血涂片的制作及评分细则
一、时间:2013年11月 二、地点:生物实验室 三、材料、人员准备:
1.所需动物:家兔或鸡
2.所需药品:瑞氏染料、甲醇、0.9%生理盐水(NaCl)、碘酒、酒精、棉签
3.比赛分组:5~8人/组,1只动物/组 4.参赛班级:15、16级农学班 四、比赛操作要求:
(一)采血(三种方法中任选一种)
(1)耳缘静脉取血:将家兔放在固定盒内,拔去拟采血部位的毛,用酒精棉球擦耳壳,使耳部血管扩张。用左手食指和中指夹住静脉近心端,拇指和小指夹住耳缘部分,以左手无名指和小指放在耳下作垫,待静脉充盈后,右手持注射器使针头由静脉末端刺入,顺血管方向向心端刺约1~1.5cm,一次抽取2~5ml血液后,棉球压迫止血。 (2)兔耳中央动脉取血:在兔耳的中央有一条较粗、颜色较鲜红的中央动脉,用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央动脉末端,沿着动脉向心方向平行刺入动脉,此法一次可取血10~15ml。取血完毕后注意止血。抽血时要注意:由于兔耳中央动脉易发生痉挛性收缩,因此抽血前,必须先让兔耳充分充血,当动脉扩张,未发生痉挛性收缩前立即抽血。不要在近耳根处取血,因耳根部软组织厚,血管位置较深,易刺透血管造成皮下出血。
(3)心脏取血:将兔仰卧固定在手术台上,将心脏部位被毛剪去,用碘酒酒精消毒皮肤,选择心搏最明显处穿刺,针头刺入心脏后即有血液涌入注射器。取得所需血量后,迅速将针头拔出,这样心肌上的穿孔易于闭合。经6~7天后,可以重复进行心脏采血。 (二) 涂片:
1.采集绿豆大小的血滴,用清洁玻璃片面一端轻轻接触血滴,使血滴附于玻片上(注意动物皮肤不要接触到玻片,否则血在玻片上就不能成滴状;用玻棒蘸一滴血于玻片上也可)
2.以左手拿该玻片的两端,迅速以右手拿住另一载玻片的一端,在左手载玻片上由前向后接触血滴,使两玻片成45度角,轻轻移动,使血滴成一条直线,然后由前向后推为一均匀薄片。
3.涂片在空气中干燥后置于染色架上,滴上瑞氏染色剂,使涂片被染色液覆盖。
4.染色1分钟后,再滴加等量的缓冲液在染色液上,浸染约5~8分钟,此时玻片表面呈现一层古铜色。
5.用蒸馏水迅速冲洗,见涂片呈粉红色后,自然晾干。 (三)血细胞的识别
1、正确使用显微镜,并调至高倍镜(×40)下,成像清晰。 2、在显微镜下正确识别:红细胞、血小板(或凝血细胞)、淋巴细胞等。
五、比赛评分标准
血涂片的制作及评分细则
一、时间:2013年11月 二、地点:生物实验室 三、材料、人员准备:
1.所需动物:家兔或鸡
2.所需药品:瑞氏染料、甲醇、0.9%生理盐水(NaCl)、碘酒、酒精、棉签
3.比赛分组:5~8人/组,1只动物/组 4.参赛班级:15、16级农学班 四、比赛操作要求:
(一)采血(三种方法中任选一种)
(1)耳缘静脉取血:将家兔放在固定盒内,拔去拟采血部位的毛,用酒精棉球擦耳壳,使耳部血管扩张。用左手食指和中指夹住静脉近心端,拇指和小指夹住耳缘部分,以左手无名指和小指放在耳下作垫,待静脉充盈后,右手持注射器使针头由静脉末端刺入,顺血管方向向心端刺约1~1.5cm,一次抽取2~5ml血液后,棉球压迫止血。 (2)兔耳中央动脉取血:在兔耳的中央有一条较粗、颜色较鲜红的中央动脉,用左手固定兔耳,右手持注射器,在中央动脉末端,沿着动脉向心方向平行刺入动脉,此法一次可取血10~15ml。取血完毕后注意止血。抽血时要注意:由于兔耳中央动脉易发生痉挛性收缩,因此抽血前,必须先让兔耳充分充血,当动脉扩张,未发生痉挛性收缩前立即抽血。不要在近耳根处取血,因耳根部软组织厚,血管位置较深,易刺透血管造成皮下出血。
(3)心脏取血:将兔仰卧固定在手术台上,将心脏部位被毛剪去,用碘酒酒精消毒皮肤,选择心搏最明显处穿刺,针头刺入心脏后即有血液涌入注射器。取得所需血量后,迅速将针头拔出,这样心肌上的穿孔易于闭合。经6~7天后,可以重复进行心脏采血。 (二) 涂片:
1.采集绿豆大小的血滴,用清洁玻璃片面一端轻轻接触血滴,使血滴附于玻片上(注意动物皮肤不要接触到玻片,否则血在玻片上就不能成滴状;用玻棒蘸一滴血于玻片上也可)
2.以左手拿该玻片的两端,迅速以右手拿住另一载玻片的一端,在左手载玻片上由前向后接触血滴,使两玻片成45度角,轻轻移动,使血滴成一条直线,然后由前向后推为一均匀薄片。
3.涂片在空气中干燥后置于染色架上,滴上瑞氏染色剂,使涂片被染色液覆盖。
4.染色1分钟后,再滴加等量的缓冲液在染色液上,浸染约5~8分钟,此时玻片表面呈现一层古铜色。
5.用蒸馏水迅速冲洗,见涂片呈粉红色后,自然晾干。 (三)血细胞的识别
1、正确使用显微镜,并调至高倍镜(×40)下,成像清晰。 2、在显微镜下正确识别:红细胞、血小板(或凝血细胞)、淋巴细胞等。
五、比赛评分标准