柱色谱分离中的应用
摘要：本文主要简述柱色谱的基本知识，了解柱色谱的简要操作以及分类。简介柱色谱的广泛应用等。 关键词：柱色谱 分离 吸附剂 一、概念
1、柱色谱
柱色谱是在一根玻璃管或金属管中迸行的色谱技术，将吸附剂填充到管中而使之成为柱状，这样的管状柱称为吸附色谱柱。使用吸附色谱柱分离混合物的方法，称为吸附柱色谱。这种方法可以用来分离大多数有机化合物，尤其适合于复杂的天然产物的分离。分离容量从几毫克到百毫克级，所以，适用于分离和精制较大量的样品
2、吸附剂
吸附剂是能有效地从气体或液体中吸附其中某些成分的固体物质。吸附剂一般有以下特点：大的比表面、适宜的孔结构及表面结构；对吸附质有强烈的吸附能力；一般不与吸附质和介质发生化学反应；制造方便，容易再生；有良好的机械强度等。吸附剂可按孔径大小、颗粒形状、化学成分、表面极性等分类，如粗孔和细孔吸附剂，粉状、粒状、条状吸附剂，碳质和氧化物吸附剂，极性和非极性吸附剂等。
吸附剂要求
一种合适的吸附剂，一般应满足下列几个基本要求: ⑴对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应，在洗脱剂中也不会溶解。
⑵对待分离组分能够进行可逆的吸附，同时具有足够的吸附力，使组分在固定相与流动相之间能最快地达到平衡。 ⑶颗粒形状均匀，大小适当，以保证洗脱剂能够以一定的流速 （一般为1.5 mL·min-1）通过色谱柱。
⑷材料易得，价格便宜而且是无色的，以便于观察。可用于吸附剂的物质有氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙 （镁）、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。其中有些对几类物质分离效果较好，而对其它大多数化合物不适用。
二、柱色谱分类：
1.吸附柱色谱
色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入
吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果。除另有规定外,
通常多采用直径为0.07～0.15mm的颗粒。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱
时的流速，均按各品种项下的规定。
(1) 吸附剂的填装 ①干法 将吸附剂一次加入色谱柱，振动管壁使其均匀下沉，
然后沿管壁缓缓加入洗脱剂；或在色谱柱下端出口处连接活塞，加入适量的洗脱剂，旋
开活塞使洗脱剂缓缓滴出，然后自管顶缓缓加入吸附剂，使其均匀地润湿下沉，在管内
形成松紧适度的吸附层。操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。
②湿法 将吸附剂与洗脱剂混合，搅拌除去空气泡，徐徐倾入色谱柱中，然后加入
洗脱剂将附着管壁的吸附剂洗下，使色谱柱面平整。 俟填装吸附剂所用洗脱剂从色谱柱自然流下，液面和柱表面相平时，即加供试品溶
液。
(2) 供试品的加入 除另有规定外，将供试品溶于开始洗脱时使用的洗脱剂中，再
沿色谱管壁缓缓加入，注意勿使吸附剂翻起。或将供试品溶于适当的溶剂中，与少量吸
附剂混匀，再使溶剂挥发去尽使呈松散状，加在已制备好的色谱柱上面。如供试品在常
用溶剂中不溶，可将供试品与适量的吸附剂在乳钵中研磨混
匀后加入。
(3) 洗脱 除另有规定外，通常按洗脱剂洗脱能力大小递增变换洗脱剂的品种和比
例，分别分部收集流出液，至流出液中所含成分显著减少或不再含有时，再改变洗脱剂
的品种和比例。操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。
2.分配柱色谱
方法和吸附柱色谱基本一致。装柱前，先将载体和固定液混合，然后分次移入色谱
柱中并用带有平面的玻棒压紧；供试品可溶于固定液，混以少量载体，加在预制好的色
谱柱上端。
洗脱剂需先加固定液混合使之饱和，以避免洗脱过程中两相分配的改变。 实验关键步骤：
1、 装柱要紧密，要求无断层、无缝隙。
2、 在装柱、洗脱过程中，始终保持有溶剂覆盖吸附剂。 一个色带与另一色带的洗脱液的接受不要交叉
三、柱色谱的分离应用
1、天然胡萝卜素的提取及分离
【摘要】 采用浸取法从胡萝卜中提取胡萝卜素,研究了不同提取剂对胡萝卜素提取效果的影响。使用薄层色谱(TLC)、柱色谱对提取液进行分离纯化,采用紫外可见分光光度计测定胡萝
卜素含量。研究结果表明:用丙酮—石油醚(3:7,V/V)混合液提取效果较好,提取的胡萝卜素含量可达995μg?g;薄层色谱分离中展开剂选用石油醚和乙醚的混合液,两者比例为9∶1时分离效果最好;柱色谱的洗脱速度和效果与溶剂极性相关,洗脱剂为石油醚和乙醚的混合液时色带分离明显
2、紫杉醇生产新工艺研究
【摘要】 从红豆杉茎皮提取紫杉醇，采用１％柠檬酸渗漉、柱色谱分离、溴加成后柱色谱分离的新工艺，可以获得比较满意的结果。
3、硅胶柱色谱分离纯化生物发酵液中叶酸的研究
【摘要】 采用硅胶柱色谱分离纯化生物发酵液中的叶酸 ,实验研究了色谱方法 ,确定了适的谱条件。
4、柱色谱分离提纯叔戊基蒽醌
【摘要】 叔戊基蒽醌作为一种有机中间体,被广泛的运用在合成、催化等各领域,其作为过氧化氢的催化剂不仅催化效率高,且催化剂不易中毒。本文就叔戊基蒽醌的分离做了初步研究,主要利用了薄层色谱定性,柱色谱分离的方法,使叔戊基蒽醌得到了分离提纯,经高效液相色谱内标法测定,纯度达到了90%左右。
5、切割硅胶柱色谱法分离丹参中的丹参酮ⅡA
柱色谱分离中的应用
摘要：本文主要简述柱色谱的基本知识，了解柱色谱的简要操作以及分类。简介柱色谱的广泛应用等。 关键词：柱色谱 分离 吸附剂 一、概念
1、柱色谱
柱色谱是在一根玻璃管或金属管中迸行的色谱技术，将吸附剂填充到管中而使之成为柱状，这样的管状柱称为吸附色谱柱。使用吸附色谱柱分离混合物的方法，称为吸附柱色谱。这种方法可以用来分离大多数有机化合物，尤其适合于复杂的天然产物的分离。分离容量从几毫克到百毫克级，所以，适用于分离和精制较大量的样品
2、吸附剂
吸附剂是能有效地从气体或液体中吸附其中某些成分的固体物质。吸附剂一般有以下特点：大的比表面、适宜的孔结构及表面结构；对吸附质有强烈的吸附能力；一般不与吸附质和介质发生化学反应；制造方便，容易再生；有良好的机械强度等。吸附剂可按孔径大小、颗粒形状、化学成分、表面极性等分类，如粗孔和细孔吸附剂，粉状、粒状、条状吸附剂，碳质和氧化物吸附剂，极性和非极性吸附剂等。
吸附剂要求
一种合适的吸附剂，一般应满足下列几个基本要求: ⑴对样品组分和洗脱剂都不会发生任何化学反应，在洗脱剂中也不会溶解。
⑵对待分离组分能够进行可逆的吸附，同时具有足够的吸附力，使组分在固定相与流动相之间能最快地达到平衡。 ⑶颗粒形状均匀，大小适当，以保证洗脱剂能够以一定的流速 （一般为1.5 mL·min-1）通过色谱柱。
⑷材料易得，价格便宜而且是无色的，以便于观察。可用于吸附剂的物质有氧化铝、硅胶、聚酰胺、硅酸镁、滑石粉、氧化钙 （镁）、淀粉、纤维素、蔗糖和活性炭等。其中有些对几类物质分离效果较好，而对其它大多数化合物不适用。
二、柱色谱分类：
1.吸附柱色谱
色谱管为内径均匀、下端缩口的硬质玻璃管,下端用棉花或玻璃纤维塞住,管内装入
吸附剂。吸附剂的颗粒应尽可能保持大小均匀,以保证良好的分离效果。除另有规定外,
通常多采用直径为0.07～0.15mm的颗粒。色谱柱的大小,吸附剂的品种和用量,以及洗脱
时的流速，均按各品种项下的规定。
(1) 吸附剂的填装 ①干法 将吸附剂一次加入色谱柱，振动管壁使其均匀下沉，
然后沿管壁缓缓加入洗脱剂；或在色谱柱下端出口处连接活塞，加入适量的洗脱剂，旋
开活塞使洗脱剂缓缓滴出，然后自管顶缓缓加入吸附剂，使其均匀地润湿下沉，在管内
形成松紧适度的吸附层。操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。
②湿法 将吸附剂与洗脱剂混合，搅拌除去空气泡，徐徐倾入色谱柱中，然后加入
洗脱剂将附着管壁的吸附剂洗下，使色谱柱面平整。 俟填装吸附剂所用洗脱剂从色谱柱自然流下，液面和柱表面相平时，即加供试品溶
液。
(2) 供试品的加入 除另有规定外，将供试品溶于开始洗脱时使用的洗脱剂中，再
沿色谱管壁缓缓加入，注意勿使吸附剂翻起。或将供试品溶于适当的溶剂中，与少量吸
附剂混匀，再使溶剂挥发去尽使呈松散状，加在已制备好的色谱柱上面。如供试品在常
用溶剂中不溶，可将供试品与适量的吸附剂在乳钵中研磨混
匀后加入。
(3) 洗脱 除另有规定外，通常按洗脱剂洗脱能力大小递增变换洗脱剂的品种和比
例，分别分部收集流出液，至流出液中所含成分显著减少或不再含有时，再改变洗脱剂
的品种和比例。操作过程中应保持有充分的洗脱剂留在吸附层的上面。
2.分配柱色谱
方法和吸附柱色谱基本一致。装柱前，先将载体和固定液混合，然后分次移入色谱
柱中并用带有平面的玻棒压紧；供试品可溶于固定液，混以少量载体，加在预制好的色
谱柱上端。
洗脱剂需先加固定液混合使之饱和，以避免洗脱过程中两相分配的改变。 实验关键步骤：
1、 装柱要紧密，要求无断层、无缝隙。
2、 在装柱、洗脱过程中，始终保持有溶剂覆盖吸附剂。 一个色带与另一色带的洗脱液的接受不要交叉
三、柱色谱的分离应用
1、天然胡萝卜素的提取及分离
【摘要】 采用浸取法从胡萝卜中提取胡萝卜素,研究了不同提取剂对胡萝卜素提取效果的影响。使用薄层色谱(TLC)、柱色谱对提取液进行分离纯化,采用紫外可见分光光度计测定胡萝
卜素含量。研究结果表明:用丙酮—石油醚(3:7,V/V)混合液提取效果较好,提取的胡萝卜素含量可达995μg?g;薄层色谱分离中展开剂选用石油醚和乙醚的混合液,两者比例为9∶1时分离效果最好;柱色谱的洗脱速度和效果与溶剂极性相关,洗脱剂为石油醚和乙醚的混合液时色带分离明显
2、紫杉醇生产新工艺研究
【摘要】 从红豆杉茎皮提取紫杉醇，采用１％柠檬酸渗漉、柱色谱分离、溴加成后柱色谱分离的新工艺，可以获得比较满意的结果。
3、硅胶柱色谱分离纯化生物发酵液中叶酸的研究
【摘要】 采用硅胶柱色谱分离纯化生物发酵液中的叶酸 ,实验研究了色谱方法 ,确定了适的谱条件。
4、柱色谱分离提纯叔戊基蒽醌
【摘要】 叔戊基蒽醌作为一种有机中间体,被广泛的运用在合成、催化等各领域,其作为过氧化氢的催化剂不仅催化效率高,且催化剂不易中毒。本文就叔戊基蒽醌的分离做了初步研究,主要利用了薄层色谱定性,柱色谱分离的方法,使叔戊基蒽醌得到了分离提纯,经高效液相色谱内标法测定,纯度达到了90%左右。
5、切割硅胶柱色谱法分离丹参中的丹参酮ⅡA