放入-20度的环境保藏菌种,并不是很好。最好用液氮保藏或者-70度的冰箱的保藏,菌种比较稳定。
其实,菌种的活化步骤如下:
第一天:
1、放入4℃,一直到变成液状;(用液氮保藏直接放入37度的温水中,待变成液体 状,直接划线培养)
2、制备固体培养基,灭菌后,在超净工作台进行以下操作:
3、制备液倒入无菌培养皿,每培养皿约25ml ;
4、待凝固后,用接种环,划板;
5、水平放置半小时以上,待菌吸附在培养基上。
5、用保鲜膜或者封口膜密封培养皿,倒置于37℃恒温箱中过夜;
第二天:
6、制备150mL 液体培养基,灭菌后,在超净工作台进行以下操作:
8、挑平板上单个菌落,至液体培养液中,200rpm 摇床过夜;
这样培养的菌液放入4度冰箱,可以在一周内做后续的实验。但是超过一周,就别用了。还有上述的平板放到4度的冰箱里,可以在两周内重新扩大培养成菌液。但是超过2周,就别用了,活性和特性都不稳定。
放入-20度的环境保藏菌种,并不是很好。最好用液氮保藏或者-70度的冰箱的保藏,菌种比较稳定。
其实,菌种的活化步骤如下:
第一天:
1、放入4℃,一直到变成液状;(用液氮保藏直接放入37度的温水中,待变成液体 状,直接划线培养)
2、制备固体培养基,灭菌后,在超净工作台进行以下操作:
3、制备液倒入无菌培养皿,每培养皿约25ml ;
4、待凝固后,用接种环,划板;
5、水平放置半小时以上,待菌吸附在培养基上。
5、用保鲜膜或者封口膜密封培养皿,倒置于37℃恒温箱中过夜;
第二天:
6、制备150mL 液体培养基,灭菌后,在超净工作台进行以下操作:
8、挑平板上单个菌落,至液体培养液中,200rpm 摇床过夜;
这样培养的菌液放入4度冰箱,可以在一周内做后续的实验。但是超过一周,就别用了。还有上述的平板放到4度的冰箱里,可以在两周内重新扩大培养成菌液。但是超过2周,就别用了,活性和特性都不稳定。