实验五葡萄糖注射液的含量测定(旋光法)
一、目的要求
1. 掌握旋光法测定葡萄糖注射液含量的原理、方法及计算。2. 学会使用自动旋光仪。
二、仪器与试剂
仪器:自动旋光仪
试剂:葡萄糖注射液
三、方法原理
葡萄糖分子结构中有多个不对称碳原子,具有旋光性,为右旋体。一定条件下的旋光度是旋光性物质的特性常数,测定葡萄糖的比旋度,可以鉴别药物,也可以反映药物的纯杂程度。旋光度(α)与溶液的浓度(c )和偏振光透过溶液的厚度(L )成正比。当偏振光通过厚1dm 且每1ml 中含有旋光性物质1g 的溶液,使用光线波长为钠光D 线(589.3nm ),测定温度为t ℃时,测得的旋光度称为该物质的比旋度,以[α]=α/Lc。
无水葡萄糖的比旋度为+52.75,按下式计算无水葡萄糖的浓度:无水葡萄糖浓度(c )=100α/[α]L, 如果换算成一水葡萄糖浓度(c ˊ)时,则应为:
198. 17(一水葡萄糖的分子量)
c ˊ=c ×180. 16(无水葡萄糖的分子量) =1.0426×c
所以,测定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含量。
四、旋光仪的使用方法
(1)将仪器电源插头插入220V 交流电源,并将接地脚可靠接
地。
(2)打开电源开关,这时钠光灯应启亮,需经5min 钠光灯预热,使之发光稳定。
(3)打开电源开关(若光源开关打开后,钠光灯熄灭,则再将光源开关上下重复打开1到2次,使钠光灯在直流下点亮,为正常)。
(4)打开测量开关,这时数码管应有数字显示。
(5)将装有蒸馏水或其他空白溶剂的试管放入样品室,盖上箱盖,待示数稳定后,按清零按钮。试管中若有气泡,应先让气泡浮在凸颈处。通光面两端的雾状水滴,应用软布揩干。试管螺帽不宜旋得过紧,以免产生应为,影响读数。试管安放时应注意标记的位置和方向。
(6)取出试管,将待测样品注入试管,按相同的位置和方向放入样品室内,盖好箱盖。仪器数显窗将显示出该样品的旋光度。
(7)逐次按下复测按钮,重复读几次数,取平均值作为样品的测定结果。
(8)如样品超过测量范围,仪器在±45处来回振荡。此时,取出试管,打开箱盖按箱内回零按钮,仪器即自动转回零位。
(9)仪器使用完毕后,应依次关闭测量、光源、电源开关。(10)钠灯在直流供电系统出现故障不能使用时,仪器也可在钠灯交流供电的情况下测试,但仪器的性能可能略有降低。
(11)当放入小角度样品(小于0.5°)时,示数可能变化,这时只要按复测按钮,就会出现新的数字。
五、操作步骤
1. 调整零点将旋光管用蒸馏水冲洗数次,缓缓注满蒸馏水(注意勿使发生气泡),小心盖上玻璃片、橡胶垫和螺帽,旋紧旋光管两端螺帽时,不应用力过大以免产生应力,造成误差,然后以软布或擦镜纸揩干、擦净,认定方向将旋光管置于旋光计内,调整零点。
2. 测定将旋光管用供试液冲洗数次,按上述同样方式装入供试液并按同一方向置于旋光计内,同法读取旋光度3次,取其平均值。
六、实验结果
1. 数据记录
葡萄糖
α
α平均值
L=
2. 结果计算
六、注意事项
1. 钠光灯启辉后至少30min 后发光才能稳定,测定或读数时应在发光稳定后进行。
2. 测定时应调节温度至20℃±0.5℃。
3. 供试液应不显浑浊或含有混悬的小粒,否则应预先过滤并弃去初滤液。
4. 测定结束后须将测定管洗净晾干,不许将盛有供试品的测试管长时间置于仪器样品室内;仪器不使用时样品室可放硅胶吸潮。123
实验五葡萄糖注射液的含量测定(旋光法)
一、目的要求
1. 掌握旋光法测定葡萄糖注射液含量的原理、方法及计算。2. 学会使用自动旋光仪。
二、仪器与试剂
仪器:自动旋光仪
试剂:葡萄糖注射液
三、方法原理
葡萄糖分子结构中有多个不对称碳原子,具有旋光性,为右旋体。一定条件下的旋光度是旋光性物质的特性常数,测定葡萄糖的比旋度,可以鉴别药物,也可以反映药物的纯杂程度。旋光度(α)与溶液的浓度(c )和偏振光透过溶液的厚度(L )成正比。当偏振光通过厚1dm 且每1ml 中含有旋光性物质1g 的溶液,使用光线波长为钠光D 线(589.3nm ),测定温度为t ℃时,测得的旋光度称为该物质的比旋度,以[α]=α/Lc。
无水葡萄糖的比旋度为+52.75,按下式计算无水葡萄糖的浓度:无水葡萄糖浓度(c )=100α/[α]L, 如果换算成一水葡萄糖浓度(c ˊ)时,则应为:
198. 17(一水葡萄糖的分子量)
c ˊ=c ×180. 16(无水葡萄糖的分子量) =1.0426×c
所以,测定葡萄糖溶液的旋光度可以求得其含量。
四、旋光仪的使用方法
(1)将仪器电源插头插入220V 交流电源,并将接地脚可靠接
地。
(2)打开电源开关,这时钠光灯应启亮,需经5min 钠光灯预热,使之发光稳定。
(3)打开电源开关(若光源开关打开后,钠光灯熄灭,则再将光源开关上下重复打开1到2次,使钠光灯在直流下点亮,为正常)。
(4)打开测量开关,这时数码管应有数字显示。
(5)将装有蒸馏水或其他空白溶剂的试管放入样品室,盖上箱盖,待示数稳定后,按清零按钮。试管中若有气泡,应先让气泡浮在凸颈处。通光面两端的雾状水滴,应用软布揩干。试管螺帽不宜旋得过紧,以免产生应为,影响读数。试管安放时应注意标记的位置和方向。
(6)取出试管,将待测样品注入试管,按相同的位置和方向放入样品室内,盖好箱盖。仪器数显窗将显示出该样品的旋光度。
(7)逐次按下复测按钮,重复读几次数,取平均值作为样品的测定结果。
(8)如样品超过测量范围,仪器在±45处来回振荡。此时,取出试管,打开箱盖按箱内回零按钮,仪器即自动转回零位。
(9)仪器使用完毕后,应依次关闭测量、光源、电源开关。(10)钠灯在直流供电系统出现故障不能使用时,仪器也可在钠灯交流供电的情况下测试,但仪器的性能可能略有降低。
(11)当放入小角度样品(小于0.5°)时,示数可能变化,这时只要按复测按钮,就会出现新的数字。
五、操作步骤
1. 调整零点将旋光管用蒸馏水冲洗数次,缓缓注满蒸馏水(注意勿使发生气泡),小心盖上玻璃片、橡胶垫和螺帽,旋紧旋光管两端螺帽时,不应用力过大以免产生应力,造成误差,然后以软布或擦镜纸揩干、擦净,认定方向将旋光管置于旋光计内,调整零点。
2. 测定将旋光管用供试液冲洗数次,按上述同样方式装入供试液并按同一方向置于旋光计内,同法读取旋光度3次,取其平均值。
六、实验结果
1. 数据记录
葡萄糖
α
α平均值
L=
2. 结果计算
六、注意事项
1. 钠光灯启辉后至少30min 后发光才能稳定,测定或读数时应在发光稳定后进行。
2. 测定时应调节温度至20℃±0.5℃。
3. 供试液应不显浑浊或含有混悬的小粒,否则应预先过滤并弃去初滤液。
4. 测定结束后须将测定管洗净晾干,不许将盛有供试品的测试管长时间置于仪器样品室内;仪器不使用时样品室可放硅胶吸潮。123