[] 指示剂的选择
指示剂选择不当，加之肉眼对变色点辨认困难，都会给测定结果带来误差。因此，在多种指示剂中，选择指示剂的依据是：要选择一种变色范围恰好在滴定曲线的突跃范围之内，或者至少要占滴定曲线突跃范围一部分的指示剂。这样当滴定正好在滴定曲线突跃范围之内结束时，其最大误差不过0.1%，这是容量分析容许的。
[] 常用指示剂
酸碱指示
氧化还原指示剂
金属指示剂
[] 酸碱指示剂
酸碱指示剂指示的原理：酸碱指示剂一般是有机弱酸或者有机弱碱，当溶液的pH改变时，指示剂由于结构的改变而发生颜色的改变。 实验室中常用的酸碱指示剂
通用指示剂是多种酸碱指示剂的混合物，它指在不同的pH值下显示相应不同的颜色下表是一些实验室中常用的酸碱指示剂。指示剂通常会在一些pH值范围显示过渡颜色转变。
例如：酚红在低pH值时呈现黄色，在高pH值时呈现红色，但在pH6.6至8.0间会呈现橙色。其过渡、转变颜色的pH范围会受指示剂的浓度或温度的影响而出现轻微的变化。
温度和溶剂
温度的变化会引起指示剂电离常数和水的质子自递常数发生变化，因而指示剂的变色范围亦随之改变，对碱性指示剂的影响较酸性指示剂更为明显。不同的溶剂具有不同的介电常数和酸碱性，因而也会影响指示剂的电离常数和变色范围。
自制酸碱指示剂
1、从红萝卜皮中提取酸碱指示剂 刮下红萝卜的红皮后，用95%的酒精浸泡一天左右，过滤取出它的滤液即酸碱指示剂。按检验的需要制作pH1-14的标准液若干个，每个标准液取10ml分置于试管中，再分别加入红萝卜皮浸泡液10滴，塞紧作为比色样品。在某待测溶液中加入红萝卜浸泡液，颜色发生变化后再与比色样品比较，就能确定待测溶液pH值的大致范围。
2、从紫草中提取酸碱指示剂 取紫草5g，用50%的酒精浸泡一天可得到紫草素的紫色的酒精溶液即酸碱指示剂。其遇到酸碱的变色与石蕊试液相同。
3、从紫色卷心菜中提取酸碱指示剂 取约250g紫色卷心菜，洗净切碎置于不锈钢锅中加水煮沸10分钟，然后过滤冷却置于容器中即可用作酸碱指示剂。其用法可参照上述操作1的方法。
4、从米苋菜中提取酸碱指示剂，其操作方法同操作3。 5. 用咖喱粉制酸碱指示剂
[] 天然pH指示剂
糖萝卜、蓝莓胡萝卜、樱桃咖哩粉、飞燕草花瓣、天竺葵花瓣、葡萄七叶树的
带氧气指示剂的脱氧剂
叶、绣球花、洋葱牵牛花花瓣、欧洲樱草罂粟花瓣、紫牡丹、红叶卷心菜、红萝卜、大黄玫瑰花瓣、草莓茶百里香、姜黄郁金香花瓣、紫萝兰花瓣、紫色高丽菜汁等。
[] 生物指示剂
生物指示剂是一类特殊的活微生物制品,可用于确认灭菌设备的性能,灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等.
定义
对特定灭菌处理有确定的抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体。用于确认灭菌设备的性能,灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等。
分类
1、按结构分可分为片状生物指示剂(strip biological indicator)和自含式生物指示剂(self-contained biological indicator)；
2、按监测灭菌工艺可分为环氧乙烷灭菌生物指示剂，湿热灭菌生物指示剂，辐照灭菌生物指示剂，干热灭菌生物指示剂，过氧化氢灭菌生物指示剂等； 3、按培养时间可分为通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。
重量质量特性
1、芽孢含量 2、D值
生物指示剂生产商：
作用
1、 对任何灭菌设备性能，灭菌工艺效果的验证，可通过得到
实验
的物理参数如热分布与热穿透数据, 来估测一个灭菌程序对微生物的致死性。但物理参数并不能直观反映微生物的杀灭程度，保证是否达到规定的“无菌保证水平（Sterility Assurance Level, SAL）（SAL的定义为产品经灭菌/除菌后微生物残存的概率，国际上一致规定SAL不得大于10）”。生物指示剂就是为了保证整个灭菌过程达到SAL 水平而应用的,它能综合反映影响灭菌效果的各种因素。
2、 无菌检查是无菌产品质量控制的一个重要指标。但无菌检查是抽样检查，而微生物污染属非均匀污染，由于抽样的概率问题，生产过程中产品灭菌效果不符合要求往往难以用无菌检查结果反映出来，除非是较严重污染的情况。因此，无菌产品的无菌保证不能依据终产品的无菌检查结果，而需要通过生物指示剂的挑战试验来监控。
[]
指示剂与指示液的配制
二苯胺磺酸钠指示液 取二苯胺磺酸钠0.2g，加水100ml使溶解，即得。 二苯偕肼指示液 取二苯偕肼1g，加乙醇100ml使溶解，即得。 双硫腙指示液 取双硫腙50mg，加乙醇100ml使溶解，即得。
石蕊指示液 取石蕊粉末10g,加乙醇40ml，回流煮沸1小时,静置，倾去上层清液，再用同一方法处理二次，每次用乙醇30ml，残渣用水10ml洗涤，倾去洗液，再加水50ml，煮沸，放冷，滤过，即得。变色范围 pH4.5～8.0（红→蓝）。 甲酚红指示液 取甲酚红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液5.3ml使溶解，再加水稀释至100ml，即得。变色范围 pH7.2～8.8（黄→红）
甲酚红－麝香草酚蓝混合指示液 取甲酚红指示液1份与0.1％麝香草酚蓝溶液3份,混合，即得。
甲基红指示液 取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH4.2～6.3（红→黄）。
甲基红－亚甲蓝混合指示液 取0.1％甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2％亚甲蓝溶液8ml，摇匀，即得。
甲基红－溴甲酚绿混合指示液 取0.1％甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2％溴甲酚绿的乙醇溶液30ml，摇匀，即得。
甲基橙指示液 取甲基橙0.1g，加水100ml使溶解，即得。 变色范围 pH3.2～4.4（红→黄）。
甲基橙－二甲苯蓝FF混合指示液 取甲基橙与二甲苯蓝FF各0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。
邻二氮菲指示液 取硫酸亚铁0.5g，加水100ml使溶解,加硫酸2滴与邻二氮菲0.5g,摇匀，即得。本液应临用新制。
茜素磺酸钠指示液 取茜素磺酸钠0.1g，加水100ml使溶解，即得。变色范围 pH3.7～5.2（黄→紫）
荧光黄指示液 取荧光黄0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。
钙黄绿素指示剂 取钙黄绿素0.1g，加氯化钾10g，研磨均匀，即得。 钙紫红素指示剂 取钙紫红素0.1g，加无水硫酸钠10g,研磨均匀，即得。 姜黄指示液 取姜黄粉末20g，用冷水浸渍4次，每次100ml,除去水溶性物质后，残渣在100℃干燥，加乙醇100ml，浸渍数日，滤过，即得。 结晶紫指示液 取结晶紫0.5g，加冰醋酸100ml使溶解，即得。
酚酞指示液 取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。 变色范围 pH8.3～10.0（无色→红）。
铬黑T指示剂 取铬黑T 0.1g，加氯化钠10g，研磨均匀，即得。
淀粉指示液 取可溶性淀粉0.5g，加水5ml搅匀后，缓缓倾入100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。本液应临用新制。 硫酸铁铵指示液 取硫酸铁铵8g，加水100ml使溶解，即得。
溴酚蓝指示液 取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围 pH2.8～4.6（黄→蓝绿）。
溴麝香草酚蓝指示液 取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围 pH6.0～7.6（黄→蓝）。 麝香草酚酞指示液 取麝香草酚酞0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。变色范围 pH9.3～10.5（无色→蓝）。
麝香草酚蓝指示液 取麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液4.3ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH1.2～2.8（红→黄）；pH8.0～9.6（黄→紫蓝）。
[] 指示剂的选择
指示剂选择不当，加之肉眼对变色点辨认困难，都会给测定结果带来误差。因此，在多种指示剂中，选择指示剂的依据是：要选择一种变色范围恰好在滴定曲线的突跃范围之内，或者至少要占滴定曲线突跃范围一部分的指示剂。这样当滴定正好在滴定曲线突跃范围之内结束时，其最大误差不过0.1%，这是容量分析容许的。
[] 常用指示剂
酸碱指示
氧化还原指示剂
金属指示剂
[] 酸碱指示剂
酸碱指示剂指示的原理：酸碱指示剂一般是有机弱酸或者有机弱碱，当溶液的pH改变时，指示剂由于结构的改变而发生颜色的改变。 实验室中常用的酸碱指示剂
通用指示剂是多种酸碱指示剂的混合物，它指在不同的pH值下显示相应不同的颜色下表是一些实验室中常用的酸碱指示剂。指示剂通常会在一些pH值范围显示过渡颜色转变。
例如：酚红在低pH值时呈现黄色，在高pH值时呈现红色，但在pH6.6至8.0间会呈现橙色。其过渡、转变颜色的pH范围会受指示剂的浓度或温度的影响而出现轻微的变化。
温度和溶剂
温度的变化会引起指示剂电离常数和水的质子自递常数发生变化，因而指示剂的变色范围亦随之改变，对碱性指示剂的影响较酸性指示剂更为明显。不同的溶剂具有不同的介电常数和酸碱性，因而也会影响指示剂的电离常数和变色范围。
自制酸碱指示剂
1、从红萝卜皮中提取酸碱指示剂 刮下红萝卜的红皮后，用95%的酒精浸泡一天左右，过滤取出它的滤液即酸碱指示剂。按检验的需要制作pH1-14的标准液若干个，每个标准液取10ml分置于试管中，再分别加入红萝卜皮浸泡液10滴，塞紧作为比色样品。在某待测溶液中加入红萝卜浸泡液，颜色发生变化后再与比色样品比较，就能确定待测溶液pH值的大致范围。
2、从紫草中提取酸碱指示剂 取紫草5g，用50%的酒精浸泡一天可得到紫草素的紫色的酒精溶液即酸碱指示剂。其遇到酸碱的变色与石蕊试液相同。
3、从紫色卷心菜中提取酸碱指示剂 取约250g紫色卷心菜，洗净切碎置于不锈钢锅中加水煮沸10分钟，然后过滤冷却置于容器中即可用作酸碱指示剂。其用法可参照上述操作1的方法。
4、从米苋菜中提取酸碱指示剂，其操作方法同操作3。 5. 用咖喱粉制酸碱指示剂
[] 天然pH指示剂
糖萝卜、蓝莓胡萝卜、樱桃咖哩粉、飞燕草花瓣、天竺葵花瓣、葡萄七叶树的
带氧气指示剂的脱氧剂
叶、绣球花、洋葱牵牛花花瓣、欧洲樱草罂粟花瓣、紫牡丹、红叶卷心菜、红萝卜、大黄玫瑰花瓣、草莓茶百里香、姜黄郁金香花瓣、紫萝兰花瓣、紫色高丽菜汁等。
[] 生物指示剂
生物指示剂是一类特殊的活微生物制品,可用于确认灭菌设备的性能,灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等.
定义
对特定灭菌处理有确定的抗力，并装在内层包装中可供使用的染菌载体。用于确认灭菌设备的性能,灭菌程序的验证,生产过程灭菌效果的监控等。
分类
1、按结构分可分为片状生物指示剂(strip biological indicator)和自含式生物指示剂(self-contained biological indicator)；
2、按监测灭菌工艺可分为环氧乙烷灭菌生物指示剂，湿热灭菌生物指示剂，辐照灭菌生物指示剂，干热灭菌生物指示剂，过氧化氢灭菌生物指示剂等； 3、按培养时间可分为通用型生物指示剂和快速型生物指示剂。
重量质量特性
1、芽孢含量 2、D值
生物指示剂生产商：
作用
1、 对任何灭菌设备性能，灭菌工艺效果的验证，可通过得到
实验
的物理参数如热分布与热穿透数据, 来估测一个灭菌程序对微生物的致死性。但物理参数并不能直观反映微生物的杀灭程度，保证是否达到规定的“无菌保证水平（Sterility Assurance Level, SAL）（SAL的定义为产品经灭菌/除菌后微生物残存的概率，国际上一致规定SAL不得大于10）”。生物指示剂就是为了保证整个灭菌过程达到SAL 水平而应用的,它能综合反映影响灭菌效果的各种因素。
2、 无菌检查是无菌产品质量控制的一个重要指标。但无菌检查是抽样检查，而微生物污染属非均匀污染，由于抽样的概率问题，生产过程中产品灭菌效果不符合要求往往难以用无菌检查结果反映出来，除非是较严重污染的情况。因此，无菌产品的无菌保证不能依据终产品的无菌检查结果，而需要通过生物指示剂的挑战试验来监控。
[]
指示剂与指示液的配制
二苯胺磺酸钠指示液 取二苯胺磺酸钠0.2g，加水100ml使溶解，即得。 二苯偕肼指示液 取二苯偕肼1g，加乙醇100ml使溶解，即得。 双硫腙指示液 取双硫腙50mg，加乙醇100ml使溶解，即得。
石蕊指示液 取石蕊粉末10g,加乙醇40ml，回流煮沸1小时,静置，倾去上层清液，再用同一方法处理二次，每次用乙醇30ml，残渣用水10ml洗涤，倾去洗液，再加水50ml，煮沸，放冷，滤过，即得。变色范围 pH4.5～8.0（红→蓝）。 甲酚红指示液 取甲酚红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液5.3ml使溶解，再加水稀释至100ml，即得。变色范围 pH7.2～8.8（黄→红）
甲酚红－麝香草酚蓝混合指示液 取甲酚红指示液1份与0.1％麝香草酚蓝溶液3份,混合，即得。
甲基红指示液 取甲基红0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液7.4ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH4.2～6.3（红→黄）。
甲基红－亚甲蓝混合指示液 取0.1％甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2％亚甲蓝溶液8ml，摇匀，即得。
甲基红－溴甲酚绿混合指示液 取0.1％甲基红的乙醇溶液20ml，加0.2％溴甲酚绿的乙醇溶液30ml，摇匀，即得。
甲基橙指示液 取甲基橙0.1g，加水100ml使溶解，即得。 变色范围 pH3.2～4.4（红→黄）。
甲基橙－二甲苯蓝FF混合指示液 取甲基橙与二甲苯蓝FF各0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。
邻二氮菲指示液 取硫酸亚铁0.5g，加水100ml使溶解,加硫酸2滴与邻二氮菲0.5g,摇匀，即得。本液应临用新制。
茜素磺酸钠指示液 取茜素磺酸钠0.1g，加水100ml使溶解，即得。变色范围 pH3.7～5.2（黄→紫）
荧光黄指示液 取荧光黄0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。
钙黄绿素指示剂 取钙黄绿素0.1g，加氯化钾10g，研磨均匀，即得。 钙紫红素指示剂 取钙紫红素0.1g，加无水硫酸钠10g,研磨均匀，即得。 姜黄指示液 取姜黄粉末20g，用冷水浸渍4次，每次100ml,除去水溶性物质后，残渣在100℃干燥，加乙醇100ml，浸渍数日，滤过，即得。 结晶紫指示液 取结晶紫0.5g，加冰醋酸100ml使溶解，即得。
酚酞指示液 取酚酞1g，加乙醇100ml使溶解，即得。 变色范围 pH8.3～10.0（无色→红）。
铬黑T指示剂 取铬黑T 0.1g，加氯化钠10g，研磨均匀，即得。
淀粉指示液 取可溶性淀粉0.5g，加水5ml搅匀后，缓缓倾入100ml沸水中，随加随搅拌，继续煮沸2分钟，放冷，倾取上层清液，即得。本液应临用新制。 硫酸铁铵指示液 取硫酸铁铵8g，加水100ml使溶解，即得。
溴酚蓝指示液 取溴酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.0ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围 pH2.8～4.6（黄→蓝绿）。
溴麝香草酚蓝指示液 取溴麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液3.2ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。 变色范围 pH6.0～7.6（黄→蓝）。 麝香草酚酞指示液 取麝香草酚酞0.1g，加乙醇100ml使溶解，即得。变色范围 pH9.3～10.5（无色→蓝）。
麝香草酚蓝指示液 取麝香草酚蓝0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液4.3ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。变色范围 pH1.2～2.8（红→黄）；pH8.0～9.6（黄→紫蓝）。