第33卷第7期中成药
Chinese Traditional Patent Medicine Vol．33No．7
升麻及其炮制品的HPLC 指纹图谱研究
*
王冰，张振秋，孙艳涛，李力，邓雪男（辽宁中医药大学药学院，辽宁大连116600）
摘要：目的RP-HPLC 法建立升麻指纹图谱。方法5μm ）色谱柱；流动相为采用Phenomsil BDS C 18（250mm ˑ 4．6mm ，
建立了升麻的HPLC
0．1%磷酸水溶液（B ）梯度洗脱，0 5min （88%A ʒ 12%B ），25min （80%A ʒ 20%B ），45min （70%A ʒ 30%B ），乙腈（A ）-60min （60%A ʒ 40%B ），检测波长316nm ，柱温40ħ ；体积流量1．0mL /min；进样量10μL 。结果指纹图谱，标定出15个共有指纹峰。结论参考依据。
关键词：升麻；指纹图谱中图分类号：R284．1
文献标志码：A
1528（2011）07-1106-04文章编号：1001-升麻药材的指纹图谱可用于升麻的定性鉴别，为升麻药材的质量控制提供
HPLC fingerprint of Cimicifuga and its processed products
WANG Bing ，ZHANG Zheng-qiu *，SUN Yan-tao ，LI Li ，DENG Xue-nan
（College of Pharmacy ，Liaoning Univesity of Traditional Chinese Medicine ，Dalian 116600，China ）
KEY WORDS ：Cimicifuga ；fingerprint
升麻为毛茛科植物大三叶升麻Cimicifuga hera-cleifolia Kom．、兴安升麻Cimicifuga dahurica （Turcz．）Maxim．或升麻Cimicifuga foetida L．的干燥《神农本草经》，茎。始载于列为上品。其味辛、微
性微寒。归肺、脾、胃、大肠经。具有发表透疹、甘，
清热解毒、升举阳气的功效。用于风热头痛，齿痛，口疮，咽喉肿痛，麻疹不透，阳毒发斑；脱肛，子宫脱垂
［1］
（上海奥豪斯公司）。
1．2试药异阿魏酸（中国药品生物制品检定所，
200602）。升麻药材经辽宁中医药大批号111698-学李峰教授鉴定均为正品药材。样品编号依次为1
10；升麻炒炭品由北京商品地生品依药典方法自样品编号为11；蜜炙品购自上海，样品编号为制，
12；来源、种类和收集时间见表1；水为重蒸馏水，甲
乙腈（天津市科密欧化学试剂有限公司，色谱醇、
纯），磷酸（天津市科密欧化学试剂有限公司，分析纯）。22．1
方法与结果
色谱条件Phenomsil BDS C 18（250mm ˑ 4．6mm ，5μm ）色谱柱；流动相：乙腈（A ）-0．1%磷酸水溶液（B ）（13ʒ 87）；流动相梯度：0 5min （88%A ʒ 12%B ），25min （80%A ʒ 20%B ），45min （70%A
60min （60%A ʒ 40%B ），ʒ 30%B ），检测波长为316nm ；柱温：40ħ ；体积流量：1．0mL /min。2．2
参照物溶液的制备取异阿魏酸对照品适量，
精密称定，置棕色量瓶中，加10%乙醇制成每1mL 含异阿魏酸202．8μg 的溶液，即得。
。升麻中含有有机酸、糖苷、色原酮、挥发油、
［2］
甾醇等多种类型的化学成分图谱的研究较多析
［10］
［3-4］
。当前对中药指纹
［9］
［5-6］［7-8］
，。主要有GC 和HPLC 法
对升麻的研究主要集中于定量测定麻的指纹图谱
价提供参考。1
［11］
和成分分
HPLC 法建立并分析升方面。本实验采用RP-，为升麻药材及其炮制品的质量评
仪器与试药
1．1仪器Agilent1100高效液相色谱仪（仪器编号：20041191DE43607375），配置四元梯度泵，在线VWD 检测器；Phenomsil BDS C 18（250mm ˑ 脱气机，4．6mm ，5μm ）色谱柱；METTLER AB135-S 十万分之一电子分析天平（瑞士）；AR2140电子分析天平
06-21收稿日期：2010-作者简介：王
mail ：wb20040312@163．com 冰（1982—），女，硕士生，研究方向：药物分析。E-
*通信作者：张振秋，E-mail ：zhangzhenqiu@sina．com 男，博士生导师，教授。Tel ：（0411）87586058，
1106
Tab．1
样品编号
1
[1**********]112
来源地黑龙江北京河北辽宁上海吉林山西山东江苏广东北京（炒炭）上海（蜜炙）
Cimicifuga from different resources
收集年月2009-102009-102009-032009-042009-092009-032009-042009-092009-092009-092009-102009-09
学名
大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．
升麻Cimicifuga foetida L．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．
升麻Cimicifuga foetida L．广东升麻Serratula chinensis S．Moore 大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．
升麻Cimicifuga foetida L．
2．3
供试品溶液的制备分别称取1 12号药材
精密称定，置50mL 烧瓶粉末（过2号筛）约1g ，
中，加入30%乙醇20mL ，密塞，加热回流1．5h ，放
冷，滤过，滤液置25mL 量瓶中，加30%乙醇稀释至
度良好。
2．6重复性实验
取5号样品5份，按样品制备方
法进行制备，在所建立的测定条件下测定，以异阿魏酸峰位参照峰，实验结果得出色谱图中各特征峰相对保留时间的RSD ＜0．19%；相对峰面积（特征峰
刻度，摇匀，取续滤液，即得。
2．4测定法在2．1项色谱条件下，分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μL ，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得。参照物和样品指纹图谱见图1
。
所占比例大于1%）的RSD ＜5%，表明方法的重复
性良好。2．7
稳定性实验取5号样品，按样品制备方法进
1、2、4、行制备，在所建立的测定条件下，分别在0、
8、12h 进行测定，实验结果表明各特征峰相对保留时间的RSD ＜0．17%，相对峰面积（特征峰所占比例大于1%）的RSD ＜5%，表明样品的稳定性良好。2．8
取除10号样品外的11批升麻样
按供试品制备方法，在2．1项色谱条件下，分别品，
测定结果
11批样品注入液相色谱仪，测定，精密吸取10μL ，
出峰总数及共有峰所占的比例见表2。
表2Tab．2
各样品的出峰总数及其共有峰所占比例Numbers of sample peaks and proportion of
common peaks
样品编号
1
234
来源地黑龙江北京河北辽宁上海吉林山西山东江苏北京（炒炭）上海（蜜炙）
出峰总数/个
28
[***********]42
共有峰所占比例/%
53．57
42．8626．3248．3938．4653．5748．3951．7246．8851．7230．95
A
B
567891112
图1对照品异阿魏酸（A ）和样品（B ）的HPLC 色谱Fig．1HPLC chromatograms of reference substances ：
iso-ferulate （A ），sample （B ）
2．5
精密度实验取5号样品，按样品制备方法进在所建立的测定条件下，连续进样5次，以行制备，
异阿魏酸峰位参照峰，实验结果得出色谱图中各特
征峰相对保留时间的RSD ＜0．27%；相对峰面积（特征峰所占比例大于1%）的RSD ＜5%，表明精密
使用Excel 2003按照相关系数公式和夹角余弦分析各个商品地及两种炮制品的保留时间
和峰面积，计算相似度，结果见表3、表4。
1107
公式
［12］
Tab．3
峰1峰2峰3峰4峰5峰6峰7峰8峰9峰10峰11峰12峰13峰14峰15
10．24830．35790．47660．76450．91031．00001．13611．35321．46651．49661．54611．71181．75032．09802．6942
20．24760．35740．47520．76430．91041．00001．13591．35401．46761．49851．54811．71421．75272．10132．69730．99890．9957
30．24730．35680．47380．76400．91021．00001．13541．35421．46781．51171．54881．71441．75342．10132．70030．99890．9958
The calculation result of cosine of the angle and correlation coefficient for relative retention times
40．24460．35650．47360．77550．91021．00001．13611．35551．46971．50001．54981．71611．75492．10552．70370．99890．9957
50．24170．35500．47160．75980．90981．00001．13671．35631．46961．50131．55131．71791．75692．10622．70660．99880．9958
60．25010．35810．47810．76800．91031．00001．13701．35201．46411．49301．54181．70551．74392．07162．67460．99910．9962
70．24570．35520．47330．76790．91021．00001．13761．35451．46881．49771．54691．71151．75012．09572．68770．99890．9960
80．24630．35700．47560．76570．91071．00001．13651．35171．46411．49371．54271．70681．74482．08892．67960．99900．9960
90．24750．35880．47910．76660．91131．00001．13631．35051．46221．49101．53971．70391．74172．08652．67060．99900．9960
110．24130．35620．47500．76140．91041．00001．13671．35361．46641．49601．54531．71001．74852．09602．68880．99890．9959
120．25030．36320．48200．78680．92251．00001．15021．37201．49271．51801．56861．73771．77660．00000．00000．81330．2146
对照模板0．24640．35740．47580．76770．91151．00001．13771．35521．46901．49981．54811．71361．75221．90462．44581．00001．0000
夹角余弦0．9989相关系数0．9957
注：对照模板一列为根据夹角余弦公式、相关系数公式计算所得的结果。
表4Tab．4
1
峰1峰2峰3峰4峰5峰6峰7峰8峰9峰10峰11峰12峰13峰14峰15
0．14230．02090．14000．06830．18801．00000．12750．23440．07600．15420．64400．32061．59440．04320．0365
20．10430．02430．12400．07600．18191．00000．12880．16000．05170．12090．61240．22351．25210．06310．04710．89220．8264
30．32480．05880．12700．08130．27811．00000．05720．06010．08530．55540．40590．12030．30210．32980．01940．88040．7506
各峰相对峰面积的夹角余弦和相关系数计算结果
The calculation result of cosine of the angle and correlation coefficient for relative peak areas
40．01350．01200．17130．01800．21181．00000．12330．08270．04930．09990．51620．16080．62080．05570．02860．95410．9410
50．18770．02870．09490．02210．15251．00000．04060．06260．07540．03460．18640．10210．42170．05610．04370．89910．8640
60．09210．01850．24660．04390．26821．00000．21240．09470．05540．22220．81450．10780．39040．05270．03240．94600．9073
70．08900．01870．23070．04640．26581．00000．19730．08800．05410．22360．84750．10620．39120．05630．03070．93820．8950
80．11680．02180．23750．02540．20281．00000．22910．23680．05640．12070．51250．17950．82880．06490．05430．96390．9358
90．17360．03420．33190．04000．28341．00000．13250．11140．06580．10520．50680．10770．34110．09690．04370．95920．9254
110．05170．01690．03760．02910．09581．00000．02150．03190．03180．03810．13150．07680．26600．01690．01950．84660．8469
120．15560．16032．56440．16871．22541．00003．41310．47350．21121．25290．15260．35000．14830．00000．00000．64020．3577
对照模板0．13200．03770．39140．05630．30491．00000．42580．14870．07390．26620．48460．16870．59610．07600．03231．00001．0000
夹角余弦0．8536相关系数0．7603
注：对照模板一列为根据夹角余弦公式、相关系数公式计算所得的结果。
10号样品的图谱中未出现参照物异阿魏酸峰，而在计算各峰相对保留时间和相对峰面积的夹角余
需要将样品中异阿魏酸峰的保留弦和相关系数时，
再将其他峰的保时间和峰面积作为1（作为分母），
留时间和峰面积与之相比，得出相对保留时间和相利用得到的数据计算出夹角余弦和相关对峰面积，
系数。所以10号样品无法根据异阿魏酸峰计算夹角余弦和相关系数。10号样品与其他样品比较（以1号样品为例），样品各峰的保留时间、与15个共有峰符合的峰数见表5。
1108
33．1
讨论
根据中华人民共和国药典中指纹图谱测定方
法，在选定的色谱条件下，建立了9个不同商品地升
麻HPLC 指纹图谱，标定出15个共有指纹峰；2个常用炮制品的HPLC 指纹图谱，炒炭升麻具有15个共有特征峰；蜜炙升麻只具有13个共有特征峰。将炮制品与生品的指纹图谱相比较可知，升麻经炮制前后出峰总数和峰面积不完全相同，说明有效成分发生了变化。
Tab．5
共有峰数的比较
The relative retention time of sample 1and num-bers of common peaks comparison between sam-ples 1and 10
保留时间/min样品1样品105．7056．4038．23310．9514．08717．50520．91621．7322．19122．97623．4823．85124．17326．103
5．178-7．86610．857----------保留时间/min
样品1样品1031．09132．733．69434．38535．52437．45537．73338．56539．3340．21647．83448．20356．16761．90115
------37．631-39．20440．159----6
而其他成分的峰面积显著减小甚至的峰面积增加，
消失。说明炮制前后升麻所含的化学成分发生改变，可以从图谱中看出。
3．6由广东商品地购买的升麻药材为菊科植物麻花头的根，主产于广东、福建等地，在当地习惯作升麻使用。其特征峰的数量以及所占的比例均小。本实验建立升麻的指纹图谱，而广东升麻与升麻不属于同种药材，所以在数据统计时未加入有关广东升麻（10号样品）的数据。根据实验建立的指纹图谱中特征峰种类和数目、共有峰相对保留时间差异等可对升麻进行定性鉴别、对同名不同物的药材加以区别。实验建立的指纹图谱可作为控制升麻及其炮制品内在质量的标准之一。
参考文献：
［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典：2010年版一部［S ］．
2010：68．北京：中国医药科技出版社，
［2］张庆文，叶文才，赵守训，等．兴安升麻的化学成分研究［J ］．
2002，（8）：683-685．中草药，
［3］王［4］周
．现微，康云鹰．论中药指纹图谱利弊及其应用前景［J ］．中医中锐．现代中药质量标准体系与中药指纹图谱［J ］2009，3（2）：70-72．代中医药，2007，7（4）：221．药，
［5］康春珍，康志英，孔颜霜，等．沉香药材GC 指纹图谱的研究
［J ］．广东药学院学报，2006，22（6）：610-623．
［6］李小妹，潭光华．石牌广藿香与海南广藿香挥发油的指纹图
．广东药学院学报，2007，22（6）：641-643．谱分析［J ］
［7］杨［8］陈［9］王
瑛，王实强，蔡光先．蒲黄药材HPLC 指纹图谱标准研究玉，郑
萍．川产葛根药材的HPLC 指纹图谱［J ］．华西
［J ］．中华中医药杂志，2008，23（5）：444-446．2008，23（2）：217-218．药学杂志，
冰，张振秋，孙艳涛．HPLC 切换波长法同时测定升麻中5J ］．药物分析杂志，2011，31（2）：391-394．种成分的含量［
［10］李从军，．药学学报，1994，李英和．升麻中的三萜类成分［J ］
29（6）：449-453．
［11］陈思妮，张振秋．广金钱草HPLC 指纹图谱的研究［J ］．中成
2008，30（9）：1249-1252．药，
［12］苗爱东，孙殿甲．Excel 2002在中药指纹谱相似度计算中的应
J ］．药学进展，2003，27（1）：51-54．用［
峰号[***********]4
峰号[***********]2425262728
符合指纹图谱共有注：1号样品中保留时间为22．976min 的峰为异阿魏酸峰，是指而10号样品中没有。纹图谱中的参照峰，
3．2
实验通过紫外可见分光光度法测定供试品溶液，发现在316nm 处有较大吸收，所以选择316nm
为检测波长。
3．3根据建立的指纹谱图，1 9批升麻药材的指纹图谱中15个共有峰相对保留时间符合程度较好，共有峰占总峰面积的90%以上；但各个峰的相对峰面积存在一定差异，说明不同来源的1 9批升麻药材质量是有差别的。3．4
从表2可知，各样品的非共有峰数差异较大，说明不同来源的升麻所含有的成分存在差别，这可能与药材生长的地理位置、环境、气候、采收季节和时间等因素有关。3．5
将北京和上海两地的生、炮制品进行比较：包括共有峰在内，蜜炙升麻中部分化学成分显著增加，异阿魏酸的峰面积有所减小；炒炭升麻中异阿魏酸
1109
第33卷第7期中成药
Chinese Traditional Patent Medicine Vol．33No．7
升麻及其炮制品的HPLC 指纹图谱研究
*
王冰，张振秋，孙艳涛，李力，邓雪男（辽宁中医药大学药学院，辽宁大连116600）
摘要：目的RP-HPLC 法建立升麻指纹图谱。方法5μm ）色谱柱；流动相为采用Phenomsil BDS C 18（250mm ˑ 4．6mm ，
建立了升麻的HPLC
0．1%磷酸水溶液（B ）梯度洗脱，0 5min （88%A ʒ 12%B ），25min （80%A ʒ 20%B ），45min （70%A ʒ 30%B ），乙腈（A ）-60min （60%A ʒ 40%B ），检测波长316nm ，柱温40ħ ；体积流量1．0mL /min；进样量10μL 。结果指纹图谱，标定出15个共有指纹峰。结论参考依据。
关键词：升麻；指纹图谱中图分类号：R284．1
文献标志码：A
1528（2011）07-1106-04文章编号：1001-升麻药材的指纹图谱可用于升麻的定性鉴别，为升麻药材的质量控制提供
HPLC fingerprint of Cimicifuga and its processed products
WANG Bing ，ZHANG Zheng-qiu *，SUN Yan-tao ，LI Li ，DENG Xue-nan
（College of Pharmacy ，Liaoning Univesity of Traditional Chinese Medicine ，Dalian 116600，China ）
KEY WORDS ：Cimicifuga ；fingerprint
升麻为毛茛科植物大三叶升麻Cimicifuga hera-cleifolia Kom．、兴安升麻Cimicifuga dahurica （Turcz．）Maxim．或升麻Cimicifuga foetida L．的干燥《神农本草经》，茎。始载于列为上品。其味辛、微
性微寒。归肺、脾、胃、大肠经。具有发表透疹、甘，
清热解毒、升举阳气的功效。用于风热头痛，齿痛，口疮，咽喉肿痛，麻疹不透，阳毒发斑；脱肛，子宫脱垂
［1］
（上海奥豪斯公司）。
1．2试药异阿魏酸（中国药品生物制品检定所，
200602）。升麻药材经辽宁中医药大批号111698-学李峰教授鉴定均为正品药材。样品编号依次为1
10；升麻炒炭品由北京商品地生品依药典方法自样品编号为11；蜜炙品购自上海，样品编号为制，
12；来源、种类和收集时间见表1；水为重蒸馏水，甲
乙腈（天津市科密欧化学试剂有限公司，色谱醇、
纯），磷酸（天津市科密欧化学试剂有限公司，分析纯）。22．1
方法与结果
色谱条件Phenomsil BDS C 18（250mm ˑ 4．6mm ，5μm ）色谱柱；流动相：乙腈（A ）-0．1%磷酸水溶液（B ）（13ʒ 87）；流动相梯度：0 5min （88%A ʒ 12%B ），25min （80%A ʒ 20%B ），45min （70%A
60min （60%A ʒ 40%B ），ʒ 30%B ），检测波长为316nm ；柱温：40ħ ；体积流量：1．0mL /min。2．2
参照物溶液的制备取异阿魏酸对照品适量，
精密称定，置棕色量瓶中，加10%乙醇制成每1mL 含异阿魏酸202．8μg 的溶液，即得。
。升麻中含有有机酸、糖苷、色原酮、挥发油、
［2］
甾醇等多种类型的化学成分图谱的研究较多析
［10］
［3-4］
。当前对中药指纹
［9］
［5-6］［7-8］
，。主要有GC 和HPLC 法
对升麻的研究主要集中于定量测定麻的指纹图谱
价提供参考。1
［11］
和成分分
HPLC 法建立并分析升方面。本实验采用RP-，为升麻药材及其炮制品的质量评
仪器与试药
1．1仪器Agilent1100高效液相色谱仪（仪器编号：20041191DE43607375），配置四元梯度泵，在线VWD 检测器；Phenomsil BDS C 18（250mm ˑ 脱气机，4．6mm ，5μm ）色谱柱；METTLER AB135-S 十万分之一电子分析天平（瑞士）；AR2140电子分析天平
06-21收稿日期：2010-作者简介：王
mail ：wb20040312@163．com 冰（1982—），女，硕士生，研究方向：药物分析。E-
*通信作者：张振秋，E-mail ：zhangzhenqiu@sina．com 男，博士生导师，教授。Tel ：（0411）87586058，
1106
Tab．1
样品编号
1
[1**********]112
来源地黑龙江北京河北辽宁上海吉林山西山东江苏广东北京（炒炭）上海（蜜炙）
Cimicifuga from different resources
收集年月2009-102009-102009-032009-042009-092009-032009-042009-092009-092009-092009-102009-09
学名
大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．
升麻Cimicifuga foetida L．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．
升麻Cimicifuga foetida L．广东升麻Serratula chinensis S．Moore 大三叶升麻Cimicifuga heracleifolia Kom．
升麻Cimicifuga foetida L．
2．3
供试品溶液的制备分别称取1 12号药材
精密称定，置50mL 烧瓶粉末（过2号筛）约1g ，
中，加入30%乙醇20mL ，密塞，加热回流1．5h ，放
冷，滤过，滤液置25mL 量瓶中，加30%乙醇稀释至
度良好。
2．6重复性实验
取5号样品5份，按样品制备方
法进行制备，在所建立的测定条件下测定，以异阿魏酸峰位参照峰，实验结果得出色谱图中各特征峰相对保留时间的RSD ＜0．19%；相对峰面积（特征峰
刻度，摇匀，取续滤液，即得。
2．4测定法在2．1项色谱条件下，分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μL ，注入液相色谱仪，测定，记录色谱图，即得。参照物和样品指纹图谱见图1
。
所占比例大于1%）的RSD ＜5%，表明方法的重复
性良好。2．7
稳定性实验取5号样品，按样品制备方法进
1、2、4、行制备，在所建立的测定条件下，分别在0、
8、12h 进行测定，实验结果表明各特征峰相对保留时间的RSD ＜0．17%，相对峰面积（特征峰所占比例大于1%）的RSD ＜5%，表明样品的稳定性良好。2．8
取除10号样品外的11批升麻样
按供试品制备方法，在2．1项色谱条件下，分别品，
测定结果
11批样品注入液相色谱仪，测定，精密吸取10μL ，
出峰总数及共有峰所占的比例见表2。
表2Tab．2
各样品的出峰总数及其共有峰所占比例Numbers of sample peaks and proportion of
common peaks
样品编号
1
234
来源地黑龙江北京河北辽宁上海吉林山西山东江苏北京（炒炭）上海（蜜炙）
出峰总数/个
28
[***********]42
共有峰所占比例/%
53．57
42．8626．3248．3938．4653．5748．3951．7246．8851．7230．95
A
B
567891112
图1对照品异阿魏酸（A ）和样品（B ）的HPLC 色谱Fig．1HPLC chromatograms of reference substances ：
iso-ferulate （A ），sample （B ）
2．5
精密度实验取5号样品，按样品制备方法进在所建立的测定条件下，连续进样5次，以行制备，
异阿魏酸峰位参照峰，实验结果得出色谱图中各特
征峰相对保留时间的RSD ＜0．27%；相对峰面积（特征峰所占比例大于1%）的RSD ＜5%，表明精密
使用Excel 2003按照相关系数公式和夹角余弦分析各个商品地及两种炮制品的保留时间
和峰面积，计算相似度，结果见表3、表4。
1107
公式
［12］
Tab．3
峰1峰2峰3峰4峰5峰6峰7峰8峰9峰10峰11峰12峰13峰14峰15
10．24830．35790．47660．76450．91031．00001．13611．35321．46651．49661．54611．71181．75032．09802．6942
20．24760．35740．47520．76430．91041．00001．13591．35401．46761．49851．54811．71421．75272．10132．69730．99890．9957
30．24730．35680．47380．76400．91021．00001．13541．35421．46781．51171．54881．71441．75342．10132．70030．99890．9958
The calculation result of cosine of the angle and correlation coefficient for relative retention times
40．24460．35650．47360．77550．91021．00001．13611．35551．46971．50001．54981．71611．75492．10552．70370．99890．9957
50．24170．35500．47160．75980．90981．00001．13671．35631．46961．50131．55131．71791．75692．10622．70660．99880．9958
60．25010．35810．47810．76800．91031．00001．13701．35201．46411．49301．54181．70551．74392．07162．67460．99910．9962
70．24570．35520．47330．76790．91021．00001．13761．35451．46881．49771．54691．71151．75012．09572．68770．99890．9960
80．24630．35700．47560．76570．91071．00001．13651．35171．46411．49371．54271．70681．74482．08892．67960．99900．9960
90．24750．35880．47910．76660．91131．00001．13631．35051．46221．49101．53971．70391．74172．08652．67060．99900．9960
110．24130．35620．47500．76140．91041．00001．13671．35361．46641．49601．54531．71001．74852．09602．68880．99890．9959
120．25030．36320．48200．78680．92251．00001．15021．37201．49271．51801．56861．73771．77660．00000．00000．81330．2146
对照模板0．24640．35740．47580．76770．91151．00001．13771．35521．46901．49981．54811．71361．75221．90462．44581．00001．0000
夹角余弦0．9989相关系数0．9957
注：对照模板一列为根据夹角余弦公式、相关系数公式计算所得的结果。
表4Tab．4
1
峰1峰2峰3峰4峰5峰6峰7峰8峰9峰10峰11峰12峰13峰14峰15
0．14230．02090．14000．06830．18801．00000．12750．23440．07600．15420．64400．32061．59440．04320．0365
20．10430．02430．12400．07600．18191．00000．12880．16000．05170．12090．61240．22351．25210．06310．04710．89220．8264
30．32480．05880．12700．08130．27811．00000．05720．06010．08530．55540．40590．12030．30210．32980．01940．88040．7506
各峰相对峰面积的夹角余弦和相关系数计算结果
The calculation result of cosine of the angle and correlation coefficient for relative peak areas
40．01350．01200．17130．01800．21181．00000．12330．08270．04930．09990．51620．16080．62080．05570．02860．95410．9410
50．18770．02870．09490．02210．15251．00000．04060．06260．07540．03460．18640．10210．42170．05610．04370．89910．8640
60．09210．01850．24660．04390．26821．00000．21240．09470．05540．22220．81450．10780．39040．05270．03240．94600．9073
70．08900．01870．23070．04640．26581．00000．19730．08800．05410．22360．84750．10620．39120．05630．03070．93820．8950
80．11680．02180．23750．02540．20281．00000．22910．23680．05640．12070．51250．17950．82880．06490．05430．96390．9358
90．17360．03420．33190．04000．28341．00000．13250．11140．06580．10520．50680．10770．34110．09690．04370．95920．9254
110．05170．01690．03760．02910．09581．00000．02150．03190．03180．03810．13150．07680．26600．01690．01950．84660．8469
120．15560．16032．56440．16871．22541．00003．41310．47350．21121．25290．15260．35000．14830．00000．00000．64020．3577
对照模板0．13200．03770．39140．05630．30491．00000．42580．14870．07390．26620．48460．16870．59610．07600．03231．00001．0000
夹角余弦0．8536相关系数0．7603
注：对照模板一列为根据夹角余弦公式、相关系数公式计算所得的结果。
10号样品的图谱中未出现参照物异阿魏酸峰，而在计算各峰相对保留时间和相对峰面积的夹角余
需要将样品中异阿魏酸峰的保留弦和相关系数时，
再将其他峰的保时间和峰面积作为1（作为分母），
留时间和峰面积与之相比，得出相对保留时间和相利用得到的数据计算出夹角余弦和相关对峰面积，
系数。所以10号样品无法根据异阿魏酸峰计算夹角余弦和相关系数。10号样品与其他样品比较（以1号样品为例），样品各峰的保留时间、与15个共有峰符合的峰数见表5。
1108
33．1
讨论
根据中华人民共和国药典中指纹图谱测定方
法，在选定的色谱条件下，建立了9个不同商品地升
麻HPLC 指纹图谱，标定出15个共有指纹峰；2个常用炮制品的HPLC 指纹图谱，炒炭升麻具有15个共有特征峰；蜜炙升麻只具有13个共有特征峰。将炮制品与生品的指纹图谱相比较可知，升麻经炮制前后出峰总数和峰面积不完全相同，说明有效成分发生了变化。
Tab．5
共有峰数的比较
The relative retention time of sample 1and num-bers of common peaks comparison between sam-ples 1and 10
保留时间/min样品1样品105．7056．4038．23310．9514．08717．50520．91621．7322．19122．97623．4823．85124．17326．103
5．178-7．86610．857----------保留时间/min
样品1样品1031．09132．733．69434．38535．52437．45537．73338．56539．3340．21647．83448．20356．16761．90115
------37．631-39．20440．159----6
而其他成分的峰面积显著减小甚至的峰面积增加，
消失。说明炮制前后升麻所含的化学成分发生改变，可以从图谱中看出。
3．6由广东商品地购买的升麻药材为菊科植物麻花头的根，主产于广东、福建等地，在当地习惯作升麻使用。其特征峰的数量以及所占的比例均小。本实验建立升麻的指纹图谱，而广东升麻与升麻不属于同种药材，所以在数据统计时未加入有关广东升麻（10号样品）的数据。根据实验建立的指纹图谱中特征峰种类和数目、共有峰相对保留时间差异等可对升麻进行定性鉴别、对同名不同物的药材加以区别。实验建立的指纹图谱可作为控制升麻及其炮制品内在质量的标准之一。
参考文献：
［1］国家药典委员会．中华人民共和国药典：2010年版一部［S ］．
2010：68．北京：中国医药科技出版社，
［2］张庆文，叶文才，赵守训，等．兴安升麻的化学成分研究［J ］．
2002，（8）：683-685．中草药，
［3］王［4］周
．现微，康云鹰．论中药指纹图谱利弊及其应用前景［J ］．中医中锐．现代中药质量标准体系与中药指纹图谱［J ］2009，3（2）：70-72．代中医药，2007，7（4）：221．药，
［5］康春珍，康志英，孔颜霜，等．沉香药材GC 指纹图谱的研究
［J ］．广东药学院学报，2006，22（6）：610-623．
［6］李小妹，潭光华．石牌广藿香与海南广藿香挥发油的指纹图
．广东药学院学报，2007，22（6）：641-643．谱分析［J ］
［7］杨［8］陈［9］王
瑛，王实强，蔡光先．蒲黄药材HPLC 指纹图谱标准研究玉，郑
萍．川产葛根药材的HPLC 指纹图谱［J ］．华西
［J ］．中华中医药杂志，2008，23（5）：444-446．2008，23（2）：217-218．药学杂志，
冰，张振秋，孙艳涛．HPLC 切换波长法同时测定升麻中5J ］．药物分析杂志，2011，31（2）：391-394．种成分的含量［
［10］李从军，．药学学报，1994，李英和．升麻中的三萜类成分［J ］
29（6）：449-453．
［11］陈思妮，张振秋．广金钱草HPLC 指纹图谱的研究［J ］．中成
2008，30（9）：1249-1252．药，
［12］苗爱东，孙殿甲．Excel 2002在中药指纹谱相似度计算中的应
J ］．药学进展，2003，27（1）：51-54．用［
峰号[***********]4
峰号[***********]2425262728
符合指纹图谱共有注：1号样品中保留时间为22．976min 的峰为异阿魏酸峰，是指而10号样品中没有。纹图谱中的参照峰，
3．2
实验通过紫外可见分光光度法测定供试品溶液，发现在316nm 处有较大吸收，所以选择316nm
为检测波长。
3．3根据建立的指纹谱图，1 9批升麻药材的指纹图谱中15个共有峰相对保留时间符合程度较好，共有峰占总峰面积的90%以上；但各个峰的相对峰面积存在一定差异，说明不同来源的1 9批升麻药材质量是有差别的。3．4
从表2可知，各样品的非共有峰数差异较大，说明不同来源的升麻所含有的成分存在差别，这可能与药材生长的地理位置、环境、气候、采收季节和时间等因素有关。3．5
将北京和上海两地的生、炮制品进行比较：包括共有峰在内，蜜炙升麻中部分化学成分显著增加，异阿魏酸的峰面积有所减小；炒炭升麻中异阿魏酸
1109