深圳依诺金生物科技有限公司 产品说明书
DIG DNA标记试剂盒 I
Dig-dUTP 标记混合物I 1 µl H O* X µl
2
Taq DNA 聚合酶 0.5 µl 目录号: DDLK-010
---------------------------------------- 装量: 10次PCR 标记反应
总体积 20 µl
保存期: 12个月.
*用蒸馏水补足20 µl总反应体积
存储条件: –20℃
注意：如使用试剂盒中的对照引物组合，则用1µl
试剂盒组成: DDLK
对照引物组合替换正向引物和逆向引物。
Dig-dUTP 标记混合物
2. PCR扩增程序：30个循环
94℃ 4分钟
Beta-Actin 对照cDNA --------------------------
94℃ 30秒
2
58℃ 40秒 质量保证:
该试剂盒已用Beta-Actin 对照引物和对照cDNA 按照下述的操作方法验证。
地高辛DNA 标记试剂盒应用
地高辛DNA 标记试剂盒是通过PCR 反应将地高辛-dUTP 掺入DNA 探针的快速标记方法。地高辛标记的探针高度稳定，用途广泛，可用于：非同位素的 Southern Blot、Northern Blot、菌落杂交和斑点印迹杂交分析等。
地高辛DNA 标记试剂操作方法
1. 制备反应液:
正向引物 (50–100 pmol) X µl 反向引物 (50–100 pmol) X µl cDNA 模板(10–20 ng/µl) 1 µl 10X PCR 缓冲液 2 µl MgCl 2 µl
2
72℃ 60秒
-------------72℃ 10分钟，4℃ 末次循环后样品置于 –20℃。
3． 检测扩增产物：制备1.0%的琼脂糖凝胶，取
5µl PCR产物电泳检测。
4．检测扩增产物的地高辛掺入：取1 µl 扩增产
物，倍比稀释点样于尼龙膜上，根据自己偏好的方法进行检测，如化学发光或化学显色。
*上述过程已经PE PCR(Model# PE2400)优化，客户可根据自己的PCR 仪调整参数。
注意:
¾ 对长度为22–27 bp的引物，推荐的Tm>
62℃
¾ 建议每Kb 延伸反应1分钟，通常根据引物
的Tm 值和模板的长度调整PCR 参数。 ¾ 扩增循环数可根据需要调整。
深圳依诺金生物科技有限公司
地址：深圳市高新区高新中一道，生物孵化器大楼1-204室 邮编：518057 电话：0755-26031015, 26031014, 26031013 传真：0755-26031013 公司网页：www.innogent-cn.com 电子邮件：[email protected]
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DIG DNA标记试剂盒 I
Dig-dUTP 标记混合物I 1 µl H O* X µl
2
Taq DNA 聚合酶 0.5 µl 目录号: DDLK-010
---------------------------------------- 装量: 10次PCR 标记反应
总体积 20 µl
保存期: 12个月.
*用蒸馏水补足20 µl总反应体积
存储条件: –20℃
注意：如使用试剂盒中的对照引物组合，则用1µl
试剂盒组成: DDLK
对照引物组合替换正向引物和逆向引物。
Dig-dUTP 标记混合物
2. PCR扩增程序：30个循环
94℃ 4分钟
Beta-Actin 对照cDNA --------------------------
94℃ 30秒
2
58℃ 40秒 质量保证:
该试剂盒已用Beta-Actin 对照引物和对照cDNA 按照下述的操作方法验证。
地高辛DNA 标记试剂盒应用
地高辛DNA 标记试剂盒是通过PCR 反应将地高辛-dUTP 掺入DNA 探针的快速标记方法。地高辛标记的探针高度稳定，用途广泛，可用于：非同位素的 Southern Blot、Northern Blot、菌落杂交和斑点印迹杂交分析等。
地高辛DNA 标记试剂操作方法
1. 制备反应液:
正向引物 (50–100 pmol) X µl 反向引物 (50–100 pmol) X µl cDNA 模板(10–20 ng/µl) 1 µl 10X PCR 缓冲液 2 µl MgCl 2 µl
2
72℃ 60秒
-------------72℃ 10分钟，4℃ 末次循环后样品置于 –20℃。
3． 检测扩增产物：制备1.0%的琼脂糖凝胶，取
5µl PCR产物电泳检测。
4．检测扩增产物的地高辛掺入：取1 µl 扩增产
物，倍比稀释点样于尼龙膜上，根据自己偏好的方法进行检测，如化学发光或化学显色。
*上述过程已经PE PCR(Model# PE2400)优化，客户可根据自己的PCR 仪调整参数。
注意:
¾ 对长度为22–27 bp的引物，推荐的Tm>
62℃
¾ 建议每Kb 延伸反应1分钟，通常根据引物
的Tm 值和模板的长度调整PCR 参数。 ¾ 扩增循环数可根据需要调整。
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