桂郁金化学成分研究_

桂郁金化学成分研究Ⅰ

葛跃伟

1, 2

, 高慧敏, 王维皓, 王智民

2223

(11西北农林科技大学动物科技学院, 陕西杨凌712100; 21中国中医科学院中药研究所, 北

京100700)

摘要:目的　研究中药桂郁金的化学成分。方法　通过大孔树脂、反复硅胶柱色谱、ODS 柱色谱和重结晶的方法进行分离纯化, 通过化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果　分离得到7个化合物, 分别为zedoar olide B (Ⅰ) , zedoar ondi ol

(Ⅱ) , zedoalact one A (Ⅲ) , alis moxide (Ⅳ) , is ozedoar ondi ol (Ⅴ) , curcu menol (Ⅵ) 和β2谷甾醇(Ⅶ) 。结论　化合物Ⅰ～Ⅵ均为

首次从本植物中分离得到。

关键词:桂郁金; 广西莪术; 化学成分; 倍半萜

中图分类号:R284　　　文献标识码:A 　　　文章编号:1001-2494(2007) 11-0822-03

Stud i es on Che m i ca l Con stituen ts i n Gu i yuji n (Report Ⅰ) GE Yue 2wei , G AO Hui 2m in ,WANG W ei 2hao ,WANG Zhi 2m in

Sciences, B eijing 100700, China )

1

2

2

23

(11College of A ni m al Science and Technology, N orthw est

A griculture and Forestry U niversity, Yangling 712100China ; 21Institute of China M aterial M edia, China A cade m y of Chinese M edical

ABSTRACT:OBJECT I VE 　T o study the che m ical constituents in Guiyujin (r oot of Curcum a kw ) 1M ETHOD S 　The compounds were is olated and purified by recrystallizati on and chr omat ography on oporus ODS 1Their structures were elucidated on the basis of che m ical and s pectral evidence 1RESU L zedoar olide B (Ⅰ) , zedoar ondi ol (Ⅱ) , zedoalact one A (Ⅲ) , alis moxide (Ⅳ) , is ozedoar ((β2sit oster ol (Ⅶ) . CO NCL U 2S I O N 　Co mpound Ⅰ～Ⅵare is olated fr om this p lant for e 1

KE Y WO R D S:Guiyujin; Curcum a kw ical pene

　　(a kw an 2gsiensis S 1G 1Lee L ) 的干燥块根, 收载于2005年版《》一部, 与温郁金、黄丝郁金和绿丝郁金共同作为郁金入药, 其性味辛、苦、寒, 归肝、心、肺经, 具有行气化瘀, 清心解郁, 利胆退黄之功效。用于经闭痛经, 胸腹涨痛、刺痛, 热病神昏, 癫

[1]

痫发狂, 黄疸尿赤。广西莪术为我国特有品种, 具有一定的化学独特性, 到目前为止, 国内关于郁金的研究多集中于温郁金, 未见有关桂郁金较为深入的化学研究。桂郁金为广西产大宗中药材, 明确其化学组成对其深入开发具有重要意义。为了寻找桂郁金的有效成分, 阐明其药效物质基础, 为新药开发提供依据, 我们对桂郁金进行了化学成分研究, 采用各种柱色谱结合重结晶法从中分离得到6个倍半萜和1个甾类化合物, 分别为zedoar olide B (Ⅰ) 、zedo 2ar ondi ol (Ⅱ) 、zedoalact one A (Ⅲ) 、alis moxide (Ⅳ) 、is ozedoar ondi ol (Ⅴ) 、curcu menol (Ⅵ) 和β2谷甾醇(Ⅶ) 。其中Ⅰ～Ⅵ均为首次从本植物中分离得到。1　仪器与材料显微熔点测定仪(DDR -8109型, 未经校正) ;

Mercury -400(美国VAR I A N 公司) 、B ruker AVANCE DRX -500型核磁共振仪(德国B ruker Op tics 公司) , T MS 为内标; 质谱仪为Trace -MS (美国Ther mv Fi m igan 公司) ; HP D -100大孔吸附树脂(沧州宝恩化工有限公司) ; 柱色谱用硅胶(青岛海洋化工厂) , C 18(40～75μm , F UJ I silysia che m ical LT D 1) ; 实验试剂均为分析纯或化学纯。桂郁金药材由广西万丰药业提供, 经中国中医科学院中药研究所生药室何希荣老师鉴定为姜科植物广西莪术(Cu rcum a kw angsiensis S 1G 1Lee et C 1F 1L iang ) 的干燥块根。2　提取与分离

桂郁金药材318kg, 用8倍量水煎煮2次, 每次1h, 滤过, 合并滤液, 用体积分数为80%的乙醇沉淀, 静置24h 后滤过, 合并滤液, 减压浓缩至浸膏状, 再以适量水稀释后上HP D -100型大孔吸附树脂, 分别用水以及体积分数为10%、30%、50%和70%的乙醇洗脱。10%乙醇部分(5g ) 经硅胶

作者简介:葛跃伟, 男, 硕士研究生　　3通讯作者:王智民, 研究员, 博士生导师　　Tel:(010) 84014128　　E 2mail:zhmw123@2631net ・822・

Chin Phar m J, 2007June, Vol 142N o 111

中国药学杂志2007年6月第42卷第11

期

(200～300目) 柱色谱(氯仿2甲醇10∶1洗脱) , 分离7∶3洗脱) , 结合结晶法得到化合物Ⅳ(6mg ) 和Ⅴ(8mg ) ; 70%乙醇部分(4g ) 经硅胶(200～300目)

得到化合物Ⅰ(12mg ) ; 30%乙醇部分(7g ) 经硅胶(200～300目) 柱色谱(正己烷2丙酮7∶3洗脱) , 分离得到化合物Ⅱ(15mg ) 、Ⅲ(18mg ) ; 50%乙醇部分(3g ) 经硅胶(200～300目) 柱色谱(石油醚2丙酮

柱色谱(石油醚2丙酮9∶1、石油醚2乙酸乙酯4∶1洗

脱) , 结合结晶法得到化合物Ⅵ(26mg ) 和Ⅶ(21mg ) 。化合物结构见图1

。

图1　化合物Ⅰ～Ⅵ的分子结构

F i g 1　Structures of compound Ⅰ～Ⅵ

3　结构鉴定

1

化合物Ⅰ:无色油状物, H 2NMR (DMS O 2d 6, 400

α) , 1182(1H, MHz ) δ:2145(1H, d, J =1512Hz, H 26

β) , 2116(1H, d, J =1512Hz, H 2d, J =1512Hz, H 26

α) , 2103(1H, d, J =1512Hz, H 2β) , 1166(3H, s, 99

13

H 213) , 1119(3H, s, H 214) , 1106(3H, s, H 215) 。C 2

献数据比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅲ为zedoalac 2

t one A 。

化合物Ⅳ:无色油状物, E I 2MS:m /z 220[M-H 2

+

O ](11) , 187(12) , 177(19) , 162(68) , 149(94) , 134(36) , 119(56) , 93(54) , 79(41) , 69(31) , 551

(35) , 43(100) 。H 2NMR (3400MHz ) δ:5149(1H, brs, H ) , 11) , 1121(3H, s, H 214) 1d, J 42, 0196(3H, d, 5

[4]

NMR (DMS O 2d 6, 100MHz ) δ:5116(C 21) , 2414(C 2

2) , 3713(C 23) , 7918(C 24) , 5017(C 25) , 2314(C 26) , 16015(C 27) , 10515(C 28) , 4315(C 29) , 7112(C 210) , 12115(C 211) , 17214(C 212) , 716(C 213) , 1832NMR (CDCl 3, 100MHz ) δ:

鉴定化合物Ⅰ为化合物Ⅱ:～134℃。H 2NMR (CDCl 3, 400:2182(1H, d, J =1512Hz, α) , 1195(H 2β) , 2195(1H, d, J =1214Hz, H 2H 266α) , 2159(1H, d, J =1214Hz, H 2β) , 1191(3H, s, 99H 212) , 1182(3H, s, H 213) , 1119(3H, s, H 214) , 1117

13

(3H, s, H 215) 。C 2NMR (CDCl 3, 100MHz ) δ:5519(C 21) , 2118(C 22) , 3917(C 23) , 7919(C 24) , 5119(C 25) , 2815(C 26) , 13416(C 27) , 20219(C 28) , 5918(C 29) , 7217(C 210) , 14211(C 211) , 2218(C 212) , 2212

[3](C 213) , 2216(C 214) , 2015(C 215) 。与文献数据

1

14) , 3112(C 215) 。与文献

[2]

7() 15(C 22) , 4015(C 23) , 8012(C 24) ,

3(C 25) , 12113(C 26) , 14917(C 27) , 2511(C 28) , 4216(C 29) , 7513(C 210) , 3713(C 211) , 2113(C 212) ,

[5]

2114(C 213) , 2215(C 214) , 2112(C 215) 。与文献

数据比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅳ为alis moxide 。化合物Ⅴ:白色雪花状结晶, mp 152～154℃。

+

E I 2MS:m /z 252[M](1) , 234(11) , 206(13) , 192(31) , 173(32) , 163(20) , 149(73) , 136(59) , 121(40) , 93(37) , 81(49) , 67(48) , 55(27) , 43(100) 。1

H 2NMR (CDCl 3, 400MHz ) δ:3123(1H, d, J =1610

α) , 2143(1H, d, J =1610Hz, H 2β) , 2101Hz, H 299(3H, s, H 212) , 1186(3H, s, H 213) , 1142(3H, s, H 2

13

14) , 1122(3H, s, H 215) 。C 2NMR (CDCl 3, 100MHz ) δ:5313(C 21) , 2511(C 22) , 3619(C 23) , 8214(C 24) , 5117(C 25) , 2714(C 26) , 13319(C 27) , 20310(C 28) , 5012(C 29) , 7312(C 210) , 14318(C 211) , 2218(C 212) , 2211(C 213) , 2419(C 214) , 3212(C 215) 。与文献数据比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅴ为is oze 2doar ondi ol 。

化合物Ⅵ:白色针簇状结晶, mp 114～116℃。

+

E I 2MS:m /z 234[M](20) , 191(22) , 189(40) , 173(12) , 147(31) , 133(43) , 119(29) , 105(100) , 91(27) , 79(13) , 55(14) , 41(54) 。1H 2NMR (P yr 2d 6,

Chin Phar m J, 2007June, V ol 142N o 1

11

[3]

比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅱ为zedoar ondi ol 。

1

化合物Ⅲ:无色油状物, H 2NMR (CDCl 3, 400MHz ) δ:4191(1H, d, J =614Hz, H 28) , 2169(1H, dd,

α) , 2128(1H, dd, J =1210, 618J =1210, 312Hz, H 29

β) , 1180(3H, s, H 2Hz, H 2913) , 1137(3H, s, H 214) ,

13

1121(3H, s, H 215) 。C 2NMR (CDCl 3, 100MHz ) δ:5116(C 21) , 2511(C 22) , 3713(C 23) , 8017(C 24) , 5110(C 25) , 2419(C 26) , 16110(C 27) , 8117(C 28) , 3612(C 29) , 7315(C 210) , 12217(C 211) , 17515(C 212) , 811(C 213) , 2416(C 214) , 3118(C 215) 。与文

中国药学杂志2007年6月第42卷第11期

　　　　　　　　　　　　　　　・823・

细脚拟青霉多糖对乙醇诱导L 202细胞损伤的保护作用研究胡云良

325027)

a, b

, 李宝剑, 金丽琴

c d 3

(温州医学院, a 1检验医学院, b 1附属二院检验科, c 1药学院, d 1基础学院生化教研室, 浙江温州

摘要:目的　探讨细脚拟青霉多糖(PtPs ) 对乙醇诱导肝细胞损伤的体外保护作用。方法　采用RT 2PCR 分别检测乙醇诱导损α(T NF 2α) mRNA 和热休克蛋白90(HSP90) mR 2伤的乙醇组、PtPs 处理组(PtPs +乙醇) 及正常对照组L 202细胞肿瘤坏死因子2

NA 的表达; 检测细胞培养上清液中黄嘌呤氧化酶(XOD ) 、超氧化物歧化酶(S OD ) 、乳酸脱氢酶(LDH ) 活性及丙二醛(MDA )

含量; 检测细胞匀浆中三磷酸腺苷酶(ATPase ) 活性, 并对各组细胞进行Annexin 2F I TC 标记染色观察凋亡细胞情况。结果　与αmRNA 表达下降(P

养上清液中S OD 活性升高、XOD 及LDH 活性下降、MDA 含量下降(P

0105或P

有保护作用。

关键词:细脚拟青霉; 多糖; L 202细胞; 乙醇; 细胞凋亡; 肝损伤

中图分类号:R965　　　文献标识码:A 　　　文章编号:1001-2494(2007) 11-0824-05

Study of the Hepa toprotecti ve Effect of Paecilom yces tenu ipes Polys acchar i des on A lcohol 2I nduced L 202Cell I n jury

HU Yun 2liang , L I Bao 2jian , J I N L i 2qin

a, b

c

d 3

(a 1School of L aboratory M b 1D M edicince, Second

A ffiliated Hosptial, c 1School of Phar m acy, d 1D epart m ent of B ioche m istry, W , China )

ABSTRACT:OBJECT I VE 　To investigate the p r otective polysaccharides (PtPs ) on alcohol 2induced

α(T NF 2α) mRNA and hepat ocyte injury in vitro 1M ETHOD S 　used ressi ons of tu mor necr osis fact or 2

heat shock p r otein 90(HSP90) 2oup, PtPs dis posed gr oup s (PtPs +alcohol ) and nor mal contr ol gr oup 1The levels of ((S OD ) , lactic dehydr ogenase (LDH ) , mal ondialdehyde (MDA ) in supernatant and adenosine tri ) in cell homogenate were deter m ined 1The cells in each gr oup were stained by Annexin 2F I TC and

500MHz ) δ:6112(1H, s, H 29) , 2167(1H, dt, J =

α) , 2118(1H, dt, J =1214Hz, H 2β) , 1214Hz, H 2662103(3H, s, H 213) , 1151(3H, s, H 212) , 1108(3H, d,

J =615Hz, H 214) , 1159(3H, s, H 215) , 1195(1H, t, J =712Hz, H 21) 。C 2NMR (P yr 2d 6, 125MHz ) δ:5115

13

(C 21) , 2811(C 22) , 3119(C 23) , 4017(C 24) , 8419(C 25) , 3718(C 26) , 13819(C 27) , 10212(C 28) , 12817(C 29) , 13714(C 210) , 12016(C 211) , 2811(C 212) , 1917

[6](C 213) , 1218(C 214) , 2114(C 215) 。与文献数据

比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅵ为curcumenol 。

化合物Ⅶ:白色针簇状结晶, 10%硫酸乙醇溶液显红色; mp 137～138℃; 与β2谷甾醇标准品混合熔点不下降, T LC Rf 值一致, 鉴定化合物Ⅶ为β2谷甾醇。

REFERENCES

(中国药典2005年版1一部) [S]12005:1441[1]　Ch 1P (2005) Vol Ⅰ

[2]　H I S AS H I M, T OS H I O M, I W AO T, et al 1I nhibit ors of nitric oxide

pr oducti on and ne w sequiter penes, zedoar ofuan, 42epicurcu menol, neocurcu menol, gajutsulact ones A and B, and zedoar olides A and B, fr o m Zedoariae r hizo m a [J]1Che m Phar m B ull , 2001, 49(12) :1558215661[3]　MAS ANOR I K,UE NO A, K AORU U, et al 1Structures of sesquiter pe 2

nes fr o m Curcu m a ar o m atica Salisb [J ]1Che m Phar m B ull , 1987, 35(1) :

532591[4]　I CH I RO T, I CH I RO Y, K O I CH I T, et al 1Guaiane sesquiter pene lac 2

t ones fr o m Curcu m a aer uginosa [J ]1Phytoche m istr y , 1995, 40(4) :1197212001[5]　MAS AY UKI Y, S HOK O Y, H I S AS H IM, et al 1Crude drug fr o m a 2

quatic plants 1Ⅳ1on the consitituents of A lis m atis rhizo m e 1(2) . ste 2reostructures of bi oactive sesquiter penes, alis mol, alis moxide, orien 2tal ols A,B, and C, fr o m Chinese Alis matis rhiz o me[J].Che m Phar m B ull , 1994, 42(9) :1813218151[6]　K URN I A F, T AKES H I K,AKI K O I , et al 1Ter penoids fr o m Curcu m a

heyneana [J]1Phytoche m istr y , 1988, 27(12) :3887238911

(收稿日期:2006209226)

基金项目:浙江省中医药科研基金资助课题(2004C121) ; 温州市科技计划项目资助课题(Y2004A008)

作者简介:胡云良, 男, 硕士, 副教授　　3通讯作者:金丽琴, 女, 教授, 硕士生导师　　Tel:(0577) 86689889　　E 2mail:liqinjin@1261com ・824・

Chin Phar m J, 2007June, Vol 142N o 111

中国药学杂志2007年6月第42卷第11期

桂郁金化学成分研究Ⅰ

葛跃伟

1, 2

, 高慧敏, 王维皓, 王智民

2223

(11西北农林科技大学动物科技学院, 陕西杨凌712100; 21中国中医科学院中药研究所, 北

京100700)

摘要:目的　研究中药桂郁金的化学成分。方法　通过大孔树脂、反复硅胶柱色谱、ODS 柱色谱和重结晶的方法进行分离纯化, 通过化合物的理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果　分离得到7个化合物, 分别为zedoar olide B (Ⅰ) , zedoar ondi ol

(Ⅱ) , zedoalact one A (Ⅲ) , alis moxide (Ⅳ) , is ozedoar ondi ol (Ⅴ) , curcu menol (Ⅵ) 和β2谷甾醇(Ⅶ) 。结论　化合物Ⅰ～Ⅵ均为

首次从本植物中分离得到。

关键词:桂郁金; 广西莪术; 化学成分; 倍半萜

中图分类号:R284　　　文献标识码:A 　　　文章编号:1001-2494(2007) 11-0822-03

Stud i es on Che m i ca l Con stituen ts i n Gu i yuji n (Report Ⅰ) GE Yue 2wei , G AO Hui 2m in ,WANG W ei 2hao ,WANG Zhi 2m in

Sciences, B eijing 100700, China )

1

2

2

23

(11College of A ni m al Science and Technology, N orthw est

A griculture and Forestry U niversity, Yangling 712100China ; 21Institute of China M aterial M edia, China A cade m y of Chinese M edical

ABSTRACT:OBJECT I VE 　T o study the che m ical constituents in Guiyujin (r oot of Curcum a kw ) 1M ETHOD S 　The compounds were is olated and purified by recrystallizati on and chr omat ography on oporus ODS 1Their structures were elucidated on the basis of che m ical and s pectral evidence 1RESU L zedoar olide B (Ⅰ) , zedoar ondi ol (Ⅱ) , zedoalact one A (Ⅲ) , alis moxide (Ⅳ) , is ozedoar ((β2sit oster ol (Ⅶ) . CO NCL U 2S I O N 　Co mpound Ⅰ～Ⅵare is olated fr om this p lant for e 1

KE Y WO R D S:Guiyujin; Curcum a kw ical pene

　　(a kw an 2gsiensis S 1G 1Lee L ) 的干燥块根, 收载于2005年版《》一部, 与温郁金、黄丝郁金和绿丝郁金共同作为郁金入药, 其性味辛、苦、寒, 归肝、心、肺经, 具有行气化瘀, 清心解郁, 利胆退黄之功效。用于经闭痛经, 胸腹涨痛、刺痛, 热病神昏, 癫

[1]

痫发狂, 黄疸尿赤。广西莪术为我国特有品种, 具有一定的化学独特性, 到目前为止, 国内关于郁金的研究多集中于温郁金, 未见有关桂郁金较为深入的化学研究。桂郁金为广西产大宗中药材, 明确其化学组成对其深入开发具有重要意义。为了寻找桂郁金的有效成分, 阐明其药效物质基础, 为新药开发提供依据, 我们对桂郁金进行了化学成分研究, 采用各种柱色谱结合重结晶法从中分离得到6个倍半萜和1个甾类化合物, 分别为zedoar olide B (Ⅰ) 、zedo 2ar ondi ol (Ⅱ) 、zedoalact one A (Ⅲ) 、alis moxide (Ⅳ) 、is ozedoar ondi ol (Ⅴ) 、curcu menol (Ⅵ) 和β2谷甾醇(Ⅶ) 。其中Ⅰ～Ⅵ均为首次从本植物中分离得到。1　仪器与材料显微熔点测定仪(DDR -8109型, 未经校正) ;

Mercury -400(美国VAR I A N 公司) 、B ruker AVANCE DRX -500型核磁共振仪(德国B ruker Op tics 公司) , T MS 为内标; 质谱仪为Trace -MS (美国Ther mv Fi m igan 公司) ; HP D -100大孔吸附树脂(沧州宝恩化工有限公司) ; 柱色谱用硅胶(青岛海洋化工厂) , C 18(40～75μm , F UJ I silysia che m ical LT D 1) ; 实验试剂均为分析纯或化学纯。桂郁金药材由广西万丰药业提供, 经中国中医科学院中药研究所生药室何希荣老师鉴定为姜科植物广西莪术(Cu rcum a kw angsiensis S 1G 1Lee et C 1F 1L iang ) 的干燥块根。2　提取与分离

桂郁金药材318kg, 用8倍量水煎煮2次, 每次1h, 滤过, 合并滤液, 用体积分数为80%的乙醇沉淀, 静置24h 后滤过, 合并滤液, 减压浓缩至浸膏状, 再以适量水稀释后上HP D -100型大孔吸附树脂, 分别用水以及体积分数为10%、30%、50%和70%的乙醇洗脱。10%乙醇部分(5g ) 经硅胶

作者简介:葛跃伟, 男, 硕士研究生　　3通讯作者:王智民, 研究员, 博士生导师　　Tel:(010) 84014128　　E 2mail:zhmw123@2631net ・822・

Chin Phar m J, 2007June, Vol 142N o 111

中国药学杂志2007年6月第42卷第11

期

(200～300目) 柱色谱(氯仿2甲醇10∶1洗脱) , 分离7∶3洗脱) , 结合结晶法得到化合物Ⅳ(6mg ) 和Ⅴ(8mg ) ; 70%乙醇部分(4g ) 经硅胶(200～300目)

得到化合物Ⅰ(12mg ) ; 30%乙醇部分(7g ) 经硅胶(200～300目) 柱色谱(正己烷2丙酮7∶3洗脱) , 分离得到化合物Ⅱ(15mg ) 、Ⅲ(18mg ) ; 50%乙醇部分(3g ) 经硅胶(200～300目) 柱色谱(石油醚2丙酮

柱色谱(石油醚2丙酮9∶1、石油醚2乙酸乙酯4∶1洗

脱) , 结合结晶法得到化合物Ⅵ(26mg ) 和Ⅶ(21mg ) 。化合物结构见图1

。

图1　化合物Ⅰ～Ⅵ的分子结构

F i g 1　Structures of compound Ⅰ～Ⅵ

3　结构鉴定

1

化合物Ⅰ:无色油状物, H 2NMR (DMS O 2d 6, 400

α) , 1182(1H, MHz ) δ:2145(1H, d, J =1512Hz, H 26

β) , 2116(1H, d, J =1512Hz, H 2d, J =1512Hz, H 26

α) , 2103(1H, d, J =1512Hz, H 2β) , 1166(3H, s, 99

13

H 213) , 1119(3H, s, H 214) , 1106(3H, s, H 215) 。C 2

献数据比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅲ为zedoalac 2

t one A 。

化合物Ⅳ:无色油状物, E I 2MS:m /z 220[M-H 2

+

O ](11) , 187(12) , 177(19) , 162(68) , 149(94) , 134(36) , 119(56) , 93(54) , 79(41) , 69(31) , 551

(35) , 43(100) 。H 2NMR (3400MHz ) δ:5149(1H, brs, H ) , 11) , 1121(3H, s, H 214) 1d, J 42, 0196(3H, d, 5

[4]

NMR (DMS O 2d 6, 100MHz ) δ:5116(C 21) , 2414(C 2

2) , 3713(C 23) , 7918(C 24) , 5017(C 25) , 2314(C 26) , 16015(C 27) , 10515(C 28) , 4315(C 29) , 7112(C 210) , 12115(C 211) , 17214(C 212) , 716(C 213) , 1832NMR (CDCl 3, 100MHz ) δ:

鉴定化合物Ⅰ为化合物Ⅱ:～134℃。H 2NMR (CDCl 3, 400:2182(1H, d, J =1512Hz, α) , 1195(H 2β) , 2195(1H, d, J =1214Hz, H 2H 266α) , 2159(1H, d, J =1214Hz, H 2β) , 1191(3H, s, 99H 212) , 1182(3H, s, H 213) , 1119(3H, s, H 214) , 1117

13

(3H, s, H 215) 。C 2NMR (CDCl 3, 100MHz ) δ:5519(C 21) , 2118(C 22) , 3917(C 23) , 7919(C 24) , 5119(C 25) , 2815(C 26) , 13416(C 27) , 20219(C 28) , 5918(C 29) , 7217(C 210) , 14211(C 211) , 2218(C 212) , 2212

[3](C 213) , 2216(C 214) , 2015(C 215) 。与文献数据

1

14) , 3112(C 215) 。与文献

[2]

7() 15(C 22) , 4015(C 23) , 8012(C 24) ,

3(C 25) , 12113(C 26) , 14917(C 27) , 2511(C 28) , 4216(C 29) , 7513(C 210) , 3713(C 211) , 2113(C 212) ,

[5]

2114(C 213) , 2215(C 214) , 2112(C 215) 。与文献

数据比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅳ为alis moxide 。化合物Ⅴ:白色雪花状结晶, mp 152～154℃。

+

E I 2MS:m /z 252[M](1) , 234(11) , 206(13) , 192(31) , 173(32) , 163(20) , 149(73) , 136(59) , 121(40) , 93(37) , 81(49) , 67(48) , 55(27) , 43(100) 。1

H 2NMR (CDCl 3, 400MHz ) δ:3123(1H, d, J =1610

α) , 2143(1H, d, J =1610Hz, H 2β) , 2101Hz, H 299(3H, s, H 212) , 1186(3H, s, H 213) , 1142(3H, s, H 2

13

14) , 1122(3H, s, H 215) 。C 2NMR (CDCl 3, 100MHz ) δ:5313(C 21) , 2511(C 22) , 3619(C 23) , 8214(C 24) , 5117(C 25) , 2714(C 26) , 13319(C 27) , 20310(C 28) , 5012(C 29) , 7312(C 210) , 14318(C 211) , 2218(C 212) , 2211(C 213) , 2419(C 214) , 3212(C 215) 。与文献数据比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅴ为is oze 2doar ondi ol 。

化合物Ⅵ:白色针簇状结晶, mp 114～116℃。

+

E I 2MS:m /z 234[M](20) , 191(22) , 189(40) , 173(12) , 147(31) , 133(43) , 119(29) , 105(100) , 91(27) , 79(13) , 55(14) , 41(54) 。1H 2NMR (P yr 2d 6,

Chin Phar m J, 2007June, V ol 142N o 1

11

[3]

比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅱ为zedoar ondi ol 。

1

化合物Ⅲ:无色油状物, H 2NMR (CDCl 3, 400MHz ) δ:4191(1H, d, J =614Hz, H 28) , 2169(1H, dd,

α) , 2128(1H, dd, J =1210, 618J =1210, 312Hz, H 29

β) , 1180(3H, s, H 2Hz, H 2913) , 1137(3H, s, H 214) ,

13

1121(3H, s, H 215) 。C 2NMR (CDCl 3, 100MHz ) δ:5116(C 21) , 2511(C 22) , 3713(C 23) , 8017(C 24) , 5110(C 25) , 2419(C 26) , 16110(C 27) , 8117(C 28) , 3612(C 29) , 7315(C 210) , 12217(C 211) , 17515(C 212) , 811(C 213) , 2416(C 214) , 3118(C 215) 。与文

中国药学杂志2007年6月第42卷第11期

　　　　　　　　　　　　　　　・823・

细脚拟青霉多糖对乙醇诱导L 202细胞损伤的保护作用研究胡云良

325027)

a, b

, 李宝剑, 金丽琴

c d 3

(温州医学院, a 1检验医学院, b 1附属二院检验科, c 1药学院, d 1基础学院生化教研室, 浙江温州

摘要:目的　探讨细脚拟青霉多糖(PtPs ) 对乙醇诱导肝细胞损伤的体外保护作用。方法　采用RT 2PCR 分别检测乙醇诱导损α(T NF 2α) mRNA 和热休克蛋白90(HSP90) mR 2伤的乙醇组、PtPs 处理组(PtPs +乙醇) 及正常对照组L 202细胞肿瘤坏死因子2

NA 的表达; 检测细胞培养上清液中黄嘌呤氧化酶(XOD ) 、超氧化物歧化酶(S OD ) 、乳酸脱氢酶(LDH ) 活性及丙二醛(MDA )

含量; 检测细胞匀浆中三磷酸腺苷酶(ATPase ) 活性, 并对各组细胞进行Annexin 2F I TC 标记染色观察凋亡细胞情况。结果　与αmRNA 表达下降(P

养上清液中S OD 活性升高、XOD 及LDH 活性下降、MDA 含量下降(P

0105或P

有保护作用。

关键词:细脚拟青霉; 多糖; L 202细胞; 乙醇; 细胞凋亡; 肝损伤

中图分类号:R965　　　文献标识码:A 　　　文章编号:1001-2494(2007) 11-0824-05

Study of the Hepa toprotecti ve Effect of Paecilom yces tenu ipes Polys acchar i des on A lcohol 2I nduced L 202Cell I n jury

HU Yun 2liang , L I Bao 2jian , J I N L i 2qin

a, b

c

d 3

(a 1School of L aboratory M b 1D M edicince, Second

A ffiliated Hosptial, c 1School of Phar m acy, d 1D epart m ent of B ioche m istry, W , China )

ABSTRACT:OBJECT I VE 　To investigate the p r otective polysaccharides (PtPs ) on alcohol 2induced

α(T NF 2α) mRNA and hepat ocyte injury in vitro 1M ETHOD S 　used ressi ons of tu mor necr osis fact or 2

heat shock p r otein 90(HSP90) 2oup, PtPs dis posed gr oup s (PtPs +alcohol ) and nor mal contr ol gr oup 1The levels of ((S OD ) , lactic dehydr ogenase (LDH ) , mal ondialdehyde (MDA ) in supernatant and adenosine tri ) in cell homogenate were deter m ined 1The cells in each gr oup were stained by Annexin 2F I TC and

500MHz ) δ:6112(1H, s, H 29) , 2167(1H, dt, J =

α) , 2118(1H, dt, J =1214Hz, H 2β) , 1214Hz, H 2662103(3H, s, H 213) , 1151(3H, s, H 212) , 1108(3H, d,

J =615Hz, H 214) , 1159(3H, s, H 215) , 1195(1H, t, J =712Hz, H 21) 。C 2NMR (P yr 2d 6, 125MHz ) δ:5115

13

(C 21) , 2811(C 22) , 3119(C 23) , 4017(C 24) , 8419(C 25) , 3718(C 26) , 13819(C 27) , 10212(C 28) , 12817(C 29) , 13714(C 210) , 12016(C 211) , 2811(C 212) , 1917

[6](C 213) , 1218(C 214) , 2114(C 215) 。与文献数据

比较, 基本一致, 鉴定化合物Ⅵ为curcumenol 。

化合物Ⅶ:白色针簇状结晶, 10%硫酸乙醇溶液显红色; mp 137～138℃; 与β2谷甾醇标准品混合熔点不下降, T LC Rf 值一致, 鉴定化合物Ⅶ为β2谷甾醇。

REFERENCES

(中国药典2005年版1一部) [S]12005:1441[1]　Ch 1P (2005) Vol Ⅰ

[2]　H I S AS H I M, T OS H I O M, I W AO T, et al 1I nhibit ors of nitric oxide

pr oducti on and ne w sequiter penes, zedoar ofuan, 42epicurcu menol, neocurcu menol, gajutsulact ones A and B, and zedoar olides A and B, fr o m Zedoariae r hizo m a [J]1Che m Phar m B ull , 2001, 49(12) :1558215661[3]　MAS ANOR I K,UE NO A, K AORU U, et al 1Structures of sesquiter pe 2

nes fr o m Curcu m a ar o m atica Salisb [J ]1Che m Phar m B ull , 1987, 35(1) :

532591[4]　I CH I RO T, I CH I RO Y, K O I CH I T, et al 1Guaiane sesquiter pene lac 2

t ones fr o m Curcu m a aer uginosa [J ]1Phytoche m istr y , 1995, 40(4) :1197212001[5]　MAS AY UKI Y, S HOK O Y, H I S AS H IM, et al 1Crude drug fr o m a 2

quatic plants 1Ⅳ1on the consitituents of A lis m atis rhizo m e 1(2) . ste 2reostructures of bi oactive sesquiter penes, alis mol, alis moxide, orien 2tal ols A,B, and C, fr o m Chinese Alis matis rhiz o me[J].Che m Phar m B ull , 1994, 42(9) :1813218151[6]　K URN I A F, T AKES H I K,AKI K O I , et al 1Ter penoids fr o m Curcu m a

heyneana [J]1Phytoche m istr y , 1988, 27(12) :3887238911

(收稿日期:2006209226)

基金项目:浙江省中医药科研基金资助课题(2004C121) ; 温州市科技计划项目资助课题(Y2004A008)

作者简介:胡云良, 男, 硕士, 副教授　　3通讯作者:金丽琴, 女, 教授, 硕士生导师　　Tel:(0577) 86689889　　E 2mail:liqinjin@1261com ・824・

Chin Phar m J, 2007June, Vol 142N o 111

中国药学杂志2007年6月第42卷第11期