半胱氨酸（cysteine，Cys）含量测定试剂盒使用说明
微量法100T/96S
货号:BC0185
规格:100T/96S
产品内容：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。用前1天，向试剂三中加2.5mL 蒸馏水充分溶解，再加磷酸0.625mL，混匀后盖紧（防止水分散失）沸水浴2h；冷却后加10mL 蒸馏水，4℃可保存2周。
标准品：液体×1瓶，1μmol/mL标准液，4℃保存。
产品说明：
蛋白质含有三种含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中，Cys是唯一一种含有巯基的含硫氨基酸，从甲硫氨酸转化而来，并且可与胱氨酸互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成，经常是蛋白质活性中心的组成部分，还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外，Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面，在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性，并且补充巯基，以维持皮肤的正常代谢，调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。
Cys 还原磷钨酸生成钨蓝，在600nm 处有吸收峰；通过600nm 吸光度，计算Cys 含量。试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、磷酸和蒸馏水。
操作步骤：
一、半胱氨酸提取：
1、液体样品中半胱氨酸提取：取0.1mL 液体样品，加试剂一0.9mL，充分混匀，11000rpm 4℃离心10min，取上清液，待测。
2、组织中半胱氨酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，11000rpm 4℃离心10min，取上清液待测。
3、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 试剂
一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；11000rpm，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定操作：
1、分光光度计预热30min 以上，调节波长到600nm，蒸馏水调零。
2、空白管：取1mL 玻璃比色皿，加入20μL蒸馏水，100μL试剂二，100μL试剂三，混匀后室温静置15min，于600nm 处测定吸光值，记为A 空白管。
3、标准管：取1mL 玻璃比色皿，加入20μL标准液，100μL试剂二，100μL试剂三，混匀后室温静置15min，于600nm 处测定吸光值，记为A 标准管。
4、测定管：取1mL 玻璃比色皿，加入20μL上清液，100μL试剂二，100μL试剂三，混匀后室温静置15min，于600nm 处测定吸光值，记为A 测定管。
半胱氨酸含量计算：
1、按液体样品的体积计算：
半胱氨酸含量（μmol/mL）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A
空白管)]×（V样总÷V样）=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)
2、按样本质量计算：
半胱氨酸含量（μmol/g）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×（V样总÷V样）÷W=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷W
3、按照蛋白浓度计算：半胱氨酸含量（μmol/mgprot）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]÷（V样×Cpr）=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷Cpr
4、按细胞数量计算：
氨基酸含量（μmol/104cell）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×（V样总÷V样×细胞数量）=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷细胞数量
C 标准品：标准品浓度，1μmol/mL；V标准品：反应体系中加入标准品体积，0.02mL；V样：反应体系中加入样品提取液体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL。W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。
半胱氨酸（cysteine，Cys）含量测定试剂盒使用说明
微量法100T/96S
货号:BC0185
规格:100T/96S
产品内容：
试剂一：液体×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体×1瓶，4℃保存。
试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存。用前1天，向试剂三中加2.5mL 蒸馏水充分溶解，再加磷酸0.625mL，混匀后盖紧（防止水分散失）沸水浴2h；冷却后加10mL 蒸馏水，4℃可保存2周。
标准品：液体×1瓶，1μmol/mL标准液，4℃保存。
产品说明：
蛋白质含有三种含硫氨基酸：甲硫氨酸、胱氨酸和Cys。其中，Cys是唯一一种含有巯基的含硫氨基酸，从甲硫氨酸转化而来，并且可与胱氨酸互相转化。Cys参与蛋白质二硫键的形成，经常是蛋白质活性中心的组成部分，还可以为其它生理生化反应提供巯基。此外，Cys大量积聚在皮肤和粘膜表面，在角蛋白生成中维持重要的巯基酶的活性，并且补充巯基，以维持皮肤的正常代谢，调节表皮最下层的色素细胞生成的底层黑色素。具有美白、解毒、改善炎症和过敏性皮肤等作用。
Cys 还原磷钨酸生成钨蓝，在600nm 处有吸收峰；通过600nm 吸光度，计算Cys 含量。试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、可调式移液枪、微量石英比色皿/96孔板、磷酸和蒸馏水。
操作步骤：
一、半胱氨酸提取：
1、液体样品中半胱氨酸提取：取0.1mL 液体样品，加试剂一0.9mL，充分混匀，11000rpm 4℃离心10min，取上清液，待测。
2、组织中半胱氨酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g 组织，加入1mL 试剂一）进行冰浴匀浆，11000rpm 4℃离心10min，取上清液待测。
3、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 试剂
一），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；11000rpm，4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
二、测定操作：
1、分光光度计预热30min 以上，调节波长到600nm，蒸馏水调零。
2、空白管：取1mL 玻璃比色皿，加入20μL蒸馏水，100μL试剂二，100μL试剂三，混匀后室温静置15min，于600nm 处测定吸光值，记为A 空白管。
3、标准管：取1mL 玻璃比色皿，加入20μL标准液，100μL试剂二，100μL试剂三，混匀后室温静置15min，于600nm 处测定吸光值，记为A 标准管。
4、测定管：取1mL 玻璃比色皿，加入20μL上清液，100μL试剂二，100μL试剂三，混匀后室温静置15min，于600nm 处测定吸光值，记为A 测定管。
半胱氨酸含量计算：
1、按液体样品的体积计算：
半胱氨酸含量（μmol/mL）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A
空白管)]×（V样总÷V样）=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)
2、按样本质量计算：
半胱氨酸含量（μmol/g）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×（V样总÷V样）÷W=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷W
3、按照蛋白浓度计算：半胱氨酸含量（μmol/mgprot）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]÷（V样×Cpr）=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷Cpr
4、按细胞数量计算：
氨基酸含量（μmol/104cell）=[C标准品×V标准品×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×（V样总÷V样×细胞数量）=1×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)÷细胞数量
C 标准品：标准品浓度，1μmol/mL；V标准品：反应体系中加入标准品体积，0.02mL；V样：反应体系中加入样品提取液体积，0.02mL；V样总：加入提取液体积，1mL。W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL。