丹参酚酸A在大鼠小肠的吸收动力学研究

第19卷第1期

2002年1月

沈　阳　药　科　大　学　学　报

JournalofShenyangPharmaceuticalUniversity

Vol119　No11

Jan12002　p114

文章编号:1006-2858(2002)01-0014-04

丹参酚酸A在大鼠小肠的吸收动力学研究

张向荣,潘卫三

(沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳　110016)

摘要:目的研究丹参酚酸A在大鼠小肠的吸收情况。方法采用大鼠在体小肠回流实验装置,利

用UV双波长法测定肠循环液中酚红和丹参酚酸A含量。结果表明丹参酚酸A在大鼠小肠的平均吸收率为2015%。结论在低、中、高3种不同浓度下,吸收速率常数无显著差异,其吸收机制为被动扩散。

关键词:丹参酚酸A;吸收动力学;紫外分光光度法中图分类号:R945　　　文献标识码:A

　　丹参酚酸A为丹参的水溶性成分,具有抗氧化、抗凝及抗血栓等药理作用[1～3]。口服给药时,小肠是药物在消化道内吸收的主要器官,探讨,,,回流实验装置],利用UV双波长法测定肠液中药物含量,对丹参酚酸A在大鼠小肠中的吸收动力学进行了初步研究。

紫外分光光度法,丹参酚酸A的含量也可以用紫外法测出。

2111AR营养液溶解L的NaOH溶液5mL,摇(200～700nm)扫描(图1),图在558nm处酚红有最大吸收,药物的最大吸收在262nm处,由于酚红在262nm处仍有少部分吸收,因此采用双波长法[5],分别测定酚红在558nm和262nm处的吸收,以排除其对丹参酚酸A测定的影响

。

1　仪器与材料

WFZ800—D3A型紫外可见分光光度计(北

京瑞利分析仪器公司),RDB—IV蠕动泵(沙洲仪器仪表总厂),79HW—1型恒温磁力搅拌器(浙江乐成电器厂)。酚红(沈阳试剂三厂),氢氧化钠(分析纯,沈阳化学试剂厂),丹参酚酸A(经核磁、红外、紫外光谱确证),Kreb2Ringer’s营养液[4](K-R营养液)。雄性大鼠,体重200～300g,(沈阳药科大学动物室)。

Fig.1　TheUVspectrumofsalvianoicacidAandphenolred

1—SalvianoicacidA;2—Phenolred

21112　丹参酚酸A标准曲线的绘制

2　实验方法

211　肠循环液中丹参酚酸A及酚红的含量测定

按大鼠小肠吸收常规实验方法,在肠循环液

中加入酚红(PR),酚红不能被小肠吸收,通过测定循环液中酚红浓度的变化可计算出循环液体积的变化,从而算出小肠吸收水分造成的对丹参酚酸A测定结果的影响,酚红浓度的测定一般采用

用K2R营养液配制含丹参酚酸A60、120、180、240、300μg/mL溶液,取015mL加入1mol/L的NaOH5mL,在262nm处测定吸收度,空白溶液

μ为1mol/L的NaOH,以丹参酚酸A浓度C(g/

mL)对吸收度A进行回归处理,得标准曲线回归方程为:A=01036C+010195(n=6),r=019993。21113　方法回收率及精密度的测定

收稿日期:2001-05-10

通讯作者:张向荣,Tel:(024)23844880,E-mail:[email protected]。

分别于肠循环液中准确加入一定量的丹参酚酸A,按上述处理及分析方法测定,重复5次,测定结果与各自标准品的相应浓度比较,求出方法回收率。用肠循环液配制含丹参酚酸A6010、12010、20010μg/mL样品5管,一天之内不同时间测定后,计算日内相对标准偏差。回收率在102%～107%,日内RSD低于211%,说明本法准确、可靠,能满足实验要求。21114　酚红标准曲线的绘制

采用K2R营养液配制成含酚红415、910、1810、2710、3610、4510μg/mL的标准液,取015mL加入5mL1mol/L的NaOH溶液,空白溶

为排除在215h内药物化学稳定性因素对实

验结果的影响,取60mL含100μg/mL供试药液置循环装置中,在实验条件相同的条件下,分别在0、1、2h取样015mL加入015mol/LNaOH测定丹参酚酸A在循环液中含量。214　丹参酚酸A吸收机制的研究

用3种不同浓度的供试药液,分别进行小肠吸收实验,研究该药的小肠吸收机制。

3　实验结果

311　肠液中丹参酚酸A的计算方法

液1mol/L的NaOH溶液,分别在558nm和

μg/mL)对262

nm处测定吸收度,以酚红浓度C(

吸收度A进行回归处理。

标准曲线回归方程(558nm):A=010211+010171C(n=5),r=019997;

标准曲线回归方程(262nm):A=[1**********]3C(n=5),r=212　取015mL样品加入5mL1mol/LNaOH分

别在558nm及262nm处测定吸收度。将558nm下测定数据代入酚红标准曲线(558nm),计算出酚红浓度,再代入标准曲线(262nm),计算出262,再从A标准曲。1A在大鼠小肠的吸收

将3个不同浓度的丹参酚酸A和酚红的供试液经大鼠在体小肠循环215h,每隔015h取样,按“311”条计算丹参酚酸A浓度,所得数据见表1。用公式进行数学处理,最后以lg(剩余药量)对取样时间作图,从而求出吸收速率常数Ka,吸收半衰期T1/2和吸收率PA%,结果见表2。313　药物在肠循环液中的稳定性

h,自由饮水),腹腔

注射戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉固定,沿腹中线打开腹腔,自十二指肠上部及回肠下部各插入直径为015cm的玻璃管,用线扎紧,然后用37℃生理盐水将肠内容物冲洗干净,按文献装好循环装置。取100mL用Kreb2Ringer’s营养液配制的供试药液(含酚红20μg/mL,含丹参酚酸A100、150、200μg/mL3种不同浓度),以4mL/min快速循环10min后,取样110mL,补加210mL用K2R营养液配制酚红溶液(20μg/mL),此时间记为0时,将流速调至215mL/min,每隔30min取样110mL,同时补加酚红溶液(20μg/mL)210mL,取样至150min,所取110mL样品中015mL在558nm处测定吸收度,015mL用于在262nm处测定吸收度。213　药物在肠循环液中稳定性考察

2122mgkg-C

1

药物在肠循环液中的稳定性实验,说明丹参

酚酸A在肠循环液中含量没有明显变化(RSD=0196%),因此可以排除药物稳定性因素对实验结果的影响。

314　丹参酚酸A的小肠吸收机制研究

将表2的吸收速率常数经统计学处理,结果见表3。表明3种不同浓度的丹参酚酸A的吸收速率常数间没有显著差异(P>0105)。

Table1　OriginaldataofsalvianoicacidAinrat’ssmallintestinalabsorptioninvivo

t/min

15119mg・kg-1

10199mg・kg-1

C′

B.C

[***********][***********][***********][***********][***********]2410B.C[***********][***********][***********]1322142315μg/mL);C′μg/mL);B1C1:beforecirculation　　C:concentrationofsalvianoicacidA(:concentrationofPR(

Table2　Compararisonofarat′sabsorptionconstantsinrats′smallintestinesinvivowiththreedifferentconcentration

10919μg・mL-Ka/h-1

1

15119μg・mL-PA(%)[***********]144105

Ka/h-1

1

μg・21212mL-PA(%)[***********]135146

Ka/h-1

1

　T1/2/h-[***********][1**********]

1

　T1/2/h

　T1/2/h-[***********]122140

1

PA(%)[***********]172172

1234X

第19卷第1期

2002年1月

沈　阳　药　科　大　学　学　报

JournalofShenyangPharmaceuticalUniversity

Vol119　No11

Jan12002　p114

文章编号:1006-2858(2002)01-0014-04

丹参酚酸A在大鼠小肠的吸收动力学研究

张向荣,潘卫三

(沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳　110016)

摘要:目的研究丹参酚酸A在大鼠小肠的吸收情况。方法采用大鼠在体小肠回流实验装置,利

用UV双波长法测定肠循环液中酚红和丹参酚酸A含量。结果表明丹参酚酸A在大鼠小肠的平均吸收率为2015%。结论在低、中、高3种不同浓度下,吸收速率常数无显著差异,其吸收机制为被动扩散。

关键词:丹参酚酸A;吸收动力学;紫外分光光度法中图分类号:R945　　　文献标识码:A

　　丹参酚酸A为丹参的水溶性成分,具有抗氧化、抗凝及抗血栓等药理作用[1～3]。口服给药时,小肠是药物在消化道内吸收的主要器官,探讨,,,回流实验装置],利用UV双波长法测定肠液中药物含量,对丹参酚酸A在大鼠小肠中的吸收动力学进行了初步研究。

紫外分光光度法,丹参酚酸A的含量也可以用紫外法测出。

2111AR营养液溶解L的NaOH溶液5mL,摇(200～700nm)扫描(图1),图在558nm处酚红有最大吸收,药物的最大吸收在262nm处,由于酚红在262nm处仍有少部分吸收,因此采用双波长法[5],分别测定酚红在558nm和262nm处的吸收,以排除其对丹参酚酸A测定的影响

。

1　仪器与材料

WFZ800—D3A型紫外可见分光光度计(北

京瑞利分析仪器公司),RDB—IV蠕动泵(沙洲仪器仪表总厂),79HW—1型恒温磁力搅拌器(浙江乐成电器厂)。酚红(沈阳试剂三厂),氢氧化钠(分析纯,沈阳化学试剂厂),丹参酚酸A(经核磁、红外、紫外光谱确证),Kreb2Ringer’s营养液[4](K-R营养液)。雄性大鼠,体重200～300g,(沈阳药科大学动物室)。

Fig.1　TheUVspectrumofsalvianoicacidAandphenolred

1—SalvianoicacidA;2—Phenolred

21112　丹参酚酸A标准曲线的绘制

2　实验方法

211　肠循环液中丹参酚酸A及酚红的含量测定

按大鼠小肠吸收常规实验方法,在肠循环液

中加入酚红(PR),酚红不能被小肠吸收,通过测定循环液中酚红浓度的变化可计算出循环液体积的变化,从而算出小肠吸收水分造成的对丹参酚酸A测定结果的影响,酚红浓度的测定一般采用

用K2R营养液配制含丹参酚酸A60、120、180、240、300μg/mL溶液,取015mL加入1mol/L的NaOH5mL,在262nm处测定吸收度,空白溶液

μ为1mol/L的NaOH,以丹参酚酸A浓度C(g/

mL)对吸收度A进行回归处理,得标准曲线回归方程为:A=01036C+010195(n=6),r=019993。21113　方法回收率及精密度的测定

收稿日期:2001-05-10

通讯作者:张向荣,Tel:(024)23844880,E-mail:[email protected]。

分别于肠循环液中准确加入一定量的丹参酚酸A,按上述处理及分析方法测定,重复5次,测定结果与各自标准品的相应浓度比较,求出方法回收率。用肠循环液配制含丹参酚酸A6010、12010、20010μg/mL样品5管,一天之内不同时间测定后,计算日内相对标准偏差。回收率在102%～107%,日内RSD低于211%,说明本法准确、可靠,能满足实验要求。21114　酚红标准曲线的绘制

采用K2R营养液配制成含酚红415、910、1810、2710、3610、4510μg/mL的标准液,取015mL加入5mL1mol/L的NaOH溶液,空白溶

为排除在215h内药物化学稳定性因素对实

验结果的影响,取60mL含100μg/mL供试药液置循环装置中,在实验条件相同的条件下,分别在0、1、2h取样015mL加入015mol/LNaOH测定丹参酚酸A在循环液中含量。214　丹参酚酸A吸收机制的研究

用3种不同浓度的供试药液,分别进行小肠吸收实验,研究该药的小肠吸收机制。

3　实验结果

311　肠液中丹参酚酸A的计算方法

液1mol/L的NaOH溶液,分别在558nm和

μg/mL)对262

nm处测定吸收度,以酚红浓度C(

吸收度A进行回归处理。

标准曲线回归方程(558nm):A=010211+010171C(n=5),r=019997;

标准曲线回归方程(262nm):A=[1**********]3C(n=5),r=212　取015mL样品加入5mL1mol/LNaOH分

别在558nm及262nm处测定吸收度。将558nm下测定数据代入酚红标准曲线(558nm),计算出酚红浓度,再代入标准曲线(262nm),计算出262,再从A标准曲。1A在大鼠小肠的吸收

将3个不同浓度的丹参酚酸A和酚红的供试液经大鼠在体小肠循环215h,每隔015h取样,按“311”条计算丹参酚酸A浓度,所得数据见表1。用公式进行数学处理,最后以lg(剩余药量)对取样时间作图,从而求出吸收速率常数Ka,吸收半衰期T1/2和吸收率PA%,结果见表2。313　药物在肠循环液中的稳定性

h,自由饮水),腹腔

注射戊巴比妥钠(40mg/kg)麻醉固定,沿腹中线打开腹腔,自十二指肠上部及回肠下部各插入直径为015cm的玻璃管,用线扎紧,然后用37℃生理盐水将肠内容物冲洗干净,按文献装好循环装置。取100mL用Kreb2Ringer’s营养液配制的供试药液(含酚红20μg/mL,含丹参酚酸A100、150、200μg/mL3种不同浓度),以4mL/min快速循环10min后,取样110mL,补加210mL用K2R营养液配制酚红溶液(20μg/mL),此时间记为0时,将流速调至215mL/min,每隔30min取样110mL,同时补加酚红溶液(20μg/mL)210mL,取样至150min,所取110mL样品中015mL在558nm处测定吸收度,015mL用于在262nm处测定吸收度。213　药物在肠循环液中稳定性考察

2122mgkg-C

1

药物在肠循环液中的稳定性实验,说明丹参

酚酸A在肠循环液中含量没有明显变化(RSD=0196%),因此可以排除药物稳定性因素对实验结果的影响。

314　丹参酚酸A的小肠吸收机制研究

将表2的吸收速率常数经统计学处理,结果见表3。表明3种不同浓度的丹参酚酸A的吸收速率常数间没有显著差异(P>0105)。

Table1　OriginaldataofsalvianoicacidAinrat’ssmallintestinalabsorptioninvivo

t/min

15119mg・kg-1

10199mg・kg-1

C′

B.C

[***********][***********][***********][***********][***********]2410B.C[***********][***********][***********]1322142315μg/mL);C′μg/mL);B1C1:beforecirculation　　C:concentrationofsalvianoicacidA(:concentrationofPR(

Table2　Compararisonofarat′sabsorptionconstantsinrats′smallintestinesinvivowiththreedifferentconcentration

10919μg・mL-Ka/h-1

1

15119μg・mL-PA(%)[***********]144105

Ka/h-1

1

μg・21212mL-PA(%)[***********]135146

Ka/h-1

1

　T1/2/h-[***********][1**********]

1

　T1/2/h

　T1/2/h-[***********]122140

1

PA(%)[***********]172172

1234X