清了。
简答：1. RNAi（RNA干涉）的工作机理和作用。
2. 双脱氧测序法的原理。
3. 基因芯片的种类和工作原理。
4. PCR的工作原理。
问答：1. 研究DNA与蛋白质相互作用的方法有几种。
2. 如何提高外源基因片段在原核细胞中的表达量。
3 叙述功能基因组学的内容与意义。
名词： 脉冲电场电泳法
RNA保护（RNA protection）
（80%的题都出自这里）
1． 什么是基因工程？试述在农业生产上的意义。
2． 聚丙烯酰胺凝胶电泳与琼脂糖电泳在应用中有何不同和特点。
3． 双脱氧法测序的基本原理是什么？
4． SOUTHERN印迹的基本原理及其应用。
5． 试述两种转基因方法并说明其原理.
6． 双元载体的概念及其构件原理
7． AFLP的原理及其应用.
8． PLASMID和COSMID作为载体的特点.
9． 试述RFLP
10． 试述转座子标签法克隆目基因
11． 试述定位克隆技术
12． 试述RNA编辑.
13． 试述YAC
14． 试述染色体步移
15． 试述基因芯片
我想基因工程原理无非就是这些基本原理，2004年的论述题是获得一个克隆怎么研究功能，
生化题
一、 名词解释：
拼接体 异构酶 变构酶 锌指蛋白，RNAi ，Western blotting, RT-PCR,顺式作用元件，反式
作用因子，核酶，结构域，分子伴侣，复制体，蛋白质靶向到位
二、 问答题
1简述真核生物基因表达的主要调控环节和蛋白质合成后靶向运送的类型
2生物大分子之间的相互作用是生命现象的具体表现，试以蛋白质之间以及蛋白质与核酸分
子之间的相互作用为例加以说明
3真核与原核转录的区别
4生物膜有那些主要的生物功能清举例说明膜蛋白参与那些重要的生命过程
5酶调控是代谢调控的实质，为什么?酶水平调节层次
6何谓蛋白质的磷酸化和脱磷酸化，试以实例说明其对生长和发育的调节的作用
大题同2004基因工程题
向老外求全文的信函模板
来源于网上，版权归原作者天天所有。（已搜索，无重复）
根据作者E-mail地址，向作者索要。这是一种看似麻烦，实际非常有效的办法。为了更方便大家向作者索取原文，天天特意写了一份英文信函的模板，您只要把作者姓名、文章标题等等加上就成了。 拜托您使用时稍加改动，避免千篇一律。信的内容如下：
Dear Mr./Mrs.: ________（作者名）
I am a graduate student of NanJing Medical University in China. I major in "________"（您的专业）.
Recently, I found one of your articles, titled "__________" （文章名）in Medline. I found it may help me achieve my goals in this research field. This would make a really positive contribution to my work. I would like to be able to read the full text of this article. The abstract makes the article sound very interesting.
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Sincerely: ___________（您的名字）
My Email address is: ____________________ （你的email地址）
原创】sci论文写作经验
原创】sci论文写作经验 ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ 7654321(金币+8):多谢分享！
关于写SCI文章，我也向谈谈我的感受。我介绍一下我写SCI文章的具体过程。
1.要写一篇好的文章，思路的创新性和试验数据的可靠性是非常重要的两个条件
要想思路创新，有两种方法。
1）如果你个人对某个领域进行了多年的研究，在你的潜意识中觉得某些问题解
决的关键应该在于某个方面的深入研究，如果当时很少有人注意此方面研究，你
首先开始该方面的研究，那么你的文章就有很好的创新。但是用这种方法进行创
新性的前提是你在该领越有多年的研究经历。否则很有可能会导致研究的失败。
因为你认为有创新的东西可能是人家已经做过研究了（只是研究失败，所以没有报道），或者你的思路本身就是一个错误。所以如果你只是一个研究生，为了保证毕业的论文要求，我觉得还是走第二条路。
2）就是二次创新。举个例子。如果在最近三年有不同的作者发了两篇文章，一
篇文章报道因素A对提高玉米的抗逆性有很大影响，第二篇报道因素B对小麦的抗
逆性有很大影响。那么你就可以参考以上两个作者的研究方法，研究因素A和因
素B对水稻抗逆性的影响。这样做出来的文章一般情况下能够发在和以上两篇文
章档次差不多的杂志。
我就是按照第二种方法开展我的博士论文研究的。
要保证试验数据的可靠，首先你要选用在你的领域中普遍采用的试验方法，
最简单的方法，是找几篇和你搞的研究类似的SCI文章，参考他们的研究方法。
试验结束后，就要立即进行总结数据，写文章，我的步骤如下：
1.将所有的试验结果整理成图和表，尽力挖掘图和表中的信息，越多越好。在这
个过程中你尽可能和不同的研究人员探讨你的试验结果，因为不同的人对同一张
表和图有不同的看法。这样会给你写文章的思路。
2.分析完图表好，你应该找到你这个试验结果的Key point，一定要保证这个Key
point具有较大的新意，或者说一个到这个Key point 有一种振奋人心的感觉。
然后从所有图表中找出能够论证你这个Key point 的图和表。
合理安排你的图和表，如果可能的话尽可能用图。
Result以后，就是Discussion（这是一篇文章的精华）
可以将discussion分为若干段落，可以是并列关系或者递进关系。
但是要保证每一段都有一个主题，即每一段讨论一个主要话题。
这每一段中，要说明一下几点：
1）你的研究结果说明什么，有什么意义
2）你的研究结果和别人的类似研究结果有什么异同，如果不同的话，那么可以
讨论一些产生差异的可能原因。
3）如果你在研究结果中出现非常新的东西，用以前别人的理论很难解释，那么
你可以提出你的假设理论来解释试验中非常新的东西，一定要做到能自圆其说。
在Discussion的最后要总结一下，告诉别人你这个研究的几个主要结果。
之一-----指导思想、选题立项篇
指导思想 1、 追求卓越，在知识上要绝对专业，坚决反对侥幸心理。
2、 相信NSFC申请是公平的，大家靠实力竞争，必须花大力气写标书；如果你认为NSFC只有关系，你就不用继续往下看了。
3、 NSFC是一个系统工程，需要花很多时间和精力，而不仅仅是几页标书，是智慧沉淀的结晶。
4、 不要把NSFC看的高不可及，你要相信自己的创意，哪怕你只是一名一年级硕士生。
5、 机会主义是有的，但我们没有什么其它的资本，只能消灭标书里一切可能的失败因素，加上完美的选题和课题设计，彻底征服评委，不给评委任何黑掉你的机会。
6、 基金申请不同于实际研究课题设计，必须把个人兴趣与NSFC兴趣结合起来，投其所好。 选题立项
1、 基金申请成败关键还是选题要好，提前半年，刚入行的提前一年进行课题搜索。
2、 老板指定的题未必是好题，最好自己选题，如何立项应该是研究生学习最重要的一课，毕业后你会发现，没有人会指点你什么课题有价值了，在中国学术的沙漠里，只剩下你自己了。
3、 好课题是对学科深刻理解的条件下产生的，大量翻阅文献吧，汲取知识的同时千万别忘了思考，你发现别人存在漏洞的时候，好课题就离你不远了。
4、 选题最好以问题为导向，不要以技术为导向，找到问题了，课题就找到了。而拿着新技术去找需要解决的问题，效果多数不好，但还是大有人在，比如RNAi。
5、 解放思想，发散思维，多方法多学科交叉，一般都会比较受人青睐，容易申请到基金，但不能为了交叉而强行交叉。
6、 创新性新技术、新理论的课题要有一定的理论与技术基础，最好有工作基础，没有你也要东拼西凑，这是在中国，NSFC似乎讨厌空中楼阁。
7、 临床课题研究最好别选临床应用方向，而选应用基础研究。
8、 选择自己熟悉，有工作基础的领域，别跨越太远。你是在要钱，记住了，你不装的像一个行家，NSFC是不会给钱的。
9、 重要科学问题的切入点准确，切忌过宽、过大，只要体现一定的新意和研究价值就行了，能得诺贝尔奖的课题NSFC是不给钱的。
10、 没有人做过的课题不能做为立项的依据，但NSFC资助的项目必须是国际上没人做过的，而不是国内空白。 11、 如果是捕捉科研前沿性的课题，最好设计周密，尤其是目的和结果的一致性、可获得性和可预期性，通过课题实施所获得的结果必须能充分支持与研究目标相一致的结论。
12、 热点课题不一定是好课题，热点上的人也很热。但在还没热起来的热点，一定是一个好课题，标书评审滞后半年，比如最开始的一批SARS课题。有时也不防设计一些非热点但是对与科研有价值的课题，发挥出奇不意的效果。
13、 临床课题可以是当前没有好办法治疗的疾病，急需解决的临床问题，而在国际上检索的文献只有几篇的那种。
14、 本人不主张以最新的重量级文献做指导，你会发现，很多人跟你的想法惊人的一致。有人特别反对跟风。
15、 一定要到NSFC检索一下类似课题的历年资助情况，太多、太少都不好。最好是最近二年逐渐增加的资助领域。
之二-----立题依据篇
1、 题目要有新意，吸引人，既要概括主题，容易懂，又要有些少见的新词或缩写，调胃口。
2、 5000字左右，最多两页半，不包括文献，行距字体大小适中。
3、 国内外研究现状及分析一定要准确，甚至是中庸，绝不能偏激，不然不同意你的专家会
带着逆反心理看你标书，你死定了。
4、 课题研究的具体问题和研究意义，则必须说的声泪俱下。应该达到的境界是：连你自己
都认为这个课题不做就没有天理，尽管这个课题可能不咋样。当然如果有实力，可以解决关
键的科学性问题，那再好不过。然而课题意义不是最重要的，但常常被撰写得份量过重，课
题总体构想、大体实施方案及可能的预期结果才是人们最关心的。
5、 要把复杂的事说简单。既要论述充分，写作又要简练。剔除所有不必要的知识细节、理
论和概念，要舍得割肉才行。越简单，出错越少，专家不懂的越少（他们有时确实有知识盲
点）。有人主张“要让评委看过之后，感叹您idea的精妙，却不太明白您的理论依据”，我认
为在面上项目不太合适，在重点项目还可以。我赞同“写出来的理论，要让人家能欣赏”。“写
出来的理论，要让人家看不懂”，这份申请书很危险。
6、 立论依据要非常突出：理论性课题一定要有新观点，应用性一定要实用，与现有理论或
方法具有明显的先进性，总之要让人感觉到有意义。
7、 一定要有可预见的成果，至少画一张大饼，但看上去要象真的才行。基金委的专家是撒
把米就叫你下蛋的，如果你说：“吃完米，明儿再下”，那你就只有饿着了。
8、 任何重要的论点都要有文献标注，有文献就等于没有疑问。参考文献要新，最好是当年
的。而且一定要引上Science、Nature、Annual Reviews系列杂志的近期文献，增加自己立
论依据的权威性。最好包括已有工作基础，将已有相关结果以及发表的杂志列上，可以增加
可信度。
9、 一定多让本实验室的人修改，特别是中过基金的前辈，要改15遍以上才行。请外人修
改时要“防人之心不可无”。
10、 标书的评委参差不齐，评审意见也差异悬殊。好的标书最容易受到高水平评委的赏识，
只要你的题好，这些评委是好征服的。难就难在如何让水平差的评委通过你的标书。我认为
除了运气好，少碰到一些这样的评委之外，关键的一点就是让他们看懂你的标书；第二就是
标书不能太长，他是看不下去的；第三就是实验设计在不失科学性、先进性的条件下，尽可
能简单，千万别让他觉得你比他高很多，那样你死定了。所以一份好的标书是在高水平教授
和低水平教授之间的平衡，写的非常玄妙的标书通常中不了。
11、 评审专家通常是本专业的，也可能不是，尤其是交叉学科投递的项目，评审专家未必
对你的研究领域特别熟悉。所以尽可能少引入非常专业的概念，如果不可避免，也要解释清
楚。
12、 文字写作要有适当的弹性，不能把话说死，留有余地。因为你肯定会碰到不同意你课
题的专家，除非你运气实在好。对于赞同你课题的同行，只需证明你具备完成课题的实力就行了，这点容易做到。标书的目的其实就是征服对你课题不同意，甚至存在偏见的评审。所
以立题依据的写作实际上就是一种心理诱导过程（哈哈，骗子可能最拿手了），你开始的观
点应该处于偏见评委和你真实观点之间，稍偏你一方，处于容忍范围，他不会立即提出反对，
下一步再偏一点儿，逐渐下去到最后，他还是没提出反对，你就胜利了，要钱成功！
13、 本人不赞同把认为重要的句子字体增粗或下面打点以示关键，但这也许对于一些评委
管用。
之三-----研究方案、预期研究结果篇
研究方案篇 1、 研究目标要明确要精，提法要准确、恰当；内容要详细但文字不宜过多，且一定不能写得太具体。关键的问题要突出，一定要准确，且要有一定难度，但不必写的太具体，否则有时会出现mission impossible。
2、 可行性分析是你说服评委的第二次机会，可按成熟的理论基础（理论上可行）、研究目标在现有技术条件下的可实现性（技术上可行）、本单位现有技术设备实验材料的完备（设备材料可行）、课题组成员完成课题能力（知识技能上可行）等几方面分层论述。可以找一家比自己单位强的合作伙伴，把他们的软硬件条件也加进去。
3、 创新点要切合实际，要有所发挥，但语气要肯定，指出国际国内研究的先进性和创新性，点明理论和现实意义。
4、 研究内容要集中，与研究目标紧密一致，只做支撑课题最关键最必要的内容。不可为多作实验显示劳动量或增加预算而使研究内容过泛。
5、 实验方案和技术路线合理、可靠、可行，没漏洞是最重要的。思路好，材料独特，方法独特新颖，会增加获得资助的机会。技术当然是越新越好，但未必需要采用最时髦的研究手段，不能为了技术而研究。
6、 研究内容及方案切忌复杂，步骤最好有一流程图。研究方法、技术路线、实验方案不能太具体化，容易出漏洞。但你必须让评委认为你十分了解实验技术的整个过程，可以尽可能多的应用技术术语和技术缩写，写出主要实验材料和实验过程。
7、 技术方法一定是本实验是已经建立的，至少是有相关实验基础，或虚拟的基础。所有关键技术要有文献出处，最好是自己实验室发表的，有文献就等于没有疑问。如果本单位力量弱，可挂靠较强的研究机构，
从而使评审相信你能完成课题。关键实验材料必须已经具备，或可以获得。这些问题应该附有相应的证据。 预期结果篇 预期结果要考虑对基础和实用双重的价值。
以发表论文和申请专利结题比较容易。最好突出SCI收录杂志的影响因子，给基金委的专家们觉得，您的实力确实不一般。因为最终结题情况，是基金委专家们最关心的事情，他们当然愿意把基金支持能发表高水平文章的人。
之四-----工作基础、人员组成、个人简历篇
工作基础篇 1、 工作基础是你说服评委的第三次机会。课题科学先进、技术路线新颖合理可行、工作基础雄厚这三方面表述要紧密联系、前后呼应。
2、 一定要有基础。把实验室发表的所有文章搜集起来，找出与你设计课题相关的，只要沾边，都列上。自己最好在研究生一年级就发表综述，如果努力，第二年申请就来得及。如已发表高水平文章，基金申请基本没问题。文章与课题关系远一些无所谓，最好既相关，又不同。
3、 预实验结果很重要，而且是有硬data的结果，一定附上。但一定要慎重掌握，不要写的太多，评委会认为你的工作做的差不多了，没必要再申请基金了。只预期你的课题肯定有好的结果就行了。
4、 工作基础可以找个较强的合作单位，你就强壮起来了。
5、 有针对性地把研究队伍的相关工作经历、论文、成果等展示出来，但相关基金就最好别露富了。 人员组成篇 1、 主要成员6-10名，结构合理：高级研究人员（1-2人）；中级研究人员（2-3人）；技术人员及研究生（3-5人）
2、 参加人员技术力量的配备要合适，必须保证一定的劳动力。
3、 1名高职足够，多了浪费资源，现在NSFC限项很死的，我们的高职资源快耗竭了。
4、 中级人员是骨干，但在职的不要太多，1－2名。
5、 技术员2名左右，很重要呦，这是专业技术保障。
6、 研究生不能少于2名，这是主要劳力，地球人都知道。
7、 成员介绍要紧扣课题的研究内容和技术路线，既注重梯队、比例、技术力量等科研综合实力的展示，又注意与本课题相关
8、 最好不加入老先生，除非他是院士，答应给你基金。不过找个好的副高作课题指导，他的工作就相当于你的了。但恐怕他的基金还申请不过来呢，哪舍得把宝贵的名额给你呀。 个人简历篇 1、 申请者和项目组主要成员的学历和研究工作简历，近期已发表与本项目有关的主要论著目录和获得学术奖励情况及在本项目中承担的任务，所有复印件一定要附上，眼见才为实，别忘了扫描到电子版里去呦，评委看的是那个。
2、 申请者和项目组主要成员正在承担的科研项目情况，包括自然科学基金的项目，要注明项目的名称和编号、经费来源、起止年月、负责的内容等。完成的可以都列上，没结题的一定不要写了，基金委不同情富人，何况我们还是假装富的人。
3、 中级技术职称的推荐信或在职研究生申请项目的导师推荐信一定不要忘了。
4、 至于申请名分问题，就不好讲了，仔细研究申报指南吧，一切按常规，世界上就没有奇迹了。
5、 个人简历一定有针对性的倾向于课题方向，并与课题中各人的分工相一致。所从事的研究项目可适当给出，但不能过多，保证课题组有充足时间完成基金课题。
之五-----经费预算、摘要写作篇
经费预算篇 1、 要求按照《国家自然科学基金经费管理办法》认真填写，管理费：5 %
2、 2、 人员费：5 %雷打不动，人不值钱呀。
3、 实验材料费：60-70%必须占大头。
4、 仪器费
修了，NSFC舍不得。但如果有超过万元的仪器设备费，会给人研究条件不过硬的印象，基
金委当然希望把钱投到硬件条件好的单位，可以把基金用于刀刃上。
5、 了解当年NSFC资助力度，面上项目自由申请经费以此为标准
6、 实验材料开价要合理，不能狮子大开口。实验不够就把要求拉高些，技术先进些，二十
几万很快就能虚拟花光，很爽！但不能胡来，会死人的。败家要败得冠冕堂皇。 摘要写作
1、 摘要可能是标书最后写的部分了，但却是评委最先看的部分，很多标书在这一关就倒下
了。
2、 摘要字数少，但最忌讳写的平淡无奇。要激起评委浓厚的兴趣，要激发他万丈怒火，都
算胜利。哈哈，当然要努力后者。
3、 基于以上认识，摘要一定要语气坚定，旗帜鲜明，一反立题依据中的中庸之道。其实语
句的变化不大，只是删除有弹性的话就是了。
4、 摘要字数有限，资源宝贵，惜字如金，因此要特别注意重点突出，讲明现状、课题意义、
课题构想和预期结果。
5、 防止“头重脚轻”，削减一般性细节描述，多用概括性语句，讲明现状、课题意义、课题
构想和预期结果部分要相互平衡。 之六-----学科选口、善后工作篇
学科选口篇 1、 申报的方向和学部很重要，往往结果天壤之别。尽量避重就轻，在竞争不很激烈的领域申请，除非您有充分的把握。
2、 投到你老板能量比较集中的学科，是第一选择。
3、 仔细研读基金申报指南，洞悉各专业领域倾斜性项目和优先资助方向。
4、 仔细分析NSFC历年与你课题相关资助项目在各学科的分布，发现隔年资助或近几年资助递增学科，你基本找到钱在哪了。
5、 学科交叉鼓励，但尽可能投到你熟悉的学科。如果十分生疏，找个熟悉那学科的人作搭档，不然你会迷路的。 善后工作篇 1、 版面调整，清晰，层次分明，使版面简洁、易于阅读。
2、 坚决消灭错别字。
3、 完美5遍以上。
4、 合理行使基金委赋予的权利－回避制度自我保护，注意自己小领域的同行，防止个别在学术道德方面有些问题的评委把你黑掉。但你不能把所有同行都回避掉。
5、 仔细审查自己的申请人资格是否达到NSFC要求。
6、 仔细审查自己的项目组成人员（包括自己）有没有超项，同室撞车，害人害己。
7、 中国的国家自然科学基金当然由中国人审，如果你有充足的人缘，别浪费了这宝贵的资源，甚至很水的标书，也不要绝望，它很有机会变成黄金的。
3、