花色苷的测定

4.1.4 材料处理

4.1.4.1 草莓果实中花色苷的提取

按照Orak(2007)的方法,并略作修改,选取多个具有代表性的草莓果实,在液氮保护下迅速研成粉状,从中准确称取1.00g转入10mL离心管,加入5mL甲醇-HCl(95:5)提取剂,超声30min (功率为100w,温度为30℃),静置30min,12000g离心10min,倾上清液留存,同上再加入5mL提取液,超声30min,静置,离心,倾上清液留存,最后用提取剂再洗涤残渣2次,离心,最后将提取液合并定容至25mL。提取液于-20℃冰箱中保存待液相分析用,液相测定前提取液样品经0.45μm微孔滤膜过滤。

4.1.5 HPLC色谱条件

LiChrospher 100RP-18e 色谱柱(250×4.0 mm I.D.,5 μm,Merck),保护柱为RP-18(10 mm×4mm,Merck),紫外检测波长为520 nm,柱温40℃,进样量为20 μl。根据保留时间(RT)及吸收光谱与标准品对照定性,以峰面积外标法定量。

流动相A:水—甲酸,体积比100:1.5;

流动相B:水—甲醇体积比25:75,然后用甲酸调整pH值到2.35

把流动相按照比例配好,配好之后过流动相滤膜,然后超声20分钟。

洗脱程序:

0min:90%A,10%B;

0min-10min:90%A,10%B;

10-50min:90%A-40%A;10%B-60%B;

50-55min:40%A-10%A;60%B-90%B;

55-60min:10%A-90%A;90%B-10%B

天竺葵素-3-葡萄糖苷标准曲线

4.1.4 材料处理

4.1.4.1 草莓果实中花色苷的提取

按照Orak(2007)的方法,并略作修改,选取多个具有代表性的草莓果实,在液氮保护下迅速研成粉状,从中准确称取1.00g转入10mL离心管,加入5mL甲醇-HCl(95:5)提取剂,超声30min (功率为100w,温度为30℃),静置30min,12000g离心10min,倾上清液留存,同上再加入5mL提取液,超声30min,静置,离心,倾上清液留存,最后用提取剂再洗涤残渣2次,离心,最后将提取液合并定容至25mL。提取液于-20℃冰箱中保存待液相分析用,液相测定前提取液样品经0.45μm微孔滤膜过滤。

4.1.5 HPLC色谱条件

LiChrospher 100RP-18e 色谱柱(250×4.0 mm I.D.,5 μm,Merck),保护柱为RP-18(10 mm×4mm,Merck),紫外检测波长为520 nm,柱温40℃,进样量为20 μl。根据保留时间(RT)及吸收光谱与标准品对照定性,以峰面积外标法定量。

流动相A:水—甲酸,体积比100:1.5;

流动相B:水—甲醇体积比25:75,然后用甲酸调整pH值到2.35

把流动相按照比例配好,配好之后过流动相滤膜,然后超声20分钟。

洗脱程序:

0min:90%A,10%B;

0min-10min:90%A,10%B;

10-50min:90%A-40%A;10%B-60%B;

50-55min:40%A-10%A;60%B-90%B;

55-60min:10%A-90%A;90%B-10%B

天竺葵素-3-葡萄糖苷标准曲线


相关内容

  • 紫薯花色苷提取工艺研究
  • 堡墼堡壅高躺糕㈣ 紫薯花色苷提取工艺研究 孙欣1,赵林2,厉玉婷2,陈蕾蕾1,裘纪莹1,刘孝永1,陈相艳h (1.JIJ东省农业科学院农产Hn[I皿'I究所,济南250100: 2.f|I东轻|.qk,7:院,-东省r.№微,仁物莺点实验室,济南250353) 摘要:本文研究r紫薯色素的最侄提取^法 ...

  • 蓝莓花青素的提取工艺条件
  • 第26卷第3期 200 大连轻工业学院学报 JournalofDalianInstituteofLightIndustry VoL26No-3 7年9月Sept.2007 文章编号:1005-401412007)03-0196-03 蓝莓花青素的提取工艺条件 王兆雨,徐美玲,朱蓓薇 (大连工业大学生 ...

  • 紫甘蓝中花青素提取实验报告
  • 紫甘蓝中花青素的提取 (安徽农业大学 12青年农场主班) 花青素具有很强的抗氧化作用,具有清除体内自由基.过敏.保护胃粘膜等多种功能,引起了国内外学者广泛关注.目前抗变异.抗肿瘤.抗,对花青素的研究主要集中于花青素的提取.分离纯化.热稳定性.抗氧化性及其生理功能等方面. 1.实验原理 紫甘蓝花青素或 ...

  • 遗传定律复习题三
  • 遗传定律复习题三 1. 某自然种群的雌雄异株植物为XY 型性别决定,该植物的花色(白色.蓝色和紫色)是由常染色体上的两对独立遗传的等位基因(A 和a .B 和b )控制,叶型(宽叶和窄叶)由另一对位于性染色体上的等位基因(D 和d )控制,请据图回答. (1)图甲中的基因是通过控制的合成来控制代谢过 ...

  • 丽格海棠及其栽培技术
  • /Barkos0./Bazan0./Azotus0. 丽格海棠及其栽培技术 韩富军 (甘肃省农业科学院林果花卉研究所,甘肃兰州730070) 3 栽培技术要点 3.1 育苗方法 3.1.1 扦插育苗 扦插是丽格海棠最主要的繁殖方法.其方法是将刀具用70%酒精浸泡30min进行消毒处理后,结合整形,选 ...

  • 果胶酶对葡萄酒中生物活性物质浸提的影响
  • 浅谈果胶酶对葡萄酒中生理活性物质浸提的影响 摘要本文主要综述了果胶酶对浸提葡萄酒中的生理活性物质,如白藜芦醇.花色素和花色苷.单宁以及干浸出物的影响,根据各种实验表明,果胶酶能够增加这些多酚类化合物的浸提和积聚,使葡萄酒更有价值,对人体有益. 关键词葡萄酒果胶酶多酚类化合物干浸出物 前言 葡萄酒是当 ...

  • 湿法超微粉碎提取葡萄皮中花青素_黄晓庆
  • 工艺技术 湿法超微粉碎提取葡萄皮中花青素 黄晓庆 广州合诚实业有限公司(广州 510620) 摘要为了提高效率及降低成本,采用了湿法超微粉碎辅助提取葡萄皮中的花青素,考察了料液比.提取时 间.溶剂比例.磨齿间隙等对花青素提取率的影响,利用大孔树脂对所提取的花青素进行纯化,低温冷冻浓缩制备花青素纯品. ...

  • 2016年4月浙江生物选考卷含答案
  • 2016年4月浙江省普通高校招生选考.选考科目考试 生物试题 考生注意: 1.答题前,请务必将自己的姓名.准考证号用黑色字迹的签字笔或钢笔分别填写在试题卷和答题纸规定的位置上. 2.答题时,请按照答题纸上"注意事项"的要求,在答题纸相应位置上规范作答,在本试题卷上的作答一律无效. ...

  • 家庭秋播的草本花卉
  • 家庭秋播的草本花卉 真正的花友,大多喜欢自己播种的.当把亲手培育的花儿馈赠给亲朋好友时,心底涌起的是一种自豪.草本花卉中的二年生花卉和多年生草本中,很多采用秋季播种 的方法来培育花卉种苗.为了让大家能掌握草花播种的要领,这里推荐一些适宜家庭阳台.庭院播种栽培.观花效果好的草本花卉. 金鱼草 又名龙头 ...