专题1 基因工程
1.2 基因工程的基本操作程序
姓名： 班级： 学号：
一、学习目标
1. 简述基因工程基本操作程序的四个步骤。
2. 说出目的基因的获得、运载体的构建、目的基因的导入与检测等常用的方法及其基本原理。
二、学习重点和难点
1. 学习重点：基因购买您构成基本操作程序的四个步骤。
2. 学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因。
（2）利用PCR 技术扩增目的基因。
三、学习过程
考点一：基因工程的基本操作程序
1. 复习引入，回顾并结合P8内容简述基因工程的四个基本操作步骤：
（1） ；
（2） ；
（3） ；
（4） 。
考点二：基因工程的基本操作程序每一步骤的必要性分析
（一）目的基因的获取
阅读教材P8—9相关内容，思考并讨论：
2. 举例说明什么是目的基因？
3. 目的基因的获取途径有哪些？
（1）从 中获取目的基因；
（2）利用 扩增目的基因；
（3）用化学方法直接 。
※从基因文库中获取目的基因
4. 什么是基因文库？基因文库包括哪两种？
（1）基因文库：将含有某种生物 的许多DNA 片段，导入 的群体中
通过克隆而储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。
（2）种类： 和
☆ 启动子：具有启动作用的DNA 片段；
☆ 内含子：位于编码蛋白质序列内的非编码DNA 片段。
6. 怎样从基因文库中得到我们所需要的目的基因呢？
根据基因的 序列、基因的功能、基因在 上的位置、基因的转录产物mRNA 、
及基因的表达产物 等的特性来获取目的基因。
※利用PCR 技术扩增目的基因
阅读教材P10—11相关内容，思考并讨论：
7. 什么是PCR 技术？PCR 技术的全称？目的是什么？原理是什么？特点是什么？需要哪些物
质和条件？过程是怎样的？
PCR 技术：
全称：
目的：
原理：
特点：
物质和条件：
过程：第一步： 第二步： 第三步：
☆PCR 技术在 中自动完成。
8. 如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过用化学方法直接人工合成。
（二）基因表达载体的构建（基因工程的 ）
阅读教材P11相关内容，思考并讨论：
9. 基因表达载体构建的目的是什么？
目的：使 在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，是目的基因能够 作用。
10. 一个基因表达载体的组成原件有哪些？各自有何功能？
（1）基因表达载体的组成原件：
（2） ：位于基因的首端，是 识别和结合的部位。
终止子：位于基因的尾端，使 在所需要的地方停止下来。 ：为了鉴别受体细胞中是否含有 ，从而将含目的基因的细胞筛
选出来。
（三）将目的基因导入受体细胞
阅读教材P11—12相关内容，思考并讨论：
11. 什么是转化？
※将目的基因导入植物细胞
12. 将目的基因导入植物细胞的方法有哪些？适用范围如何？
13. 农杆菌转化法为什么不能用于单子叶植物？
14. 农杆菌感染双子叶植物和裸子植物过程是怎样的？
15. 农杆菌转化法的过程是怎样的？
※将目的基因导入动物细胞
16. 将目的基因导入动物细胞的最为有效的方法是什么？基本操作程序是什么？
※将目的基因导入微生物细胞
17. 早期基因工程都用原核生物作为受体细胞的原因是什么？
18. 大肠杆菌细胞最常用的转化方法是怎样的？
首先，用 处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中的DNA 分子的生理状态，这种细
胞称 ；第二步将重组表达载体DNA 分子溶于 中与感受态细胞混合，在
一定的温度下促进感受态细胞吸收 分子，完成转化过程。
※目的基因的检测与鉴定（检验基因工程是否 的一步）
19. 为什么要对目的基因进行检测与鉴定？
20. （1）怎样检测转基因生物染色体上是否插入了目的基因？
（2）怎样检测目的基因转录出了mRNA ？
（3）怎样检测目的基因是否翻译成蛋白质？
（4）以上检测都是在什么水平上的检测？检测的原理分别是什么？可不可以在个体水平
上鉴定？举例说明。
四、重难点剖析
1. PCR 中的DNA 聚合酶和普通DNA 聚合酶有何异同？
2. 利用反转录法得到的目的基因有何特点？
据已知蛋白质的氨基酸序列推测出相应的mRNA 序列，然后再推测出它的结构基因的核
苷酸序列，通过化学合成以单核苷酸为原料合成的目的基因只有一种吗？为什么？
3. 为什么不把目的基因直接导入受体细胞，而是要构建表达载体？
4. 目的基因与质粒结合形成重组质粒的步骤是怎样的？基因表达载体的构建都是一样的
吗？
5. 转基因植物的受体细胞可以是什么？转基因动物呢？为什么？
6. 基因工程中，为什么目的基因能与质粒形成重组质粒？
目的基因为什么能在受体细胞中得到表达？
7. 基因工程的四步操作中，哪些步骤涉及到了碱基互补配对？
我的疑惑：
专题1 基因工程
1.2 基因工程的基本操作程序
姓名： 班级： 学号：
一、学习目标
1. 简述基因工程基本操作程序的四个步骤。
2. 说出目的基因的获得、运载体的构建、目的基因的导入与检测等常用的方法及其基本原理。
二、学习重点和难点
1. 学习重点：基因购买您构成基本操作程序的四个步骤。
2. 学习难点：（1）从基因文库中获取目的基因。
（2）利用PCR 技术扩增目的基因。
三、学习过程
考点一：基因工程的基本操作程序
1. 复习引入，回顾并结合P8内容简述基因工程的四个基本操作步骤：
（1） ；
（2） ；
（3） ；
（4） 。
考点二：基因工程的基本操作程序每一步骤的必要性分析
（一）目的基因的获取
阅读教材P8—9相关内容，思考并讨论：
2. 举例说明什么是目的基因？
3. 目的基因的获取途径有哪些？
（1）从 中获取目的基因；
（2）利用 扩增目的基因；
（3）用化学方法直接 。
※从基因文库中获取目的基因
4. 什么是基因文库？基因文库包括哪两种？
（1）基因文库：将含有某种生物 的许多DNA 片段，导入 的群体中
通过克隆而储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因。
（2）种类： 和
☆ 启动子：具有启动作用的DNA 片段；
☆ 内含子：位于编码蛋白质序列内的非编码DNA 片段。
6. 怎样从基因文库中得到我们所需要的目的基因呢？
根据基因的 序列、基因的功能、基因在 上的位置、基因的转录产物mRNA 、
及基因的表达产物 等的特性来获取目的基因。
※利用PCR 技术扩增目的基因
阅读教材P10—11相关内容，思考并讨论：
7. 什么是PCR 技术？PCR 技术的全称？目的是什么？原理是什么？特点是什么？需要哪些物
质和条件？过程是怎样的？
PCR 技术：
全称：
目的：
原理：
特点：
物质和条件：
过程：第一步： 第二步： 第三步：
☆PCR 技术在 中自动完成。
8. 如果基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过用化学方法直接人工合成。
（二）基因表达载体的构建（基因工程的 ）
阅读教材P11相关内容，思考并讨论：
9. 基因表达载体构建的目的是什么？
目的：使 在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，是目的基因能够 作用。
10. 一个基因表达载体的组成原件有哪些？各自有何功能？
（1）基因表达载体的组成原件：
（2） ：位于基因的首端，是 识别和结合的部位。
终止子：位于基因的尾端，使 在所需要的地方停止下来。 ：为了鉴别受体细胞中是否含有 ，从而将含目的基因的细胞筛
选出来。
（三）将目的基因导入受体细胞
阅读教材P11—12相关内容，思考并讨论：
11. 什么是转化？
※将目的基因导入植物细胞
12. 将目的基因导入植物细胞的方法有哪些？适用范围如何？
13. 农杆菌转化法为什么不能用于单子叶植物？
14. 农杆菌感染双子叶植物和裸子植物过程是怎样的？
15. 农杆菌转化法的过程是怎样的？
※将目的基因导入动物细胞
16. 将目的基因导入动物细胞的最为有效的方法是什么？基本操作程序是什么？
※将目的基因导入微生物细胞
17. 早期基因工程都用原核生物作为受体细胞的原因是什么？
18. 大肠杆菌细胞最常用的转化方法是怎样的？
首先，用 处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中的DNA 分子的生理状态，这种细
胞称 ；第二步将重组表达载体DNA 分子溶于 中与感受态细胞混合，在
一定的温度下促进感受态细胞吸收 分子，完成转化过程。
※目的基因的检测与鉴定（检验基因工程是否 的一步）
19. 为什么要对目的基因进行检测与鉴定？
20. （1）怎样检测转基因生物染色体上是否插入了目的基因？
（2）怎样检测目的基因转录出了mRNA ？
（3）怎样检测目的基因是否翻译成蛋白质？
（4）以上检测都是在什么水平上的检测？检测的原理分别是什么？可不可以在个体水平
上鉴定？举例说明。
四、重难点剖析
1. PCR 中的DNA 聚合酶和普通DNA 聚合酶有何异同？
2. 利用反转录法得到的目的基因有何特点？
据已知蛋白质的氨基酸序列推测出相应的mRNA 序列，然后再推测出它的结构基因的核
苷酸序列，通过化学合成以单核苷酸为原料合成的目的基因只有一种吗？为什么？
3. 为什么不把目的基因直接导入受体细胞，而是要构建表达载体？
4. 目的基因与质粒结合形成重组质粒的步骤是怎样的？基因表达载体的构建都是一样的
吗？
5. 转基因植物的受体细胞可以是什么？转基因动物呢？为什么？
6. 基因工程中，为什么目的基因能与质粒形成重组质粒？
目的基因为什么能在受体细胞中得到表达？
7. 基因工程的四步操作中，哪些步骤涉及到了碱基互补配对？
我的疑惑：