一 预处理和固液分离
1. 名词解释:错流过滤,凝聚,絮凝
2发酵液为何需要预处理?处理方法有哪些?
3凝聚与絮凝过程有何区别?
4固液分离的方法有哪些?各有和优缺点。
分离大肠杆菌细胞,已知离心管的内径为0.15m ,高0.8m ,转速为18,000 r/min,生产能力为Q=0.3m3/h。求细胞的离心沉降速度u 。
二 细胞分离与胞内产物的溶解
1、常用的细胞破碎方法有哪些
2、在选择细胞破碎方法时需要考虑哪些因素?
3、基因工程包含体的纯化方法。
三 溶剂萃取法
1、概念:分配系数,表观分配系数,分离因素,介电常数,HLB 值 ,萃取因素E ,理论收率,离子对/反应萃取;
2、pH 对弱电解质的萃取效率有何影响?
3、发酵液乳化现象产生原因与影响?如何消除乳化现象?
4、将青霉素由水相萃取到丁酯相中,其pK=2.75,萃取条件:pH=2.5,T=10℃,VF ∶VS = 1∶1,测得萃取前发酵液(水相)效价20000 u/ml,平衡后废液效价645.2 u/ml,求分配系数K 和K0。
弱酸的表观分配系数:K=K0 /(1 +10 pH - pK )
弱碱的表观分配系数: K=K0 /(1 +10 pK - pH )
5、 林可霉素性质:碱性抗生素,分子中有一个胺基pK=7.6;pH
(1)、设计提取工艺路线:
① 能否用萃取法提取?
② 选用什么溶剂最好?理由?
③ 萃取时pH 范围?
④ 欲提高分配系数,可采取什么措施?
⑤ 如需进一步反萃取,考虑反萃取的pH 范围。原因?
(2)、若采用二级逆流萃取,α=3,K0=15.56,求萃取的理论收率。
四 膜分离技术
1. 掌握浓差极化-凝胶层模型?
2. 了解管状收缩效应现象。
3. 掌握膜过滤的影响因素。
4. 膜污染是哪些途径造成?如何有效防止和清除膜污染?
五 反胶束萃取
1 、反胶束的概念、构成、优点。影响反胶束萃取的主要因素。
2、蛋白质的溶解模型和萃取的基本操作。
六 双水相萃取
1. 双水相萃取的概念、双水相萃取的特点。影响双水相萃取的因素。
2、双节线和系线的意义,双水相萃取的应用。
七 超临界流体萃取法
1、名词解释:
超临界流体;超临界流体萃取法;改性剂(共溶剂)
2、简答
简述萃取,液-液萃取,超临界流体萃取法。
解释超临界萃取对比压力、温度、密度图。
八 沉淀法
1、什么是沉淀法,具体包括哪些方法?
2、理解概念:硫酸铵饱和度,盐溶, 盐析
3、盐析的机理是什么?
4、影响盐析的因素有哪些?
5、有机溶剂沉淀蛋白质的机理什么?用乙醇
6、沉淀蛋白质时应注意哪些事项?
7、何为选择性变性沉淀法?
九 电泳技术
名词解释
1. 迁移率;2. 电渗;3. 电泳
问答题
1. 蛋白质电泳常用的方法有哪些?
2. 试述聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质原理。
十 色层分离法
1 理解概念:解离常数,分离因素,阻滞因子,理论塔板高度,洗脱体积,分辨率。 2 不同的层析方法常用的层析介质有哪些?各适用于何种状况下的分离? 十一 吸附与离子交换
1、掌握离子交换的基本步骤
2、简述纯水的制备工艺
3、离子交换与吸附的机理什么?
4、吸附的类型有哪些?
一 预处理和固液分离
1. 名词解释:错流过滤,凝聚,絮凝
2发酵液为何需要预处理?处理方法有哪些?
3凝聚与絮凝过程有何区别?
4固液分离的方法有哪些?各有和优缺点。
分离大肠杆菌细胞,已知离心管的内径为0.15m ,高0.8m ,转速为18,000 r/min,生产能力为Q=0.3m3/h。求细胞的离心沉降速度u 。
二 细胞分离与胞内产物的溶解
1、常用的细胞破碎方法有哪些
2、在选择细胞破碎方法时需要考虑哪些因素?
3、基因工程包含体的纯化方法。
三 溶剂萃取法
1、概念:分配系数,表观分配系数,分离因素,介电常数,HLB 值 ,萃取因素E ,理论收率,离子对/反应萃取;
2、pH 对弱电解质的萃取效率有何影响?
3、发酵液乳化现象产生原因与影响?如何消除乳化现象?
4、将青霉素由水相萃取到丁酯相中,其pK=2.75,萃取条件:pH=2.5,T=10℃,VF ∶VS = 1∶1,测得萃取前发酵液(水相)效价20000 u/ml,平衡后废液效价645.2 u/ml,求分配系数K 和K0。
弱酸的表观分配系数:K=K0 /(1 +10 pH - pK )
弱碱的表观分配系数: K=K0 /(1 +10 pK - pH )
5、 林可霉素性质:碱性抗生素,分子中有一个胺基pK=7.6;pH
(1)、设计提取工艺路线:
① 能否用萃取法提取?
② 选用什么溶剂最好?理由?
③ 萃取时pH 范围?
④ 欲提高分配系数,可采取什么措施?
⑤ 如需进一步反萃取,考虑反萃取的pH 范围。原因?
(2)、若采用二级逆流萃取,α=3,K0=15.56,求萃取的理论收率。
四 膜分离技术
1. 掌握浓差极化-凝胶层模型?
2. 了解管状收缩效应现象。
3. 掌握膜过滤的影响因素。
4. 膜污染是哪些途径造成?如何有效防止和清除膜污染?
五 反胶束萃取
1 、反胶束的概念、构成、优点。影响反胶束萃取的主要因素。
2、蛋白质的溶解模型和萃取的基本操作。
六 双水相萃取
1. 双水相萃取的概念、双水相萃取的特点。影响双水相萃取的因素。
2、双节线和系线的意义,双水相萃取的应用。
七 超临界流体萃取法
1、名词解释:
超临界流体;超临界流体萃取法;改性剂(共溶剂)
2、简答
简述萃取,液-液萃取,超临界流体萃取法。
解释超临界萃取对比压力、温度、密度图。
八 沉淀法
1、什么是沉淀法,具体包括哪些方法?
2、理解概念:硫酸铵饱和度,盐溶, 盐析
3、盐析的机理是什么?
4、影响盐析的因素有哪些?
5、有机溶剂沉淀蛋白质的机理什么?用乙醇
6、沉淀蛋白质时应注意哪些事项?
7、何为选择性变性沉淀法?
九 电泳技术
名词解释
1. 迁移率;2. 电渗;3. 电泳
问答题
1. 蛋白质电泳常用的方法有哪些?
2. 试述聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质原理。
十 色层分离法
1 理解概念:解离常数,分离因素,阻滞因子,理论塔板高度,洗脱体积,分辨率。 2 不同的层析方法常用的层析介质有哪些?各适用于何种状况下的分离? 十一 吸附与离子交换
1、掌握离子交换的基本步骤
2、简述纯水的制备工艺
3、离子交换与吸附的机理什么?
4、吸附的类型有哪些?