课程名称: 细胞生物学实验 指导老师: 实验日期:
院(系): 专业班级: 实验地点:
学生姓名: 学号:
实验项目名称: 小鼠骨髓细胞染色体标本制备
一、目的:
初步掌握小鼠骨髓细胞染色体制作方法。
二、原理:
小鼠→秋水仙素处理→骨髓细胞→低渗处理→固定→滴片→染色→观察
三、实验用品:
(1)试剂:200ug/ml秋水仙素溶液,0.075mol/L KCl低渗液、甲醇溶液、冰醋酸溶液、pH6.8磷酸缓冲液、Giemsa 原液、生理盐水。
(2)仪器:解剖板、解剖剪、大小镊子、吸管、离心管、注射器、离心机、培养皿、恒温水浴锅、量筒、预冷载玻片、酒精灯、普通天平、香柏油、二甲苯、擦镜纸。
(3)材料:小鼠
四、操作要点:
小鼠→秋水仙素2-3h →脱臼法处死→取四肢骨去肌肉(爪)→生理盐水洗净→剪碎入离心管→KCl 2ml→振荡器30s →加KCl 3ml→37℃水浴15min →甲醇:乙酸固定液1ml →手动混匀→静置1min →3000rpm 6min→弃上清液→加固定液3ml →手动摇匀→静置5min →3000rpm 6min→弃上清液→加固定液0.5ml →混匀→滴片(冰片 距离)→过火(勿过热)→干燥→入Giemsa 8min→水洗→干燥→镜检
五、观察人体细胞染色体标本片
六、结果与讨论:
课程名称: 细胞生物学实验 指导老师: 实验日期:
院(系): 专业班级: 实验地点:
学生姓名: 学号:
实验项目名称: 小鼠骨髓细胞染色体标本制备
一、目的:
初步掌握小鼠骨髓细胞染色体制作方法。
二、原理:
小鼠→秋水仙素处理→骨髓细胞→低渗处理→固定→滴片→染色→观察
三、实验用品:
(1)试剂:200ug/ml秋水仙素溶液,0.075mol/L KCl低渗液、甲醇溶液、冰醋酸溶液、pH6.8磷酸缓冲液、Giemsa 原液、生理盐水。
(2)仪器:解剖板、解剖剪、大小镊子、吸管、离心管、注射器、离心机、培养皿、恒温水浴锅、量筒、预冷载玻片、酒精灯、普通天平、香柏油、二甲苯、擦镜纸。
(3)材料:小鼠
四、操作要点:
小鼠→秋水仙素2-3h →脱臼法处死→取四肢骨去肌肉(爪)→生理盐水洗净→剪碎入离心管→KCl 2ml→振荡器30s →加KCl 3ml→37℃水浴15min →甲醇:乙酸固定液1ml →手动混匀→静置1min →3000rpm 6min→弃上清液→加固定液3ml →手动摇匀→静置5min →3000rpm 6min→弃上清液→加固定液0.5ml →混匀→滴片(冰片 距离)→过火(勿过热)→干燥→入Giemsa 8min→水洗→干燥→镜检
五、观察人体细胞染色体标本片
六、结果与讨论: