血液科-标本采集的操作和取材单

血液科标本保存

血液标本采集和保存标准流程

一、目的

血液是容易得到的生物资源,可能是正常病人唯一可得到的资源。标本库主要贮存血清、血浆和白细胞层。标准化的采集和贮存步骤可以保证提供高质量的标本。

二、权限

1. 只采集签写知情同意书的患者,并确定采集的时间

2. 血液只能在生物安全级别2(含或以上)的实验室操作,血液只能由受过培 训的人员操作,所有操作按照生物安全标准进行

3. 在采集到供者血液的30分钟内处理血液标本

4. 在采血前,将供者的信息录入标本库的信息系统

三、使用范围

标本库的组成人员及经审批授予使用权限的人员。

四、材料和设备

血液采集盒包括:医用(5ml和10ml)一次性注射器、 一次性乳胶手套、止血带、碘酒、无菌拭子、血清储藏管、标本标签、创可贴、可封口塑料袋、标本采集表格、带有冰袋的冰壶、污物桶、笔、试管架。

通风橱

-80°C冰箱

离心机

移液器

灭菌枪头

冻存管

存放冻存管的48孔板

2个聚苯乙烯架

Smartscan Solo 2D 读码器

线性条码扫描仪

计算机

五、具体步骤

1. 血液科病房的管理人员将知情同意书发放给患者,参与者或参与者的合法代理人在清醒,正常的精神状态下,仔细阅读知情同意书,同意后签字。 2 确定采血时间,将知情同意书交给标本库。

3 患者在采血前8-12小时之内没有进食或酒精或咖啡因

4 护士采血前口头肯定病人的身份,核对知情同意书上的姓名、性别和签名。 5 通知标本库的人员来去血标本,以确保30分钟内处理标本

6 利用标本库提供的采血盒,采血用的医疗用品符合GB15980-1995标准的产品。采血盒内包含2个含2%EDTA抗凝剂的紫帽管,2个无EDTA的红帽管,将管按1-4进行标记如下:

1) 2%EDTA抗凝剂的紫帽管

2) 2%EDTA抗凝剂的紫帽管

3) 无EDTA的红帽管

4) 无EDTA的红帽管

7. 检查采血试剂盒的完整性和日期,如果有破损,需送还标本库

8. 将采血管按照数字顺序1-4,收集20ml血液。

9. 将采血管来回颠倒8-10次混匀,填写血液标本采集表格。

10. 将采血管在采集的30分钟内送回标本库。

11 入库前确保血液标本在4︒C冰箱保存

12 标本库的技术人员将所处理的标本视为感染的标本

13 将10个蓝色,10个黄色和10个白色的冻存管放在聚苯乙烯架子上。

14. 登记血液的采集时间和处理开始的时间

15. 将2个红帽管和2个紫帽管放在离心机上,配平,离心1500g ,10分钟。

16.小心将管移出,避免干扰白细胞层,将管放在聚苯乙烯架子上,准备提取以下

标本。

17. 血清的提取

17.1血清来自3号和4号红帽管,用无菌的移液枪将3号管中的血清移出,并将

1毫升的分液分入有蓝盖的冻寸管中,重复进行4号管。

17.2将血清按照100微升进行分装

18. 血浆的提取

18.1血浆,血细胞层和红细胞来源于EDTA管,用无菌移液管将血 浆从1管中

移出,小心别碰到血细胞层。

18.2将血浆就按照100微升进行分装,放入4个黄盖的冻存管中。

19.有核细胞层

19.1用无菌移液管将有核细胞层缓慢移出,用转圈的动作将可见的有核细胞层移出,因为有核细胞层粘附于红细胞层 ,一些红细胞和血浆将和有核细胞一起被吸出。

19.2将有核细胞层在10个带白帽的冻存管中平均分配

20 将冻存管放在48孔板上,放入-80︒C冰箱中保存,填写血液标本采集处理登记表

附件3 血液标本采集记录

参考文献

1.Tuck MK, Chan DW, Chia D, Godwin AK, Grizzle WE, Krueger KE, Rom W, Sanda M, Sorbara L, Stass S, Wang W, Brenner DE. Standard Operating

Procedures for Serum and Plasma Collection: Early Detection Research

Network Consensus Statement Standard Operating Procedure Integration

Working Group. J Proteome Res. 8(1):113-117, 2009.

2.Grizzle WE, Bell WC, Sexton. Issues in Collecting, Processing and Storing Human Tissues and Associated Information to Support Biomedical Research. In: Translational Laboratory of Early Cancer (Eds. Grizzle, Sirvastava). In press, 2009.

3.Caporaso N, Vaught J. Collection, processing, and analysis of preneoplastic specimens. In: Franco EL, Rohan TE, editors. Cancer precursors:

epidemiology, detection, and prevention. New York: Springer-Verlag; 2002. p. 33–45.

4.Landi MT, Caporaso N. Sample collection, processing, and storage. In:

Applications of biomarkers in cancer epidemiology, IARC Scientific Pub.

No. 142. Lyon, France: IARC; 1997. p. 223–36.

骨髓标本采集和保存标准流程

一、目的

骨髓是血液恶性肿瘤的主要来源。标本库主要贮存骨髓细胞。标准化的采集和贮存步骤可以保证提供高质量的标本。

二、权限

1. 只采集签写知情同意书的患者

2. 骨髓只能在生物安全级别2(含或以上)的实验室操作,骨髓只能由受过培 训的人员操作,所有操作按照生物安全标准进行

3. 必须在采集到供者骨髓的120分钟内处理血液标本

4. 在采血前,将供者的信息录入标本库的信息系统

三、使用范围

标本库的组成人员及经审批授予使用权限的人员。

四、材料和设备

骨髓采集盒包括:由血液科骨髓室准备骨髓穿刺常规材料,医用(5ml和10ml)一次性注射器、 一次性乳胶手套、标本标签、标本采集表格。

通风橱

-80°C冰箱

离心机

移液器

灭菌枪头

冻存管

存放冻存管的48孔板

2个聚苯乙烯架

Smartscan Solo 2D 读码器

线性条码扫描仪

计算机

五、具体步骤

1. 血液科管理人员将知情同意书发放给患者,参与者或参与者的合法代理人在清醒,正常的精神状态下,仔细阅读知情同意书,同意后签字。

2 确定骨髓穿刺时间,将知情同意书交给标本库。

3负责骨髓穿刺的医生核实病人的身份,核对知情同意书上的姓名、性别和签名。 5 通知标本库的人员来去血标本,以确保120分钟内处理标本

6 利用标本库提供的采血盒,采血用的医疗用品符合GB15980-1995标准的产品。采血盒内包含1个含2%EDTA抗凝剂的紫帽管

7. 检查采血试剂盒的完整性和日期,如果有破损,需送还标本库

8. 收集4ml骨髓

9. 将采血管来回颠倒8-10次混匀,填写骨髓标本采集表格。

10. 将采血管在采集的30分钟内送回标本库。

11 入库前确保骨髓标本在4︒C冰箱保存

12 标本库的技术人员将所处理的标本视为感染的标本

13 将4个白色的冻存管放在聚苯乙烯架子上。

14. 登记骨髓的采集时间和处理开始的时间

15. 有核细胞的提取

用无菌移液管将4ml骨髓吸出,加入到50ml 离心管中,加入20ml红细胞裂解液(血液科自配),来回颠倒8-10次充分混匀,静置10分钟,1500转离心5分钟,去上清(一定要干净,用移液器),如果红细胞溶解不充分需要重复上述过程一次(加入红细胞裂解液10ml)。把细胞分装4个1.5ml EP管,离心去残留上清,把细胞弹起,把4个EP管放在放入-80︒C冰箱中保存,填写骨髓标本采集处理登记表

附件3 血液标本采集记录

血液标本登记表

采集单位:__________________采集序号:__________________

采集日期:____年____月____日 采集时间____时____分____秒 采集量____ml 抗凝的全血____ml,不抗凝的全血____ml

临床诊断:_____________________

一、患者信息:

1. 患者的ID ________________(勿用患者姓名)

2. 患者出生日期:

_______年 _______月 ________日

3. 性别:___男 ___女 ___不详

4. 出生地:________________________________________

二、临床表现(请勾选):

___患病 ___正常 ___有发病风险 ___无病携带者

三、 临床信息(请勾选)

1. 来源:

___体检报告 ___临床记录 ___遗传病诊断

___专家报告 ___解剖学报告 ___私人医生记录

___其他来源________________________________________________________

2. 临床病例信息摘要(200~400 字):

______________________________________________________________________________

3. 其他家庭成员是否曾经被任何机构采样并保存(请勾选):__是 __否

4. 如果是,此成员与该患者之间的关系以及此成员样本类型、保存机构和保存序号为:

_____________________________________________________________________

四、样本处理和保存信息:

1.血液样本处理

①处理时间____时____分____秒

②处理后的种类:血清____血浆____有核细胞____全血____外周血淋巴细胞____ 红细胞____

③保存的标本量:血清____ml/份,____份;血浆____ml/份,____份;有核细胞____ml/份,____份;全血____ml/份,____份;外周血淋巴细胞____ml/份,____份;红细胞____ml/份,____份;

1. 配对组织:无 有 入库编号

2.组织病理诊断(请勾选):____有 ____无

①是否为确定诊断(请勾选):___是 ___否

②确定诊断:_______________________ 诊断方法:_______________________

3. 血液标本保存信息:

入库日期:__________________ 入库编号:__________________

保存位置:______架 ______层 ______盒 _____行 _____列

4.质量监控信息(请勾选):

分子完整性检测:__有 __无 检测日期___________________

方法:___DNA 凝胶电泳__ RT-PCR __

结果:___________________________________

采集者姓名:________________标本处理者姓名:

骨髓标本登记表

采集单位:__________________采集序号:__________________

采集日期:____年____月____日 采集时间____时____分____秒 采集量____ml 抗凝的骨髓____ml

临床诊断(WHO):_____________________

一、患者信息:

1. 患者的ID ________________(勿用患者姓名)

2. 患者出生日期:

_______年 _______月 ________日

3. 性别:___男 ___女 ___不详

二、临床表现(请勾选):

___患病 ___正常 ___有发病风险 ___无病携带者

三、 临床信息(请勾选)

1. 来源:

___体检报告 ___临床记录 ___遗传病诊断

___专家报告 ___解剖学报告 ___私人医生记录

___其他来源________________________________________________________

2. 临床病例信息摘要(200~400 字):

______________________________________________________________________________

3. 其他家庭成员是否曾经被任何机构采样并保存(请勾选):__是 __否

4. 如果是,此成员与该患者之间的关系以及此成员样本类型、保存机构和保存序号为:

_____________________________________________________________________

四、样本处理和保存信息:

1.骨髓样本处理

①处理时间____时____分____秒

②处理后的种类:有核细胞____

③保存的标本量:有核细胞____个 /份,共4份

2. 骨髓标本保存信息:

入库日期:__________________ 入库编号:__________________ 保存位置:______架 ______层 ______盒 _____行 _____列

4.质量监控信息(请勾选):

分子完整性检测:__有 __无 检测日期___________________ 方法:___DNA 凝胶电泳__ RT-PCR __

结果:___________________________________

采集者姓名:________________标本处理者姓名:

血液科标本保存

血液标本采集和保存标准流程

一、目的

血液是容易得到的生物资源,可能是正常病人唯一可得到的资源。标本库主要贮存血清、血浆和白细胞层。标准化的采集和贮存步骤可以保证提供高质量的标本。

二、权限

1. 只采集签写知情同意书的患者,并确定采集的时间

2. 血液只能在生物安全级别2(含或以上)的实验室操作,血液只能由受过培 训的人员操作,所有操作按照生物安全标准进行

3. 在采集到供者血液的30分钟内处理血液标本

4. 在采血前,将供者的信息录入标本库的信息系统

三、使用范围

标本库的组成人员及经审批授予使用权限的人员。

四、材料和设备

血液采集盒包括:医用(5ml和10ml)一次性注射器、 一次性乳胶手套、止血带、碘酒、无菌拭子、血清储藏管、标本标签、创可贴、可封口塑料袋、标本采集表格、带有冰袋的冰壶、污物桶、笔、试管架。

通风橱

-80°C冰箱

离心机

移液器

灭菌枪头

冻存管

存放冻存管的48孔板

2个聚苯乙烯架

Smartscan Solo 2D 读码器

线性条码扫描仪

计算机

五、具体步骤

1. 血液科病房的管理人员将知情同意书发放给患者,参与者或参与者的合法代理人在清醒,正常的精神状态下,仔细阅读知情同意书,同意后签字。 2 确定采血时间,将知情同意书交给标本库。

3 患者在采血前8-12小时之内没有进食或酒精或咖啡因

4 护士采血前口头肯定病人的身份,核对知情同意书上的姓名、性别和签名。 5 通知标本库的人员来去血标本,以确保30分钟内处理标本

6 利用标本库提供的采血盒,采血用的医疗用品符合GB15980-1995标准的产品。采血盒内包含2个含2%EDTA抗凝剂的紫帽管,2个无EDTA的红帽管,将管按1-4进行标记如下:

1) 2%EDTA抗凝剂的紫帽管

2) 2%EDTA抗凝剂的紫帽管

3) 无EDTA的红帽管

4) 无EDTA的红帽管

7. 检查采血试剂盒的完整性和日期,如果有破损,需送还标本库

8. 将采血管按照数字顺序1-4,收集20ml血液。

9. 将采血管来回颠倒8-10次混匀,填写血液标本采集表格。

10. 将采血管在采集的30分钟内送回标本库。

11 入库前确保血液标本在4︒C冰箱保存

12 标本库的技术人员将所处理的标本视为感染的标本

13 将10个蓝色,10个黄色和10个白色的冻存管放在聚苯乙烯架子上。

14. 登记血液的采集时间和处理开始的时间

15. 将2个红帽管和2个紫帽管放在离心机上,配平,离心1500g ,10分钟。

16.小心将管移出,避免干扰白细胞层,将管放在聚苯乙烯架子上,准备提取以下

标本。

17. 血清的提取

17.1血清来自3号和4号红帽管,用无菌的移液枪将3号管中的血清移出,并将

1毫升的分液分入有蓝盖的冻寸管中,重复进行4号管。

17.2将血清按照100微升进行分装

18. 血浆的提取

18.1血浆,血细胞层和红细胞来源于EDTA管,用无菌移液管将血 浆从1管中

移出,小心别碰到血细胞层。

18.2将血浆就按照100微升进行分装,放入4个黄盖的冻存管中。

19.有核细胞层

19.1用无菌移液管将有核细胞层缓慢移出,用转圈的动作将可见的有核细胞层移出,因为有核细胞层粘附于红细胞层 ,一些红细胞和血浆将和有核细胞一起被吸出。

19.2将有核细胞层在10个带白帽的冻存管中平均分配

20 将冻存管放在48孔板上,放入-80︒C冰箱中保存,填写血液标本采集处理登记表

附件3 血液标本采集记录

参考文献

1.Tuck MK, Chan DW, Chia D, Godwin AK, Grizzle WE, Krueger KE, Rom W, Sanda M, Sorbara L, Stass S, Wang W, Brenner DE. Standard Operating

Procedures for Serum and Plasma Collection: Early Detection Research

Network Consensus Statement Standard Operating Procedure Integration

Working Group. J Proteome Res. 8(1):113-117, 2009.

2.Grizzle WE, Bell WC, Sexton. Issues in Collecting, Processing and Storing Human Tissues and Associated Information to Support Biomedical Research. In: Translational Laboratory of Early Cancer (Eds. Grizzle, Sirvastava). In press, 2009.

3.Caporaso N, Vaught J. Collection, processing, and analysis of preneoplastic specimens. In: Franco EL, Rohan TE, editors. Cancer precursors:

epidemiology, detection, and prevention. New York: Springer-Verlag; 2002. p. 33–45.

4.Landi MT, Caporaso N. Sample collection, processing, and storage. In:

Applications of biomarkers in cancer epidemiology, IARC Scientific Pub.

No. 142. Lyon, France: IARC; 1997. p. 223–36.

骨髓标本采集和保存标准流程

一、目的

骨髓是血液恶性肿瘤的主要来源。标本库主要贮存骨髓细胞。标准化的采集和贮存步骤可以保证提供高质量的标本。

二、权限

1. 只采集签写知情同意书的患者

2. 骨髓只能在生物安全级别2(含或以上)的实验室操作,骨髓只能由受过培 训的人员操作,所有操作按照生物安全标准进行

3. 必须在采集到供者骨髓的120分钟内处理血液标本

4. 在采血前,将供者的信息录入标本库的信息系统

三、使用范围

标本库的组成人员及经审批授予使用权限的人员。

四、材料和设备

骨髓采集盒包括:由血液科骨髓室准备骨髓穿刺常规材料,医用(5ml和10ml)一次性注射器、 一次性乳胶手套、标本标签、标本采集表格。

通风橱

-80°C冰箱

离心机

移液器

灭菌枪头

冻存管

存放冻存管的48孔板

2个聚苯乙烯架

Smartscan Solo 2D 读码器

线性条码扫描仪

计算机

五、具体步骤

1. 血液科管理人员将知情同意书发放给患者,参与者或参与者的合法代理人在清醒,正常的精神状态下,仔细阅读知情同意书,同意后签字。

2 确定骨髓穿刺时间,将知情同意书交给标本库。

3负责骨髓穿刺的医生核实病人的身份,核对知情同意书上的姓名、性别和签名。 5 通知标本库的人员来去血标本,以确保120分钟内处理标本

6 利用标本库提供的采血盒,采血用的医疗用品符合GB15980-1995标准的产品。采血盒内包含1个含2%EDTA抗凝剂的紫帽管

7. 检查采血试剂盒的完整性和日期,如果有破损,需送还标本库

8. 收集4ml骨髓

9. 将采血管来回颠倒8-10次混匀,填写骨髓标本采集表格。

10. 将采血管在采集的30分钟内送回标本库。

11 入库前确保骨髓标本在4︒C冰箱保存

12 标本库的技术人员将所处理的标本视为感染的标本

13 将4个白色的冻存管放在聚苯乙烯架子上。

14. 登记骨髓的采集时间和处理开始的时间

15. 有核细胞的提取

用无菌移液管将4ml骨髓吸出,加入到50ml 离心管中,加入20ml红细胞裂解液(血液科自配),来回颠倒8-10次充分混匀,静置10分钟,1500转离心5分钟,去上清(一定要干净,用移液器),如果红细胞溶解不充分需要重复上述过程一次(加入红细胞裂解液10ml)。把细胞分装4个1.5ml EP管,离心去残留上清,把细胞弹起,把4个EP管放在放入-80︒C冰箱中保存,填写骨髓标本采集处理登记表

附件3 血液标本采集记录

血液标本登记表

采集单位:__________________采集序号:__________________

采集日期:____年____月____日 采集时间____时____分____秒 采集量____ml 抗凝的全血____ml,不抗凝的全血____ml

临床诊断:_____________________

一、患者信息:

1. 患者的ID ________________(勿用患者姓名)

2. 患者出生日期:

_______年 _______月 ________日

3. 性别:___男 ___女 ___不详

4. 出生地:________________________________________

二、临床表现(请勾选):

___患病 ___正常 ___有发病风险 ___无病携带者

三、 临床信息(请勾选)

1. 来源:

___体检报告 ___临床记录 ___遗传病诊断

___专家报告 ___解剖学报告 ___私人医生记录

___其他来源________________________________________________________

2. 临床病例信息摘要(200~400 字):

______________________________________________________________________________

3. 其他家庭成员是否曾经被任何机构采样并保存(请勾选):__是 __否

4. 如果是,此成员与该患者之间的关系以及此成员样本类型、保存机构和保存序号为:

_____________________________________________________________________

四、样本处理和保存信息:

1.血液样本处理

①处理时间____时____分____秒

②处理后的种类:血清____血浆____有核细胞____全血____外周血淋巴细胞____ 红细胞____

③保存的标本量:血清____ml/份,____份;血浆____ml/份,____份;有核细胞____ml/份,____份;全血____ml/份,____份;外周血淋巴细胞____ml/份,____份;红细胞____ml/份,____份;

1. 配对组织:无 有 入库编号

2.组织病理诊断(请勾选):____有 ____无

①是否为确定诊断(请勾选):___是 ___否

②确定诊断:_______________________ 诊断方法:_______________________

3. 血液标本保存信息:

入库日期:__________________ 入库编号:__________________

保存位置:______架 ______层 ______盒 _____行 _____列

4.质量监控信息(请勾选):

分子完整性检测:__有 __无 检测日期___________________

方法:___DNA 凝胶电泳__ RT-PCR __

结果:___________________________________

采集者姓名:________________标本处理者姓名:

骨髓标本登记表

采集单位:__________________采集序号:__________________

采集日期:____年____月____日 采集时间____时____分____秒 采集量____ml 抗凝的骨髓____ml

临床诊断(WHO):_____________________

一、患者信息:

1. 患者的ID ________________(勿用患者姓名)

2. 患者出生日期:

_______年 _______月 ________日

3. 性别:___男 ___女 ___不详

二、临床表现(请勾选):

___患病 ___正常 ___有发病风险 ___无病携带者

三、 临床信息(请勾选)

1. 来源:

___体检报告 ___临床记录 ___遗传病诊断

___专家报告 ___解剖学报告 ___私人医生记录

___其他来源________________________________________________________

2. 临床病例信息摘要(200~400 字):

______________________________________________________________________________

3. 其他家庭成员是否曾经被任何机构采样并保存(请勾选):__是 __否

4. 如果是,此成员与该患者之间的关系以及此成员样本类型、保存机构和保存序号为:

_____________________________________________________________________

四、样本处理和保存信息:

1.骨髓样本处理

①处理时间____时____分____秒

②处理后的种类:有核细胞____

③保存的标本量:有核细胞____个 /份,共4份

2. 骨髓标本保存信息:

入库日期:__________________ 入库编号:__________________ 保存位置:______架 ______层 ______盒 _____行 _____列

4.质量监控信息(请勾选):

分子完整性检测:__有 __无 检测日期___________________ 方法:___DNA 凝胶电泳__ RT-PCR __

结果:___________________________________

采集者姓名:________________标本处理者姓名:


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