Strait Pharmaceutical Journal Vol 12No 4 2000
・中药与天然药物・
石斛中石斛多糖提取工艺的优选
倪立坚 蒋小平 (福建省第二人民医院 福州 350003) 陈东红 (福建省人民医院 福州 350004)
摘要:本文运用正交试验L 9(34) 对水煎提取石斛中石斛多糖的工艺进行优选。结果表明提取次数对指标影响最大, 加水量和煎煮时间差异无显著性, 采用短时多次提取工艺省时合理。关键词:石斛; 石斛多糖; 正交实验
The Optimum Preparation Procedure for the Extractin g Polyhexose Con tained in Herba Dendrobii
N I Li -jian , JIANG Xiao -ping (Second People ’s H ospital of Fujian Province , Fuzhou 350003) CH EN Dong -hong (People ’s Hospital of Fujian Province , Fuzhou 350004)
ABSTR ACT :T he optim um preparation procedur e fo r the poly hex ose contained in Herba Dendr obii w ith w ater-ex tr acting w ere studied by L 9(3) orthogo nal ex perimental design. T he result show ed that ex tracting times has the largest influences on the index and to the result o f w ater-adding amo unt and deco cting time w er e indistinct . The process with sho rt -tim e and extracting many times w as much m ore effective . KEY WORDS :Herba Dendr obii; Polyhexo se; Ortho gonal ex perimental desig n 石斛为一常用的补阴药, 具有滋阴清热、益胃生津、润肺止咳的功效, 在中药制剂中较为常用。石斛的生理活性与多糖含量有一定的关系。为此, 本文以石斛中石斛多糖的含量为指标, 采用正交实验法对提取工艺进行优选, 获得最佳条件, 以增加药材的利用率。1 材料与仪器
石斛药材经鉴定为金钗石斛Dendrobium nobile Lindl . 的干燥茎; 7530G 紫外—可见光分光光度计(上海分析仪器厂) :DT -100分析天平(北京光学仪器厂) 。
苯酚试剂的制备:取苯酚200g , 加铝片0. 2g 和碳酸氢钠0. 1g, 蒸馏, 收集182℃馏分, 称取10g , 加水150g 混匀, 使溶解即得, 置棕色瓶内, 放冰箱中备用。乙醇等试剂均为分析纯。2 方法与结果
2. 1 正交实验设计 参照临床实践, 选用水煎煮工艺, 主要考察提取时的加水量、提取时间及提取次数对石斛多糖提取的影响。因素水平表(见表1) 。
4
表1 因素水平表
水平123
4
A
加水量(倍) 81012
B 煎煮时间(hr) 1
23
C 提取次数
1
23
按L 9(3) 表对石斛进行石斛多糖的提取和测定, 并作为考察指标。
2. 2 实验方法
2. 2. 1 样品的提取 取石斛药材, 切成0. 5cm 长的饮片, 各称取100g , 按L 9(34) 组合实验条件进行提取, 提取液浓缩至1∶1(g ・ml ) , 加3倍量乙醇使沉淀, 放置, 倾出上清液, 沉淀加水溶解, 加稀乙醇使沉淀, 放置, 离心, 取其上清液继续加乙醇使含醇量达70%以上, 放置, 倾出上清液, 沉淀依次用乙醇、无水乙醇洗涤, 减压过滤, 低温干燥, 即得多糖粗品。
2. 2. 2 含量测定 标准曲线:精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100m g, 置100ml 容量瓶中, 加水
-1
海峡药学 2000年 第12卷 第4期
适量使溶解, 稀释至刻度, 摇匀, 精密吸取10ml , 置100ml 容量瓶中, 加水至刻度, 摇匀, 备用。
精密量取标准溶液0. 1m l ～0. 8ml 共8份, 分别置于试管中, 加水至2. 0ml, 并加苯酚溶液1. 0ml , 摇匀, 迅速滴加浓硫酸5. 0ml , 迅速摇匀, 放置5min, 置沸水浴中加热15m in, 取出, 迅速冷却至室温, 另以2. 0m l 水同上平行操作, 作为空白对照, 在490nm 波长处测定吸收度, 得回归方程:C =0. 0742A -3. 73×10-4, r =0. 9990。测定方法 取2. 2. 1项下所得粗多糖约50mg , 105℃干燥至恒重, 精密称定, 置于50m l 容量瓶中, 加水溶解, 并稀释至刻度, 摇匀, 精密量取10m l , 置100ml 容量瓶中, 加水稀释至刻度摇匀, 备用。
从上述样品中精密吸取0. 5m l, 置25ml 容量瓶中, 照标准曲线绘制项下的方法至“加水2. 0ml ”起依法测定吸收值, 并依回归方程计算, 得多糖的相对含量[1]。为了便于统计, 我们将结果缩小20倍, 使其与收率相一致。2. 3 结果
将正交表结果进行方差分析, 结果(见表2、3)
[2]
表2 正交试验设计表及结果试验号123456789
加水量(A) 111222333
煎煮时间(B) 1
23123123
提取次数(C) 1
23231312
石斛多糖含量(%) (x)
0. 819
0. 9771. 0210. 9911. 0480. 8481. 0750. 8621. 038
表3 方差分析结果
变异来源离均差平方和自由度
总A 间B 间C 间误差
0. 0737000. 0041790. 0000990. 0694200. 000185
62222
均方0. 0122800. 0020890. 0000490. 0347100. 000092
F 值133. 0322. 630. 53375. 93
P 值0. 0070. 0420. 6520. 003
10倍与12倍差异不大, 为了省时节水节能, 本实验最佳提取条件定为A 2B 1C 3, 即加10倍量的水煎煮3次, 每次1h 。
3. 2 从表2可以看出提取次数对结果影响最大, 提取时间对结果影响最小, 采用短时多次提取工艺省时合理。
参考文献
[1]李满飞, 等. 中药石斛类多糖的含量测定, 中草药, 1990, (21) :10～12.
[2]周明河. 简明卫生统计学, 北京, 北京大学出版社, 1991, 89～90.
。
3 讨论
3. 1 结果表明:因素C (提取次数) 差异有显著性, 而因素A(加水量) 显著性水平为临界值(0. 042) ; 因素B(煎煮时间) 差异无显著性, 程度依次为C>A>B (Eta 值为0. 969>0. 238>0. 037) , 各因素的最佳水平为A 3B 3C 3。由于提取时间影响小, 同时加水量
对中成药胶囊剂装量差异标准的商榷
郑鉴超 马旭闽 赵玉鸿(厦门医药采购供应站 厦门 361001)
摘要:为合理制定中成药胶囊剂装量差标准提供参考, 设定不同样本容量数, 对一定数量胶囊剂内容物重量的数据进行统计分析, 参照历年《中国药典》考量中成药胶囊剂的装量差异限度, 结果表明中成药胶囊剂装量差异标准的取样数为20较合理, 对不同规格的胶囊应有不同的限度。关键词:中成药胶囊剂; 装量差异
胶囊剂系指将药物盛装于空胶囊中制成的制剂, 分为硬胶囊和软胶囊。胶囊剂由于其能有效地隔离药物的异味、苦味、臭味及方便服用等优点, 近年来在中药制剂中得到广泛的应用。自1963年版《中
国药典》一部通则收载中成药胶囊剂标准以来, 胶囊剂装量差异的标准也几经变迁(见表1) [1～6]。由于近
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・中药与天然药物・
石斛中石斛多糖提取工艺的优选
倪立坚 蒋小平 (福建省第二人民医院 福州 350003) 陈东红 (福建省人民医院 福州 350004)
摘要:本文运用正交试验L 9(34) 对水煎提取石斛中石斛多糖的工艺进行优选。结果表明提取次数对指标影响最大, 加水量和煎煮时间差异无显著性, 采用短时多次提取工艺省时合理。关键词:石斛; 石斛多糖; 正交实验
The Optimum Preparation Procedure for the Extractin g Polyhexose Con tained in Herba Dendrobii
N I Li -jian , JIANG Xiao -ping (Second People ’s H ospital of Fujian Province , Fuzhou 350003) CH EN Dong -hong (People ’s Hospital of Fujian Province , Fuzhou 350004)
ABSTR ACT :T he optim um preparation procedur e fo r the poly hex ose contained in Herba Dendr obii w ith w ater-ex tr acting w ere studied by L 9(3) orthogo nal ex perimental design. T he result show ed that ex tracting times has the largest influences on the index and to the result o f w ater-adding amo unt and deco cting time w er e indistinct . The process with sho rt -tim e and extracting many times w as much m ore effective . KEY WORDS :Herba Dendr obii; Polyhexo se; Ortho gonal ex perimental desig n 石斛为一常用的补阴药, 具有滋阴清热、益胃生津、润肺止咳的功效, 在中药制剂中较为常用。石斛的生理活性与多糖含量有一定的关系。为此, 本文以石斛中石斛多糖的含量为指标, 采用正交实验法对提取工艺进行优选, 获得最佳条件, 以增加药材的利用率。1 材料与仪器
石斛药材经鉴定为金钗石斛Dendrobium nobile Lindl . 的干燥茎; 7530G 紫外—可见光分光光度计(上海分析仪器厂) :DT -100分析天平(北京光学仪器厂) 。
苯酚试剂的制备:取苯酚200g , 加铝片0. 2g 和碳酸氢钠0. 1g, 蒸馏, 收集182℃馏分, 称取10g , 加水150g 混匀, 使溶解即得, 置棕色瓶内, 放冰箱中备用。乙醇等试剂均为分析纯。2 方法与结果
2. 1 正交实验设计 参照临床实践, 选用水煎煮工艺, 主要考察提取时的加水量、提取时间及提取次数对石斛多糖提取的影响。因素水平表(见表1) 。
4
表1 因素水平表
水平123
4
A
加水量(倍) 81012
B 煎煮时间(hr) 1
23
C 提取次数
1
23
按L 9(3) 表对石斛进行石斛多糖的提取和测定, 并作为考察指标。
2. 2 实验方法
2. 2. 1 样品的提取 取石斛药材, 切成0. 5cm 长的饮片, 各称取100g , 按L 9(34) 组合实验条件进行提取, 提取液浓缩至1∶1(g ・ml ) , 加3倍量乙醇使沉淀, 放置, 倾出上清液, 沉淀加水溶解, 加稀乙醇使沉淀, 放置, 离心, 取其上清液继续加乙醇使含醇量达70%以上, 放置, 倾出上清液, 沉淀依次用乙醇、无水乙醇洗涤, 减压过滤, 低温干燥, 即得多糖粗品。
2. 2. 2 含量测定 标准曲线:精密称取105℃干燥至恒重的葡萄糖100m g, 置100ml 容量瓶中, 加水
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适量使溶解, 稀释至刻度, 摇匀, 精密吸取10ml , 置100ml 容量瓶中, 加水至刻度, 摇匀, 备用。
精密量取标准溶液0. 1m l ～0. 8ml 共8份, 分别置于试管中, 加水至2. 0ml, 并加苯酚溶液1. 0ml , 摇匀, 迅速滴加浓硫酸5. 0ml , 迅速摇匀, 放置5min, 置沸水浴中加热15m in, 取出, 迅速冷却至室温, 另以2. 0m l 水同上平行操作, 作为空白对照, 在490nm 波长处测定吸收度, 得回归方程:C =0. 0742A -3. 73×10-4, r =0. 9990。测定方法 取2. 2. 1项下所得粗多糖约50mg , 105℃干燥至恒重, 精密称定, 置于50m l 容量瓶中, 加水溶解, 并稀释至刻度, 摇匀, 精密量取10m l , 置100ml 容量瓶中, 加水稀释至刻度摇匀, 备用。
从上述样品中精密吸取0. 5m l, 置25ml 容量瓶中, 照标准曲线绘制项下的方法至“加水2. 0ml ”起依法测定吸收值, 并依回归方程计算, 得多糖的相对含量[1]。为了便于统计, 我们将结果缩小20倍, 使其与收率相一致。2. 3 结果
将正交表结果进行方差分析, 结果(见表2、3)
[2]
表2 正交试验设计表及结果试验号123456789
加水量(A) 111222333
煎煮时间(B) 1
23123123
提取次数(C) 1
23231312
石斛多糖含量(%) (x)
0. 819
0. 9771. 0210. 9911. 0480. 8481. 0750. 8621. 038
表3 方差分析结果
变异来源离均差平方和自由度
总A 间B 间C 间误差
0. 0737000. 0041790. 0000990. 0694200. 000185
62222
均方0. 0122800. 0020890. 0000490. 0347100. 000092
F 值133. 0322. 630. 53375. 93
P 值0. 0070. 0420. 6520. 003
10倍与12倍差异不大, 为了省时节水节能, 本实验最佳提取条件定为A 2B 1C 3, 即加10倍量的水煎煮3次, 每次1h 。
3. 2 从表2可以看出提取次数对结果影响最大, 提取时间对结果影响最小, 采用短时多次提取工艺省时合理。
参考文献
[1]李满飞, 等. 中药石斛类多糖的含量测定, 中草药, 1990, (21) :10～12.
[2]周明河. 简明卫生统计学, 北京, 北京大学出版社, 1991, 89～90.
。
3 讨论
3. 1 结果表明:因素C (提取次数) 差异有显著性, 而因素A(加水量) 显著性水平为临界值(0. 042) ; 因素B(煎煮时间) 差异无显著性, 程度依次为C>A>B (Eta 值为0. 969>0. 238>0. 037) , 各因素的最佳水平为A 3B 3C 3。由于提取时间影响小, 同时加水量
对中成药胶囊剂装量差异标准的商榷
郑鉴超 马旭闽 赵玉鸿(厦门医药采购供应站 厦门 361001)
摘要:为合理制定中成药胶囊剂装量差标准提供参考, 设定不同样本容量数, 对一定数量胶囊剂内容物重量的数据进行统计分析, 参照历年《中国药典》考量中成药胶囊剂的装量差异限度, 结果表明中成药胶囊剂装量差异标准的取样数为20较合理, 对不同规格的胶囊应有不同的限度。关键词:中成药胶囊剂; 装量差异
胶囊剂系指将药物盛装于空胶囊中制成的制剂, 分为硬胶囊和软胶囊。胶囊剂由于其能有效地隔离药物的异味、苦味、臭味及方便服用等优点, 近年来在中药制剂中得到广泛的应用。自1963年版《中
国药典》一部通则收载中成药胶囊剂标准以来, 胶囊剂装量差异的标准也几经变迁(见表1) [1～6]。由于近